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1、檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 1 -檢驗(yàn)標(biāo)本的采集檢驗(yàn)標(biāo)本的采集一、標(biāo)本的正確采集一、標(biāo)本的正確采集標(biāo)本采集必須符合 2 個(gè)條件,即必須滿足檢測(cè)結(jié)果正確性的各項(xiàng)要求和檢測(cè)結(jié)果必須能真實(shí)地反映檢驗(yàn)對(duì)象當(dāng)前病情,避免干擾因素的存在。二、標(biāo)本的貯存二、標(biāo)本的貯存標(biāo)本采集后盡快送至實(shí)驗(yàn)室,若不能及時(shí)送檢,已采集的標(biāo)本要按檢驗(yàn)規(guī)定的貯存條件,如室溫、冰浴、溫浴或防腐貯存,將標(biāo)本直立置于穩(wěn)定、干燥、避光、密閉的環(huán)境中,避免振搖,以免標(biāo)本遺灑或溶血影響檢測(cè)結(jié)果。三、標(biāo)本的運(yùn)送三、標(biāo)本的運(yùn)送必須保證運(yùn)送后標(biāo)本所分析的結(jié)果與剛采集標(biāo)本后分析的結(jié)果一致。四、標(biāo)本的簽收四、標(biāo)本的簽收臨床工作人員從口才采集標(biāo)本并
2、將標(biāo)本從臨床運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室及實(shí)驗(yàn)室人員接收臨床標(biāo)本,均應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)化要求進(jìn)行,做到認(rèn)真核對(duì),包括標(biāo)本來(lái)源、標(biāo)本屬性、檢查項(xiàng)目、標(biāo)本采集和運(yùn)送是否合乎要求等,標(biāo)本送出人員和標(biāo)本接收人員都要做認(rèn)真的記錄并簽字存檔。五、標(biāo)本的處理五、標(biāo)本的處理 1、實(shí)驗(yàn)室接收標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)正確地予以處理,否則會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 2、如果取血后未盡快轉(zhuǎn)送或分離血清、血漿,血清與血塊簪時(shí)間接觸可發(fā)生變化。 3、實(shí)驗(yàn)室接收標(biāo)本后處理應(yīng)注意事項(xiàng): (1) 、時(shí)間:實(shí)驗(yàn)室接收標(biāo)本后應(yīng)盡快予以分類和離心。 、促凝標(biāo)本應(yīng)盡早處理,可在采血 5-15 分鐘后離心;抗凝標(biāo)本可采血后立即離心;非抗凝(無(wú)促凝)標(biāo)本采血 30-60 分鐘后
3、離心;抗凝全血標(biāo)本(全血細(xì)胞分析、ESR 等)不需要離心。 (2) 、溫度:一般標(biāo)本為室溫(最好是 22-25)放置;冷藏標(biāo)本(對(duì)溫度依賴性分析物)應(yīng)保持在 2-8直到溫度控制離心。 (3) 、采血管放置:應(yīng)管口(蓋管塞)向上,保持垂直立位放置。 (4) 、采血管必須封口:管塞移去后會(huì)使血 PH 改變,影響檢測(cè)結(jié)果,封口可以減少污染、蒸發(fā)、噴灑和溢出等。六、分析前的可變因素六、分析前的可變因素 1 1、生物因素:可引起所檢測(cè)物質(zhì)在體內(nèi)的變化,此種變化與檢測(cè)方法無(wú)關(guān),分為可變的和固定的生物因素。 2 2、干擾因素:在收集和分析標(biāo)本過程中,干擾因素常導(dǎo)致分析結(jié)果與被測(cè)物真實(shí)濃度不符。七、標(biāo)本采集的
4、基本原則七、標(biāo)本采集的基本原則遵照醫(yī)囑采集各種標(biāo)本均應(yīng)按醫(yī)囑執(zhí)行。凡對(duì)檢驗(yàn)申請(qǐng)單有疑問,應(yīng)核實(shí)清楚后再執(zhí)行。1、充分準(zhǔn)備(1)采集標(biāo)本前,應(yīng)明確檢驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)?zāi)康募白⒁馐马?xiàng)并向病人作耐心解釋,以取得合作。(2).應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇適當(dāng)容器,容器外必須貼上標(biāo)簽,注明病人姓名、科室、床號(hào)、檢查目的、送檢時(shí)間等。檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 2 -2、嚴(yán)格查對(duì)(1).采集前應(yīng)認(rèn)真查對(duì)醫(yī)囑,核對(duì)申請(qǐng)項(xiàng)目、病人姓名、床號(hào)等。(2).采集完畢及送檢前應(yīng)重復(fù)查對(duì)。3、正確采集采集標(biāo)本既要保證及時(shí),又須保證采集量準(zhǔn)確,這樣才能保證送檢標(biāo)本的質(zhì)量。4、及時(shí)送檢標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢,特殊標(biāo)本還應(yīng)注明采集時(shí)間。
5、八、標(biāo)本采集方法八、標(biāo)本采集方法(一) 、靜脈血液采集靜脈血液采集1. 目的目的抽取靜脈血標(biāo)本以做各項(xiàng)檢驗(yàn)。2. 適用范圍適用范圍適用于本科做生化、免疫、血常規(guī)等項(xiàng)目所需血液標(biāo)本的采集。3. 物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備:止血帶、一次性墊巾、無(wú)菌棉簽、復(fù)合碘消毒液、一次性采血針、負(fù)壓真空管(數(shù)量和種類根據(jù)要求選取后檢查滅菌日期、有效期及有無(wú)漏氣) 、試管架、編號(hào)筆、口罩。4. 檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫要求檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫要求:4.1 檢驗(yàn)申請(qǐng)單用鋼筆填寫,使用正楷字,字跡清楚,填寫完整。4.2 填寫內(nèi)容包括:受檢者姓名、性別、年齡、臨床診斷、送檢標(biāo)本、檢驗(yàn)項(xiàng)目、標(biāo)本采集年月日時(shí)、申請(qǐng)醫(yī)生及采樣者簽名。5. 操作步驟操
6、作步驟:5.1 查對(duì)檢驗(yàn)申請(qǐng)單、受檢者姓名及是否已按醫(yī)囑準(zhǔn)備,向受檢者解釋操作目的,以取得合作。在采血管上貼好與檢驗(yàn)申請(qǐng)單相對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽。5.2 選擇血管,常用肘窩靜脈、肘正中靜脈、前臂內(nèi)側(cè)靜脈,小兒可采用頸外靜脈、大隱靜脈。5.3 在穿刺部位肢體下放一次性墊巾、止血帶。5.4 用復(fù)合碘棉簽消毒穿刺部位。5.5 在靜脈穿刺部位上方 4-7 厘米處扎止血帶,囑受檢者握緊拳頭,使靜脈充盈顯露。5.6 穿刺:推薦使用真空采血技術(shù)。摘掉靜脈穿刺針上的保護(hù)套,進(jìn)行靜脈穿刺,穿刺成功后,用貼好標(biāo)簽的負(fù)壓真空管采集靜脈血,松開止血帶,受檢者松拳,用棉簽壓住進(jìn)針處,拔出針頭,囑采血對(duì)象按壓 2-3 分鐘。5.7
7、 為受檢者整理衣袖。5.8 采血完畢后,產(chǎn)生的醫(yī)療垃圾按規(guī)定分類處理。6. 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)6.1 采血前應(yīng)核對(duì)好姓名和檢驗(yàn)項(xiàng)目,明確標(biāo)本要求。6.2 抗凝管收集血標(biāo)本后,立即將試管輕輕顛倒 56 次,使血液與抗凝劑充分混勻。6.3 一般生化、免疫檢驗(yàn)用干燥非抗凝管收集標(biāo)本,采樣量 3-5ml。若檢驗(yàn)項(xiàng)目較多,應(yīng)適當(dāng)增加采樣量。6.4 血常規(guī)檢驗(yàn)用 EDTAK2 抗凝管收集標(biāo)本,采樣量 0.5-1 毫升。6.5 凝血四項(xiàng)、血紅蛋白電泳、3P 試驗(yàn)用枸櫞酸鈉(0.2ml)抗凝管收集標(biāo)本,采樣量必須準(zhǔn)確,為 1.8ml。血沉用枸櫞酸鈉 0.4ml 抗凝,抽血 1.6ml。6.6 高鐵血紅蛋白還原試
