001有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編制/修訂人：日期：年月日部門審核人：日期：年月日y -I I. 分管負(fù)責(zé)人：日期：年月日質(zhì)量審核人：日期：年月日企業(yè)負(fù)責(zé)人：日期：年月日5""" , j 實施日期：年月日文件類別：口治理標(biāo)準(zhǔn)受控狀態(tài)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)V工作標(biāo)準(zhǔn)匚 I / '- I 'A本文件由質(zhì)量部公布,根據(jù)需要分發(fā)于以下部門：行政人事部口生產(chǎn)部口質(zhì)量部1工程部口采購部口物資部口計財部口商務(wù)部口存檔1【目的】標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測定法檢驗的程序和方法, 保證有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測定法檢驗結(jié) 果準(zhǔn)確可靠【適用范圍】適用于本公司有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測定法的檢驗

2、.【責(zé)任】1QC僉驗人員負(fù)責(zé)起草,按審批后的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行.2質(zhì)量部經(jīng)理、質(zhì)量負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)審核、監(jiān)督執(zhí)行.3總經(jīng)理負(fù)責(zé)審批.歡送閱讀【內(nèi)容】1簡述有機(jī)氯類農(nóng)藥是農(nóng)藥史中使用量最大,使用歷史最長的一類農(nóng)藥,具化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,脂溶 性強(qiáng),殘效期長可達(dá)3050年之久,易在脂肪組織中蓄積,造成慢性中毒,嚴(yán)重危及人體健 康.本法通過提取、凈化和富集等步驟制備供試品溶液,采用氣相色譜法,電子捕獲檢測器測 定.2儀器與用具2.1 氣相色譜儀,帶有63Ni-ECD電子捕獲檢測器,載氣為高純氮,必須安裝脫氧管.2.2 超聲波處理器.2.3 離心機(jī).2.4 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀.2.5 色譜柱：SE-54或DB-1701彈性石英毛細(xì)

3、管柱30mX0.32mnK 0.25仙m2.6 具塞刻度離心管10ml,刻度濃縮瓶,具塞錐形瓶100ml,移液管等.3試藥與試液3.1 丙酮、石油醴6090C和二氯甲烷均為分析純,且全部經(jīng)過全玻璃蒸儲裝置重蒸儲,經(jīng)氣 相色譜法確認(rèn),符合農(nóng)殘檢測的要求.3.2 無水硫酸鈉和氯化鈉均為分析純,硫酸為優(yōu)級純.3.3 農(nóng)藥對照品：六六六BHC 包括a -BHG B-BHC, 丫-BHC和6-BHC四種異構(gòu)體,滴 滴涕DDT包括pp'-DDE, pp'-DDD, op'-DDT和pp'-DDT四種異構(gòu)體及五氯硝基苯PCNB , 由中國計量科學(xué)研究院提供標(biāo)示含量濃度的農(nóng)藥標(biāo)

4、準(zhǔn)品,也可采用國際認(rèn)可的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品自行 配制.49種有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測定法4.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以14%點丙基-苯基甲基聚硅氧烷或5啾基甲基聚 硅氧烷為固定液的彈性石英毛細(xì)管柱 30mX0.32mmX0.25um,Ni-ECD電子捕獲檢測器.進(jìn)樣口溫 度230C,檢測器溫度300 C,不分流進(jìn)樣.程序升溫：初始溫度100C,每分鐘10c升至220C , 再以每分鐘8c升至250C, i持10分鐘.按上述條件操作,理論板數(shù)以a -BHC峰計算應(yīng)不低于 1X106,兩個相鄰色譜峰白別離度應(yīng)大于 1.5.4.2 操作方法4.2.1 對照品貯備液的制備精密稱取六六六 BHCa-BHC, 0

5、 -BHG 丫 -BHG 6-BHC、 滴滴涕DDTP, P'-DDE, P, P'-DDD, O, P'-DDT, P, P'-DDT及五氯硝基苯PCNB濃藥對照品溶液適量,用石油醴6090C分別制成每1ml約含45區(qū) 的溶液,即得.4.2.2 混合對照品儲藏液的制備精密量取上述各對照品貯備液0.5ml ,置10mI量瓶中,用石油醴6090C稀釋至刻度,搖勻,即得.4.2.3 混合對照品溶液的制備精密量取上述混合對照品貯備液,用石油醴6090C制成每1L分別含0ug, 1 g, 5g, 10g, 50仙g, 100仙g和250仙g的溶液,即得.4.2.4 供試

