第七章-芳香胺類藥物的分析

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專心-專注-專業(yè)精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)第七章 芳香胺類藥物的分析教學(xué)目的一、掌握芳胺類、苯乙胺類藥物的鑒別和含量測(cè)定的基本原理與方法。二、熟悉芳氧丙醇胺類藥物鑒別和含量測(cè)定的基本原理與方法。本章分配學(xué)時(shí)數(shù)2學(xué)時(shí)教學(xué)環(huán)節(jié)與教學(xué)內(nèi)容復(fù)習(xí)引入2分鐘在上節(jié)課，我們進(jìn)行了芳酸及其酯類藥物的分析，要求同學(xué)們通過上一章的學(xué)習(xí)不僅要掌握水揚(yáng)酸類、苯甲酸類藥物的理化性質(zhì)、鑒別和含量測(cè)定的基本原理與方法，并熟悉其它芳酸類藥物鑒別和含量測(cè)定的基本原理與方法，還要了解本類藥物的體內(nèi)分析方法。那么，這節(jié)課我們就要對(duì)芳香胺類藥物進(jìn)行分

2、析，經(jīng)過本章的學(xué)習(xí)后，要求同學(xué)們不僅要掌握芳胺類、苯乙胺類藥物的鑒別和含量測(cè)定的基本原理與方法，還要熟悉芳氧丙醇胺類藥物鑒別和含量測(cè)定的基本原理與方法。教授新課芳胺類藥物的分析芳胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)有兩類：其中一類為芳伯氨基未被取代，而在芳環(huán)對(duì)位有取代的對(duì)氨基苯甲酸酯類。代表性藥物有苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸丁卡因等局部麻醉藥；另一類則為芳伯氨基被?；?，并在芳環(huán)對(duì)位有取代的酰胺類藥物。代表性藥物有對(duì)乙酰氨基酚（解熱鎮(zhèn)痛藥）、鹽酸利多卡因、鹽酸布比卡因（局部麻醉藥）和醋氨苯砜（抗麻風(fēng)藥）等。對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)基本結(jié)構(gòu)與典型藥物本類藥物主要包括苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸

3、丁卡因等常用局部麻醉藥。它們的分子結(jié)構(gòu)中都具有對(duì)氨基苯甲酸酯的母體，基本結(jié)構(gòu)如下：典型藥物結(jié)構(gòu)為：苯佐卡因鹽酸普魯卡因鹽酸丁卡因若將鹽酸普魯卡因分子結(jié)構(gòu)中的酯鍵改為酰胺鍵時(shí)，則成為抗心率失常藥鹽酸普魯卡因胺，其結(jié)構(gòu)如下：它雖然不屬于本類藥物，因其化學(xué)性質(zhì)與本類藥物很相似，也在此一并列入討論。主要化學(xué)性質(zhì)芳伯氨基特性因其結(jié)構(gòu)中的芳伯氨基，故顯重氮化偶合反應(yīng)；與芳醛縮合成Schiff堿的反應(yīng)；易氧化變色等。鹽酸丁卡因無此特性。水解特性因分子結(jié)構(gòu)中有酯鍵（或酰胺鍵），使其容易水解。弱堿性除苯佐卡因外，因其脂羥胺側(cè)鏈為叔胺氮原子，故具有弱堿性。其它特性本類藥物因苯環(huán)上具有芳伯氨基或同時(shí)具有脂羥胺基側(cè)鏈

4、，其游離堿多為堿性油狀液體或低熔點(diǎn)固體，難溶于水，可溶于有機(jī)溶劑。其鹽酸鹽均系白色結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點(diǎn)，易溶于水和乙醇，難溶于有機(jī)溶劑。酰胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)基本結(jié)構(gòu)與典型藥物本類藥物包括對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）等解熱鎮(zhèn)痛藥、鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因等局部麻醉藥及醋氨苯砜抗麻風(fēng)藥等。本類藥物均系苯胺的酰基衍生物，其共性是具有芳酰胺基，基本結(jié)構(gòu)為：典型藥物的結(jié)構(gòu)為：對(duì)乙酰氨基酚 醋氨苯砜 鹽酸利多卡因 鹽酸布比卡因主要化學(xué)性質(zhì)水解后顯芳伯氨基特性本類藥物的分子結(jié)構(gòu)中均具有芳酰胺基，在酸性溶液中易水解為具芳伯氨基的化合物，并顯芳伯氨基特性反應(yīng)。水解產(chǎn)物易酯化對(duì)乙酰氨基酚和醋氨苯