8、驗(yàn)(G6PD)以枸櫞酸鈉 0.2ml 抗凝,另加入葡萄糖 20mg,抽靜脈血 1.8ml,混勻。檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 3 -6.7 糖化血紅蛋白測(cè)定需用肝素管抗凝。6.8 血液粘度測(cè)定需同時(shí)抽取血常規(guī)、血沉和肝素抗凝血(5ml)三份樣本。6.9 餐后,血糖、血脂可增加而影響測(cè)定結(jié)果,故一般應(yīng)空腹抽血。有些食物成分:高蛋白、高脂及飲食可引起血中蛋白、血脂、尿酸增高;香蕉、咖啡等可引起尿中兒茶酚胺代謝產(chǎn)物的測(cè)定等。6.10 藥物影響:如異菸肼、慶大毒素、氨芐青毒素可使谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性增高、咖啡因可使膽紅素增加。因此,建議檢查前幾天就停止使用有干擾的藥物,且申請(qǐng)單最好能注明近期用藥情況。7
9、. 標(biāo)本運(yùn)輸及實(shí)驗(yàn)前存放標(biāo)本運(yùn)輸及實(shí)驗(yàn)前存放:低溫條件 2-8或室溫運(yùn)輸,1 小時(shí)內(nèi)送檢。1 小時(shí)內(nèi)分離出血清,室溫放置不超過 4 小時(shí),4保存不超過 8 小時(shí),長(zhǎng)時(shí)間保存需在冰凍條件下,且只能凍融 1 次。8. 附加檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)附加檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng):8.1 標(biāo)本采集送出后需附加檢驗(yàn)項(xiàng)目的,其申請(qǐng)應(yīng)在標(biāo)本采集當(dāng)天上午 11 點(diǎn) 30 分以前電話通知實(shí)驗(yàn)室。8.2 附加檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)為本檢驗(yàn)科目錄外項(xiàng)目的需提前一天與檢驗(yàn)科聯(lián)系,以便聯(lián)系其它實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。9. 其它其它:如分析失敗,將對(duì)同一原始樣本進(jìn)行檢驗(yàn)。如仍不能發(fā)出報(bào)告者,分析原因并告知受檢者重新采樣檢驗(yàn)。 (二)(二) 、末梢血采集、末梢血采集
10、1. 目的目的采集末梢血標(biāo)本以做門診血常規(guī)檢驗(yàn)。2. 適用范圍適用范圍適用于門診檢驗(yàn)科做血常規(guī)等項(xiàng)目所需血液標(biāo)本的采集。3. 物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備:一次性采血針、75%酒精、無(wú)菌棉球、0.5 毫升離心管(EDTAK2 抗凝管)、試管架、編號(hào)筆、微型震蕩器、口罩。4. 檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫要求檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫要求:4.1 檢驗(yàn)申請(qǐng)單用鋼筆填寫,使用正楷字,字跡清楚,填寫完整。4.2 填寫內(nèi)容包括:受檢者姓名、性別、年齡、化驗(yàn)單編號(hào)、臨床診斷、送檢標(biāo)本、檢驗(yàn)項(xiàng)目、標(biāo)本采集標(biāo)本年月日時(shí)、申請(qǐng)醫(yī)生及采樣者簽名。5. 操作步驟操作步驟:5.1 查對(duì)檢驗(yàn)申請(qǐng)單、受檢者姓名及是否已按醫(yī)囑準(zhǔn)備,向受檢者解釋操作目的,以取
11、得合作。5.2 常用選擇無(wú)名指,先用酒精棉球消毒,然后用一次性采血針穿刺,讓血液自然流出,用消毒棉球輕拭去第一滴后,將血液收集在 0.5 毫升離心管(EDTAK2 抗凝管),約 0.2-0.3毫升。5.3 用干棉球壓住穿刺部位,囑采血對(duì)象按壓 2-3 分鐘。5.4 在微型震蕩器混勻。馬上送檢。6. 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)6.1 采血前應(yīng)核對(duì)好姓名和檢驗(yàn)項(xiàng)目,明確標(biāo)本要求。6.2 血常規(guī)用 EDTAK2 抗凝管收集血標(biāo)本后,在微型震蕩器混勻,使血液與抗凝劑充分混勻。6.3 除特殊情況外,不要在耳垂采血。嬰幼兒可自拇指或足跟兩側(cè)采血。燒傷患者可根檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 4 -據(jù)情況選用皮膚完整
12、的肢體末端。采血部位應(yīng)無(wú)炎癥或水腫。末梢采血不可用力擠壓。7. 標(biāo)本運(yùn)輸及實(shí)驗(yàn)前存放:標(biāo)本運(yùn)輸及實(shí)驗(yàn)前存放:立即送檢,如需保存,可置 2-8存放不超過 8 小時(shí)。8. 其它其它:如分析失敗,將對(duì)同一原始樣本進(jìn)行檢驗(yàn)。如仍不能發(fā)出報(bào)告者,分析原因并告知受檢者重新采樣檢驗(yàn)。 (三)尿液標(biāo)本采集(三)尿液標(biāo)本采集 1. 目的目的采集尿液標(biāo)本以做尿液常規(guī)、生化檢驗(yàn)。2. 適用范圍適用范圍適用于本科做尿液常規(guī)、生化項(xiàng)目所需尿液標(biāo)本的采集。3. 物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備:專用一次性尿杯、編號(hào)筆。4. 檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫要求檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫要求:4.1 檢驗(yàn)申請(qǐng)單用鋼筆填寫,使用正楷字,字跡清楚,填寫完整。4.2 填寫內(nèi)
13、容包括:受檢者姓名、性別、年齡、化驗(yàn)單編號(hào)、臨床診斷、送檢標(biāo)本、檢驗(yàn)項(xiàng)目、標(biāo)本采集標(biāo)本年月日時(shí)、申請(qǐng)醫(yī)生及采樣者簽名。5. 操作步驟:操作步驟:5.1 查對(duì)檢驗(yàn)申請(qǐng)單、姓名,向受檢者解釋操作目的,以取得合作。5.2 發(fā)一次性尿杯一個(gè)給受檢者,囑受檢者留取新鮮尿立即送檢,以清晨第一次中間段尿?yàn)橐恕?.3 受檢者按要求自己用一次性尿杯留取半杯尿標(biāo)本交檢驗(yàn)科編號(hào)待檢。6. 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)6.1 根據(jù)采集時(shí)間,可分為晨尿、隨機(jī)尿、空腹尿、餐后尿、計(jì)時(shí)尿(2h、3h、12h、24h)等。一般定性分析測(cè)定,可在任意時(shí)間留取標(biāo)本。常規(guī)定性分析,多采用晨尿。計(jì)時(shí)尿多用于腎功能和有形成分排出率的估計(jì)。許多定量
14、分析需收集 24 小時(shí)尿液。微生物檢驗(yàn)的標(biāo)本應(yīng)取尿道排出的中段尿并立即送檢。一般尿液檢查應(yīng)留取新鮮尿液置清凈、干燥容器中立即送檢。 (靜脈滴注大劑量青霉素、VitC 時(shí)可影響尿蛋白、尿糖及尿隱血結(jié)果,應(yīng)盡量避免) 。6.2 特殊檢驗(yàn)如尿妊娠試驗(yàn)、尿糖定性試驗(yàn)一般應(yīng)取空腹晨尿送檢。6.3 標(biāo)本應(yīng)避免污染。一般定性分析標(biāo)本,應(yīng)在留取后馬上檢測(cè)。若需保存、或收集 24 小時(shí)尿液,原則上應(yīng)首選 04冷藏,必要時(shí)可添加化學(xué)防腐劑。常用的化學(xué)防腐劑有:a. 甲苯(或二甲苯):較常用,如 24h 尿糖定量、尿蛋白定量測(cè)定。100ml 尿液中加1ml。不能制止尿液中已有細(xì)菌的繁殖。b. 氯仿:防腐效果較甲苯好
