診斷——臨床常用免疫學(xué)檢查PPT課件

1、p免疫功能檢查 (immunological function) 血清免疫球蛋白檢測(cè) 血清補(bǔ)體檢測(cè) 細(xì)胞免疫檢測(cè)(immunoglobulin, complements, cell immune)p自身免疫檢測(cè) (auto-antibodies) 類風(fēng)濕因子測(cè)定 抗核抗體檢測(cè) 組織和細(xì)胞抗體檢測(cè) (RF ANA other antibodies)p感染免疫檢測(cè) (infectious immunology) 細(xì)菌感染免疫檢測(cè) 病毒感染免疫檢測(cè) 其它(寄生蟲感染、性病等）(bacterial , virus and so on )q腫瘤標(biāo)志物檢測(cè) (tumor markers) 蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志

2、物 糖脂類腫瘤標(biāo)志物 酶類腫瘤標(biāo)志物(proteins, glycolipid, enzymes markers) q器官與骨髓移植的檢測(cè) (organ and bone marrow transplantation)p病毒肝炎血清標(biāo)志物 (virus hepatitis markers)p其它 循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)、冷球蛋白檢測(cè)、丙種反應(yīng)性蛋白檢測(cè)第1頁/共101頁l 血清免疫球蛋白檢測(cè)血清免疫球蛋白檢測(cè)( (Immunoglobulin test) ) l 血清補(bǔ)體檢測(cè) (Complements)l 細(xì)胞免疫檢測(cè) (Cell immune)第2頁/共101頁n概念：具有抗體活性和抗體樣結(jié)構(gòu)的

3、球蛋白，由漿細(xì)胞產(chǎn)生，存在于體液，血液，外分泌液和一些細(xì)胞膜上。n分類: 用超速離心、免疫電泳方法可將免疫球蛋白分為五類： IgG、IgA、IgM、 IgD 、 IgE第3頁/共101頁第4頁/共101頁第5頁/共101頁第6頁/共101頁u IgG最多、占75%85%抗體活性u(píng) IgA血清型和分泌型兩種u IgM是有效的凝聚和溶解細(xì)胞的因子。最早；最先u IgD功能尚不完全清楚u IgE與變態(tài)反應(yīng)有關(guān)(0.002%)第7頁/共101頁第8頁/共101頁ADCC第9頁/共101頁第10頁/共101頁 多克隆(Polyclonal)增高: IgG IgA IgM均增高 單克隆(Monoclona

4、l)增高: 僅某一種Ig增高而其他種不增高 第11頁/共101頁增高：p多克隆性增高(polyclonal elevate) 慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病(chronic infection, chronic hepatitis, AID)p 單克隆性增高(monoclonal elevate) 免疫增殖性疾病 ( proliferative disease) 第12頁/共101頁第13頁/共101頁概念：?jiǎn)慰寺淋巴細(xì)胞異常增殖產(chǎn)生免疫球蛋白，具有相同結(jié)構(gòu)和電泳遷徙速度，但不具有抗體活性。第14頁/共101頁第15頁/共101頁第16頁/共101頁減低：p 先天性(congenital

5、) 體液免疫缺陷和聯(lián)合免疫缺陷（先天性無（低）丙種球蛋白血癥等）p獲得性(acquired) 腎病綜合征（大量流失蛋白）、淋巴網(wǎng)狀系統(tǒng)腫瘤、病毒感染、免疫抑制劑應(yīng)用第17頁/共101頁p血清免疫球蛋白檢測(cè)(Immunoglobulin test) p血清補(bǔ)體檢測(cè)(Complements)p細(xì)胞免疫檢測(cè)細(xì)胞免疫檢測(cè) ( (Cell immune) )第18頁/共101頁第19頁/共101頁 p 組成：由傳統(tǒng)途徑的9種成分c1（c1q 、c1r 、c1s ）c9,旁路途徑的3種成分及其衍生物B、D 、 P 、H 、I等因子組成。p 作用：參與滅活病原體的免疫反應(yīng)，也可破壞自身組織或自身細(xì)胞造成免疫

