高考生物一輪復(fù)習(xí)特訓(xùn)：38微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 Word版含解析

1、時間：45分鐘滿分：100分一、選擇題(7小題，每小題2分，共14分)1下列關(guān)于滅菌和消毒的說法不正確的是()A滅菌是指殺滅物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子B消毒和滅菌的條件、結(jié)果、方法是相同的C接種環(huán)用灼燒法滅菌D常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等答案B解析滅菌是指殺滅物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子，消毒只能殺死部分微生物，不能殺死芽孢和孢子。2大多數(shù)微生物的擴大培養(yǎng)，利用的都是牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基。下表所示牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的成分及含量。相關(guān)敘述錯誤的是()成分牛肉膏蛋白胨氯化鈉瓊脂蒸餾水含量5 g10 g5 g20 g1000 mL(定容體積)A.該培養(yǎng)基為微生

2、物提供維生素的有牛肉膏、蛋白胨B該培養(yǎng)基為微生物提供氮源的有牛肉膏、蛋白胨C該培養(yǎng)基為微生物提供碳源的有牛肉膏、蛋白胨D該培養(yǎng)基能為微生物提供無機鹽的只有NaCl答案D解析牛肉膏為微生物提供碳源、氮源、維生素以及磷酸鹽等，其中磷酸鹽屬于無機鹽。3能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是()A稀釋涂布平板法B直接計數(shù)法C質(zhì)量法 D比濁法答案A解析直接計數(shù)法是利用特定的計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積量樣品中微生物的數(shù)量，不能區(qū)分死菌與活菌；質(zhì)量法是用于微生物生長測定的一種方法，有濕重法和干重法，也可以通過測蛋白質(zhì)和DNA含量反映細胞的物質(zhì)質(zhì)量；比濁法是在一定范圍內(nèi)，懸液中細胞濃度與渾濁度成正比，即與光密度成正比

3、，菌越多，光密度越大；活菌在適宜培養(yǎng)基和良好生長條件下通過生長形成菌落，此法又稱活菌計數(shù)法，可采用稀釋涂布平板法接種。4使用液體選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌的目的是()用液體選擇培養(yǎng)基可獲得大量纖維素分解菌用液體培養(yǎng)基便于稀釋涂布平板纖維素分解菌只能在液體培養(yǎng)基中生長用液體培養(yǎng)基可鑒別纖維素分解菌A BC D答案A解析使用液體選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌，一方面可以獲得大量纖維素分解菌，另一方面便于稀釋涂布平板。纖維素分解菌也可以在固體培養(yǎng)基上生長；鑒別纖維素分解菌使用的是固體培養(yǎng)基。52016蘇州質(zhì)檢分離土壤中分解尿素的細菌，對培養(yǎng)基的要求是()選項尿素瓊脂糖葡萄糖硝酸鹽ABCD注“”表示加入，

4、“”表示不加。答案C解析分離土壤中分解尿素的細菌，培養(yǎng)基中要有碳源，且尿素作為唯一的氮源，不能添加硝酸鹽。6下列關(guān)于微生物培養(yǎng)基的敘述，錯誤的是()A制備固體培養(yǎng)基，可以在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂B微生物在固體培養(yǎng)基表面生長形成的菌落，可以用肉眼觀察到C所有培養(yǎng)基都含有相同的水、碳源、氮源和無機鹽等四類物質(zhì)D培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素答案C解析微生物在固體培養(yǎng)基上生長，可以形成肉眼可見的菌落；培養(yǎng)不同的微生物，所需配方存在差異；培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素。7.研究者從冰川土樣中分離獲得了具有較高脂肪酶活性的青霉菌菌株，為了在此基礎(chǔ)上獲得脂肪酶活性更高的菌株，最可行的做

5、法是()A用紫外線照射青霉菌菌株，再進行篩選B將青霉菌菌株與能高效水解蛋白質(zhì)的菌株混合培養(yǎng)，再進行篩選C將能高效水解蛋白質(zhì)的菌株的基因?qū)肭嗝咕?，再進行篩選D設(shè)置培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)成分的濃度梯度，對青霉菌菌株分別培養(yǎng)，再進行篩選答案A解析基因突變是不定向的，紫外線處理后再進行篩選有可能獲得脂肪酶活性更高的菌株。二、非選擇題(8小題，共86分)8(13分)某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地，以豐富學(xué)生的勞動技術(shù)課內(nèi)容。首先對食用菌實驗室進行清掃和消毒處理，準備食用菌栽培所需的各種原料和用具，然后從菌種站購來各種食用菌菌種。請回答下列問題：(1)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方如下：牛肉膏蛋白胨NaCl