15、??赡芨蓴_尿沉渣鏡檢。c. 鹽酸:分析測(cè)定甾體激素及其衍生物或兒茶酚胺以及含氮物質(zhì)時(shí)常選用。100ml 尿液中加 1ml,或 24 小時(shí)尿液中 10-15ml。d. 甲醛:100ml 尿液中加 0.5ml。用于 24h 尿無(wú)機(jī)離子定量及艾迪氏計(jì)數(shù)測(cè)定可干擾尿糖測(cè)定和干化學(xué)法的白細(xì)胞測(cè)定。7. 其它其它:如分析失敗,將對(duì)同一原始樣本進(jìn)行檢驗(yàn)。如仍不能發(fā)出報(bào)告者,分析原因并告知受檢者重新采樣檢驗(yàn)。九、標(biāo)本正確采集的醫(yī)學(xué)意義九、標(biāo)本正確采集的醫(yī)學(xué)意義(一) 取樣技術(shù)引起的分析前變異姿勢(shì)、靜脈加壓的持續(xù)時(shí)間、最后一次進(jìn)食、體力付出、診斷方法、血樣采集時(shí)間、溶血、輸液、外源性污染等。檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
16、(SOP)- 5 -1、姿勢(shì)從仰臥位到直立位的過程中大約有 8的體內(nèi)水由血管中進(jìn)入間質(zhì)組織中?;颊哂芍绷⑽晦D(zhuǎn)為坐位或仰臥位后,抽血測(cè)得的蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)結(jié)合物、細(xì)胞比至少讓患者仰臥 10 分鐘后抽血所測(cè)定的結(jié)果要高 38。對(duì)于一些參數(shù),由上述原因所導(dǎo)致的影響要比分析不精確的影響還要大例如血紅蛋白、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞壓積、總蛋白、膽固醇、白蛋白、免疫球蛋白和鈣離子。這種改變?cè)谟兴[的患者中比在健康人中更明顯。人體直立、手臂下垂時(shí)的血液濃度比保持手臂于心房水平要高。由于體內(nèi)循環(huán)的改變,由仰臥位到直立位可以導(dǎo)致去甲腎上腺素、醛固酮和腎素水平的升高兩倍以上。2、靜脈加壓的持續(xù)時(shí)間靜脈加壓和體
17、位從水平位變?yōu)榇怪蔽挥邢嗤男?yīng)。所有的高分子物質(zhì)增高,如 10 分鐘的加壓時(shí)間可使總蛋白升高 20。最多 2 分鐘的短期加壓幾乎不引起什么變化。如對(duì)水腫患者的手臂加壓,血液濃度的問題將非常突出。3、最后一次進(jìn)食進(jìn)食可引起血中葡萄糖、磷酸鹽和膽紅素的增加,ALT 和鉀離子明顯增高和尿酸、蛋白質(zhì)、鈣離子、膽固醇中到輕度增高。脂肪攝入的程度決定了甘油三脂的水平。OLewis 陽(yáng)性血型的人在進(jìn)食脂肪餐后可呈現(xiàn)堿性磷酸酶明顯升高。在實(shí)際診斷為目的時(shí),低脂肪的簡(jiǎn)單早餐對(duì)許多血液成分的濃度無(wú)明顯影響。而另一方面,如果要評(píng)估脂肪代謝,就必須堅(jiān)持12 小時(shí)禁食葡萄糖耐量試驗(yàn)前,要求連續(xù)幾天攝入高碳水化合物。4
18、、體力付出體液臨時(shí)性的從血管內(nèi)流入間質(zhì)中,致使血液中蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)結(jié)合物和血細(xì)胞濃度升高。經(jīng)過幾個(gè)小時(shí)的運(yùn)動(dòng),尤其是對(duì)未經(jīng)訓(xùn)練過的個(gè)體,由于體力所致的細(xì)胞損傷導(dǎo)致肌肉組織中的酶如 AST、LD、CK 的濃度升高。5、診斷方法診斷方法對(duì)臨床實(shí)驗(yàn)室結(jié)果有許多影響。在采血樣之前按摩前列腺可引起酸性磷酸酶的升高在糖耐量試驗(yàn)中,鉀、磷和鎂離子濃度升高。肌肉注射一些藥物如苯二氮卓類、度冷丁、噴他左辛、氯丙嗪、利多卡因、苯巴比妥、異丙嗪,可引起 CK 和肌紅蛋白的升高。外科手術(shù)可引起急性時(shí)相蛋白濃度的升高,從而導(dǎo)致紅細(xì)胞沉降率加快。6、血樣采集時(shí)間在每日的不同時(shí)間,鐵濃度都有明顯的變化,在下午的變化最大;而
19、皮質(zhì)醇、腎上腺素和去甲腎上腺素在早晨的變化最大;腎素、醛固酮、生長(zhǎng)激素和甲狀旁腺素在晚上的變化最大。7、溶血長(zhǎng)時(shí)間過度的加壓可使血管內(nèi)溶血,用注射器采血時(shí)用力過大或不正確的穿刺吸入靜脈周圍血導(dǎo)致血管外溶血。溶血可致鉀離子濃度升高和 LD、ALT、AST 和酸性磷酸酶活力的升高。如血紅蛋白濃度超過 0.2gL 肉眼即可見到溶血。8、輸液不可在輸液同時(shí)及同側(cè)取血樣檢測(cè)。(二) 需要考慮的生物因素1、性別許多實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)都列出了不同性別的參考值。對(duì)一些被測(cè)物,性別間的差異可能是由于體重、體表面積和肌肉重量的不同而導(dǎo)致的。下列試驗(yàn)在男性中所測(cè)得的結(jié)果比在女性中所測(cè)得的高:GGT、甘油三酯、尿酸、肌酐、氨
20、、CK、AST、ALP、鐵、尿素、膽固醇。2、種族就酶的參考值來(lái)說,種族不會(huì)導(dǎo)致明顯的差異。就一些底物如膽固醇、甘油三酯、尿酸檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 6 -來(lái)說,不同社會(huì)經(jīng)濟(jì)階層的飲食習(xí)慣不同所導(dǎo)致的差異要比種族不同所導(dǎo)致的差異大。在血型的頻率分布上,種族差異起著很重要的作用,同樣,種族差異在一些血漿蛋白表型和它們蛋白質(zhì)濃度之間的關(guān)系中也起一定的作用,如結(jié)合珠蛋白和 a1 一抗胰蛋白酶。3、年齡和老化鈣、磷酸鹽、總蛋白和白蛋白水平下降而葡萄糖、尿素、膽固醇的濃度和 LD 活性增高。單克隆丙種球蛋白病發(fā)病率上升和肌酸清除率的下降都是與年齡相關(guān)的改變。肌酸、ALP、GGT 的升高和男性中
21、年齡相關(guān)性尿酸的增高仍沒有被明確的證實(shí)。與成人相比,兒童期的酶活性較高,而鐵、銅和免疫球蛋白的濃度較低。4、生物節(jié)律個(gè)體的不規(guī)則的血液成分在 1 天內(nèi)的變化必須與人體的生理節(jié)律相鑒別。后者是 24h 內(nèi)有規(guī)律的反復(fù)出現(xiàn)的特定現(xiàn)象。時(shí)區(qū)改變時(shí)常常出現(xiàn)生物節(jié)律的改變?nèi)绱┰浇?jīng)線。機(jī)體需要 68h 去適應(yīng)新的時(shí)區(qū)。并不是所有的人都出現(xiàn)晝夜節(jié)律和生物節(jié)律的改變。這些改變常伴有暫時(shí)性的血液成分的改變(如在早晨常有幾分鐘的皮質(zhì)醇的改變)或血液成分在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)發(fā)生變動(dòng)。個(gè)體間的變化、生理節(jié)律和長(zhǎng)期的變動(dòng)只在縱向檢測(cè)時(shí)有意義。在橫向檢測(cè)中,因?yàn)橛袇⒖贾捣秶?,所以這些改變沒什么意義。5、體重肥胖的男性有較高濃度的
22、尿酸、膽固醇、LD、胰島素、餐后葡萄糖、AST、肌酐、總蛋白和尿酸。磷酸鹽在男性和女性肥胖者中較低,而鈣離子只在女性肥胖者中較低。6、酒精飲酒幾分鐘后AST 會(huì)輕度升高3h 后達(dá)到最大,但仍在不飲酒的參考范圍內(nèi)。一段時(shí)間后,GGT 輕度增高對(duì)別的酶的影響很難檢測(cè)到。飲酒后,甚至是少量的飲酒后,在一些個(gè)體中可以檢測(cè)到甘油三酯持續(xù)幾個(gè)小時(shí)或幾天的大量增高。慢性飲酒可顯示持續(xù)性的 GGT 水平升高。7、緊張兒茶酚胺和 1 7 一羥皮質(zhì)類甾醇的產(chǎn)生增加。皮質(zhì)醇、腎素、醛固酮和生長(zhǎng)激素的血漿水平升高。促甲狀腺激素和催乳素的血漿水平也可能增加。8、臥床休息腎臟排泄鈉、鈣、氯化物、磷酸鹽和氨增加ALP 的血
