藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新

1、第四章 藥物定量分析與 分析方法驗(yàn)證第一節(jié) 定量分析樣品的前處理方法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新一、概述 含鹵素有機(jī)藥物系指藥物分子結(jié)構(gòu)中所含鹵素直接與芳環(huán)或脂肪鏈相連者，而不包括某些有機(jī)藥物的鹵酸鹽或氫鹵酸鹽結(jié)構(gòu)特點(diǎn)ArXRX藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（一）鹵原子的活潑性1. 鹵原子與其相連接的烴基的結(jié)構(gòu)（1）乙烯型鹵和芳鹵 不活潑藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（2）烯丙型鹵和芐鹵 活潑（3）鹵代烷型 介于兩者之間CH2CH(CH2)nX n2藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新2. 分子中所含鹵原子的個(gè)數(shù)（n） 分子中所含鹵原子的個(gè)數(shù)越多，活潑性越強(qiáng)，特別是同一碳上含多個(gè)鹵原子或一個(gè)苯環(huán)上

2、含多個(gè)鹵原子時(shí)，活潑性增強(qiáng)更加明顯藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新3. 鹵素的種類 活潑性IBrClF常見的含鹵素有機(jī)藥物藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新CCH3OHCH3CCl3三氯叔丁醇藥用輔料、防腐劑含量測(cè)定堿性回流銀量法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新泛影酸診斷用藥含量測(cè)定堿性還原銀量法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新碘苯酯-診斷用藥含量測(cè)定氧瓶燃燒法間接碘量法I藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新醋酸氟輕松氟檢查氧瓶燃燒法氟檢查藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新磺溴酞鈉診斷用藥含量測(cè)定硫和溴氧瓶燃燒法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新(二)、含金屬有機(jī)藥物 含金屬的有機(jī)藥物：金屬原子不與碳原子直接相連，通

3、常為有機(jī)酸及酚的金屬鹽或配位化合物 如葡萄糖酸銻鈉、富馬酸亞鐵藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新酒石酸銻鉀藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新CCHCCOOOFeO硬脂酸鎂富馬酸亞鐵藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新葡萄糖酸銻鈉藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 適用于含金屬有機(jī)藥物或結(jié)合不牢固的含鹵素等藥物的分析。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 適用于金屬原子不直接與碳原子相連的含金屬有機(jī)藥物或某些CM鍵結(jié)合不牢固的有機(jī)金屬藥物。（一）. 直接測(cè)定法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新1.氧化還原滴定法富馬酸亞鐵的含量測(cè)定 Ch.P (2010) 取本品約0.3g，精密稱定，加稀硫酸 15

4、ml，加熱溶解后，放冷，加新沸過的冷水50ml與鄰二氮菲指示液2 滴，立即用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于16.99mg 。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新原理Fe2+ + Ce4+ Ce3+ + Fe3+ Fe2+ + e-Fe3+紅色淺藍(lán)色OOCCHOHCCO+Fe2+藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新例 葡萄糖酸銻鈉的含量測(cè)定 Ch.P（2005） 取本品約0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加水100ml、鹽酸15ml與碘化鉀試液10ml，密塞、振搖后，在暗處?kù)o置10min，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/

5、L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。2. 利用藥物中金屬離子的氧化性測(cè)定法 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 本法適用于含鹵素有機(jī)藥物結(jié)構(gòu)中鹵素原子結(jié)合不牢固的藥物二. 經(jīng)水解后測(cè)定法 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新RX 溶劑NaOH回流水解X-銀量法（Volhard法）鐵銨釩指示劑法1.堿水解后測(cè)定法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新例：三氯叔丁醇的含量測(cè)定 Ch.P（2005）本品適量乙醇、NaOH 回流H2O HNO3定量過量AgNO3 (0.1mol/L)鄰苯二甲酸二丁酯Fe3+指示劑 振搖 NH4SCN(0.1

