理化檢測中的質(zhì)量控制ppt課件

1、理化檢驗實驗室質(zhì)量控制浙江省疾病預(yù)防控制中心 黃百芬 bfhuangcdc.zj.意義根據(jù)途徑理化檢測實驗室質(zhì)量控制.質(zhì)量控制的意義1、準(zhǔn)確可靠的分析結(jié)果是保證消費者安康和國際貿(mào)易順利進展的前提。2、質(zhì)量控制是提供準(zhǔn)確結(jié)果的必要條件。 .孔雀石綠、硝基呋喃.堿性橙堿性玫瑰精.09年“砒霜門事件“砷超標(biāo)飲料復(fù)檢“全部合格.質(zhì)量控制的根據(jù) ISO/IEC17025規(guī)范GLP GB/T 27404-2021 歐盟指令 .質(zhì)量控制的根據(jù)GB/T 5009.1-2003GB/T 5750.3-2006.質(zhì)量控制的途徑人機料法環(huán)測.分析人員根本資源分析過程質(zhì)量控制的途徑環(huán)料機

2、人法測.分析人員嚴(yán)謹(jǐn)?shù)娜蝿?wù)態(tài)度專業(yè)資歷 豐富的 任務(wù)閱歷系統(tǒng)培訓(xùn). 設(shè)備 耗材 環(huán)境根底資源 設(shè)備.對實驗室環(huán)境的要求實驗室的設(shè)計及實驗設(shè)備的擺放：必需滿足分析義務(wù)的要求，以保證最大的平安性和分析樣品免受污染。實驗室內(nèi)的建筑資料、實驗器具、資料：必需能耐受所運用化學(xué)試劑的腐蝕。有滿足殘留測定要求的區(qū)域：最好將樣品接納與儲存、樣品制備、樣品提取凈化、運用儀器測定樣品這些步驟在不同的房間進展。進展適當(dāng)?shù)沫h(huán)境溫濕度監(jiān)控。.對實驗室設(shè)備的要求實驗室設(shè)計應(yīng)滿足有機溶劑的運用要求：所用的設(shè)備如試劑室的燈、存放試劑的冰箱必需做到防火防爆。通風(fēng)設(shè)備：樣品提取、凈化、濃縮均應(yīng)在通風(fēng)場所進展，最好是在通風(fēng)櫥中進展

3、。供水、供電、供氣設(shè)備要求：必需保證明驗室水電的充足和可靠的供應(yīng)。.對實驗室設(shè)備的要求個人防護設(shè)備：實驗室應(yīng)配備充足的防護鏡、手套及其它防護衣服，有緊急沖洗設(shè)備和溶劑噴濺處置器具，有充足的防火器材。任務(wù)人員必需對被分析物的急、慢性毒性有全面的認識和了解。在運用有機物規(guī)范時必需加以小心，對廢棄的規(guī)范溶液或陽性樣品須進展相應(yīng)的處置,符合三廢處置要求。.對設(shè)備的控制計量用儀器設(shè)備必需按方案進展檢定或校準(zhǔn)，做好定期維護和日常維護任務(wù)，并保管相應(yīng)的記錄。必需定期監(jiān)測和檢查冰箱、冰柜的運轉(zhuǎn)溫度，并保管記錄。.對規(guī)范物質(zhì)的控制規(guī)范物質(zhì)： 純物質(zhì)的規(guī)范物質(zhì)RM 含有適宜基體的有證規(guī)范物質(zhì)CRM 用適當(dāng)溶劑稀釋