23、漿水平升高。9、外科手術(shù)對(duì)血細(xì)胞計(jì)數(shù)和血清中酶活性和底物濃度的影響取決于所患的疾病和手術(shù)類型。通常,手術(shù)后的第一個(gè) 24h 內(nèi)會(huì)發(fā)生下列改變:血紅蛋白濃度下降、白細(xì)胞增多、紅細(xì)胞沉降率升高,像 C 反應(yīng)蛋白等急性時(shí)相蛋白增加、暫時(shí)性的中度高膽紅素血癥和尿素增高。CK 水平明顯升高,尤其是在腹部或胸腔手術(shù)時(shí),其水平在最高參考限值的 310 倍膽囊切除術(shù)后,經(jīng)常可見到中度轉(zhuǎn)氨酶升高,但在別的外科手術(shù)中,很少見到轉(zhuǎn)氦酶的升高。10、電離輻射電離輻射治療,由于腫瘤組織的溶解,??蓪?dǎo)致血小板和白細(xì)胞的下降,尿酸升高至 1 785 umoIL(30mgd1)。11、懷孕ALP、膽固醇、甘油三酯、銅、血漿銅
24、藍(lán)蛋白、運(yùn)鐵蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、孕酮、雌二醇、雌三醇和催乳素升高。隨懷孕而上升的人絨毛膜促性腺激素(hCG)和甲胎蛋白。鐵、鎂、鈣、總蛋白、白蛋白、膽堿酯酶、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)下降。12、口服避孕藥(OC)服用 OC 后,血清中的酶在一定周期內(nèi)升高,然后降低。任何升高都保持在正常值范圍內(nèi)。甲狀腺素結(jié)合球蛋白和血漿銅藍(lán)蛋白在女性分別升高 44和 70。檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 7 -(三) 、影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素在臨床醫(yī)療工作中臨床醫(yī)生面對(duì)尿沉渣報(bào)告中極少量的紅血球,會(huì)針對(duì)導(dǎo)尿或女性患者與男性患者,給予不同的解讀。但是對(duì)未懷疑的疾病,檢驗(yàn)室居然出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)告,臨床醫(yī)師絕不能掉以輕
25、心,簡(jiǎn)單認(rèn)定檢驗(yàn)報(bào)告有誤,應(yīng)小心求證以得到正確的解釋。另外尚有一些飲食、生理現(xiàn)象、標(biāo)本處置不當(dāng)、藥物因素,也會(huì)造成判讀的偏差。本節(jié)主要就影響檢驗(yàn)結(jié)果的疾病外因素予以簡(jiǎn)單介紹。1、飲食因素() 、必須空腹(通常指禁食 810 小時(shí),其間只允許喝白開水)的檢驗(yàn)項(xiàng)目如:G L u、脂類(L ipid Profile)、鐵(FE)、總鐵結(jié)合力(TIBC)、轉(zhuǎn)肽酶(GTT)、膽汁酸(BileAcid)、胰島素(1nsulin)等。其它血清學(xué)檢驗(yàn)如需血清澄清最好空腹:如各種病毒抗體等。() 、空腹超過 48 小時(shí)可能會(huì)造成膽紅素(BIL)兩倍以上的增加,而 Glu、白蛋白(ALB)、補(bǔ)體 (Complem
26、entC3)及轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)下降。() 、餐后立即抽血,造成高 K 低 P,混濁的血清其 BlL、LDH、TP 增高,有可能造成 UA、BUN 降低。() 、高蛋白飲食者,其 BUN、尿酸(Urate)高而高嘌呤(Purines)食物影響的當(dāng)然就是 Urate 增高。() 、口服避孕藥使 T4(RlA)、TG、ALT、FE、GGT 升高,ALB 低等可影響的檢驗(yàn)報(bào)告據(jù)稱有 100 多項(xiàng)。() 、酒精可導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果立即上升的有:UA、乳酸(Lactate);嗜酒者的影響如:GGT、ALT、TG,成癮者甚至影響其它如:BlL、AST、ALP。2、生理因素() 、懷孕造成甲胎蛋白
27、(AFP)、AMY、膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)偏高,BUN、NA、ALB 偏低。() 、劇烈運(yùn)動(dòng)后,CK、CREA、BUN、UA、WBC、K+、BlL、LACT、高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)會(huì)升高。運(yùn)動(dòng)員的 LDH、BUN 較高。長(zhǎng)期的運(yùn)動(dòng)促使 HDLC、Lactate等升高。() 、采血部位、姿勢(shì)和止血帶的使用、采血時(shí)要避開水腫、破損部位,應(yīng)“一針見血”,防止組織損傷,外源性凝血因子進(jìn)入針管;如果采血過慢或不順利,可能激活凝血系統(tǒng)使凝血因子活性增高、血小板假性減低。輸液病人應(yīng)在輸液裝置的對(duì)側(cè)胳膊采血,避免血液被稀釋。決不能在輸液裝置的近心端采血。、姿勢(shì)的影響結(jié)果。臥姿、坐姿或站姿
28、,由于造成靜脈承受壓力不同,會(huì)造成影響(站姿較高)如:TP、ALB、CA、HCT、ALT、FE、CHOL 及尿中兒茶酚胺(Catecholamines)。測(cè)血中 Catecholamines 時(shí),采血前一周,應(yīng)避免抽煙,食用如核桃、香蕉及腎上腺素類(epinephrinelike)藥物;保持平靜勿使其受壓力、興奮等情緒變化仰臥三十分鐘后抽血。、對(duì)于血色素、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞比積等檢驗(yàn)指標(biāo)來(lái)說臥位采血與坐、立位采血結(jié)果有區(qū)別。正常人直立位時(shí)血漿總量比臥位減少 12左右,血液中以上成分不能通過血管壁轉(zhuǎn)移到間質(zhì)中去,使其血漿含量升高 51 5。、止血帶壓迫時(shí)間不能過長(zhǎng),最長(zhǎng)不超過 1 分
29、鐘。壓迫時(shí)間過長(zhǎng),可引起纖溶活性增強(qiáng),血小板釋放及某些凝血因子活性增強(qiáng),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。、肥胖人士除了 GLU、CHOL、UA 普遍偏高外,肥胖男性尚會(huì)有 CREA、TP、HtGB、AST 偏高及 P 偏低的現(xiàn)象,而肥胖女性則有 CA 偏低的情形。3、時(shí)辰影響因素檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 8 -() 、皮質(zhì)醇(Cortisol)在睡眠時(shí)濃度會(huì)增加,因此上下午所測(cè)之值可能有明顯差異,最好于上下午各采血一次,其它如尿鉀(可造成 5 倍之改變)、黃體生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)。() 、促甲狀腺素(TSH)在每日不同時(shí)辰,其濃度也會(huì)出現(xiàn)若干變化。() 、Transferrin 高值出現(xiàn)
30、于 4PM-8PM。() 、WBC 及 LYM 早晨較高,嗜酸粒細(xì)胞(EOS)下午較低。() 、TG、P、BUN、HCT 的高值出現(xiàn)于下午 BIL 反之。() 、性別、晝夜節(jié)律、季節(jié)、海拔高度對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響:如晨 6 點(diǎn)左右皮質(zhì)醇值達(dá)最高峰,隨后逐漸降低,午夜最低。4、樣本處置不當(dāng)() 、溶血:LDH、HBDH、BlL、AST、CK、CKMB、AST、MG、ACP、K 偏高。其它影響較小的,諸如凝血因子、蛋白質(zhì)分析、ALP、FE、P。等在交叉配血試驗(yàn)中血樣溶血嚴(yán)重干擾對(duì)結(jié)果的判斷。紅細(xì)胞膜完整性被破壞會(huì)嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的項(xiàng)目主要有:LDH、K+、Hb、ACP;有值得注意的影響的項(xiàng)目主要有:F