6、品溶液制備方法1 藥材或飲片取供試品,粉碎成粉末過三號篩,取名2g, 精密稱定,置100ml具塞錐形瓶中,加水20ml浸泡過夜,精密加丙酮 40ml,稱定重量,超聲處 理30分鐘,放冷,再稱定重量,用丙酮補(bǔ)足減失的重量,再加氯化鈉約6g,精密加二氯甲烷30ml, 稱定重量,超聲處理15分鐘,再稱定重量,用二氯甲烷補(bǔ)足減失的重量,靜置使分層,將歡送閱讀有機(jī)相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100ml具塞錐形瓶中,放置4小時.精密量取35ml,于40c水浴上減壓濃縮至近干,加少量石油醴 60 90C如前反復(fù)操作至二氯甲烷及丙酮除凈,用石油醴6090C溶解并轉(zhuǎn)移至10ml具塞刻度離心管中,加石油醴609

7、0C精密稀釋至5ml, 小心參加硫酸1ml,振搖1分鐘,離心3000轉(zhuǎn)/分鐘10分鐘,精密量取上精液2ml,置具刻度 濃縮瓶中,連接旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,40c下或用氮氣將溶液濃縮至適量,精密稀釋至 1ml,即得.同一 法制備空白樣品.4.2.5 方法2制齊J取供試品,研成細(xì)粉蜜丸切碎,液體直接量取,精密稱取適量相當(dāng) 于藥材2g,以下按方法1,制備供試品溶液.4.2.6 測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應(yīng)濃度的混合對照品溶液各 彳;1N1,注入 氣象色譜儀,按外標(biāo)法計算供試品中9種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量.522種有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測定法5.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗分析柱：以 50哪基50%:甲基聚硅

8、氧烷為固定液的彈性石 英毛細(xì)管柱30mX0.25mmX0.25umO僉柱：以100萬甲基聚硅氧烷為固定液的彈性石英毛細(xì)管 柱30mX0.25mmX0.25um63Ni-ECD電子捕獲檢測器.進(jìn)樣口溫度 240C,檢測器溫度300C ,不 分流進(jìn)樣,流速為恒壓模式初始流速為1.3ml/min .程序升溫：初始70 C,保持1分鐘,每分鐘10c升至180C,保持5分鐘,再以每分鐘5c升至220C,最后以每分鐘100c升至280C , 保持8分鐘.理論板數(shù)以a -BHC計算應(yīng)不低于1X106,兩個相鄰色譜峰白別離度應(yīng)大于1.5.5.2 操作方法5.2.1 對照品儲藏液的制備精密稱取表 1中農(nóng)藥對照品

9、適量,用異辛烷分別制如表1中濃度, 即得.5.2.2 混合對照品儲藏液的制備精密量上述對照品貯備溶液各1ml,置100ml量瓶中,用異辛烷稀釋至刻度,搖勻,即得.5.2.3 混合對照品溶液的制備分別精密量取上述對照品備貯溶液,用異辛烷制成每 1L分別 含10仙g、20 pg、50仙g、100仙g、200 g、500仙g的溶液,即得其中B -六六六,異狄氏劑、 P, P'-滴滴滴、O, P'-滴滴涕每 1L 分別含 20 pg、40 pg、100 g、200 仙 g、400 仙 g、1000 g05.2.4 供試品溶液制備取供試品,粉碎成粉末過三號篩,取約1.5g ,精密稱定,置

10、于50ml 聚苯乙烯具塞離心管中,加水 10ml,混勻,放置2小時,精密參加乙月青15ml,劇烈振搖提取1 分鐘,再加人預(yù)先稱好的無水硫酸鎂 4g與氣化鈉1g的混合粉末,再次劇烈振搖1分鐘后,離心 4000轉(zhuǎn)/分鐘1分鐘.精密吸取上精液10ml, 40c減壓濃縮至近干,用環(huán)己烷-乙酸乙酯1:1 混合溶液分次轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中,加環(huán)己烷-乙酸乙酯1:1混合溶液至刻度,搖勻,轉(zhuǎn)移至預(yù) 先參加1g無水硫酸鈉的離心管中,振搖,放置 1小時,離心必要時濾過,取上精液5ml過凝 膠滲透色譜柱400mmX25mm裝BIO-BeadsS-X3填料；以環(huán)己烷-乙酸乙酯1:1混合溶液為流 動相；流速為每分鐘5.