4、規(guī)范溶液儲存在適當(dāng)條件下。.規(guī)范物質(zhì)的管理及期間核對 規(guī)范物質(zhì)管理：分析質(zhì)量控制中準(zhǔn)確度和精細度提高是以規(guī)范物質(zhì)穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性為前提的。1購買規(guī)范物質(zhì)應(yīng)向供應(yīng)方索取相應(yīng)的證書，證書上有明示的濃度、有效期、不確定度、溶劑規(guī)范液等。2新購的規(guī)范物質(zhì)應(yīng)閱歷收、建立實驗數(shù)據(jù)；在運用期間，也應(yīng)定期進展期限檢查，以了解其變化動態(tài)，確定有效期。.3規(guī)范物質(zhì)存放：有機規(guī)范物配制后最好熔封在玻璃安瓿內(nèi)，低溫避光保管。4應(yīng)建立規(guī)范物領(lǐng)用登記本，專人保管、請購。.規(guī)范溶液期間核對 1安瓿分裝規(guī)范溶液：從安瓿中取一定量配制濃度系列，再封存，每隔一段時間，再用原溶液配制同樣濃度系列。嚴(yán)厲控制實驗條件來比較兩次規(guī)范曲線的

5、斜率，斜率下降闡明有損失。.規(guī)范溶液期間核對 2幾支一樣濃度同時配制的規(guī)范：先翻開的規(guī)范的測定值與間隔一段時間后翻開的另一支規(guī)范的測定值進展比較，以此類推，其變異程度為規(guī)范在此期間穩(wěn)定性變化程度。. 3幾個實驗室用同一規(guī)范物分別配制一樣濃度規(guī)范液，各自進展規(guī)范曲線測定，再按規(guī)定交換該規(guī)范液進展測定，比較測定結(jié)果差別，以察看同一規(guī)范的時間和空間變異。規(guī)范溶液期間核對.4同種規(guī)范物來源不同時，應(yīng)采用分別配制交叉測定的方法來檢查規(guī)范的純度及配制能否準(zhǔn)確。 規(guī)范溶液期間核對.對試劑等耗材的控制試劑要進展空白實驗，以確保對測定無干擾。過濾頭須保證對被測成分無截留。.國產(chǎn)濾頭未過濾Milipor濾頭Wat

6、ers濾頭.分析過程中的質(zhì)量控制1. 防止污染防止操作污染防止環(huán)境污染.防止操作污染 采樣、樣品運輸、儲存和樣品分析都有能夠引入污染，一切的玻璃器皿、試劑、有機溶劑和水在運用前都要檢查能否有能夠存在的污染，另外在實驗中要做試劑空白。.防止環(huán)境污染1.對試劑和吸附劑進展純化處置。2.對玻璃儀器、注射器、色譜柱，在運用前進展適當(dāng)?shù)奶幹谩?.控制洗滌劑、光滑劑、塑料、天然或合成的橡膠制品、防護手套、濾紙、棉毛織品等的運用。.2.樣品控制取樣要有代表性：有詳細的接納信息：仔細填寫接樣單，有詳細的性狀、包裝等描畫。運用獨一性標(biāo)識：留意檢測傳送過程中的標(biāo)識轉(zhuǎn)移。取樣量、均勻性等。.3.分析方法的控制方法種

7、類方法性能參數(shù)方法適用性檢驗與評價.測定方法種類中國國家規(guī)范或行業(yè)規(guī)范公定的規(guī)范方法，如國際規(guī)范化組織ISO)發(fā)布的方法經(jīng)權(quán)威的管理部門或機構(gòu)認可的規(guī)范操作指南sop)曾經(jīng)被實驗室驗證的方法，必需符合技術(shù)要求并按實驗室方法管理的相關(guān)程序?qū)徟?。宏觀.挑選方法：用于挑選目的方法，即測定一個或一組分析物在最低目的或高于最低目的濃度時能否存在的方法。確證方法：用于確證目的方法，經(jīng)過確證，可以防止假陽性結(jié)果。包括定性和定量確證。測定方法種類微觀.方法性能參數(shù)校準(zhǔn)曲線空白值檢出限LOD定量限LOQ準(zhǔn)確度精細度.校正曲線規(guī)范曲線任務(wù)曲線.校準(zhǔn)曲線至少6個點 (包括原點) 濃度范圍盡能夠覆蓋一個數(shù)量級?？蓮?