6、mol/L)滴定T = 6.216 mg / ml藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH 回流(CH3)2-CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2OAgNO3 + NH4SCNAgSCN + NH4NO3（淡棕紅色）(Ksp=1.561010 )(Ksp=1.010-12 )Fe3+ + SCN Fe (SCN) 2+ NaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 定量過量藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新過量的SCN-將發(fā)生AgClSCN AgSCN +Cl不能出現(xiàn)Fe(SCN)2紅色，消耗NH4SCN過量，采取消除誤差的辦法：將生成的Ag

7、Cl過濾，再滴定，繁瑣；滴定前加入一定量的有機(jī)溶劑，將AgCl包裹。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新三.經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 適用于含金屬及含X、N、S、P等有機(jī)藥物結(jié)構(gòu)中的待測(cè)原子與碳原子結(jié)合牢固者。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 高溫?zé)胱品ê脱跗咳紵?（一）干法破壞藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新2. 氧瓶燃燒法應(yīng)用于含鹵素、硫、磷、硒等有機(jī)藥物的分析（1）原理 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 本法特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速、破壞完全，尤其適用于微量樣品的分析藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 （ 2） 儀器與材料 儀器裝置 燃燒瓶為500、1000或2000ml無色、磨口、厚壁、硬質(zhì)玻璃錐形瓶；瓶塞空心

8、，底部熔封鉑絲一根，下端呈螺旋狀或網(wǎng)狀,長(zhǎng)度為瓶身長(zhǎng)的2/3藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新稱樣用材料及稱樣 A. 固體樣品 無灰濾紙 B. 液體樣品 無灰濾紙紙袋 C. 軟膏類樣品：將適量樣品置不含被測(cè)成分的蠟油紙中包裹嚴(yán)密，外層再用無灰濾紙包裹藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新吸收液 A. 作用：吸收液的作用是將樣品經(jīng)燃燒分解所產(chǎn)生的各種價(jià)態(tài)的鹵素、硫、氮、硒等，定量地吸收并轉(zhuǎn)變?yōu)橐欢ǖ谋阌跍y(cè)定的價(jià)態(tài)氧氣藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新B. 吸收液的選擇氟 水 氯 H2O-NaOH溶液溴 H2O-NaOH-SO2飽和溶液碘 H2O-NaOH-SO2飽和溶液硫 H2O2

9、 溶液H2O磷 H2O HNO3(少量）硒 HNO3硝酸溶液藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（3）操作方法 吸收液燃燒瓶充O212玻片蓋好 樣品無灰濾紙按折線包好 將紙包夾在鉑絲的螺旋中(尾部在外)點(diǎn)火藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新插入燃燒瓶中壓住瓶塞充分燃燒 灰分入吸收液吸收產(chǎn)生的煙霧充分振搖 放置15 沖洗瓶塞及鉑絲合并洗液同法另作空白試驗(yàn)藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新根據(jù)被燃燒分解的樣品量選用適宜大小的燃燒瓶。（4）注意事項(xiàng) ChP（2005）規(guī)定的燃燒瓶體積為500、1000或2000ml三種，采用常量或半微量分析藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新測(cè)定含氟有機(jī)藥物時(shí)，用石英制燃燒瓶鉑絲燃燒時(shí)

10、起催化作用應(yīng)同時(shí)做空白試驗(yàn)燃燒時(shí)要注意防爆燃燒要完全燃燒產(chǎn)生的煙霧完全被吸收藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新98：140. 氧瓶燃燒法中的裝置有A. 磨口硬質(zhì)玻璃錐形瓶B. 磨口軟質(zhì)玻璃錐形瓶C. 鉑絲D. 鐵絲E. 鋁絲藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新96：133（99x：138）選擇氧瓶燃燒法所必備的實(shí)驗(yàn)物品A. 磨口硬質(zhì)玻璃錐形瓶B. 鉑絲C. 普通濾紙D. 氫氣 E. 無灰濾紙藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新99：76氧瓶燃燒法測(cè)定含氯有機(jī)藥物時(shí)所用的吸收液多數(shù)為A. H2O2溶液B. H2O2NaOH溶液C. NaOH溶液D硫酸肼飽和液E. NaOH硫酸肼飽和液藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最

