生物制藥中親和層析的類型和應(yīng)用2400字

1、生物制藥中親和層析的類型和應(yīng)用2400字 近年來(lái)，染料配位體已被廣泛用于親和層析，而且已經(jīng)在蛋白質(zhì)純化中獲得了重要的成果，下面是搜集整理的一篇探究親和層析應(yīng)用的論文范文，歡送閱讀參考。1、親和層析應(yīng)用的作用機(jī)理親和層析的原理是將具有特殊構(gòu)造的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中，當(dāng)要被別離的蛋白混合液通過(guò)層析柱時(shí)，與吸附劑具有親和才能的蛋白質(zhì)就會(huì)被吸附而滯留在層析柱中。那些沒(méi)有親和力的蛋白質(zhì)由于不被吸附，直接流出，從而與被別離的蛋白質(zhì)分開(kāi)，然后選用適當(dāng)?shù)南疵撘?，改變結(jié)合條件將被結(jié)合的蛋白質(zhì)洗脫下來(lái)1.這種親和層析洗脫形式已經(jīng)被廣泛應(yīng)用，特別是用在有關(guān)生物醫(yī)學(xué)和藥物分析上。選擇的主要因素是其表現(xiàn)

2、的簡(jiǎn)單、靈敏、較高選擇性。2、親和層析的類型和應(yīng)用2.1凝集素親和層析凝集素是自然界廣泛存在的一大類糖結(jié)合蛋白。它們具有不同的糖結(jié)合專一性。利用天然存在的一些多糖和被固定化的不同糖鏈構(gòu)造的糖蛋白。可以有效地別離純化不同型的凝集素，也可應(yīng)用固定化的凝集素別離純化各種糖蛋白2.2.2硼酸鹽親和層析另一種臨床樣本使用成功的親和層析，以硼酸鹽作為配體，以此被稱為硼酸鹽親和層析。在臨床試驗(yàn)中，通過(guò)糖化血紅蛋白定量測(cè)定用于糖尿病控制，它是最早被確定的技術(shù)之一3.開(kāi)展這種親和層析類型的方法既用到瓊脂糖又用到高效親和層析的介質(zhì)，同時(shí)，其他方法中其它類型的糖蛋白，如糖化白蛋白和一些載脂蛋白，應(yīng)經(jīng)被應(yīng)用。此外，硼

3、酸鹽親和也被用于血紅蛋白(發(fā)現(xiàn)于人血液中是糖化血紅蛋白的根本成分)的分析與測(cè)量4.2.3免疫親和層析免疫親和層析是利用生物體內(nèi)存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)展別離的方法。例如將抗原結(jié)合于親和層析基質(zhì)上，就可以從血清中別離其對(duì)應(yīng)的抗體。親和層析的應(yīng)用主要是生物大分子的別離、純化3.免疫親和層析柱可選擇性吸附樣品液中的鹽酸克倫特羅(一種beta;-興奮劑)，從而對(duì)鹽酸克倫特羅樣品起到特異性純化和富集的作用，樣品過(guò)柱后的洗脫液可結(jié)合液相色譜進(jìn)展準(zhǔn)確定量，也可以結(jié)合ELISA測(cè)試盒和膠體金試紙條進(jìn)展檢測(cè)。親和層析柱使用可以改善信噪比，可進(jìn)步檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度5.2.4金屬螯合層析金屬螯合層析是

4、基于固定化金屬離子與特異性目的組分互相反響，其組分來(lái)自蛋白外表，如氨基酸、多肽類和核酸。此外，關(guān)于氨基酸、組氨酸、色氨酸和半胱氨酸的殘留在結(jié)合蛋白質(zhì)中起到重要作用。金屬螯合層析基質(zhì)是通過(guò)螯合組織將金屬離子被固定化在柱子中，如亞氨基二乙酸、次氨基三乙酸和谷氨酸。如Ni2+、Zn2+、Cu2+和Fe3+這些金屬離子螯合在這些組分之中。它廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥分析，如人銅鋅超氧化物歧化酶的別離、人血漿a2巨球蛋白的純化等等，展示了金屬螯合層析的開(kāi)展前景6.2.5染料配體親和層析染料作為配體的親和層析，具有顯著的親和力。其優(yōu)點(diǎn)是穩(wěn)定、價(jià)格低廉，并且可以與多種類型的酶結(jié)合，但又不被酶所作用7.近年來(lái)，染料配位體

5、已被廣泛用于親和層析，而且已經(jīng)在蛋白質(zhì)純化中獲得了重要的成果。舉兩個(gè)應(yīng)用實(shí)例，一種是酵母中含有NAD酶的別離，其過(guò)程是面包酵母提取液離心取沉淀溶于緩沖液中，再流經(jīng)藍(lán)色交聯(lián)瓊脂糖凝膠柱，經(jīng)過(guò)洗脫得到NAD酶。另一個(gè)是堿性磷酸單酯酶的別離，其過(guò)程是小牛小腸粘膜抽提液上樣活性染料和交聯(lián)瓊脂糖偶聯(lián)的染料層析柱，經(jīng)過(guò)洗滌洗脫得到堿性單酯酶。3、結(jié)論親和層析在生物藥學(xué)和藥物分析領(lǐng)域中，提供了關(guān)于純化別離方面的重要信息。近幾年關(guān)于親和層析的研究報(bào)告顯著增加，通過(guò)對(duì)以上不同類型親和層析的分析，可以看出配體的多樣性擴(kuò)大了醫(yī)藥領(lǐng)域的臨床選擇性，隨著大量的臨床研究，將有更多的生物制品利用層析進(jìn)展別離純化，必將促進(jìn)親

6、和層析得到更深化的研究開(kāi)展。參考文獻(xiàn)：1Hage,D.S.(Eds.).(2022).Handbookofaffinitychromatography.2nded.,CRCPress.2Kimura,K.(2022).ApplicationoflectinaffinitychromatographyandMAL-DI-TOF/MS.Waterresearch,46(17).3Hage,D.S.(1999).Affinitychromatography:areviewofclinicalapplications.Clinicalchemistry,45(5)，593-615.4Li,H.,Liu

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