骨髓造血干細(xì)胞課件(同名1260)

1、造血干細(xì)胞移植進(jìn)展云南省腫瘤醫(yī)院血液科何明生 博士 1造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1999年12月美國SCIENCE 人類干細(xì)胞研究 列入人類十大科學(xué)成就 榜首2造血干細(xì)胞移植進(jìn)展2003年度 十大科學(xué)進(jìn)展中同樣涉及了干細(xì)胞，即鼠的胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)皿中既能發(fā)育成精子也能發(fā)育成卵子，有望發(fā)展出新一代的試管嬰兒技術(shù)。 3造血干細(xì)胞移植進(jìn)展hematopoietic stem cellinPubMedItems 1 - 500 of 56 66312/5/20054造血干細(xì)胞移植進(jìn)展干細(xì)胞移植進(jìn)展第一部分 基礎(chǔ)理論第二部分 實驗技術(shù)第三部分 臨床移植5造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1骨髓造血干細(xì)胞的基本概念骨髓造血干細(xì)胞

2、(hematopoietic stem cell,HSC)是指存在于骨髓中的一小群具有無限或較長期的自我更新能力,并具有多向分化潛能的原始造血細(xì)胞6造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1骨髓造血干細(xì)胞的基本概念傳統(tǒng)觀念認(rèn)為HSC的生物學(xué)特征是：具有高度增殖分裂能力；能多向分化產(chǎn)生各系血細(xì)胞；可移植性；能自我更新(self-renew) ，持久地維持正常造血功能。7造血干細(xì)胞移植進(jìn)展2.骨髓造血干細(xì)胞的研究歷史8造血干細(xì)胞移植進(jìn)展2.骨髓造血干細(xì)胞的研究歷史9造血干細(xì)胞移植進(jìn)展造血干細(xì)胞移植在近30年里迅猛發(fā)展壯大至今 1990年，美國的Thomas因在骨髓移植中做出重要貢獻(xiàn)，從而共同獲得該年度的諾貝爾生理獎和醫(yī)

3、學(xué)獎，這是臨床醫(yī)學(xué)首次獲得此項殊榮。10造血干細(xì)胞移植進(jìn)展3. 造血干細(xì)胞的體外研究造血干細(xì)胞向紅細(xì)胞分化造血干細(xì)胞向粒細(xì)胞分化造血干細(xì)胞向單核細(xì)胞分化造血干細(xì)胞向淋巴細(xì)胞分化造血干細(xì)胞向血小板分化造血干細(xì)胞向NK細(xì)胞分化11造血干細(xì)胞移植進(jìn)展3. 造血干細(xì)胞的體外研究造血干細(xì)胞還可向心肌細(xì)胞分化、肝細(xì)胞、神經(jīng)組織細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等非血液細(xì)胞分化12造血干細(xì)胞移植進(jìn)展4造血干細(xì)胞的體內(nèi)特性骨髓造血干細(xì)胞來源于胚胎干細(xì)胞的成血血管內(nèi)皮細(xì)胞，經(jīng)由卵黃囊、胎肝、胸腺、脾、最后到骨髓，在體內(nèi)不斷增殖發(fā)育，產(chǎn)生髓系、紅細(xì)胞系和淋巴細(xì)胞系，逐步分化至各系成熟血細(xì)胞。4造血干細(xì)胞的體內(nèi)特性13造血干細(xì)胞移

4、植進(jìn)展4造血干細(xì)胞的體內(nèi)特性骨髓造血干細(xì)胞在體內(nèi)具有高度的自我更新能力和多向分化潛能，不斷的產(chǎn)生髓系、紅系和淋巴系細(xì)胞。4造血干細(xì)胞的體內(nèi)特性14造血干細(xì)胞移植進(jìn)展神經(jīng)性疾病 南佛羅里達(dá)醫(yī)學(xué)院和佐治亞醫(yī)學(xué)院的研究人員在2003年美國神經(jīng)年會上報告，將血液中的干細(xì)胞移植到卒中大鼠的大腦中能大大促進(jìn)大腦的功能恢復(fù)。 15造血干細(xì)胞移植進(jìn)展神經(jīng)性疾病 巴西圣保羅大學(xué)的研究小組從30例脊椎損傷所致癱瘓患者的血液中抽取干細(xì)胞，再注入患者脊椎動脈血管，幾個月后，12例患者的癱瘓肢體恢復(fù)了知覺。 16造血干細(xì)胞移植進(jìn)展神經(jīng)性疾病 我們與昆醫(yī)神經(jīng)科學(xué)研究所的合作研究表明，骨髓的CD34+細(xì)胞移植對恢復(fù)全脊髓損