11、新99：134. 氧瓶燃燒法可用于A. 含鹵素有機(jī)藥物的含量測(cè)定B. 醚類藥物的含量測(cè)定C. 檢查甾體激素類藥物中的氟D. 檢查甾體激素類藥物中的硒E. 芳酸類藥物的含量測(cè)定藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（二）濕法破壞 凱氏定氮法：以硫酸硫酸鹽法為基礎(chǔ)的含氮有機(jī)藥物定量分析方法。 主要應(yīng)用含有機(jī)氨基或酰胺結(jié)構(gòu)的藥物含量測(cè)定。 Ch.P收載常量法（含氮：2530mg,500ml）和半微量法（12mg,3035ml）。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新原理 以撲米酮為例（1）消解(2)堿化蒸餾水蒸汽藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（3）酸溶液吸收氨(4) 酸滴定藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新半微量凱氏定

12、氮法1.加入硫酸鉀或者無水硫酸鈉提高硫酸的沸點(diǎn)。2.硫酸銅作為催化劑。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新第二節(jié) 定量分析方法的特點(diǎn)Ch.P二部含量測(cè)定方法主要:容量分析法光譜分析法色譜分析法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新一、容量分析(一)、特點(diǎn)測(cè)定準(zhǔn)確度高，相對(duì)誤差0.2%；操作簡(jiǎn)便快速；儀器簡(jiǎn)單，廉價(jià)；用于高含量或中等含量組分的測(cè)定，應(yīng)用于原料藥的含量測(cè)定；專屬性差。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新(二) 計(jì)算1、滴定度 每1ml規(guī)定濃度的滴定液所相當(dāng)?shù)谋粶y(cè)藥物的質(zhì)量（mg）。如：每1ml的碘滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于8.806mg的維生素C。藥物定量分析與分

13、析方法驗(yàn)證最新2. 滴定度的計(jì)算a A + b B c C + d D 被測(cè)物滴定液藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新a A + b B c C + d D WA WB藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新滴定液的摩爾濃度被測(cè)物的分子量藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新m規(guī)碘滴定液0.05mol/Lm實(shí)碘滴定液0.05150mol/L 在實(shí)際工作中，配制的滴定液的摩爾濃度與藥典規(guī)定的有一定的誤差（規(guī)定值5）T實(shí)T規(guī)m實(shí)m規(guī)藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新F為校正因數(shù)T實(shí)T規(guī) m實(shí)m規(guī)= T規(guī) F藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新配制的高氯酸滴定液(0.0981mol/L)每1ml 高氯酸滴定液(0.1mol/L)相

14、當(dāng)于32.09mg的C17H20N2S.HCl 。 F=?藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新3.百分含量的計(jì)算 直接滴定法a . 不做空白試驗(yàn)例如：阿司匹林直接酸堿滴定法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新W 供試品取量V 消耗滴定液的體積F 滴定液濃度校正因數(shù)T實(shí)際滴定度T 規(guī)定滴定度藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新b. 做空白試驗(yàn)V0 空白試驗(yàn)消耗滴定液的體積藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 取本品約0.3g，精密稱定，加冰醋酸10ml與醋酸汞試液4ml ，溫?zé)嶂镣耆芙?，放冷至室溫，加結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml 高氯酸

15、滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于32.09mg的C17H20N2S.HCl 。 鹽酸異丙嗪（非水滴定法） 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 間接滴定法生成物滴定法和剩余滴定法生成物滴定法例如：葡萄糖酸銻鈉的含量測(cè)定取本品約0.3g精密稱定置碘瓶100ml+15mlHCl+KI試液10ml 硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L)滴定 空白試驗(yàn)校正。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新反應(yīng)摩爾比：本品：碘：硫代硫酸鈉=1:1:2藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新b. 剩余量滴定法（回滴定法）以司可巴比妥鈉的含量測(cè)定為例10ml溶解取本品0.1g 250ml碘瓶精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml+HCl