31、e、ALT、T4;有輕微影響或不太受影響的項(xiàng)目主要有:TP、ALB、ALP、 AST、TBIL、WBC、APTT、TT、Cr、Urea、UA、P、Mg 、Ca。() 、未分離血清過久:K+、LDH、FE、AST(可能)偏高,GLU、ALP(可能)偏低。() 、日曬:WBC、PLT、ESR 偏高,BlL 偏低。() 、禁止從靜脈注射處、套管處取血,嚴(yán)重影響 GLU、電解質(zhì)及凝血因子報(bào)告之準(zhǔn)確性。() 、綁止血帶時(shí)間及握拳會(huì)影響電解質(zhì)、Lactic Acid、PC02、pH。() 、微血管穿刺樣本可用于血細(xì)胞分析、電解質(zhì)及一般生化檢驗(yàn), 但有可能擠入組織液造成不準(zhǔn)確的結(jié)果。5、藥物因素(1) 、抗
32、生泰藥物青霉素類和磺胺類藥物能增高血液中尿酸濃度,常誤報(bào)作“痛風(fēng)陽(yáng)性” ?;前奉愐种颇c內(nèi)細(xì)菌繁殖,使尿膽素不能還原為尿膽原,無(wú)法得出尿膽原的正確結(jié)果。(2) 、鎮(zhèn)痛消炎藥物阿斯匹林、氨基比林等會(huì)使尿中膽紅素檢測(cè)值升高;嗎啡、杜冷丁和消炎痛、布洛芬等,可導(dǎo)致檢驗(yàn)中淀粉酶和脂肪酶含量明顯升高,在用藥后 4 小時(shí)內(nèi)影響最大,24 小時(shí)后消失。(3) 、抗癌藥物絕大多數(shù)抗癌藥物對(duì)人體造血系統(tǒng)有抑制和毒害作用,可導(dǎo)致血液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板和血紅蛋白數(shù)量的減少(少數(shù)藥物可使血細(xì)胞異常升高),肝功能改變,有的使血脂值升高。其中甲氨蝶啶抑制骨髓,且損害腎功能;硫唑嘌呤損害肝功能,出現(xiàn)黃疸;阿糖胞苷使谷丙
33、、谷草轉(zhuǎn)氨酶異常升高。(4) 、激素類藥物雌激素類藥物能影響人體中血脂的正常含量,使葡萄糖耐量試驗(yàn)減低,并可引起血小板和紅細(xì)胞量的減少。鹽皮質(zhì)素易致水、鈉潴留和低鉀血癥。腎上腺素減少鈣、磷的吸收,且排出量增加,故血鈣、血磷偏低,另外可明顯升高血糖值。(5) 、利尿藥物臨床上常用的為雙氫克尿噻、速尿、三氯噻嗪和利尿酸等。典型的臨床反應(yīng)為:低血鉀、低血容量和低血氯,長(zhǎng)期應(yīng)用后可見高氮質(zhì)血癥和高尿酸血癥。檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 9 -(6) 、抗糖尿病藥胰島素使用后可出現(xiàn)低血糖癥,這已為大家所熟知。其它抗糖尿病藥(如 D 60、氯磺丙脲等), 可損害肝功能,使谷丙、谷草轉(zhuǎn)氨酶升高,出現(xiàn)黃疸
34、,血細(xì)胞減少等。(7)抗癲癇藥如苯妥英鈉因抑制葉酸的吸收,常見巨細(xì)胞性貧血。因輕度抑制骨髓,故使血細(xì)胞(尤其是白細(xì)胞和血小板)減少,偶有再生障礙性貧血的報(bào)道。卡馬西平可致粒細(xì)胞、血小板減少,長(zhǎng)期應(yīng)用損害肝功能。(8) 、使檢驗(yàn)標(biāo)本著色的藥物主要為藥物使尿液染色,從而干擾比色測(cè)定和熒光分析的測(cè)定結(jié)果。如服利福平后尿呈橙紅色;服維生素 B2、黃連素等使尿呈黃色;服苯琥珀后尿呈桔紅色;服氨苯喋啶后使尿呈綠藍(lán)色,并有藍(lán)色熒光。許多藥物對(duì)大便的色澤也產(chǎn)生影響。為了最大限度地避免和清除“藥物干擾檢測(cè)”這一現(xiàn)象,臨床醫(yī)師、檢驗(yàn)醫(yī)師和藥師必須結(jié)合不同給藥途徑給藥后的藥物代謝動(dòng)力學(xué),判定檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)要綜合考慮給藥
35、途徑、藥物的血藥濃度水平、藥物的半衰期、排泄途徑和清除率等。許多藥物對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的干擾,常與血藥濃度呈正相關(guān),故檢驗(yàn)取樣應(yīng)盡量避開血藥高峰期。當(dāng)然,疾病條件許可時(shí),應(yīng)提早幾天停藥,以完全排除藥物對(duì)檢測(cè)影響,但這并不是每個(gè)病人都能做到的。 檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 10 -血常規(guī)及血常規(guī)及 URIT-3010 血球儀使用操作程序血球儀使用操作程序一、目的目的規(guī)范血細(xì)胞分析儀檢測(cè)試驗(yàn),確保結(jié)果準(zhǔn)確性和重復(fù)性。二、原理二、原理由于血細(xì)胞的非傳導(dǎo)性質(zhì),電解質(zhì)溶液中懸浮的血細(xì)胞在通過檢測(cè)小孔時(shí)會(huì)引起小孔的電阻變化,這種進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測(cè)量的方法稱為電阻抗法或庫(kù)爾特原理。三、儀器的運(yùn)行壞境三、儀
36、器的運(yùn)行壞境1. 儀器應(yīng)安裝在平穩(wěn)干燥的地方。2. 安裝于不受高溫、潮濕、灰塵、陽(yáng)光直射等可能對(duì)儀器產(chǎn)生不良影響的地方。3. 儀器應(yīng)避免受到強(qiáng)烈的震動(dòng)或沖擊。4. 不要安裝化學(xué)藥品的保管場(chǎng)所或產(chǎn)生氣體的地方。5. 溫度 18-30,最佳 23,空調(diào)冷卻能力必須約為 172kal/小時(shí),相對(duì)濕度 50%-85%,電壓 200V10%.6. 避免強(qiáng)光照射及輻射源輻射。四、授權(quán)操作者四、授權(quán)操作者 經(jīng)實(shí)驗(yàn)室上崗培訓(xùn)合格的各級(jí)檢驗(yàn)人員五、工作前檢查五、工作前檢查1. 將質(zhì)控品從冰箱中取出,放置 20 分鐘,恢復(fù)至室溫待用。2. 開啟儀器執(zhí)行自動(dòng)清洗并進(jìn)行空白測(cè)量。3. 檢查試劑并將廢液處理。六、試劑裝
37、載程序六、試劑裝載程序試劑不足時(shí)準(zhǔn)備好相應(yīng)的新試劑,確認(rèn)其在使用期限內(nèi)裝載。七、操作程序七、操作程序1、開機(jī)前的準(zhǔn)備(1) 、確認(rèn)各電氣、外接管路連接正確無(wú)誤,各試劑瓶?jī)?nèi)試劑充分夠用。(2) 、檢查儀器外部液路導(dǎo)管是否有打折或脫落;廢液桶內(nèi)的廢液是否已滿。2、開機(jī)啟動(dòng) 開啟主機(jī)后面板電源開關(guān),儀器進(jìn)入自檢。3、空白測(cè)試 (1) 、放置清潔的試管于采樣針下,在血細(xì)胞分析窗口,點(diǎn)擊“排液” ,儀器排出稀釋液到試管中。檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 11 - (2) 、在血細(xì)胞分析窗口,選擇“資料” ,在彈出的“資料編輯”對(duì)話框中將樣本編號(hào)改為“0” 。 (3) 、將盛有稀釋液的試管放于采樣針下,
38、應(yīng)確保采樣針輕觸試管底部。 (4) 、按儀器前面板的計(jì)數(shù)鍵,待聽到“滴”的一聲后,方可移走試管。儀器開始計(jì)數(shù)測(cè)量。 (5) 、計(jì)數(shù)完成后,顯示屏上顯示出空白測(cè)試結(jié)果,空白測(cè)試結(jié)果可接受范圍見:參數(shù)數(shù)值單位WBC0.2109LRBC0.021012LHGB1gLPLT10109L 注:序號(hào) 0 是儀器空白測(cè)試的專用序號(hào),在給臨床的血液樣本編號(hào)時(shí)請(qǐng)勿輸入此序號(hào)。4、血樣的采集 (1) 、靜脈血的采集:采用靜脈穿刺采取靜脈血,注入含有抗凝劑的干凈采血管,輕搖 5 次。 (2) 、末梢血的采集:從指端穿刺采集,采用 20ul 定量采血管。5、血樣計(jì)數(shù)、分析 1、預(yù)稀釋方式:將空試管置于采樣針下,點(diǎn)擊“