5、傷有治療作用，相關(guān)論文正在審稿之中。17造血干細(xì)胞移植進(jìn)展（HSC）向神經(jīng)細(xì)胞（NC）分化及其治療脊髓損傷的研究 干細(xì)胞移植成為治療神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病唯一可能有效的手段。但是，目前NSC移植還未廣泛用于臨床實踐中，原因主要有3點：NSC取材困難，需做開顱手術(shù)，對患者創(chuàng)傷較大，給患者帶來較大痛苦。再加上神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病患者多為高齡者，故患者已經(jīng)受不住神經(jīng)干細(xì)胞移植。18造血干細(xì)胞移植進(jìn)展（HSC）向神經(jīng)細(xì)胞（NC）分化及其治療脊髓損傷的研究 NSC分離提純技術(shù)尚未成熟，想要得到一定數(shù)量一定純度的NSC困難較大。NSC較脆弱，易受各種因素的影響，即使分離提純出NSC，也很難斷定這些神經(jīng)干細(xì)胞仍具

6、有正常功能和特性，以及將這些“神經(jīng)干細(xì)胞”注入神經(jīng)系統(tǒng)后能否分化為一定數(shù)量的神經(jīng)細(xì)胞。19造血干細(xì)胞移植進(jìn)展（HSC）向神經(jīng)細(xì)胞（NC）分化及其治療脊髓損傷的研究 與NSC相比HSC具有以下優(yōu)點：1）HSC取材容易，無論是骨髓HSC還是外周血HSC的采集都具有創(chuàng)口小、患者痛苦小、安全性高的特點。2）HSC的分離提純技術(shù)已較為成熟，可較容易的得到一定數(shù)量一定純度的HSC。20造血干細(xì)胞移植進(jìn)展（HSC）向神經(jīng)細(xì)胞（NC）分化及其治療脊髓損傷的研究 3）對干細(xì)胞的認(rèn)識首先從HSC開始，因此關(guān)于HSC的研究較NSC要深入得多。4）HSC呈懸浮狀態(tài)，再采集和培養(yǎng)等過程中損傷較小。21造血干細(xì)胞移植進(jìn)展

7、（HSC）向神經(jīng)細(xì)胞（NC）分化及其治療脊髓損傷的研究 臨床價值可將HSC培養(yǎng)分化出“神經(jīng)細(xì)胞” 的特性及功能，將這些“神經(jīng)細(xì)胞”注入神經(jīng)系統(tǒng)病變局部，從而替代或部分替代受損神經(jīng)細(xì)胞的功能治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病。HSC源自患者本人，既可以避免移植后免疫排斥反應(yīng)，年齡的限制也可延長。22造血干細(xì)胞移植進(jìn)展（HSC）向神經(jīng)細(xì)胞（NC）分化及其治療脊髓損傷的研究 預(yù)期研究成果1、骨髓干細(xì)胞可誘導(dǎo)分化為具有神經(jīng)細(xì)胞功能的細(xì)胞2、骨髓干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的神經(jīng)細(xì)胞對脊髓損傷有治療作用 23造血干細(xì)胞移植進(jìn)展第二部分 實驗技術(shù)24造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.問題如何取得干細(xì)胞如何體外培養(yǎng)干細(xì)胞如何保持體外培養(yǎng)干細(xì)胞的生物學(xué)