16、 5ml 密塞振搖1分，暗處放置15分微開瓶塞加KI T.S 10ml 密塞搖勻 Na2S2O3滴定液（0.1mol/L）滴定近終點(diǎn)淀粉指示（藍(lán)色消失） 空白試驗(yàn)校正。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新定量過量藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新Br2 + 2KI 2KBr + I2I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O61 ： 2 1 ： 1藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新司可巴比妥 Br2 Na2S2O3 = 1 1 2藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新對(duì)于溴滴定液空白樣品被測(cè)藥物的量藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新對(duì)于硫代硫酸鈉滴定液空白樣品被測(cè)藥物的量藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新藥物定

17、量分析與分析方法驗(yàn)證最新二、光譜分析法1.特點(diǎn)靈敏度高，可達(dá)104107gml；準(zhǔn)確度高，相對(duì)誤差為2%5%；應(yīng)用較廣。（一）紫外可見分光光度法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新2、測(cè)定的基本要求儀器校正和檢定；溶劑要求符合規(guī)定；吸收波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長(zhǎng)2nm以內(nèi),以吸光度最大作為檢測(cè)波長(zhǎng)。配制的樣品濃度應(yīng)使吸收度在0.30.7之間；狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新3. 測(cè)定方法 對(duì)照品比較法 分別配制供試品溶液（x）和對(duì)照品溶液（r），對(duì)照品溶液中所含被測(cè)成分的量應(yīng)為供試品溶液中被測(cè)成分規(guī)定量的10010%藥物定量分析與分析方法

18、驗(yàn)證最新式中：Cx為供試品溶液的濃度； Ax為供試品溶液的吸光度； CR為對(duì)照品溶液的濃度； AR為對(duì)照品溶液的吸光度； D為稀釋體積； W為供試品取樣量。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新【含量測(cè)定】 取本品約50mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加無水乙醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml ，置另一50ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻， 照分光光度法（附錄 A），在280nm 的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度；另精密稱取炔雌醚對(duì)照品適量，用無水乙醇稀釋制成每1ml 中約含100g的溶液，同法測(cè)定，計(jì)算，即得。 炔雌醚藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新已知：Ax=0.654 Ar=0.631 W=0.

19、05213g求：含量？97.5102.5藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新原料藥百分含量：藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新2.吸收系數(shù)法 按各品種項(xiàng)下的方法配置供試品溶液，在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度，再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系數(shù)計(jì)算含量。 吸收系數(shù)通常大于100，儀器要校正和驗(yàn)證g100ml藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新為供試品在規(guī)定條件下的吸收系數(shù)(g/ml)藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新維生素2 【含量測(cè)定】 避光操作。取本品約75mg，精密稱定，置燒杯中，加冰醋酸1ml 與水75ml，加熱溶解后，加水稀釋，放泠，移置500ml量瓶中，再加水稀釋至刻度，搖勻 ；

20、精密量取10ml，置100ml 量瓶中，加1.4 醋酸鈉溶液7ml ，并用水稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（附錄 B），在444nm 的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C17H20N4O6的吸收系數(shù)（ ）為323 計(jì)算，即得。 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新已知：Ax=0.479 W=0.07483g求：VB2含量%？藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新固體制劑含量標(biāo)示百分含量標(biāo)示量為單位制劑的平均重量（或裝量）B 為制劑的標(biāo)示量藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新液體制劑的含量標(biāo)示百分含量標(biāo)示量為單位制劑的標(biāo)示裝量V 為供試品的量取體積B 為制劑的標(biāo)示量藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 公式方法原料含量固體制劑液體制

21、劑容量法直接滴定直接空白剩余滴定紫外法對(duì)照品比較法吸收系數(shù)法將計(jì)算公式填入下表，并每類編一道計(jì)算題藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新3. 計(jì)算分光光度法4. 比色法： 空白用同體積的溶劑代替對(duì)照品或供試品溶液，依次加入等量的相應(yīng)試劑，并用相同的方法處理。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新特點(diǎn)：靈敏度高、選擇性強(qiáng)、所需試樣量少；廣泛應(yīng)用于痕量分析，特別適用于生物體液中藥物或代謝產(chǎn)物的分析；干擾因素較多，影響測(cè)定的準(zhǔn)確度和精密度。（二）熒光分析法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新對(duì)照品比較法2. 含量測(cè)定藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新Ci為供試品濃度Ri、Rib分別為供試品溶液和供試品空白溶液的讀數(shù)Cr為對(duì)照