39、排液” ,儀器排出稀釋液到試管中,將 20ul 采血管內(nèi)的血樣迅速注入準(zhǔn)備好的盛有稀釋液的試管中,輕輕搖勻;將盛有血樣的試管置于采樣針下,按儀器面板前的計(jì)數(shù)鍵,指示燈變成橙色,聽到蜂鳴器發(fā)出清脆的“滴”聲后,移走試管。儀器開始自動(dòng)分析樣本。 2、全血方式:輕輕搖動(dòng)試管使血樣混勻后,將試管置于采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,指示燈變成橙色,等到“滴”聲后,移走試管。儀器開始自動(dòng)分析樣本。6、打印 樣本分析完成后,按打印鍵打印,或設(shè)為自動(dòng)打印。7、關(guān)機(jī) (1) 、選擇“關(guān)機(jī)”菜單,按“確認(rèn)”鍵,屏幕彈出關(guān)機(jī)窗口; (2) 、移動(dòng)光標(biāo)到“確認(rèn)” ,按“確認(rèn)”鍵關(guān)閉系統(tǒng); (3) 、儀器開始對(duì)液路進(jìn)行清洗、保養(yǎng)。
40、 (4) 、關(guān)機(jī)程序運(yùn)行完畢后,儀器屏幕會(huì)顯示“謝謝使用,現(xiàn)在請(qǐng)關(guān)閉電源”的提示,此時(shí)關(guān)閉儀器后面板的電源開關(guān); (5) 、清理工作臺(tái)并處理廢液。8、儀器維護(hù)保養(yǎng) (1) 、日維護(hù):擦拭分析儀臺(tái)面、檢查試劑、檢查廢液桶、檢查管路 (2) 、月維護(hù):清洗廢液桶、潤(rùn)滑電機(jī)軸、潤(rùn)滑采樣導(dǎo)向桿 (3) 、不定期維護(hù):灼燒、排堵、清洗、清潔采樣針八、儀器校準(zhǔn)頻率八、儀器校準(zhǔn)頻率 1.投入使用前,必須校準(zhǔn),合格后方可使用。 2.更換儀器的部件,移動(dòng)位置。 3.若檢測(cè)結(jié)果有漂移時(shí)需對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。 4.每半年至少進(jìn)行一次儀器校準(zhǔn)。九、標(biāo)本處理九、標(biāo)本處理 1.全血標(biāo)本檢測(cè)后,室溫保存 1 天。 2.稀釋模式
41、標(biāo)本檢測(cè)后不用保存。 3.超過保存期的血標(biāo)本,裝入黃色塑料袋,有專人統(tǒng)一回收處理。 4.有約定的按約定執(zhí)行。檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 12 -十、故障處理指引十、故障處理指引 在一般情況下,故障的排除應(yīng)遵循如下三個(gè)步驟進(jìn)行:1、 故障確認(rèn)2、 故障分類3、 故障排除十一、參數(shù)分析十一、參數(shù)分析1.白細(xì)胞指數(shù)檢測(cè)在 35450fl 范圍內(nèi)將血細(xì)胞分為三群。正常白細(xì)胞直方圖的左側(cè)峰又高又陡,跨越3593fl,定為淋巴細(xì)胞峰(小細(xì)胞群) ,以成熟小淋巴細(xì)胞為主。最右側(cè)峰又低又寬,跨越160450fl,定為中性粒細(xì)胞峰(大細(xì)胞群)以中性粒細(xì)胞為主,包括桿狀核細(xì)胞和晚幼粒細(xì)胞,左右兩峰之間較平坦
42、區(qū),定為單個(gè)核細(xì)胞區(qū)(中間細(xì)胞群)主意以單核細(xì)胞為主,也含有嗜酸、嗜堿性粒細(xì)胞及白血病細(xì)胞等。(1)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的可接受性能為15%。(2)樣本必須在 6 小時(shí)內(nèi)測(cè)定完畢。(3)對(duì)特別異常的結(jié)果須用手工計(jì)數(shù)復(fù)檢,手工計(jì)數(shù)應(yīng)用高精度的微量吸管,加液器計(jì)數(shù)盤等。(4)常見問題報(bào)警處理:細(xì)胞計(jì)數(shù)問題,應(yīng)采用手工計(jì)數(shù)法;三分群鑒別線報(bào)警,應(yīng)確認(rèn)血涂片標(biāo)本。(5)直方圖上白細(xì)胞計(jì)數(shù)值的異常信息。當(dāng)出現(xiàn) RBC 溶血不全時(shí),在白細(xì)胞直方圖上,WBC 低鑒別線與直方圖曲線的交點(diǎn)位置異常高,可通過血樣稀釋、或用稀釋液對(duì)血樣中的血漿進(jìn)行置換(清洗細(xì)胞)或用較強(qiáng)烈的溶血?jiǎng)┑膬x器進(jìn)行測(cè)定;當(dāng)出現(xiàn)白細(xì)胞凝聚時(shí),直方圖上
43、可見三峰分布混亂,在超出 250fl 的區(qū)域也有顆粒存在可以引起白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性減低??蓪⒀獦蛹訙?,用生理鹽水等清洗,消除白細(xì)胞凝聚;當(dāng)出現(xiàn)有核紅細(xì)胞的影響時(shí),紅細(xì)胞與小細(xì)胞之間的低谷位置上升,并有報(bào)警,有核紅細(xì)胞幾乎全部被當(dāng)做白細(xì)胞計(jì)數(shù)。可以引起白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性增高,因此須按下式進(jìn)行校正:校正白細(xì)胞計(jì)數(shù)值=儀器白細(xì)胞檢測(cè)值100/(100+有核紅細(xì)胞數(shù)) ,有核紅細(xì)胞數(shù);100 個(gè)白細(xì)胞中的有核紅細(xì)胞數(shù);當(dāng)出現(xiàn)血小板聚集時(shí),可使白細(xì)胞假性增高,應(yīng)重新采血測(cè)定。(6)冷凝集現(xiàn)象、檢出纖維蛋白均可使白細(xì)胞計(jì)數(shù)值產(chǎn)生正誤差;小淋巴細(xì)胞可使白細(xì)胞計(jì)數(shù)產(chǎn)生負(fù)誤差;不恰當(dāng)?shù)娜苎獎(jiǎng)┳饔每墒拱准?xì)胞計(jì)數(shù)值產(chǎn)生正的
44、或負(fù)的誤差。(7)開展室內(nèi)質(zhì)控和參加室間質(zhì)評(píng)。2.紅細(xì)胞指數(shù)檢測(cè)紅細(xì)胞直方圖:儀器在體積為 36360fl 范圍內(nèi)分析紅細(xì)胞,橫坐標(biāo)表示紅細(xì)胞體積,縱坐標(biāo)表示不同體積紅細(xì)胞出現(xiàn)的頻率。正常紅細(xì)胞主要分布在 50200fl 范圍內(nèi),直方圖上,可見兩個(gè)細(xì)胞群從 30125fl 區(qū)域有一個(gè)幾乎兩側(cè)對(duì)稱、較狹窄的正態(tài)分布曲線,主峰右側(cè)約分布在 125200fl 區(qū)域的細(xì)胞,為大紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞。紅細(xì)胞的 體積發(fā)生變化,直方圖峰可左移或右移,或出現(xiàn)雙峰。(1) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的可接受性能為6%。(2) 對(duì)特別異常的結(jié)果須用手工計(jì)數(shù)復(fù)檢,手工計(jì)數(shù)應(yīng)用高精度的微量吸管,加液器計(jì)數(shù)盤等。(3) 紅細(xì)胞在一天內(nèi)有
45、波動(dòng),上午 7 時(shí)為高峰,隨后下降。(4) 采血部位不同結(jié)果有影響,靜脈血比末梢血的結(jié)果低 1015%。(5) 開展室內(nèi)質(zhì)控和參加室間質(zhì)評(píng)。(6) 異常信息與處理方法:出現(xiàn)破碎的紅細(xì)胞,大血小板增多,血小板聚集。處理檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 13 -方法:手工計(jì)數(shù),確認(rèn)血涂片;受冷球蛋白、破碎紅細(xì)胞,白血病細(xì)胞的血比質(zhì)碎片等干擾。處理方法:將標(biāo)本加溫后后再撿,手工法、確認(rèn)血涂片標(biāo)本;受冷凝集素的干擾,有白細(xì)胞混入。處理方法:將標(biāo)本加溫后后再撿,確認(rèn)血涂片標(biāo)本;紅細(xì)胞有很明顯的大小不均。處理方法:確認(rèn)血涂片標(biāo)本;貧血治療時(shí)及受輸血的影響,出現(xiàn)多群紅細(xì)。處理方法:確認(rèn)血涂片標(biāo)本。 (7)直