6、瓊脂蒸餾水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至1000 mL其中提供氮源的是_；提供碳源的主要物質(zhì)是_。(2)微生物在生長過程中對各種成分所需量不同，配制培養(yǎng)基時各成分要有合適的_。在燒杯中加入瓊脂后要不停地_，防止_。(3)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干個試管一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入_中滅菌，壓力100 kPa，溫度_，時間_。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到0時，將試管取出。如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，此試管應(yīng)_。(4)使用高壓蒸汽滅菌鍋時注意，先向鍋內(nèi)倒入_。把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。(5)從一支試管向另一支試管接種時注意，接種

7、環(huán)要在酒精燈_(填“內(nèi)”或“外”)焰滅菌，并且待接種環(huán)_后蘸取菌種，試管口不能離開酒精燈火焰附近，將接種的試管在適溫下培養(yǎng)，長成菌落后放入_冰箱中保藏。答案(1)牛肉膏、蛋白胨牛肉膏(2)比例用玻棒攪拌瓊脂糊底引起燒杯破裂(3)高壓蒸汽滅菌鍋121 1530 min廢棄(4)適量水(5)外冷卻4解析凡能提供所需氮元素的物質(zhì)為氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。在配制培養(yǎng)基時營養(yǎng)要協(xié)調(diào)，按所培養(yǎng)微生物對各種成分的需求確定；在加入瓊脂后，要不斷攪拌，防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。玻璃器皿的滅菌應(yīng)用高壓蒸汽滅菌鍋，在壓力為100 kPa、溫度為121 條件下，滅菌1530 min。酒精燈外焰溫度高，滅菌效

8、果好。灼燒冷卻后再蘸取菌種，否則會燙死菌種，造成實驗失敗。9. 2016江蘇南京質(zhì)檢(12分)燒傷病人容易感染綠膿桿菌，引起化膿性感染，比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素都是非常經(jīng)典的抗綠膿桿菌的藥物。臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，從病人身上獲取少量樣本，按照一定的實驗步驟操作，以確定該病人體內(nèi)的綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性。 (1)獲取綠膿桿菌單菌落：配制適于綠膿桿菌生長的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分一般含有_、氮源、生長因子、水和無機鹽，調(diào)節(jié)pH至7，滅菌處理，待培養(yǎng)基冷卻至50 時，在_附近倒平板。經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得單菌落。(2)檢測綠膿桿菌對不同

9、抗生素的敏感性：取該單菌落適當稀釋，用_法接種于固體培養(yǎng)基表面，使其均勻生長，布滿平板。將分別含等劑量的比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素的相同大小的小濾紙圓片均勻置于該平板上的不同位置，適宜條件培養(yǎng)一段時間，結(jié)果是含不同抗生素的濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈，這說明綠膿桿菌對上述抗生素_；含頭孢菌素的濾紙片周圍的透明圈比含美羅培南的小，這說明_；含比阿培南、碳青霉烯類的濾紙片周圍的透明圈也比含美羅培南的小，且比阿培南透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，請推測此菌落產(chǎn)生的可能原因：一是_，二是_。(3)根據(jù)上述實驗結(jié)果，為達到抗綠膿桿菌的目的，對于該患者來說最好應(yīng)選用抗生素_。答案(1)碳源酒精燈火焰

10、(2)涂布平板敏感綠膿桿菌對頭孢菌素的敏感性比美羅培南弱雜菌污染抗比阿培南的綠膿桿菌(或綠膿桿菌產(chǎn)生耐藥性突變)形成的菌落(3)美羅培南解析(1)培養(yǎng)綠膿桿菌的培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分一般含有碳源、氮源、生長因子、水和無機鹽。接種時要進行無菌操作，需待培養(yǎng)基冷卻至50 時，在酒精燈火焰附近倒平板。(2)檢測綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性：應(yīng)取該單菌落適當稀釋，用涂布平板法接種于固體培養(yǎng)基表面，使其均勻生長，布滿平板。將分別含等劑量的比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素的相同大小的小濾紙圓片均勻置于該平板上的不同位置，如果綠膿桿菌對上述抗生素敏感，含不同抗生素的濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈。含頭孢菌素