8、特性25造血干細(xì)胞移植進(jìn)展2.髓造血干細(xì)胞的培養(yǎng)原理骨髓造血干細(xì)胞的體外培養(yǎng)指在模擬體內(nèi)生理環(huán)境等特定的體外條件下，進(jìn)行干細(xì)胞的孵育培養(yǎng)，使之生存并生長。造血干細(xì)胞體外培養(yǎng)呈懸浮狀生長，無需底物支持。1.體外培養(yǎng)原理26造血干細(xì)胞移植進(jìn)展3.動物取材在置備細(xì)胞懸液之前須將目的細(xì)胞所在組織材料分散成單細(xì)胞。機(jī)械分離和酶學(xué)解離是將組織分散成單細(xì)胞最常用的方法。27造血干細(xì)胞移植進(jìn)展3.1細(xì)胞懸液的制備 介紹兩種方法：在無菌條件下利用穿刺法從髂骨抽取骨髓，緩慢加入到比重為1.077g/3的淋巴細(xì)胞分離液中，經(jīng)密度梯度離心吸取白細(xì)胞層，多次離心后可得到骨髓單個核細(xì)胞（BMNC），重新懸浮在含有10U/

9、ml肝素的RPMI-1640液中，制成細(xì)胞懸液。28造血干細(xì)胞移植進(jìn)展3.1細(xì)胞懸液的制備 介紹兩種方法：無菌條件下從髂骨抽取骨髓經(jīng)輸血濾網(wǎng)過濾后，自然沉淀，去除大部分紅細(xì)胞，再以200r/min低速離心，漂洗23次去除血漿，保留有核細(xì)胞。 然后加入到RPMI-1640液中，制成密度為（15）107MNC/ml的細(xì)胞懸液。29造血干細(xì)胞移植進(jìn)展3.2 培養(yǎng)方法兩種常用的干細(xì)胞分離方法:1、免疫親和柱分離法2、免疫磁珠分離法30造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1）免疫親和柱分離法具體方法如下：取收集的單核細(xì)胞置于RPMI 1640培養(yǎng)液中，并加入胎牛血清過夜，以除去貼壁的細(xì)胞，在形成玫瑰花環(huán)的細(xì)胞中直接加入生

10、物素標(biāo)記的抗-CD34單克隆抗體，于4條件下旋轉(zhuǎn)孵育30分鐘，然后用Hanks液清洗。31造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1）免疫親和柱分離法將結(jié)合好的細(xì)胞放入親和層析柱中，通過親和素和生物素的結(jié)合作用，標(biāo)記的細(xì)胞被親和柱吸收，清洗親和柱除去非特異結(jié)合的細(xì)胞，即可獲得CD34細(xì)胞。32造血干細(xì)胞移植進(jìn)展2）免疫磁珠分離法此法特異性高、純度好、簡便快速、可以處理大量的細(xì)胞樣品以滿足臨床移植的需要。33造血干細(xì)胞移植進(jìn)展c 磁珠準(zhǔn)備從被覆綿羊抗小鼠IgG1（Fc）抗體Dynabeads M-450的小瓶中（磁珠密度4108/ml， 30mg/ml），按0.5個磁珠/MNC的比例取出預(yù)計磁珠量，用RPMI/HAS

11、漂洗后將磁鐵置于試管外壁吸引2分鐘，棄去上清液，收集磁珠，加入RPMI/HAS/IG 1ml懸浮磁珠，置于冰浴中，立即使用。34造血干細(xì)胞移植進(jìn)展d 致敏細(xì)胞用CD34單克隆抗體（9C5）按0.5g /106細(xì)胞比例致敏細(xì)胞，MNC濃度為（15）107MNC/ml，混合均勻后置于4的旋轉(zhuǎn)混合器上以4r/min的速度低速轉(zhuǎn)動孵育3060分鐘，用RPMI/HAS清洗細(xì)胞后4低速離心5分鐘，去除未結(jié)合的單克隆抗體，最后將致敏細(xì)胞加入RPMI/HAS中形成細(xì)胞懸液。35造血干細(xì)胞移植進(jìn)展e 混合按磁珠與致敏細(xì)胞0.5:1的比例將致敏細(xì)胞與磁珠結(jié)合，在4旋轉(zhuǎn)混合物器上轉(zhuǎn)動混合30分鐘，用磁鐵在管壁外吸引