11、0ml凈化,收集18?30分鐘的洗脫液,于40c水浴減壓濃縮至近干,加 少量正己烷替換兩次,加正己烷 1ml使溶解,轉(zhuǎn)移至弗羅里硅土固相萃取小柱 1000mg/6ml,用正 己烷-丙酮95:5混合溶液10ml和正己烷10ml預(yù)洗上,殘渣用正己烷洗滌 3次,每次1ml,洗 液轉(zhuǎn)移至同一弗羅里硅土固相萃取小柱上,再用正己烷-丙酮95: 5混合溶液10ml洗脫,收集全部洗脫液,置氮吹儀上吹至近干,加異辛烷定容至1ml,渦旋使溶解,即得.5.2.5 測定法分別精密吸取供試品溶液和混合對照品溶液各1ul ,注入氣相色譜儀,按外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算供試品中22種有機(jī)氣農(nóng)藥殘留量.5.2.6 限度除另有規(guī)定外,

12、每1kg中藥材或飲片中含總六六六a-BHC,B-BHC 丫-BHC, 6-BHC 之和不得過 0.2mg；總滴滴涕P, P'-DDE, P, P'-DDD, O, P'-DDT, P, P'-DDT 之和不得過O2mg；五氣硝基苯(Quintozene)不得過 O1mg；六氯苯(Hexachlorobenzene)不得過 0,1mg;七 氯(Heptachlor)、順式環(huán)氧七氯(Heptach I orexo-epoxide) 和反式環(huán)氧七氯 (Heptachlor*endo-epoxide) 之和不得過 0.05mg;艾氏劑(AIdrin)和狄氏劑(Dield

13、rin)之和不得 過 0.05mg;異狄氏劑(Endrin)不得過 0.05mg;順式氯丹 Chlordane)、反式氯丹(trans-Chlordane) 和氧化氯丹(oxy-Chlordane)之和不得過 0.05mg;a-硫丹(a-Endosulfan) ,硫丹(,Endosulfan) 和硫丹硫酸鹽(Endosulfansulfate)之和不得過3mg【附注】(1)當(dāng)供試品中有農(nóng)藥檢出時,可在驗證柱中確認(rèn)檢出的結(jié)果,再進(jìn)行定量.必要時,可用氣相色譜一質(zhì)譜法進(jìn)行確證.(2)加樣回收率應(yīng)在 70%?120虹問.表122種有機(jī)氯類農(nóng)藥對照品貯備液濃度、相對保存時間及檢出限參考值 序號中文名英

14、文名對照品貯備液(ug/ml)相對保存時間(分析柱)檢出限(mg/kg)1 六氯苯 Hexachlorobenzene1000.5740.001 2a-六六六 a-BHC1000.6010.0043 五硝基苯Quintozene1000.6450.0074 T -六六六 y-BHC1000.6670.0035 0-六六六%BHC2000.7050.0086 七氣Heptachlor1000.7130.0077 8 -六六六 8 - BHC1000.7500.0038 艾氏齊U Aldrin1000.7600.0069 氧化氯丹Oxy-Chlordane1000.8160.00710 順式環(huán)氧七

15、氣 Heptachlor-exo-epoxide1000.8330.006 11 反式環(huán) 氧七氣Heptachlor-endo-epoxide1000.8440.005 12 反式氯丹 trans-Chlordane1000.8540.005 13 順式氯丹cis-Chlordane1000.8670,00814a-琉丹 a-Endosulfan1000.8720.0115p,p/滴滴伊 p,p/-DDE1000.8920.006 16 狄氏齊IDieldrin1000.9010.00517 異狄氏劑 Endrin2000.9320.00918o,p/滴滴涕 o,p/f-DDT2000.9380.018 19p,p/滴滴滴 p,p/f-DDD2000.9440.008 20 0-硫丹 為Endosulfan1000.9560.00321p,/p-滴滴涕 p,p/-DDT1000.9700.005 22硫丹硫