22、品溶液的濃度Rr、Rrb分別為對(duì)照溶液和對(duì)照空白溶液的讀數(shù)藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新三.色譜分析法（一）高效液相色譜法 本法具有高靈敏度（10121015）、高選擇性、高性能、高速度及應(yīng)用廣泛。1. 特點(diǎn)藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新2. Ch.P的要求流動(dòng)相：常用甲醇水、乙腈水色譜柱：常用C18柱，其次C8柱；適 用的pH范圍28進(jìn)樣量：20l，也有10l或5l；柱溫：除另有規(guī)定外，為室溫；檢測(cè)器：除另有規(guī)定外，紫外吸收檢測(cè)器。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新反相色譜：C18、C8、氰基、氨基正相色譜：硅膠離子交換色譜：離子交換填充劑填充劑分子排阻色譜：凝膠或高分子多孔微球填充劑立體異構(gòu)體

23、色譜：手性鍵合填充劑藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新檢測(cè)器：紫外、二極管陣列、熒光、 示差折光、蒸發(fā)光散色、 電化學(xué)、質(zhì)譜選擇性檢測(cè)器：紫外、二極管陣列、熒 光、電化學(xué)、質(zhì)譜通用型檢測(cè)器：示差折光、蒸發(fā)光散色藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新不可改變的條件 可改變的條件固定相種類 固定相型號(hào)、規(guī)格流動(dòng)相組分 流動(dòng)相各組分的比 例、流速檢測(cè)器類型 柱溫、進(jìn)樣量、檢 測(cè)器靈敏度藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新3. 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 色譜柱的理論板數(shù)（n）藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 分離度R1.5藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 拖尾因子T=0.95 1.05藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 重復(fù)性 取各品種

24、項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新4. 測(cè)定法 外標(biāo)法 分別配制供試品溶液（x）和對(duì)照品溶液（r），對(duì)照品溶液的濃度為供試品溶液濃度的10%。測(cè)得相應(yīng)的峰面積為Ax和Ar。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新討論： 外標(biāo)法操作、計(jì)算簡(jiǎn)單； 要求實(shí)驗(yàn)條件穩(wěn)定：靈敏度、流動(dòng)相流速、組成等；采用定量環(huán)或自動(dòng)進(jìn)樣為好，進(jìn)樣量準(zhǔn)確，有較好的重復(fù)性，保持溶液濃度恒定，減少進(jìn)樣誤差。 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 內(nèi)標(biāo)法 在同一次實(shí)驗(yàn)操作中，被測(cè)物的質(zhì)量響應(yīng)值與內(nèi)標(biāo)物

25、的質(zhì)量響應(yīng)值的比值是恒定的，不隨進(jìn)樣體積或操作期間所配制的溶液濃度的變化而變化，根據(jù)這一原理能夠通過內(nèi)標(biāo)法得到未知樣品較準(zhǔn)確的定量結(jié)果。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新內(nèi)標(biāo)法加校正因子 配制校正因子測(cè)定液對(duì)照品（CR ）內(nèi)標(biāo)物 （CS ）混合進(jìn)樣ARAS藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 配制供試品溶液供試品（Cx)內(nèi)標(biāo)物 （CS )混合進(jìn)樣AxAS藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新在給定的色譜條件下含內(nèi)標(biāo)物的對(duì)照品溶液含內(nèi)標(biāo)物的供試品溶液校正因子藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新內(nèi)標(biāo)對(duì)比法如：CS = CS藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新討論： 內(nèi)標(biāo)物的選擇：化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在達(dá)