11、的濾紙片周圍的透明圈比含美羅培南的小，說明綠膿桿菌對頭孢菌素的敏感性比美羅培南弱；含比阿培南、碳青霉烯類的濾紙片周圍的透明圈也比含美羅培南的小，且比阿培南透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，可能原因是雜菌污染或抗比阿培南的綠膿桿菌形成的菌落。(3)綠膿桿菌對美羅培南敏感，對于該患者來說最好應(yīng)選用抗生素美羅培南。102016湖南長沙調(diào)研(10分)研究被石油污染過的土壤中細菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細菌。為了分離和純化高效分解石油的細菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進行如圖A所示的實驗。(1)配置好的培養(yǎng)基通?？梢允褂胈法滅菌。與步驟中培養(yǎng)基成分相比，步驟中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是_。(2)接種細菌常用

12、的方法有_。若經(jīng)過過程后獲得的結(jié)果為圖B所示，則所操作方法如圖_所示。(3)步驟后取樣測定石油含量的目的是_。對步驟中某瓶中細菌計數(shù)的方法有兩種，一種方法是_，其菌落數(shù)可代表活菌數(shù)；另一種方法是_， 該方法需要借助一塊特殊的載玻片，其名稱為_。答案(1)高壓蒸汽滅菌石油是唯一碳源(2)平板劃線法和稀釋涂布平板法甲(3)篩選出分解石油能力最好的細菌稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數(shù)(血球計數(shù)板計數(shù)法)血細胞計數(shù)板(血球計數(shù)板)解析(1)培養(yǎng)基滅菌用高壓蒸汽滅菌，為篩選出能分解石油的細菌，所以石油是唯一碳源。(2)接種細菌常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。圖B為平板劃線法，如圖甲所示。(3)步驟進

13、一步操作是為篩選出分解石油能力最好的細菌，微生物計數(shù)可用稀釋涂布平板法和血球計數(shù)板計數(shù)法。11江蘇高考模擬(9分)回答下列關(guān)于微生物和酶的問題。高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示。(1)過程稱為_，號培養(yǎng)基稱為_(按功能分)；該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營養(yǎng)成分_。A瓊脂 B葡萄糖C硝酸銨 D碳酸氫鈉(2)一般對配制的培養(yǎng)基采用_滅菌，在滅菌_(前，后)將培養(yǎng)基分裝到平皿中。若要測定試管中每毫升嗜熱菌活菌的數(shù)量，可用_的方法給號培養(yǎng)基接種，用此法統(tǒng)計的活菌數(shù)比實際_(大，小)。(3)在高溫淀粉酶運用

14、到工業(yè)生產(chǎn)前，需對該酶的最佳溫度范圍進行測定。下圖中的曲線表示酶在各種溫度下酶活性相對最高酶活性的百分比。曲線是將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是_。(4)據(jù)圖判斷下列敘述錯誤的是_。A該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測出活性B曲線35 數(shù)據(jù)點是在80 時測得的C曲線表明80 是該酶活性最高的溫度D曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在70 之后急劇下降答案(1)稀釋選擇培養(yǎng)基C(2)高壓蒸汽后稀釋涂布平板小(3)6080(4)A解析(1)過程稱為稀釋，號培養(yǎng)基按功能分稱為選擇培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基中除了加

15、入淀粉外，還需加入另一種重要的營養(yǎng)成分氮源硝酸銨，C選項。(2)一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，在滅菌后將培養(yǎng)基分裝到平皿中。若要測定試管中每毫升嗜熱菌活菌的數(shù)量，可用稀釋涂布平板的方法給號培養(yǎng)基接種，用此法統(tǒng)計的活菌數(shù)比實際小。(3)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是6080 。(4)該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測出活性，在各溫度條件下都能測到酶活性，A錯；曲線35 數(shù)據(jù)點是在80 時測得的，B正確；曲線表明80 是該酶活性最高的溫度，C正確；曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在70 之后急劇下降，D正確。122016四川成都模擬(9分)當今世界，能源和資源日趨危機，人們希望能借助纖維素酶將地