8、.25， 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 4.0 倍 MRL / MRPL范圍內(nèi)選點。線性回歸方程 y =bx + a相關(guān)系數(shù) r : 普通不低于0.99，水質(zhì)分析中要求不低于0.999.各種方式的校準(zhǔn)曲線意味著什么?.校準(zhǔn)溶液的配制方法規(guī)范溶液直接用溶劑稀釋規(guī)范曲線。規(guī)范溶液用空白基質(zhì)溶液稀釋。繪制校準(zhǔn)曲線的規(guī)范溶液的分析步驟與樣品分析步驟完全一樣任務(wù)曲線。.空白值空白實驗：在不參與試樣的情況下，按測定試樣一樣的條件進展實驗，所得到的測定值為空白值。包括試劑不純、水不純及容器中引入的雜質(zhì)，可在試樣測定結(jié)果中扣除此空白值。 .當(dāng)空白值很大時，應(yīng)經(jīng)過提純試劑和選用適當(dāng)器皿來處理。 空白實

9、驗純水空白 樣品空白試劑空白溶劑空白不含樣品的全套分析。 不含被測分析物的樣品資料。 單純?nèi)軇┓治觥?單純實驗用水分析。 .空白值的測定方法每批做平行雙樣測定，分別在一段時間內(nèi)隔天反復(fù)測定一批，共測定5-6批。.空白值平行測定規(guī)范偏向計算.分析物可以被檢測到的最小含量定性 通常被定義為某特定分析方法在給定的置信度通常為95%內(nèi)可從樣品中檢出定性檢出待測物質(zhì)的最小濃度。檢出限LOD.檢出限LOD估算檢出限受儀器的靈敏度和穩(wěn)定性、全程序空白實驗值及其動搖性的影響。 LOD=(k*sb)/b k-置信系數(shù)當(dāng)置信程度為90%時，k普通取值3 sb-空白多次丈量的規(guī)范偏向 b-方法靈敏度規(guī)范曲線斜率.檢

10、出限LOD估算空白測定次數(shù)n最好20，k=4.6當(dāng)空白值測定結(jié)果接近于0.000時，可配制接近零濃度的規(guī)范溶液來替代純水進展全程序空白值測定。.定量限LOQ分析物可以被定量的最小濃度。通常被定義為在特定的檢測條件下，到達一定的準(zhǔn)確度和精細度時，檢測樣品中分析物的最低濃度。儀器分析 S/N=10.準(zhǔn)確度 一系列測定結(jié)果的平均值與公認的參考值之間的接近程度。 .準(zhǔn)確度測定方法利用規(guī)范物質(zhì)測定： 反復(fù)分析規(guī)范物質(zhì)，測定的含量經(jīng)回收率校正后平均值與真值的偏向。經(jīng)過加標(biāo)回收測定： (1)在空白基質(zhì)樣品中參與不同程度高、中、低三程度知量分析物，同時測定空白基質(zhì)樣品和加標(biāo)樣品，計算加標(biāo)回收率。 (2)在某一

11、穩(wěn)定樣品中參與不同程度樣品含量的0.52倍知量分析物，同時測定樣品和加標(biāo)樣品，計算加標(biāo)回收率。.食品殘留分析中加標(biāo)濃度詳細要求 對于禁用物質(zhì)，在測定低限、兩倍測定低限和十倍測定低限進展三程度實驗； 對于有最高殘留限量MRL的，在測定低限、 MRL、選一適宜點進展三程度實驗； 對于未制定MRL的，在測定低限、 常見限量目的、選一適宜點進展三程度實驗.加標(biāo)回收率計算.加標(biāo)回收分析要求加標(biāo)回收分析在一定程度上能反響測試結(jié)果的準(zhǔn)確度，在實踐運用時應(yīng)留意加標(biāo)物質(zhì)的形狀、加標(biāo)量和樣品基體等，每批一樣基體樣品應(yīng)隨機抽取10%-20%的樣品進展加標(biāo)回收分析。.加標(biāo)回收分析結(jié)果的評價參考規(guī)范方法中相應(yīng)的驗證數(shù)據(jù)