26、到分離度要求前提下，tR與供試品的接近； 內(nèi)標(biāo)法較外標(biāo)法準(zhǔn)確，但操作和計(jì)算較復(fù)雜；藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（二）氣相色譜法原理： 樣品中各組分在固定相與載氣間分配，由于各組分的分配系數(shù)不同而分離。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新2.一般要求（Ch.P2005）載氣：N2 ；進(jìn)樣：直接進(jìn)樣或頂空進(jìn)樣；色譜柱：填充柱、毛細(xì)管柱；進(jìn)樣溫度：直接進(jìn)樣，高于柱溫3050；進(jìn)樣量：不大于數(shù)微升；檢測(cè)器：常用氫火焰離子化檢測(cè)（FID），檢測(cè)溫度一般高于柱溫，不得低于150，以免水氣冷凝，常用250300。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新不可改變的條件 可改變的條件固定液種類檢測(cè)器類型特殊指定的色譜柱材料

27、色譜柱規(guī)格、型號(hào)、固定液涂布濃度、載氣流速、檢測(cè)器靈敏度、柱溫、進(jìn)樣量等。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新3. 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)（參見HPLC）4. 測(cè)定法 由于GC進(jìn)樣在1l左右，易產(chǎn)生誤差，故常采用內(nèi)標(biāo)法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新第三節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證 一、目的及要求 證明所采用的分析方法適合于相應(yīng)的檢測(cè)要求。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草時(shí)，合成工藝變更、制劑的組分變更、原分析方法進(jìn)行修訂時(shí)，分析方法需經(jīng)驗(yàn)證。方法驗(yàn)證過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品標(biāo)準(zhǔn)起草和修訂說明中。 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新二、需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目1. 鑒別試驗(yàn)；2. 雜質(zhì)定量或限度檢查；3. 原料或制劑中有效成分含量測(cè)定；

28、4. 制劑中其它成分（降解產(chǎn)物、防腐劑等）的測(cè)定；5. 溶出度、釋放度等功能檢查中的溶出量等的測(cè)試方法。 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 驗(yàn)證內(nèi)容有：準(zhǔn)確度、精密度（重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測(cè)限、定量限、線性、范圍和耐用性三、驗(yàn)證內(nèi)容 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 （一） 準(zhǔn)確度（accuracy） 準(zhǔn)確度是指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，用百分回收率表示。 測(cè)定回收率R（recovery）的具體方法可采用“回收試驗(yàn)法”和“加樣回收試驗(yàn)法”。 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新1. 含量測(cè)定方法（1）原料藥的含量測(cè)定用已知的對(duì)照品或供試品進(jìn)行測(cè)定回收率測(cè)得量加入量

29、100藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新1. 含量測(cè)定方法（2）制劑的含量測(cè)定用已知的對(duì)照品或供試品進(jìn)行測(cè)定；向已知制劑含量加入“已知量的被測(cè)物”。回收率 測(cè)得量本底量 加入量100藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果評(píng)價(jià)，如制備三個(gè)不同濃度樣品各測(cè)三次。2.數(shù)據(jù)要求藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新回收率指標(biāo)的一般要求UV、HPLC 回收率： 98102 RSD2容量分析 回收率： 99.7100.3 RSD0.2藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 中藥分析的準(zhǔn)確度一般用加樣回收試驗(yàn)衡量。中藥回收率一般要求在95105%范圍內(nèi)，有些方法操作步驟繁多時(shí)，可要求在90110%范圍

30、內(nèi)。RSD一般在3%以內(nèi)。 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新RPHPLC二元梯度洗脫法測(cè)定魷降鈣噴鼻劑的含量及有關(guān)物質(zhì) 回收率按處方量配制適量的空白輔料溶液，分別加入處方量80%，100%，120%的SCT各3份，按含量測(cè)定方法測(cè)定SCT的含量，與加入量比較，計(jì)算得回收率，平均回收率(n=3)分別為100.4%(RSD)=1.0%)，99.5%(RSD=1.2%)，99.9%(RSD)=1.6%)。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新回收率試驗(yàn)取本品研細(xì)，精密稱取約2.5g，分別加人高、中、低(160、200、240g)不同量的延胡索乙素對(duì)照品，各2份，按含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，3者的平均回收率和相對(duì)偏