6、損傷第20頁/共101頁 第21頁/共101頁total hemolytic complement activity CH50正常值：50100 ku/L臨床意義 ： 減低 1.先天性 2.合成減少 hepatitis ,營養(yǎng)不良 3.消耗或者丟失過多 SLE 增高急性炎癥、組織損傷、某些腫瘤等。第22頁/共101頁p 補(bǔ)體C3檢測(cè) C3在補(bǔ)體系統(tǒng)各成分中含量最多，是傳統(tǒng)途徑和旁路途徑被激活的關(guān)鍵物質(zhì)。 正常值：0.851.7g/L p 補(bǔ)體C4檢測(cè) C4代表補(bǔ)體傳統(tǒng)活化途徑，在補(bǔ)體活化、促進(jìn)吞噬、防止免疫復(fù)合物沉著和中和病毒等方面發(fā)揮作用 。 正常值：0.220.34g/L第23頁/共101

7、頁p參見CH50減低和增高的臨床意義p C3增高在急性炎性反應(yīng)更敏感p C4對(duì)判斷免疫復(fù)合物形成時(shí)補(bǔ)體消耗性減低更有意義第24頁/共101頁p血清免疫球蛋白檢測(cè)(Immunoglobulin test) p血清補(bǔ)體檢測(cè)(Complements)p細(xì)胞免疫檢測(cè)細(xì)胞免疫檢測(cè) ( (Cell immune) )第25頁/共101頁 細(xì)胞免疫檢測(cè)(Cell immune)(Cell immune)T細(xì)胞免疫檢測(cè)B細(xì)胞免疫檢測(cè)自然殺傷細(xì)胞檢測(cè)(NK cell)細(xì)胞因子檢測(cè)(cytokine)第26頁/共101頁 T T細(xì)胞分化抗原測(cè)定細(xì)胞分化抗原測(cè)定 ( (免疫熒光法免疫熒光法; ;流式細(xì)胞）流式細(xì)胞）

8、 CDCD3 3總T T細(xì)胞 正常值： 69.4%4.86% 4.86% CDCD4 4T T輔助細(xì)胞（T TH H） 正常值： 41.17%5.28% 5.28% CDCD8 8T T抑制細(xì)胞（T TS S） 正常值： 24.58%4.02% 4.02% CD CD4 4 /CD /CD8 8 2.20.7/1 0.7/1 第27頁/共101頁第28頁/共101頁臨床意義：CDCD4 4降低病毒感染（CMV,HIV,HBV) CDCD4 4/ CD/ CD8 8增高惡性腫瘤、自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)、排異反應(yīng) CDCD4 4/ CD/ CD8 8減低見于艾滋病(HIV)(HIV)、惡性腫瘤、

9、傳單及乙肝急性期。 CDCD3 3 CD CD4 4 CD CD8 8均增高T T細(xì)胞型淋巴細(xì)胞惡性疾病 (T lymphocytes malignant disease)(T lymphocytes malignant disease)第29頁/共101頁 B B細(xì)胞分化抗原測(cè)定： 應(yīng)用CDCD1919、CDCD2020、 CDCD21 21 、 CDCD2222 和CDCD4040等單克隆抗體標(biāo)記單個(gè)核細(xì)胞B B細(xì)胞，通過免疫熒光或流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。 CDCD1919 為全部B B細(xì)胞共有的表面標(biāo)志，B B細(xì)胞活化后不消失，是最重要的B B細(xì)胞標(biāo)記分子。 CDCD22 22 為成熟B B

10、細(xì)胞的表面標(biāo)志。 參考值：CDCD19 19 11.743.73 % 3.73 % 第30頁/共101頁臨床意義 升高B B細(xì)胞型急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、BurkittBurkitt淋巴瘤等 減低無丙種球蛋白血癥、長(zhǎng)期免疫抑制劑應(yīng)用后第31頁/共101頁 自然殺傷細(xì)胞免疫檢測(cè)I.I.自然殺傷細(xì)胞（NKNK）介導(dǎo)天然免疫應(yīng)答，它不依賴抗體和補(bǔ)體即能殺傷靶細(xì)胞II.II. 自然殺傷細(xì)胞（NKNK）活性可作為判斷機(jī)體抗腫瘤和抗病毒感染的指標(biāo)之一第32頁/共101頁 細(xì)胞因子（cytokinecytokine）是由活化的免疫細(xì)胞和某些基質(zhì)細(xì)胞分泌的，介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫、炎癥反應(yīng)的小分子多