12、。參考以下指點范圍：.精細度(變異系數(shù)) 室內(nèi)精細度 室間精細度丈量值在平均值附近的分散程度。.室內(nèi)精細度反復(fù)性反復(fù)性：在反復(fù)性條件下對同一被丈量進展延續(xù)多次丈量所得結(jié)果之間的一致性。定量表達用反復(fù)性規(guī)范差 sr 表示。反復(fù)性條件：在同一實驗室，由同一人操作，運用一樣的設(shè)備，用同樣方法獲得獨立丈量結(jié)果的條件。.室間精細度重現(xiàn)性重現(xiàn)性：在改動了的丈量條件下,同一被丈量的丈量結(jié)果之間的一致性。重現(xiàn)性條件：在不同實驗室，由不同的人員操作，運用不同的設(shè)備，用同樣方法獲得丈量結(jié)果的條件。.精細度表示方式相對偏向：.規(guī)范偏向：精細度表示方式.相對規(guī)范偏向精細度表示方式.精細度檢驗方法水質(zhì)分析 通常以空白溶

13、液實驗用水、規(guī)范溶液、生活飲用水、生活飲用水加標(biāo)樣等幾種分析樣品，求得批內(nèi)、批間規(guī)范偏向和總規(guī)范偏向。.食品殘留分析中精細度檢驗方法對于食品中的禁用物質(zhì)，精細度實驗應(yīng)在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限三程度進展；對于有最高殘留限量MRL的，精細度實驗應(yīng)在方法測定低限、 MRL、選一適宜點進展三程度實驗；對于未制定MRL的，精細度實驗應(yīng)在方法測定低限、 常見限量目的、選一適宜點三程度進展。反復(fù)測定次數(shù)至少為6次。.精細度測定結(jié)果評價參考規(guī)范方法中相應(yīng)的驗證數(shù)據(jù)，各類偏向值應(yīng)等于或小于分析方法規(guī)定的值。 參考以下指點范圍：.精細度測定結(jié)果運用由空白平行實驗批內(nèi)規(guī)范偏向，估計分析方法

14、的檢出限。比較各溶液的批內(nèi)變異和批間變異，檢驗變異差別的顯著性。比較樣品與規(guī)范溶液測定結(jié)果的規(guī)范差，判別樣品中能否存在影響測定精度的干擾要素。比較加標(biāo)樣品的回收率，判別樣品中能否存在改動準(zhǔn)確度，但能夠不影響精細度的組份。.樣品檢測過程中常用質(zhì)控方法與要求質(zhì)量控制圖法平行雙樣法加標(biāo)回收分析規(guī)范參考物或質(zhì)控樣對比分析不同分析方法對比分析不同檢測工程的測定結(jié)果相關(guān)性分析. 質(zhì)量控制圖是根據(jù)分析結(jié)果的變化應(yīng)服從正態(tài)分布規(guī)律而繪制。優(yōu)點：控制分析質(zhì)量的一種簡單有效的統(tǒng)計技術(shù)可直觀的反映分析結(jié)果的準(zhǔn)確度或精細度的變化及時發(fā)現(xiàn)異常景象經(jīng)過查找緣由,采取相應(yīng)的措施,使分析質(zhì)量得到保證質(zhì)量控制圖. 質(zhì)量控制圖的

15、制造 將均勻、穩(wěn)定的“控制規(guī)范樣知值的規(guī)范物質(zhì)與樣品一同進展分析測試，將獲得的數(shù)據(jù)繪圖以檢驗丈量系統(tǒng)能否在統(tǒng)計控制之下。.繪制質(zhì)量控制圖的要求1.質(zhì)控樣品的選用要求：1質(zhì)控樣品組成盡量與檢測樣品類似；2質(zhì)控樣品濃度盡量與檢測樣品相近。. 2、質(zhì)控樣品的分析要求 1分析方法與檢測樣品的方法一樣；2同時進展分析；3每次至少平行2份。4積累至少20個數(shù)據(jù)，并在短期內(nèi)陸續(xù)進展，不能一次完成。5如各次分析間隔較長，能夠因氣溫動搖影響結(jié)果，必要時對測定值進展溫度校正。.d均數(shù)+2S-2S+3S-3S正常分布質(zhì)量控制圖的制造.漂移趨勢變化精度變化均 數(shù)標(biāo) 準(zhǔn) 差 質(zhì) 控 圖-3S+3S+2S-2Sd均數(shù)質(zhì)量