5、砜，水解后產(chǎn)生醋酸，可在硫酸介質(zhì)中與乙醇反應(yīng)，發(fā)出醋酸乙酯的香味。酚羥基的特性對(duì)乙酰氨基酚具有酚羥基，與三氯化鐵發(fā)生呈色反應(yīng)，可與利多卡因和醋氨苯砜區(qū)別。弱堿性利多卡因和布比卡因的脂羥胺側(cè)鏈有叔胺氮原子，顯堿性，可以成鹽，與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)。與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因酰胺基上的氮可在水溶液中與銅離子或鈷離子絡(luò)合，生成有色的配位化合物沉淀。鑒別試驗(yàn)重氮化偶合反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生重氮化偶合反應(yīng)。苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺，在鹽酸溶液中，可直接與亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)；對(duì)乙酰氨基酚和醋氨苯砜在鹽酸或硫酸中加熱水解后，也可

6、與亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)。苯佐卡因和鹽酸普魯卡因的鑒別方法對(duì)乙酰氨基酚的鑒別方法與三氯化鐵反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚分子結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，可直接與三氯化鐵試液反應(yīng)顯藍(lán)紫色。與重金屬離子反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中具有芳酰胺的鹽酸利多卡因，在碳酸鈉試液中，與硫酸銅反應(yīng)生成藍(lán)紫色配位化合物，此有色物轉(zhuǎn)溶入氯仿中顯黃色。鹽酸普魯卡因、鹽酸丁卡因和苯佐卡因等，在同樣條件下不發(fā)生此反應(yīng)。鹽酸利多卡因，在酸性溶液中與氯化鈷試液反應(yīng)，生成亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀羥肟酸鐵鹽反應(yīng)鹽酸普魯卡因分子中具有芳酰胺結(jié)構(gòu)，加入濃過氧化氫溶液，緩緩加熱置至沸后，先被氧化成羥肟酸，再與三氯化鐵作用形成配位化合物羥肟酸鐵，其溶液顯紫紅色，隨即變?yōu)榘底厣磷?/p>

7、黑色。與汞離子反應(yīng)鹽酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸汞試液煮沸，顯黃色；對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物顯紅色或橙黃色，可與之區(qū)別。水解產(chǎn)物反應(yīng)鹽酸普魯卡因堿溶液水解可生成二乙氨基乙醇蒸氣，有堿性；苯佐卡因水解后生成乙醇可發(fā)生碘仿反應(yīng)。制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)鹽酸利多卡因與三硝基苯酚形成的衍生物其熔點(diǎn)為228232，鹽酸布比卡因與三硝基苯酚形成的衍生物其熔點(diǎn)為194；鹽酸丁卡因與硫氰酸鹽形成的衍生物其熔點(diǎn)為131。紫外特征吸收光譜本類藥物分子結(jié)構(gòu)中均具有苯環(huán)，因此具有紫外吸收光譜特征。鑒別方法見教材P145表7-1。紅外吸收光譜該法特別適用于化學(xué)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜、化學(xué)結(jié)構(gòu)相互之間差別較小的藥物的鑒別與區(qū)別。因?yàn)?/p>