11、肽。 IL-2IL-2、IL-6IL-6、IL-8IL-8、IL-10IL-10和TNFTNF、IFNIFN第33頁/共101頁p免疫功能檢查 p自身免疫檢測(cè)p腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)p感染免疫檢測(cè) (infectious immune)p器官與骨髓移植的檢測(cè) p病毒肝炎血清標(biāo)志物p其它 第34頁/共101頁p類風(fēng)濕因子測(cè)定p抗核抗體檢測(cè)p組織和細(xì)胞抗體檢測(cè) 第35頁/共101頁第36頁/共101頁 概念： RF是變性IgGIgG刺激機(jī)體產(chǎn)生的一種自身抗體，主要存在于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清和關(guān)節(jié)液內(nèi)。 分型：可分為IgMIgM型、IgGIgG型、IgAIgA型等，用膠乳凝集法測(cè)出的主要是IgMIgM型

12、，速率散射比濁檢測(cè)準(zhǔn)確定量分析，用ELISAELISA法可檢出其它型。第37頁/共101頁第38頁/共101頁A. 參考值： 陰性 30 U/L1：100為陽性 第54頁/共101頁臨床意義： 1、ANAANA陽性最多見于未治療的SLESLE，陽性率達(dá)80%80%100%100%（活動(dòng)期幾乎100%100%陽性） 2 2、ANAANA陽性是結(jié)締組織病的標(biāo)志，是SLESLE最佳篩選試驗(yàn)。 3 3、其它疾病, ,如原發(fā)性膽汁性肝硬化( (Primary biliary cirrhosis) )、慢性肝病、慢性感染、腫瘤等也可出現(xiàn)陽性第55頁/共101頁第56頁/共101頁 2.2.抗脫氧核糖核酸抗

13、體 （anti-DNA antibodyanti-DNA antibody） 其中抗雙鏈DNADNA（double stranded-DNA,ds-double stranded-DNA,ds-DNADNA）抗體的靶抗原是細(xì)胞核中的DNADNA雙螺旋結(jié)構(gòu)，識(shí)別雙堿基對(duì)的DNADNA。 正常結(jié)果：陰性 臨床意義：1.1. 為SLESLE特異性抗體( (Specific antibody for Specific antibody for SLE)SLE)，特異性率95%100%95%100%；敏感性30-50%30-50%。2.2.與活動(dòng)程度相關(guān)3.3.特別在并發(fā)狼瘡性腎炎時(shí)起重要作用。4.4.

14、其它風(fēng)濕病中抗ds-DNAds-DNA抗體也可陽性。第57頁/共101頁 3.3.可提取性核抗原多肽抗體譜 ENAENA（extractable antinuclear antigenextractable antinuclear antigen）由多種相對(duì)分子質(zhì)量不同的多肽構(gòu)成，利用免疫印跡試驗(yàn)可對(duì)這些抗原的自身抗體進(jìn)行檢測(cè)，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)2020余種。 第58頁/共101頁 抗體抗體靶抗原靶抗原意義意義方法方法SmRNA和核蛋白和核蛋白SLE標(biāo)記抗體，陽性標(biāo)記抗體，陽性3 040%雙向免疫擴(kuò)散雙向免疫擴(kuò)散U1RNP小核糖核蛋白小核糖核蛋白MCTD陽性陽性90%;SLESS SSc PM/DM

15、DID;EIASSA(Ro)小細(xì)胞質(zhì)核糖核蛋白小細(xì)胞質(zhì)核糖核蛋白PSS 40 95%;SCLE 70 90%DID;EIASSB(La)小細(xì)胞核核糖核蛋白小細(xì)胞核核糖核蛋白SS高度特異性高度特異性DID;EIArRNP60S核糖體大亞基核糖體大亞基SLE高度特異性抗體，陽性高度特異性抗體，陽性1040%。與腦病有關(guān)。與腦病有關(guān)。EIAScl-70拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶1SSc特異性抗體特異性抗體,預(yù)后不良。預(yù)后不良。EIAJo-1tRNA合成酶合成酶PM/DM標(biāo)記抗體標(biāo)記抗體20 30%DID,IB第59頁/共101頁第60頁/共101頁第61頁/共101頁第62頁/共101頁Scl-70第63

16、頁/共101頁第64頁/共101頁第65頁/共101頁第66頁/共101頁第67頁/共101頁第68頁/共101頁第69頁/共101頁第70頁/共101頁第71頁/共101頁Jo-1第72頁/共101頁掌指關(guān)節(jié)和近端指間關(guān)節(jié)伸側(cè)出現(xiàn)萎縮性掌指關(guān)節(jié)和近端指間關(guān)節(jié)伸側(cè)出現(xiàn)萎縮性丘疹和斑疹，伴少量鱗屑，稱丘疹和斑疹，伴少量鱗屑，稱GottronGottron征征第73頁/共101頁第74頁/共101頁第75頁/共101頁第76頁/共101頁第77頁/共101頁第78頁/共101頁*Rheumatoid factor*Anti-Nuclear Antibody*tissue and cell anti

