實驗十細菌生化實驗-微生物實驗ppt課件

1、實 驗 十 細菌生化實驗.一、實驗目的1、證明不同微生物對各種有機大分子的水解才干不同，從而闡明不同微生物有著不同的酶系統(tǒng)。2、掌握進展微生物大分子水解實驗的原理和方法。3、了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細菌鑒定中的重要作用。4、掌握經(jīng)過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。5、了解IMViC與硫化氫反響的原理及其在腸道菌鑒定中的意義和方法。 .二、實驗原理1、微生物對生物大分子的分解利用淀粉水解：淀粉酶油脂水解：脂肪酶明膠液化：蛋白酶石蕊牛乳實驗：產(chǎn)酸、產(chǎn)堿、胨化、酸凝固等。2、糖發(fā)酵實驗產(chǎn)酸：溴甲酚紫指示劑大腸桿菌：產(chǎn)氣腸桿菌：產(chǎn)氣：杜氏小管檢測大腸桿菌：產(chǎn)氣腸桿菌：3、IMViC實驗.IMViC實驗吲哚

2、實驗：甲基紅實驗M.R.實驗：伏-普實驗乙酰甲基甲醇實驗：檸檬酸鹽實驗：色氨酸酶：色氨酸吲哚對二甲基氨基苯甲醛玫瑰吲哚紅色大腸桿菌：產(chǎn)氣腸桿菌：產(chǎn)酸才干：強，甲基紅變紅；弱：甲基紅不變色大腸桿菌：陽性產(chǎn)氣腸桿菌：陰性葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇2,3-丁二醇乙酰甲基甲醇OH二乙酰精氨酸的胍基紅色化合物大腸桿菌：陽性產(chǎn)氣腸桿菌：陰性能否利用檸檬酸作為碳源大腸桿菌：陰性產(chǎn)氣腸桿菌：陽性.三、實驗資料1、菌種：枯草芽孢桿菌，大腸桿菌，金黃色葡萄球菌，銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa，普通變形桿菌Proteus vularis，產(chǎn)氣腸桿菌。2、培育基：固體油脂培育基，固體淀粉培育基

3、，明膠培育基試管，石蕊牛奶試管，尿素瓊脂試管、葡萄糖發(fā)酵培育基試管和乳糖發(fā)酵培育基試管各3支，普通變形桿菌內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管 ，蛋白胨水培育基，葡萄糖蛋白胨水培育基，檸檬酸鹽斜面培育基，醋酸鉛培育基。3、溶液或試劑：革蘭氏染色用盧氏碘液Lugols iodine solution，甲基紅指示劑，40% KOH，5% -萘酚，乙醚，吲哚試劑等。 4、儀器或其他器具：無菌平板，無菌試管，接種環(huán)，接種針，試管架。.四、實驗步驟1、細菌水解大分子物質(zhì)實驗 淀粉水解實驗培育基：淀粉培育基平板菌種：大腸桿菌和枯草芽孢桿菌方法：平板上劃“十字接種留意：接種前在平板底部作記號；“十字不要太大 油脂水解實驗

4、培育基：油脂培育基平板菌種：大腸桿菌和金黃色葡萄球菌方法：平板上劃折線接種留意：接種前在平板底部作記號 明膠液化實驗培育基：試管明膠培育基菌種：大腸桿菌或 產(chǎn)氣腸桿菌方法：穿刺接種留意：20培育 石蕊牛乳實驗培育基：試管石蕊牛乳培育基2支菌種：粘乳產(chǎn)堿菌或銅綠假單胞菌方法：斜面劃線接種留意：察看構造留意牛乳產(chǎn)酸、產(chǎn)堿、凝固、胨化景象是延續(xù)出現(xiàn)的。.四、實驗步驟1、細菌水解大分子物質(zhì)實驗2、糖發(fā)酵實驗培育基：葡萄糖發(fā)酵培育基和乳糖發(fā)酵培育基內(nèi)裝杜氏小管各3支菌種：大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌方法：分別接種于葡萄糖發(fā)酵培育基和乳糖發(fā)酵培育基.四、實驗步驟1、細菌水解大分子物質(zhì)實驗2、糖發(fā)酵實驗3、IMVi

5、C實驗.IMViC實驗試驗名稱培養(yǎng)基名稱菌種名稱接種方式接種管數(shù)吲哚試驗蛋白胨水培養(yǎng)基大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌液體1甲基紅試驗葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基液體1伏普試驗葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基液體1檸檬酸鹽試驗檸檬酸鹽培養(yǎng)基斜面1.五、實驗報告1、分別記錄實驗菌種對淀粉水解、脂肪水解、明膠液化、石蕊牛奶及尿素實驗的結果。以“表示陽性，“表示陰性。2、記錄大腸桿菌及普通變形桿菌對葡萄糖和乳糖的發(fā)酵實驗結果。以“+表示產(chǎn)酸或產(chǎn)氣，“表示不產(chǎn)酸或不產(chǎn)氣。3、記錄大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌的吲哚實驗、甲基紅實驗、伏-普實驗、檸檬酸鹽實驗及硫化氫實驗結果，以“+表示陽性反響。“表示陰性反響。4、不利用碘液，他怎樣證明淀粉水解的存在？.五、實驗報告5、假設某種微生物可以有氧代謝葡萄糖，發(fā)酵實驗應該出現(xiàn)什么結果？6、為什么大