8、這些藥物采用其它理化方法難以進(jìn)行區(qū)別，而用紅外吸收光譜法就比較容易區(qū)別。主要以鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺為例進(jìn)行說明。特殊雜質(zhì)檢查對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查對(duì)乙酰氨基酚是以對(duì)硝基氯苯為原料，水解后制得硝基苯，經(jīng)還原生成對(duì)氨基酚，再經(jīng)乙?；蠖频?；也可以酚為原料經(jīng)亞硝化及還原反應(yīng)制得對(duì)氨基酚。在生產(chǎn)過程中除可能引入一般雜質(zhì)外，還可能引入特殊的雜質(zhì)。乙醇溶液的澄清度與顏色對(duì)乙酰氨基酚的生產(chǎn)工藝中使用鐵粉作為還原劑，可能帶入成品中，致使乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對(duì)氨基酚的有色氧化產(chǎn)物，在乙醇中顯橙紅色或棕色。有關(guān)物質(zhì)由于本品的生產(chǎn)工藝路線較多，不同生產(chǎn)的工藝路線所帶入的雜質(zhì)也有所不同，這些有機(jī)雜

9、質(zhì)主要包括中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。例如：對(duì)氨基酚、對(duì)氯乙酰苯胺、偶氮苯等。采用比色法和薄層色譜法。對(duì)氨基酚本品在合成過程中，由于乙?；煌耆蛸A藏不當(dāng)發(fā)生水解，均可引入對(duì)氨基酚。其毒性較大并使本品產(chǎn)生色澤，因此要嚴(yán)格控制其限量。鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查普魯卡因分子結(jié)構(gòu)中有酯鍵，易發(fā)生水解反應(yīng)。其注射液制備過程中受滅菌溫度、時(shí)間、溶液pH值、貯藏時(shí)間以及光線和金屬離子等因素的影響，可發(fā)生水解反應(yīng)生成對(duì)氨基苯甲酸和2-二乙氨基醇。其中對(duì)氨基苯甲酸隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)或高溫加熱，可進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化為苯胺，而苯胺又可被氧化為有色物，使注射液變黃。已變黃的注射液不僅療效下降，而且毒性增加。故藥

10、典中規(guī)定檢查水解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸，其限度不得超過1.2。采用TLC法檢查。含量測(cè)定亞硝酸鈉滴定法本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉反應(yīng)，可用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。原理芳伯氨基藥物在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，用永停法或外指示劑法指示反應(yīng)終點(diǎn)。測(cè)定的主要條件加入適量溴化鉀加快反應(yīng)速度加過量鹽酸加速反應(yīng)室溫（1030）條件下滴定滴定管尖端插入液面下滴定指示終點(diǎn)的方法永停滴定法外指示劑法非水溶液滴定法鹽酸丁卡因和鹽酸利多卡因側(cè)鏈羥胺的叔胺氮具有弱堿性，而鹽酸布比卡因側(cè)鏈哌啶環(huán)上的叔胺氮也具有弱堿性，均可采用非水溶液滴定法測(cè)定含量。分光光度法對(duì)

11、乙酰氨基酚在0.4氫氧化鈉溶液中，于257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測(cè)定。對(duì)乙酰氨基酚、片劑溶出度的測(cè)定均采用此法進(jìn)行測(cè)定。比色法本類藥物可利用芳伯氨基的重氮化偶合反應(yīng)，生成的有色偶氮染料，在可見光范圍內(nèi)測(cè)定吸收度進(jìn)行比色測(cè)定。但本法的專屬性較低。凡能重氮化的有機(jī)化合物如磺胺類、對(duì)氨基酚類以及氨基苯甲酸類均能產(chǎn)生干擾。鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測(cè)定在pH7.5的緩沖溶液中，利用鹽酸普魯卡因胺結(jié)構(gòu)中的芳伯氨基與瑩胺反應(yīng)，生成熒光物，可在ex400nm、em485nm處測(cè)定其熒光強(qiáng)度。高效液相色譜法用HPLC法，以苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，可以同時(shí)測(cè)定鹽酸普魯卡因注射液

12、中的普魯卡因及其降解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸，不需分離提取，方法準(zhǔn)確簡(jiǎn)便。體內(nèi)藥物分析應(yīng)用舉例見教材P153154。苯乙胺類藥物苯乙胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)基本結(jié)構(gòu)與典型藥物本類藥物為擬腎上腺素類藥物，其分子結(jié)構(gòu)中具有苯乙胺的基本結(jié)構(gòu)。除鹽酸克侖特羅外，其余各藥物的苯環(huán)上都有酚羥基。其中腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素和鹽酸多巴胺分子結(jié)構(gòu)中苯環(huán)的3,4位上都有2個(gè)鄰位酚羥基，與兒茶酚類似，都屬于兒茶酚胺類藥物?；窘Y(jié)構(gòu)為：由于R1，R2，R3取代基的不同構(gòu)成本類藥物，藥典收載的本類藥物有20種，書中列舉出14個(gè)品種的典型藥物。例如：腎上腺素、去甲腎上腺素。主要化學(xué)性質(zhì)弱堿性本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有羥胺