12、，收集磁珠-玫瑰花環(huán)形成細(xì)胞，再用RPMI/HAS漂洗，除去非玫瑰花環(huán)形成細(xì)胞。36造血干細(xì)胞移植進(jìn)展3）培養(yǎng)造血干細(xì)胞的常用方法液體懸浮培養(yǎng)法體外集落形成實驗 骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)法 微載體-微囊培養(yǎng)技術(shù)37造血干細(xì)胞移植進(jìn)展4.鑒定結(jié)果 一般采用脾結(jié)節(jié)形成測定法，計數(shù)脾臟的結(jié)節(jié)數(shù)一個造血干細(xì)胞增殖分化成一個集落，通常植入的造血干細(xì)胞數(shù)與生成的脾結(jié)節(jié)數(shù)呈線性相關(guān)。38造血干細(xì)胞移植進(jìn)展4.鑒定結(jié)果 采用造血干細(xì)胞表面標(biāo)志即分化抗原的鑒定造血干細(xì)胞。如CD34分子、血管內(nèi)皮生長因子受體2（VEGFR-2,又稱KDR）CD133（AC133）分子。39造血干細(xì)胞移植進(jìn)展體外細(xì)胞的生長過程體外細(xì)胞培養(yǎng)

13、的過程大致分為原代培養(yǎng)期、傳代期和衰退期三個階段。原代培養(yǎng)期： 細(xì)胞自體內(nèi)新鮮組織取出并在體外培養(yǎng)生長至第一次傳代的時期，約持續(xù)14周。此期細(xì)胞活動較活躍40造血干細(xì)胞移植進(jìn)展體外細(xì)胞的生長過程傳代期： 原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長至一定時間后，達(dá)到較高密度，此時應(yīng)將原代細(xì)胞接種至其他培養(yǎng)皿中，此過程稱為傳代。衰退期： 此期細(xì)胞仍在生存，但增殖很慢或不增殖。細(xì)胞形態(tài)輪廓增強，直至衰退死亡。41造血干細(xì)胞移植進(jìn)展培養(yǎng)細(xì)胞的傳代生長過程細(xì)胞傳一代經(jīng)歷四個階段：滯后期對數(shù)生長期穩(wěn)定期衰退期42造血干細(xì)胞移植進(jìn)展滯后期 包括懸浮期和潛伏期。細(xì)胞的胞質(zhì)收縮，包體呈圓球狀，懸浮于培養(yǎng)基中。經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)，有活力

14、的細(xì)胞開始附著于底物并逐漸延伸，恢復(fù)原來的形態(tài)，但還不分裂增殖。正常細(xì)胞的滯后期約為2496小時。43造血干細(xì)胞移植進(jìn)展對數(shù)生長期細(xì)胞增殖旺盛，開始階段細(xì)胞的增長速率與最初細(xì)胞數(shù)成正比，此時細(xì)胞數(shù)量呈指數(shù)增長。此期持續(xù)時間的長短因細(xì)胞本身的特性和培養(yǎng)條件而異，一般持續(xù)35天。44造血干細(xì)胞移植進(jìn)展穩(wěn)定期此期細(xì)胞雖仍保持分裂增殖能力，但增殖的細(xì)胞數(shù)與死亡的細(xì)胞數(shù)相當(dāng)，從而處于一種動態(tài)平衡的狀態(tài)。45造血干細(xì)胞移植進(jìn)展衰退期處于穩(wěn)定期的細(xì)胞如不傳代或不加入新的培養(yǎng)基，則會進(jìn)入衰退期，逐漸死亡。此期死亡細(xì)胞數(shù)超過分裂細(xì)胞數(shù)，細(xì)胞數(shù)因此逐漸減少。46造血干細(xì)胞移植進(jìn)展培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞周期 G1期 發(fā)生在