16、控制圖的制造. 操作者在測定質(zhì)控樣品時，如發(fā)現(xiàn)質(zhì)控數(shù)據(jù)違背了質(zhì)控規(guī)那么，應(yīng)填寫失控報告單，對失控結(jié)果要進展回想、檢查、反復(fù)測定，或另取質(zhì)控品分析，或檢查儀器、試劑和操作等，以糾正失控。 質(zhì)量控制圖失控后處置.平行雙樣法水質(zhì)分析：1 測定率要求: 每批隨機抽取10%-20%的樣品進展平行雙樣測定，假設(shè)樣品量少，應(yīng)添加平行雙樣測定比例。2 允許差:參考下表數(shù)值。.加標(biāo)回收分析每批一樣基體樣品應(yīng)隨機抽取10%-20%的樣品進展加標(biāo)回收分析。察看：加標(biāo)回收率能否與規(guī)范方法中相應(yīng)的數(shù)據(jù)相符。加標(biāo)回收率能否符合以下指點范圍：.規(guī)范參考物或質(zhì)控樣對比分析采用規(guī)范參考物或質(zhì)控樣與樣品同步進展測試，將測試結(jié)果與

17、規(guī)范樣品參考值相比較，以評價其準(zhǔn)確度和檢查實驗室內(nèi)能否存在系統(tǒng)誤差。.不同分析方法對比分析對同一樣品采器具有可比性的不同分析方法進展測定，假設(shè)結(jié)果一致，闡明分析質(zhì)量可靠。多用于規(guī)范物質(zhì)的定值等重要檢測事件。.不同檢測工程的測定結(jié)果相關(guān)性分析如： 1、水樣利用化學(xué)平衡實際 2、食品中全分析質(zhì)量目的利用質(zhì)量平衡.殘留分析方法確證技術(shù)簡介確證方法普通性能要求化合物確證分析的檢測方法.確證方法應(yīng)提供分析物的化學(xué)構(gòu)造信息。當(dāng)方法采用內(nèi)標(biāo)時，在提取步驟開場時就應(yīng)將適當(dāng)?shù)膬?nèi)標(biāo)參與到測試部分中去。假設(shè)沒有適宜的內(nèi)標(biāo)可用，可以用共色譜法對分析物進展定性。在這種情況下, 只應(yīng)有一個色譜峰，且峰高或峰面積的添加相當(dāng)

18、于參與分析物的量。用GC或LC時，半峰寬應(yīng)在原來峰寬的90-110%以內(nèi)，保管時間的變化應(yīng)在5%以內(nèi)。確證方法普通性能要求.用TLC時，只需代表分析物的斑點得到了加強，不應(yīng)出現(xiàn)新的斑點，而且外形也不應(yīng)改動。分析物含量等于或接近允許限或判別限的標(biāo)樣或加標(biāo)樣陽性控制樣品，以及陰性控制樣和試劑空白都應(yīng)在對每批樣品進展分析時同時執(zhí)行整個分析過程。確證方法普通性能要求.檢 測 方 法標(biāo) 準(zhǔn)LC-MS或GCMS液質(zhì)或氣質(zhì)要求能監(jiān)測到足夠多的特征碎片離子LC-DAD或紫外全掃描要求紫外吸收具有特征性液相熒光要求與其它技術(shù)相結(jié)合2-DTLC分光光度檢測要求與其它技術(shù)相結(jié)合GC-ECD,NPD,FPD要求與其它