46、方圖顯示紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值的異常信息。當(dāng)出現(xiàn)有核紅細(xì)胞時(shí),紅細(xì)胞直方圖 RDW 增大,須作血涂片檢查確認(rèn);當(dāng) RDW 增大提示有多種大小的紅細(xì)胞出現(xiàn)。須與 RBC 直方圖做相關(guān)分析,RBC 直方圖顯示分布較寬;當(dāng) RBC 直方圖顯示以小細(xì)胞性紅細(xì)胞為主,同時(shí)有大小不一的紅細(xì)胞,須作涂片檢查(檢查畸形紅細(xì)胞)當(dāng) RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW 顯示異常值時(shí),同時(shí)直方圖上也能觀察到一低峰,此時(shí)應(yīng)考慮為冷凝集樣本,可先涂片確認(rèn)是否冷凝集樣本,如果是將樣本加溫,凝塊消失后重新測(cè)定。(8) 分裂細(xì)胞、凝集現(xiàn)象可使紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值產(chǎn)生誤差;巨血小板可使紅細(xì)胞計(jì)數(shù)產(chǎn)生正誤差;儀器運(yùn)行異??墒辜t細(xì)胞計(jì)
47、數(shù)產(chǎn)生正誤差和負(fù)誤差。十二、危急值(警告值)十二、危急值(警告值)HGB250g/LRBC2.51012 /LWBC:成人:50109/LPLT600109/L十三、醫(yī)學(xué)決定水平十三、醫(yī)學(xué)決定水平HGB輕度:正常下限91g/L中度:9060 g/L重度:6031 g/L極重度:30 g/LRBC1.高于 6.81012L,應(yīng)采取治療措施。2.低于 3.51012L,為診斷貧血界限,應(yīng)尋找病因。3.低于 1.51012L,應(yīng)考慮輸血。WBC1.0.5109/L,檢驗(yàn)對(duì)象有高度易感性,采取相應(yīng)的預(yù)防性治療及預(yù)防感染措施。2.3.0109/L,為白細(xì)胞減少癥,應(yīng)在做其他實(shí)驗(yàn),如白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、外周血
48、涂片等并詢問用藥史。3.11109/L,為白細(xì)胞增多此時(shí)做白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)有助于分析病因和分型,如果需要應(yīng)查找感染源。4.5g/L 或尿液中含有大劑量先鋒霉素等藥物時(shí),可使結(jié)果偏低或出現(xiàn)假性結(jié)果。(4)試條中的試劑主要和白蛋白發(fā)生反應(yīng)對(duì)球蛋白的反應(yīng)靈敏度不高,應(yīng)注意。(5)肉眼可見的血尿也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)由于尿液分析儀白細(xì)胞檢測(cè)與顯微鏡下計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)原理截然不同,其報(bào)告方式也是兩種不同的概念,很難找出兩者的對(duì)應(yīng)關(guān)系,迄今還沒有一種直接的換算方式,因此儀器法白細(xì)胞檢查只是一個(gè)篩選試驗(yàn),絕不可代替顯微鏡檢查。11.抗壞血酸檢測(cè)原理:采用還原法??箟难峋哂?1,2-烯二醇還原性基團(tuán),在堿性條件中,將氧
49、化態(tài)藍(lán)色的 2,6 二氯酚靛酚染料還原為無(wú)色的 2,6 二氯二對(duì)酚胺。干擾因素:當(dāng)尿中含有氧化劑時(shí)(如高錳酸鉀,次氯酸鹽等)會(huì)影響本實(shí)驗(yàn)的靈敏度。 四、四、 標(biāo)本要求標(biāo)本要求1.標(biāo)本來(lái)源:清晨第一次尿液或隨機(jī)尿液,留取中段尿。2.不可接受逇標(biāo)本:超過 2 小時(shí),沒有按規(guī)定使用潔凈、干燥的容器以及低于 10ml 的尿液。3.標(biāo)本的保存:應(yīng)在 2 小時(shí)內(nèi)對(duì)尿液進(jìn)行檢驗(yàn)。五、五、 設(shè)備和試劑設(shè)備和試劑1.設(shè)備:URIT-500B 尿機(jī)2.試劑。與尿液配套的尿 11G.3.質(zhì)控品。陰性和陽(yáng)性,2 個(gè)水平。六、六、 檢測(cè)步驟檢測(cè)步驟1、儀器的使用 1) 、一般使用:開啟儀器電源開關(guān),儀器進(jìn)入自檢狀態(tài),開
50、始初始化,顯示屏顯示主界面。如設(shè)置正確,儀器可開始測(cè)試。如果測(cè)試出現(xiàn)故障結(jié)果,在主界面會(huì)顯示“故障表”鍵,按此鍵,可列出最近出現(xiàn)故障結(jié)果表明的序號(hào),便于重新檢測(cè)這些序號(hào)的樣本。 2) 、儀器設(shè)置選擇:1)按“設(shè)置”鍵,進(jìn)入設(shè)置菜單,可以對(duì)“時(shí)間” 、 “初始化” 、 “系統(tǒng)” 、 “打印”、 “串口” 、 “升級(jí)”進(jìn)行設(shè)置。2)按“查閱”鍵,進(jìn)入查閱菜單,可以查詢測(cè)試的歷史記錄。3)按“序號(hào)”鍵,輸入標(biāo)本序號(hào)。4)按“試紙”鍵,用循環(huán)鍵可進(jìn)行 14G、13G、11G、10G 試紙的選擇。5)按“進(jìn)紙”鍵,打印紙向前進(jìn)一行。6)按“關(guān)于”鍵,顯示有關(guān)生產(chǎn)商的信息。7)按“返回”鍵,返回上一級(jí)菜單
51、。2、儀器的校驗(yàn)使用人員要經(jīng)常用隨機(jī)附帶的 11G 標(biāo)準(zhǔn)試紙條對(duì)儀器進(jìn)行校驗(yàn)檢查,標(biāo)準(zhǔn)試紙條共兩條,日常使用一條,另一條作為保存?zhèn)溆?。確保儀器處于主界面且使用尿試紙項(xiàng)為11G,用標(biāo)準(zhǔn)試紙條進(jìn)行檢測(cè)后,將檢測(cè)的打印結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)盒上的標(biāo)準(zhǔn)值相比較,如果相符則說明儀器正常,表示可以使用;如果不符,可用另外一條標(biāo)準(zhǔn)試紙條再重復(fù)檢測(cè)一次;如仍不符,需查找故障原因并排除故障后再使用。3、常規(guī)尿液測(cè)試1) 、將待測(cè)的尿試紙條完全浸入示經(jīng)離心的待測(cè)尿液中,在尿液容器壁緩慢抽出,用檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 19 -吸水紙除去多余尿液,但不可吸得太干。2) 、把尿試紙條旋轉(zhuǎn)在固定平臺(tái)上,位于撥動(dòng)桿的右邊附近
52、,試紙面向上。3) 、放置的尿試紙條被檢測(cè)到后,撥動(dòng)桿開始啟動(dòng),將尿試紙條送到移動(dòng)臺(tái)板上,再由移動(dòng)臺(tái)板將尿試紙條關(guān)到掃描檢測(cè)區(qū),檢測(cè)頭檢測(cè)后由移動(dòng)臺(tái)板推到廢料盒。4) 、尿試紙條被測(cè)試結(jié)束后,顯示屏顯示測(cè)試結(jié)果,同時(shí)打印機(jī)打印出測(cè)試結(jié)果。5) 、如果測(cè)試過程中發(fā)生問題,可按暫停鍵暫停當(dāng)前檢測(cè)。當(dāng)故障排除后,按開始鍵重新開始檢測(cè)。注:檢測(cè)尿液標(biāo)本必須,儀器測(cè)試和鏡檢同時(shí)進(jìn)行,不能省略鏡檢步驟。七、七、 結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告將儀器打印的原始小票貼于相應(yīng)的申請(qǐng)單上檢查無(wú)誤后,并將鏡檢結(jié)果寫在申請(qǐng)單上,發(fā)出報(bào)告。有疑難問題必須向科主任匯報(bào)。八、八、 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1.不的使用過期或變質(zhì)的試劑條;試劑的變