16、球上最豐富(占全球總生物量80%)、最廉價的可再生資源纖維素轉(zhuǎn)化為能直接利用的能源和資源。纖維素酶可以從能分解纖維素的細菌培養(yǎng)液中提取。某同學(xué)設(shè)計了如下分離土壤中纖維素分解菌的實驗流程：土壤取樣選擇培養(yǎng)()鑒別培養(yǎng)(1)請補充實驗流程：_；找不到合適的取樣環(huán)境，可采取的辦法是_。(2)選擇培養(yǎng)的目的是_；研究人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，該培養(yǎng)基為_(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基，其中加入的化合物A是_，為微生物的生長提供_。(3)為了鑒別纖維素分解菌和進一步純化菌種，可以在鑒別培養(yǎng)基上加入_染液，將篩選獲得的菌液稀釋后用_法接種到鑒別培養(yǎng)基上，然后挑選產(chǎn)

17、生_的菌落作為菌種進行擴大培養(yǎng)。 答案(1)梯度稀釋 將富含纖維素的物質(zhì)埋在土壤中(2)增加纖維素分解菌的濃度 液體 纖維素 碳源(3)剛果紅 稀釋涂布平板 透明圈解析(1)經(jīng)選擇培養(yǎng)后，需經(jīng)梯度稀釋后才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上。(2)可用含纖維素的液體培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)來增加纖維素分解菌的濃度。(3)剛果紅是一種染料，可與纖維素反應(yīng)形成紅色復(fù)合物；培養(yǎng)基中有分解纖維素微生物存在的區(qū)域，纖維素會被分解，將出現(xiàn)透明圈。132016南昌模擬(13分)無菌操作是微生物接種技術(shù)的關(guān)鍵；傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物分離、純化、應(yīng)用過程及植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)過程中，均要無菌操作?；卮鹣铝邢嚓P(guān)

18、問題：(1)消毒和滅菌是兩個不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠喪失生長繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害。下列哪些事物適用于消毒處理_。皮膚飲用水牛奶注射器培養(yǎng)皿接種環(huán)培養(yǎng)基果汁醬油手術(shù)刀A BC D以上全部(2)配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行_，接種前要進行_，在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行。(3)下圖是利用_法進行大腸桿菌接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。為達到這一目的，操作上應(yīng)注意：每次劃線前要_；冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃；首尾區(qū)_。(4)利用培養(yǎng)基不僅可以分離培養(yǎng)大腸桿菌，也可以進行植物組

19、織培養(yǎng)。與大腸桿菌培養(yǎng)明顯不同的是，用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要加入_。(5)有位同學(xué)在家制作泡菜時，為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素，結(jié)果發(fā)酵失敗，原因可能是_。答案(1)A(2)調(diào)整pH高壓蒸汽滅菌(3)平板劃線灼燒接種環(huán)不連接(不重疊)(4)植物激素(5)青霉素殺死了乳酸菌解析(1)由消毒和滅菌的概念可知：皮膚、飲用水、牛奶、果汁、醬油適用于消毒。(2)配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行調(diào)整pH，接種前要進行高壓蒸汽滅菌。(3)由圖可知，利用平板劃線法進行大腸桿菌接種。每次劃線前要灼燒接種環(huán)；首尾區(qū)不連接。(4)組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需加入植物激素。(5)青霉素為抗生素，可以

20、殺死乳酸菌。14(10分)回答下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與運用的問題。KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 gFeCl30.1 gX1 g維生素微量瓊脂15 g(1)上表是篩選異養(yǎng)型細菌的培養(yǎng)基配方。從物理性質(zhì)上看該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基，其中成分X除了為目的菌提供能源，還能提供_。制備該培養(yǎng)基的一般操作順序是計算稱量_滅菌_。對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是_。(2)如圖A、B是純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法，C、D是接種后培養(yǎng)的效果。某同學(xué)接種培養(yǎng)后獲得圖C所示效果，則其采用的接種方法是_(選填“A”“B”)；接種時可能的失誤操作是_。(3)微生物強化采油是利用某些微生物能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理，通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術(shù)。為篩選和純化該類微生物，應(yīng)向培養(yǎng)基中添加_作為唯一碳源；培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上形成降油圈，此時選取_就可獲得高效菌株。答案(1)固體碳源和氮源溶化倒平板高壓蒸汽滅菌法(2)B稀釋涂布平板法涂布不均勻(3)石油降油圈大的菌落解析(1)表中培養(yǎng)