19、兩種或更多的分離技術(shù)相結(jié)合1衍生化要求不是首選方法LC-免疫技術(shù)要求與其它技術(shù)相結(jié)合LC-VV/VIS（單波長）要求與其它技術(shù)相結(jié)合化合物確證分析的檢測方法.分析技術(shù)96/23/EC附錄I的物質(zhì)局限性LC或GC/MSA組和B組僅在在線或脫機色譜分離時適用僅適用于使用全掃描技術(shù)，或使用不記錄全質(zhì)譜圖但至少使用3（B組）或4（A組）識別點時LC或GC/IRA組和B組被測物需有紅外光譜吸收液相-全掃描DADB組需要有UV光譜吸收液相-熒光B組僅適用于有天然熒光，及轉(zhuǎn)變或衍生后有熒光的分子2-D TLC-全掃描UV/VISB組必須使用二維HPTLC和共色譜法GC-電子捕獲檢測B組僅在兩根柱子極性不同時

20、適用LC-酶免B組僅適用于使用至少兩個不同的色譜系統(tǒng)或使用第二種獨立的檢測方法時LC-UV/VIS（單波長）B組僅適用于使用至少兩個不同的色譜系統(tǒng)或使用第二種獨立的檢測方法時對確證方法的要求.確證點的要求96/23/EC指令附錄 I A組禁用物質(zhì) 4個識別點 96/23/EC指令附錄 I B組限用物質(zhì) 3個識別點 .MS技術(shù)每種離子的識別點低分辨質(zhì)譜（LRMS）1.0LR-MSn母離子1.0LR-MSn子離子1.5HRMS2.0HR-MSn母離子2.0HR-MSn子離子2.5質(zhì)量碎片類型和識別點的關(guān)系 .結(jié)合確證分析方法的運用規(guī)定 結(jié)合確證分析方法是指必需與其他方法結(jié)合運用才干作為確證方法的分

21、析方法。.免疫分析方法的質(zhì)量要求1、必需規(guī)定校正曲線的任務(wù)范圍，普通要求濃度范圍至少覆蓋一個數(shù)量級。2、至少需求6個校正點。3、每次分析都要包含質(zhì)控樣品，濃度程度為：陰性對照、陽性對照、整個任務(wù)范圍的低、中、高部分，結(jié)果該當(dāng)與先前的分析結(jié)果相一致。.氣相色譜或液相色譜非特異性分析的規(guī)定在一樣實驗條件下，待測物與相應(yīng)的規(guī)范品具有一樣的保管時間。色譜圖中靠待測物最近的最大峰與待測物峰的分別度是待測物峰高10%處的峰寬。可以采用添加色譜分析或 至少采用兩根不同極性的柱子進展色譜分析，以獲得進一步信息。.薄層色譜分析的規(guī)定1、待測物的Rf 值該當(dāng)與規(guī)范品的Rf一致，通常在一樣實驗條件下，兩者相差在3%

22、，可視為滿足要求。2、待測物的斑點外觀應(yīng)與標(biāo)樣一致。3、待測物的斑點中心與距其最近的斑點中心的間隔，至少應(yīng)有兩斑點直徑之和的一半。4、可以采用添加色譜分析或二維薄層色譜分析，以獲得進一步信息。.色-質(zhì)譜聯(lián)用檢測的性能規(guī)范要求 色譜分別要求 質(zhì)譜檢測要求 .確證方法的運用規(guī)定當(dāng)檢出在正常情況下不太能夠的某些有機殘留超越MRL值時，就有必要進展確證實驗。確證方法的目的在于防止假陽性結(jié)果。針對禁用物質(zhì)，主要偏重于定性分析。對有著MRL值規(guī)定的限用物質(zhì)，先要進展定性分析，確認存在后進一步作定量分析。.液相色譜光譜分析的規(guī)定必需滿足前面兩條的要求。在光譜圖中，待測物應(yīng)與規(guī)范品有一樣的最大吸收波長，兩者的偏向由檢測系統(tǒng)的分辨率決議。對DAD而言，在2nm之內(nèi)。在220nm以上，待測物和規(guī)范品的相對吸光度大于10%，兩個光譜圖不應(yīng)有明顯的差別。