13、基側(cè)鏈，其氮為仲胺氮，故顯弱堿性；其游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；其可溶于水。酚羥基特性本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有領(lǐng)苯二酚（或苯酚）結(jié)構(gòu)，可與重金屬離子絡(luò)合呈色；在空氣中或遇光、熱易氧化，色澤變深；在堿性溶液中更易變色。光學(xué)活性多數(shù)藥物分子結(jié)構(gòu)中具有手性碳原子，具有旋光性，可利用此特性進(jìn)行藥物分析。鑒別試驗(yàn)與三氯化鐵反應(yīng)腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，與Fe3+離子絡(luò)合顯色，加入堿性溶液，隨即被高鐵離子氧化而顯紫色或紫紅色。見表7-4。與甲醛硫酸反應(yīng)腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物可與甲醛在硫酸中反應(yīng)，形成具有醌式結(jié)構(gòu)的有色化合物。見表7-4。氧化反應(yīng)本類藥物分子結(jié)構(gòu)中多

14、數(shù)具有酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀等氧化劑氧化而呈現(xiàn)不同的顏色。紫外特征吸收與紅外吸收光譜我國藥典規(guī)定，利用紫外特征吸收光譜進(jìn)行鑒別的苯乙胺藥物見表7-5。表中的苯乙胺類藥物，均可采用紅外吸收光譜進(jìn)行鑒別。與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)（Rimini試驗(yàn)）重酒石酸間羥胺分子中具有脂肪伯氨基，加水溶解后，加亞硝酸基鐵氰化鈉溶液、丙酮數(shù)滴與碳酸氫鈉少量，加熱后即顯紅紫色。此為有脂肪族伯胺的專屬反應(yīng)。試驗(yàn)中所用的丙酮必須不含甲醛。雙縮脲反應(yīng)鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿分子結(jié)構(gòu)中，芳環(huán)側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)，可顯雙縮脲特征反應(yīng)。特殊雜質(zhì)檢查酮體檢查在所列典型藥物中，腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素

15、、鹽酸異丙腎上腺素和鹽酸甲氧明等均檢查酮體。這些藥物在生產(chǎn)中均由其酮體氫化還原制得，若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)，所以藥典規(guī)定檢查酮體。有關(guān)物質(zhì)檢查所列典型藥物中鹽酸去氧腎上腺素和硫酸沙丁胺醇等藥物列有此項(xiàng)檢查。其檢查方法均用薄層色譜法。鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查檢查方法詳見教材P158。含量測(cè)定本類藥物的原料多采用非水溶液滴定法和溴量法測(cè)定含量，其制劑的測(cè)定方法較多，有提取容量法、陰離子表面活性劑滴定法、比色法、紫外分光光度法和高效液相色譜法等。非水溶液滴定法在列舉的14種典型藥物中，有11種藥物的原料藥均采用非水溶液滴定法測(cè)定含量。其測(cè)定的主要條件詳見表7-7。溴量法重酒石酸間羥胺、鹽酸

16、去氧腎上腺素及其注射液均采用溴量法測(cè)定含量。其測(cè)定原理為藥物分子中的苯酚結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中酚羥基的領(lǐng)、對(duì)位活潑氫能與過量的溴定量地發(fā)生溴化反應(yīng)，再以碘量法測(cè)定剩余的溴，根據(jù)消耗的硫代硫酸鈉滴定液的量，即可計(jì)算供試品的含量。比色法利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的酚羥基可與亞鐵離子絡(luò)合顯色，測(cè)定鹽酸異丙腎上腺素注射液和鹽酸多巴胺注射液的含量。也可利用分子結(jié)構(gòu)中的芳伯氨基進(jìn)行重氮化偶合反應(yīng)顯色，測(cè)定鹽酸克侖特羅栓劑的含量。所以比色法也是本類藥物制劑常用的含量測(cè)定方法，具有靈敏和簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。提取酸堿滴定法本法是根據(jù)本類藥物的鹽酸鹽或硫酸鹽可溶于水，而藥物本身為游離堿不溶于水，可以溶于有機(jī)溶劑的一般通性進(jìn)行的。常用