15、上一細(xì)胞周期的M期之后，此細(xì)胞周期S期之前，有稱為細(xì)胞分裂后期。在G1期主要發(fā)生與DNA合成前有關(guān)的生化變化。S期 此期主要進(jìn)行DNA的合成，各種細(xì)胞的S期持續(xù)時間的差別較小，一般為68小時。 47造血干細(xì)胞移植進(jìn)展培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞周期 G2期 發(fā)生在DNA合成后或細(xì)胞分裂前，有稱細(xì)胞分裂前期。G2期持續(xù)時間較短，一般為23小時。M期 即細(xì)胞分裂期。處于分裂期的細(xì)胞是評價細(xì)胞增殖和生長能力的參考指標(biāo)。此期持續(xù)時間很短，一般只有12小時48造血干細(xì)胞移植進(jìn)展5. 注意事項污染預(yù)防和處理培養(yǎng)基成分培養(yǎng)基的酸堿度49造血干細(xì)胞移植進(jìn)展5. 注意事項另外 接種細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)生長狀態(tài)。處于靜止期的細(xì)胞在新

16、鮮培養(yǎng)基中開始階段生長緩慢或根本不生長。50造血干細(xì)胞移植進(jìn)展 5. 注意事項細(xì)胞接種前，培養(yǎng)基要預(yù)先加熱至37，培養(yǎng)基的PH用CO2預(yù)先平衡。細(xì)胞的接種密度要大于1105/ml。51造血干細(xì)胞移植進(jìn)展 5. 注意事項攪拌速度在100300r/min的范圍內(nèi)，能夠保持細(xì)胞處于均勻的懸浮狀態(tài)即可。至少每天取樣一次，檢測細(xì)胞的生長狀況和計數(shù)細(xì)胞密度。52造血干細(xì)胞移植進(jìn)展 第三部分 臨床移植53造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.1 移植的基本概念 對患者進(jìn)行超大劑量化療和（或）放療以摧毀患者的造血和免疫功能，同時最大限度的殺滅腫瘤細(xì)胞，然后輸入正常供體的造血干細(xì)胞或預(yù)先采集的患者自體造血干細(xì)胞，以重建患者的造

17、血和免疫功能，稱為造血干細(xì)胞移植技術(shù)。54造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.1 移植的基本概念造血干細(xì)胞主要存在于單個核細(xì)胞中，表達(dá)CD34抗原。CD34+細(xì)胞占單個核細(xì)胞的1%4%。大量研究提示，CD34+HSC源于CD34-HSC，即CD34-細(xì)胞才是真正的造血干細(xì)胞。55造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.2骨髓移植的分類 自體骨髓造血干細(xì)胞移植（AHSCT）.同基因造血干細(xì)胞移植,即單卵孿生同胞（identical twin）供髓。56造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.2骨髓移植的分類 異基因造血干細(xì)胞移植（Allo-HSCT），包括：HLA相合或半相合的同胞供髓；HLA相合或部分相合的相關(guān)供髓；HLA相合或部分相合的無關(guān)

18、供髓。57造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.3骨髓移植前的準(zhǔn)備 最重要的是移植患者的準(zhǔn)備58造血干細(xì)胞移植進(jìn)展 系統(tǒng)檢查及注意事項a原發(fā)病狀況b心，肺，肝，腎功能c糖代謝功能d口腔科檢查此外，應(yīng)去處隱性感染灶，如耳、鼻、喉、肛周等處的病灶。59造血干細(xì)胞移植進(jìn)展 全環(huán)境保護(hù)全環(huán)境保護(hù)（tTEP）包括口服腸道不吸收抗生素（常用抗生素有黃連素、慶、無菌飲食、皮膚清潔消毒和眼、耳、鼻、口腔、臍、陰道等部位的消毒；住空氣層流病房（LAFR）等。60造血干細(xì)胞移植進(jìn)展 全環(huán)境保護(hù)TEP的時間應(yīng)持續(xù)1014天左右，其目的是盡量減少患者體內(nèi)致病菌的負(fù)荷，從而最大限度地降低骨髓移植后感染的發(fā)生率。61造血干細(xì)胞移植進(jìn)展