53、質(zhì)會(huì)影響反應(yīng)區(qū)的顏色變淺或變深。2.試劑條必須在原瓶中保存取出試紙后立即蓋嚴(yán)瓶蓋。不的移去包裝內(nèi)的干燥劑,每條試紙只能使用一次。3.為保護(hù)試劑的反應(yīng)活性必須隔絕周圍環(huán)境中的潮氣、光和熱。4.不要觸摸試劑條的反應(yīng)區(qū),避免陽(yáng)光直射。5.對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有疑問,與預(yù)期結(jié)果不一致時(shí),請(qǐng)查找原因;儀器狀態(tài),試紙條的有效期、質(zhì)控品的狀態(tài)人員操作等 ,糾正后,室內(nèi)質(zhì)控合格方可檢測(cè)臨床標(biāo)本。6.用過的試劑條按實(shí)驗(yàn)室生物危害性材料處理方法進(jìn)行處理。九、九、 質(zhì)量控制質(zhì)量控制1.分析前的質(zhì)量控制(1)正確留取標(biāo)本,并在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)送檢,避免陽(yáng)光直射。(2)避免標(biāo)本污染(含有強(qiáng)氧化劑如漂白粉)出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性(如含有維
54、生素C);標(biāo)本久置葡萄糖被細(xì)菌分解或細(xì)胞酶分解,引起假陰性。(3)了解檢驗(yàn)對(duì)象可能影響化學(xué)檢測(cè)的進(jìn)食及使用藥物的情況。(4)尿樣的保存:尿樣收集后應(yīng)在 2 小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),否則選用適當(dāng)?shù)姆栏瘎┎⒗洳乇4?。注意?zhǔn)確有效的標(biāo)記尿標(biāo)本。2.分析中的質(zhì)量控制(1)用尿液質(zhì)控品監(jiān)控儀器的工作狀態(tài);(2)嚴(yán)格、規(guī)范正確的實(shí)驗(yàn)操作;(3)應(yīng)使用與尿液分析儀配套的專用試帶,注意試帶的效期,注意防潮避免變色后干擾試驗(yàn)。3.分析后的質(zhì)量控制(1)分析結(jié)果的相關(guān)性,如有不符應(yīng)及時(shí)復(fù)檢,如下表所示化學(xué)分析結(jié)果鏡檢結(jié)果可能原因潛血陰性多量 RBC藥物或其他干擾物質(zhì)潛血陽(yáng)性不見或少量 RBCRBC 破碎WBC 陰性多量
55、WBC藥物干擾或慢性炎癥WBC 陽(yáng)性不見或少量 WBC其他物質(zhì)干擾出現(xiàn)假陽(yáng)性蛋白質(zhì)陰性WBC/RBC/管型增多其他物質(zhì)干擾出現(xiàn)假陰性化學(xué)分析亞硝酸鹽為陽(yáng)性,而尿蛋白和白細(xì)胞檢測(cè)均為陰性,可能因攝食含有硝酸鹽豐富檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 20 -的食物有關(guān)而造成的假陽(yáng)性。 糖尿病檢驗(yàn)對(duì)象尿糖檢測(cè)陰性,而維生素 c 含量很高,會(huì)出現(xiàn)假陰性。(2)檢測(cè)結(jié)果又異議時(shí)應(yīng)了解檢驗(yàn)對(duì)象可能影響尿化學(xué)檢測(cè)的 進(jìn)食和用藥情況。(3)綜合考慮檢驗(yàn)對(duì)象的病史;特別是腎臟疾病檢驗(yàn)對(duì)象,尿蛋白定性應(yīng)當(dāng)用磺基水楊酸法。如尿化學(xué)分析結(jié)果與鏡檢不一致,應(yīng)進(jìn)一步查明原因。(4)參考范圍的認(rèn)可:尿干化學(xué)分析儀檢測(cè)白細(xì)胞、
56、紅細(xì)胞出現(xiàn)“假陰性”時(shí),應(yīng)以鏡檢結(jié)果為準(zhǔn);但當(dāng)“假陽(yáng)性”時(shí),儀器的 結(jié)果可能正確。這種情況見于白細(xì)胞:當(dāng)尿在膀胱貯存時(shí)間長(zhǎng),白細(xì)胞破壞,中性粒細(xì)胞酯酶釋放到尿中,導(dǎo)致儀器分析(+) ,鏡檢反而(-) ;紅細(xì)胞:腎病檢驗(yàn)對(duì)象尿中紅細(xì)胞常被破壞而析出血紅蛋白或尿中有高活性不耐熱的觸酶時(shí)均可導(dǎo)致儀器分析(+) ,鏡檢卻為() 。尿液煮沸冷卻后在測(cè)試可排除不耐熱的觸酶造成的假陽(yáng)性。其他情況要結(jié)合臨床實(shí)踐,不能一概否定或肯定儀器結(jié)果,更不能隨便改變儀器的 靈敏度。十、十、 生物參考區(qū)間及臨床意義生物參考區(qū)間及臨床意義1. 1、尿糖(UGlu)正常參考值:陰性臨床意義:a、生理性糖尿?yàn)橐贿^性糖尿,是暫時(shí)性
57、的,排除生理因素后恢復(fù)正常。主要有三種:飲食性糖尿,即在短時(shí)間內(nèi)服用大量糖類,引起血糖濃度過大;應(yīng)急性糖尿,在腦外傷、腦血管意外、情緒激動(dòng)、劇烈運(yùn)動(dòng)周期性四肢麻痹等情況下,延腦糖中樞受刺激,使腎上腺激素或胰島素分泌異常,可出現(xiàn)暫時(shí)性的糖尿;妊娠中后期多可見糖尿。b、病理性糖尿也可分為三種:真性糖尿,既胰島素的分泌量相對(duì)或絕對(duì)不足,使血糖濃度超過腎糖閾尿糖檢查不僅可以診斷糖尿病,還可以指導(dǎo)臨床醫(yī)生決定胰島素的用量、判斷療效;腎性糖尿,即腎小管對(duì)葡萄糖的重吸收功能減退,新生兒的近曲小管功能未完善也能出現(xiàn)糖尿;其他糖尿,如生長(zhǎng)激素過多(肢端肥大癥)、甲狀腺激素過多(甲亢)、腎上腺激素過多(嗜鉻細(xì)胞瘤
58、)、皮質(zhì)醇(Cushing 綜合癥)、胰高血糖素等都可使血糖濃度高過腎糖閾而出現(xiàn)糖尿;另外,肥胖病、高血壓也可能出現(xiàn)糖尿。2、尿酮體(U-Ket)正常參考值:陰性臨床意義:陽(yáng)性a、糖尿病酮癥酸中毒。糖利用減少,脂肪分解產(chǎn)生過量酮體,尿酮體的檢查對(duì)未控制或治療不當(dāng)?shù)奶悄虿〕霈F(xiàn)酸中毒或昏迷的診斷很有價(jià)值,可以與低血糖、心腦疾病酸中毒或高血糖滲透性糖尿病昏迷相區(qū)別。b、感染性疾病(如肺炎、傷寒、敗血癥、結(jié)核等發(fā)熱期),嚴(yán)重嘔吐、腹瀉,長(zhǎng)期饑餓、禁食,全身麻醉后等都可能出現(xiàn)酮尿。另外婦女孕期因妊娠反應(yīng)嘔吐多、進(jìn)食少,體脂肪代謝明顯增多,也能出現(xiàn)酮尿。c、氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等情況也能出現(xiàn)酮尿。d、
59、服用雙胍類降糖藥如降糖靈后,由于藥物抑制細(xì)胞呼吸,也可能出現(xiàn)酮尿。檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)- 21 -注意事項(xiàng):a、由于尿酮體中的丙酮和乙酰乙酸都是揮發(fā)性物質(zhì);乙酰乙酸受熱易分解成丙酮;尿液被細(xì)菌污染后,酮體消失,因此,尿樣必須新鮮,檢測(cè)應(yīng)該及時(shí),以免測(cè)試結(jié)果偏低或出現(xiàn)假陰性。b、干化學(xué)法測(cè)定酮體時(shí)對(duì)乙酰乙酸的敏感度約是丙酮的 710 倍,因此,與其他的檢測(cè)方法存在一定的差別3、尿膽原(URO 或 UBG)正常參考值:弱陽(yáng)性。臨床意義:陽(yáng)性,見于溶血性黃疽、肝病等。陰性,見于梗阻性黃疽。4、尿比重(SG)正常參考值:1-5 歲1.010-1.014;5-8 歲,1.010-1.019;8
60、-14 歲,1.010-1.025;14 歲以上至成人,1.002-1.030臨床意義:增高見于急性腎炎、糖尿病、高熱、嘔吐、腹瀉及心力衰竭等。降低,見于慢性腎炎、慢性腎盂腎炎、急慢性腎功衰竭及尿崩癥等。5、尿蛋白(R-PRO)正常參考值:陰性。臨床意義:陽(yáng)性見于各種急慢性腎小球腎炎、急性腎盂腎炎、多發(fā)性骨髓瘤、腎移植術(shù)后等。此外,藥物,汞、鋪等中毒引起腎小管上皮細(xì)胞損傷也可見陽(yáng)性。6、紅細(xì)胞(UBLO)正常參考值:顯微鏡法陰性或2 個(gè)HP。儀器法陰性。臨床意義:陽(yáng)性或增多見于泌尿系統(tǒng)結(jié)石、感染、腫瘤、急慢性腎炎、血小板減少性紫癌、血友病等。7、尿白細(xì)胞(ULEU)正常參考值:5 個(gè)HP。臨床
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