17、的測(cè)定方法是將供試品溶于水或礦酸溶液中，加入適量的堿性試劑使藥物游離后，用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑提取。然后將提取液蒸干，殘?jiān)屑又行砸掖既芙?，用?biāo)準(zhǔn)酸滴定液直接滴定；或在提取液中加過量的標(biāo)準(zhǔn)酸滴定液，蒸去有機(jī)溶劑后，再用標(biāo)準(zhǔn)堿滴定液回滴定。本法主要用于硫酸苯丙胺及其制劑的含量測(cè)定。熒光分光光度法利用腎上腺素分子結(jié)構(gòu)中的領(lǐng)苯二酚，可被弱氧化劑氧化，生成的腎上腺素紅在一定條件下發(fā)生轉(zhuǎn)位，生成具有熒光性的N甲基3,5,6三羥基吲哚（THI），可建立熒光分光光度法測(cè)定腎上腺素的含量。高效液相色譜法利用液相色譜的高效分離、高靈敏度和高選擇性的測(cè)定方法，不但對(duì)本類藥物制劑進(jìn)行常規(guī)分析，而且還廣泛用于本類藥物的臨床

18、藥物濃度監(jiān)控和體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究。衍生化氣相色譜法應(yīng)用示例：測(cè)定鹽酸芬氟拉明片中主藥鹽酸芬氟拉明的含量。芳氧丙醇胺類藥物本類藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有芳氧丙醇胺的基本骨架，是新近發(fā)展很快的一類用于心腦血管病的藥物，將其歸入芳香胺類藥物討論。藥物結(jié)構(gòu)與主要理化性質(zhì)典型藥物的結(jié)構(gòu)為：氧烯洛爾鹽酸卡替洛爾氧烯洛爾為白色結(jié)晶性粉末；味苦；在乙醇或丙酮中易溶，在乙醚或氯仿中略溶，在水中微溶。鹽酸卡替洛爾為白色結(jié)晶性粉末；在水中溶解，在甲醇中略溶，在乙醇中極微溶解，在乙醚中幾乎不溶；在冰醋酸中極微溶解。鑒別試驗(yàn)化學(xué)鑒別反應(yīng)紫外吸收峰特征鹽酸卡替洛爾中有關(guān)物質(zhì)檢查鹽酸卡替洛爾中有關(guān)物質(zhì)的檢查 中國藥典采用TLC法

19、中的高低濃度對(duì)比法。氧烯洛爾中有關(guān)物質(zhì)的檢查 采用TLC法。含量測(cè)定鹽酸卡替洛爾和氧烯洛爾原料藥可用非水溶液滴定法，制劑（片劑、滴眼液等）可用分光光度法等方法進(jìn)行定量分析。鹽酸卡替洛爾原料藥含量測(cè)定方法鹽酸卡替洛爾滴眼液含量測(cè)定方法體內(nèi)藥物分析新課小結(jié)重點(diǎn)：芳胺類、苯乙胺類藥物的結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)。難點(diǎn)：芳胺類、苯乙胺類藥物鑒別的原理與方法。作業(yè)練習(xí)題與答案一、練習(xí)題A型題1鹽酸普魯卡因注射液中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛 B. 間氨基酚 C.水楊酸 D.對(duì)氨基苯甲酸 E. 氨基酚2對(duì)乙酰氨基酚中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛 B. 間氨基酚 C. 對(duì)氨基酚 D.苯甲酸 E.苯酚3腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛 B. 間氨基酚 C. 對(duì)氨基酚 D.酮體 E. 苯甲酸B型