19、移植前預(yù)防感染的措施清除感染灶及體內(nèi)已存在的病原體，以防預(yù)處理激活體內(nèi)已存在的病原體。a細(xì)菌感染的預(yù)防b真菌感染的預(yù)防c病毒感染的預(yù)防62造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.4 供者的選擇骨髓移植供髓者的選擇關(guān)系到骨髓移植的方法、預(yù)處理方案、移植后處理及預(yù)后等。63造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.4 供者的選擇供受者之間HLA相合與否直接影響著造血干細(xì)胞移植的成敗，所以通過HLA的檢測來篩選供者。64造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.4 供者的選擇HLA基因系統(tǒng)是人類主要組織相容性復(fù)合體。由一系列緊密連鎖的基因坐位所組成的HLA系統(tǒng)構(gòu)成了人體生物學(xué)的“身份證”。65造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.4 供者的選擇個體的免疫活性細(xì)胞均以HLA

20、作為識別“自己”與“非己”的標(biāo)志，從而通過免疫反應(yīng)排除“非己”，保持“自體”的完整性。66造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.5 移植免疫學(xué)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)三大支柱：1、神經(jīng)生物學(xué)：解決生物信息如何傳遞問題2、分子免疫學(xué)：認(rèn)識自己和排斥異己的問題3、分子生物學(xué)：研究分子機(jī)制的方法和工具67造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.6 骨髓造血干細(xì)胞的采集麻醉 抗凝 采髓前準(zhǔn)備 骨髓采集采髓部位為髂后上棘，多點穿刺，分次采取。采集的有核細(xì)胞數(shù)應(yīng)2108/kg，CD34+細(xì)胞應(yīng)2106/kg。1.5骨髓造血干細(xì)胞的采集68造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.7 預(yù)處理移植前的預(yù)處理是指移植前14天到移植時給予患者的化學(xué)藥物治療及放射治療。69造血干細(xì)胞

21、移植進(jìn)展1) 目的最大限度的消滅患者體內(nèi)的異常克隆或腫瘤細(xì)胞，減少復(fù)發(fā)；破壞患者免疫系統(tǒng)，為造血干細(xì)胞的植入提供條件，防止排斥反應(yīng)；清除異常細(xì)胞，為造血干細(xì)胞及基質(zhì)細(xì)胞的植入和增殖提供必要的空間。1) 目的70造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1) 目的最大限度的消滅患者體內(nèi)的異常克隆或腫瘤細(xì)胞，減少復(fù)發(fā)；破壞患者免疫系統(tǒng)，為造血干細(xì)胞的植入提供條件，防止排斥反應(yīng)；清除異常細(xì)胞，為造血干細(xì)胞及基質(zhì)細(xì)胞的植入和增殖提供必要的空間。1) 目的71造血干細(xì)胞移植進(jìn)展 用于消除白血病細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞的措施全身照射（TBI）+化療不含TBI的聯(lián)合化療72造血干細(xì)胞移植進(jìn)展 抗腫瘤化學(xué)藥物 幾乎所有的抗白血病藥物均可用于白

22、血病患者骨髓移植的預(yù)處理73造血干細(xì)胞移植進(jìn)展 用于抑制受者免疫功能的藥物a抗淋巴細(xì)胞球蛋白（ALG或ATG）b全淋巴結(jié)照射（TLI）c最常用藥物有環(huán)孢菌素(CSA)74造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.8 移植并發(fā)癥1) 造血和免疫功能受抑2) 出血性膀胱炎3) 間質(zhì)性肺炎75造血干細(xì)胞移植進(jìn)展1.8 移植并發(fā)癥 4) 肝靜脈閉塞病 5) 移植物抗宿主?。℅VHD） 和移植排斥反應(yīng) 6) 晚期并發(fā)癥76造血干細(xì)胞移植進(jìn)展2骨髓造血干細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用血液病 1、血液腫瘤 白血病2、非血液腫瘤 再生障礙性貧血2骨髓造血干細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用77造血干細(xì)胞移植進(jìn)展2骨髓造血干細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用非血液病 1、實體瘤1）乳腺癌2）小細(xì)胞肺癌3）生殖腺腫瘤