31、差分別為97.8%，0.51%;97.6%，0.41%;95.8%，0.35%，總平均回收率為98.1%。高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方胃寧片中延胡索乙素的含量藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 （二）精密度（precision） 是指在規(guī)定條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。1.精密度表示方法藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（1）平均偏差（ ）：（2）相對(duì)平均偏差（RD）：藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新兩份平行樣：最大相對(duì)偏差（允許值）容量分析 0.3重量分析 0.5儀器分析 3藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（3）.標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（SD或S）藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（4）.相

32、對(duì)標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（RSD），也稱變異系數(shù)（CV）藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（1）重復(fù)性 在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度；在規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果評(píng)價(jià)，如制備三個(gè)不同濃度樣品各測(cè)三次或把被測(cè)物濃度當(dāng)作100%，至少測(cè)6次進(jìn)行評(píng)價(jià)。2. 精密度的內(nèi)容藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 （2）中間精密度 同一實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果的精密度。 考察隨機(jī)變動(dòng)因素的影響。變動(dòng)因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 （3）. 重現(xiàn)性 不同實(shí)驗(yàn)室，不同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度。當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。

33、如建立藥典分析方法時(shí)通過協(xié)同檢驗(yàn)得出重現(xiàn)性結(jié)果，協(xié)同檢驗(yàn)的過程、重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中。 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新指標(biāo)一般要求容量分析：n6 RSD0.2HPLC： n6 RSD2UV: n6 RSD1藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新HPLC法分析羅紅霉素及其片劑含量和相關(guān)物質(zhì)精密度和準(zhǔn)確度的測(cè)定取羅紅霉素的片劑，研細(xì)，分別按“2.3”項(xiàng)制備6份供試品溶液，在確定的色譜條件下，分別進(jìn)樣20L，記錄色譜圖，計(jì)算其含量，RSD為0.95%。采用加樣回收的方法，將羅紅霉素片研細(xì)，分別精密稱定11，14，17mg，再相應(yīng)地加入羅紅霉素對(duì)照品8，10，12mg，置10mL量瓶中，用流動(dòng)相溶解

34、并稀釋至刻度，分別進(jìn)樣20L，記錄色譜圖，計(jì)算在低、中、高濃度下的平均回收率土RSD(n=3)分別為99.01%士1.0%，99.25士0.98%，99.23%士1.0%。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 （三）專屬性（specificity） 指有其他成分（雜質(zhì)、降解物、輔料等）可能存在情況下，采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物的特性。 鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定方法均應(yīng)考察其專屬性。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新對(duì)照品 75.15h破壞液 供試品 a SCP;b降鈣素C藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 （四） 檢測(cè)限（limit of detection， LOD） 檢測(cè)限系指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)

35、出的最低量。是限度試驗(yàn)參數(shù)，無需定量測(cè)定。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新1非儀器分析目視法 用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。 2. 儀器分析時(shí)的測(cè)定法如：HPLC S/N=3藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新3數(shù)據(jù)要求 應(yīng)附測(cè)試圖譜，說明測(cè)試過程和檢測(cè)限結(jié)果。 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（五）定量限（1imit of quantitation，LOQ） 指樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物定量時(shí)，應(yīng)確定定量限。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 常用信噪比法確定定量限，一般以信噪比（S/N）為101時(shí)相應(yīng)的濃度或注入儀器的量進(jìn)行

36、確定。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 （六） 線性 在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。 數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新UV: n57 相關(guān)系數(shù)r0.999HPLC: n57相關(guān)系數(shù)r0.999 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（七）范圍 指達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性的條件下，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新（八） 耐用性 指測(cè)定條件稍有變動(dòng)時(shí)，結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。 變動(dòng)因素：被測(cè)溶液的穩(wěn)定性，流動(dòng)相的組成、不同型號(hào)的色譜柱、pH、柱溫、流速等。藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新 項(xiàng)目?jī)?nèi)容鑒別 雜質(zhì)測(cè)定含量測(cè)定及溶出量測(cè)定定量限度準(zhǔn)確度-+-+精密度重復(fù)性-+-+中間精密度-+-+專屬性+檢測(cè)限-+-定量限-+-線性-+-+范圍-+-+耐用性+藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證最新六、各種含量測(cè)定方法對(duì)效能指標(biāo)的要求 1. 容量分析法：用原料藥精制品(含量99