17、body第79頁/共101頁 組織和細(xì)胞抗體檢測(cè) 抗線粒體抗體（anti-mitochondria antibody,AMA） 抗甲狀腺球蛋白抗體（anti-thyroglobulin antibody,TG） 抗甲狀腺微粒體抗體（anti-thyroid mivrosome ntibody,TM） 抗平滑肌抗體（antismooth muscle antibidy,ASMA）等 如AMA、ASMA在原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性肝病、自身免疫性肝炎中常為陽性第80頁/共101頁第81頁/共101頁p免疫功能檢查p自身免疫檢測(cè)(auto-immune)p感染免疫檢測(cè) p腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)p器官與骨髓移植

18、的檢測(cè) p病毒肝炎血清標(biāo)志物p其它 第82頁/共101頁（一）血清抗鏈球菌溶血素“O O” （anti-streptolysinanti-streptolysin“O O”，ASOASO） A組溶血性鏈球菌的莢膜抗原代謝產(chǎn)物鏈球菌溶血素“O”具有溶血活性，能溶解人類和一些動(dòng)物的紅細(xì)胞。 將受檢病人血清倍比稀釋后，加入一定量的鏈球菌溶血素“O”，如病人血清中含有抗體（ASO），即能使鏈球菌溶血素“O”失去溶血能力，不溶血的管數(shù)越多表示ASO的效價(jià)越高。 參考值：膠乳凝集法為陰性 100IU/L第83頁/共101頁 臨床意義： 當(dāng)機(jī)體受A組溶血性鏈球菌感染后23周，血清中即出現(xiàn)抗鏈球菌溶血素“O”

19、的抗體，這種抗體滴度直至病愈后數(shù)月到半年才下降至正常水平 ASO升高常見于活動(dòng)性風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、急性腎小球腎炎等 假陽性見于高膽固醇血癥、黃疸、溶血等第84頁/共101頁第85頁/共101頁第86頁/共101頁第87頁/共101頁（二）傷寒和副傷寒Typhoid and paratyphoid 沙門菌免疫測(cè)定-肥達(dá)反應(yīng)（Widal reactin WR） 人體被傷寒沙門菌感染后，菌體“O”抗原和鞭毛“H”抗原能刺激人體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。 副傷寒桿菌分甲、乙、丙三型參考值：傷寒WR“H” 1：160；“O” 1：80； 副傷寒WR甲、乙、丙均 1：80第88頁/共101頁第89頁/共101頁臨

20、床意義： 當(dāng)感染傷寒沙門菌后一周可出現(xiàn)陽性，第二周陽性率上升為 60% 70%，第四周可達(dá)90%以上，動(dòng)態(tài)觀察WR持續(xù)超過參考值，或較原效價(jià)升高4倍以上更有價(jià)值 假陽性結(jié)核病、風(fēng)濕病 假陰性早期使用抗生素及免疫抑制劑治療 第90頁/共101頁p免疫功能檢查p自身免疫檢測(cè)p感染免疫檢測(cè)p腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)(tumor marker)p器官與骨髓移植的檢測(cè) p病毒肝炎血清標(biāo)志物p其它 第91頁/共101頁n腫瘤細(xì)胞分泌的標(biāo)志物：蛋白質(zhì)類、糖脂類、酶類 、激素類等n宿主產(chǎn)生的標(biāo)志物：TNF、SFn不進(jìn)入循環(huán)體液的標(biāo)志物：第92頁/共101頁第93頁/共101頁胎兒早期肝臟和卵黃囊合成的血清糖蛋白，當(dāng)肝細(xì)胞或生殖腺胚胎細(xì)胞惡變，基因激活，細(xì)胞合成AFP增加。參考值：20ng/ml意義： 1：原發(fā)性肝癌的診斷與鑒別診斷，10%陰性。 2：生殖腺胚胎癌、胃癌、胰腺癌可升高。 3：動(dòng)態(tài)檢測(cè)原發(fā)性肝癌治療前后病情變化 4：孕婦可升高第94頁/共101頁胎兒早期消化管和一些組織合成，孕6月后減少，出生后極低。生理上孕婦可升高。參考值：15ng/ml意義： 1：90%胰腺癌、74%結(jié)腸癌、60%乳腺癌、肺癌等常明顯升高。 2