上師大免疫學細

1、1自然免疫性/先天免疫性/非特異免疫性：機體在接觸外來的侵染物之前，防御機制就已經 存在的特性模式識別受體：主要表達于固有免疫細胞表面、非克隆性分布、可識別一種或多種病原體 相關分子模式的識別分子。有CR3、CR4補體受體，糖結合受體，甘露糖受體、Toll樣受體 等。獲得免疫性/特異免疫性：機體通過抗原誘導獲得免疫應答而產生的對非自身物質的抵抗 性。免疫應答：從抗原刺激作用開始，機體抗原特異性淋巴細胞識別抗原后，發(fā)生一系列變化 （活化，增殖，分化或失去活性）并表現出一定的效應（體液免疫和細胞免疫）。免疫系統(tǒng)構成（填）：免疫組織器官、免疫細胞、免疫分子抗原：是一類能夠誘導機體免疫應答并能與相應抗

2、體或T細胞受體發(fā)生特異反應的物質。天然抗原的類別（填）：細胞、細菌和病毒；蛋白質類抗原；糖類抗原；脂質抗原；核酸 抗原。超抗原：只需極低濃度即可誘發(fā)最大的免疫效應的免疫刺激分子。包括外源性超抗原和內 源性超抗原超抗原的作用機制（簡答）超抗原被T細胞識別之前不需經APC處理，它不是嵌在MHC分子的凹槽中，而是附著于凹 槽的外側，直接與MHC-II類分子a鏈、8鏈的a 1區(qū)、3 1區(qū)的多肽結合槽以外的部位結合， 并以完整蛋白的形式被呈遞給T細胞。作為抗原應具備哪些條件（填、簡）一種物質能否作為抗原，既取決于動物能否對它發(fā)生免疫應答，也取決于抗原物質本身，即 取決于它的組成、大小、形狀等分子理化性質

3、?？乖瓫Q定簇：位于抗原物質分子表面或其他部位的具有一定組成和特殊結構的化學基團。 功能是與免疫系統(tǒng)中淋巴細胞上的受體結合以及與相應的抗體分子結合?？乖瓫Q定簇分類（填空）：順序抗原決定簇、結構抗原決定簇抗體：是一種糖蛋白，存在于血清蛋白的Y -球蛋白組分，能與抗原特異性非公價結合， 引起一系列的生物學效應抗體的基本結構（簡答）由兩條重鏈和兩條輕鏈組成的免疫球蛋白，Ig分子能被蛋白酶解為兩個片段。近N端為Fab 片段能與抗原非共價結合，其氨基酸變異大，稱為可變區(qū)（V區(qū)），可變區(qū)內三個高變區(qū)CDR1， CDR2和CDR3構成抗原結合位。近C端為Fc片段有結合細胞和激活補體等生物學效應功能； 輕鏈和重

4、鏈的可變區(qū)是由一個結構域Vl或Vh形成的，輕鏈的恒定區(qū)由一個結構域CL形成， 而重鏈的恒定區(qū)由3-4結構域，C 1，C 2和R3或C“4構成。C 1和R2之間有鉸鏈區(qū)。H HHHHH15.Ig的種類有哪些？根據什么特性來分類的？各自的功能有何差異？（簡答）根據重鏈類別的不同，抗體可分為IgA,IgD,IgE,IgG,IgM5種同種型和若干亞型，5種免疫球蛋 白在結構和功能上呈現不同的特點。IgA常以二聚體形式存在于分泌液中，參與粘膜抗感染 免疫。IgM常以五聚體形式存在，IgE參與過敏反應。IgG是作用最廣泛，含量最多的抗體， 參與多種免疫反應，還有許多與Ig類似的免疫球蛋白超家族。B細胞的分

5、化發(fā)育過程中，Ig基因發(fā)生了什么變化？（簡答）免疫球蛋白基因由四類多基因片段V,J,D和C區(qū)組成，在胚胎細胞中，這些片段呈分散排列， 在B細胞的發(fā)育過程中，V區(qū)基因發(fā)生V-J或V-D-J重排，與C基因的連接通過轉錄而得到 成熟的mRNA?？贵w多樣性是如何形成的？（簡答）免疫球蛋白的V-J或V-D-J重排的隨機組合及基因重排過程中的連接方式不同，體細胞突變 是造成Ig多樣性的主要來源。體細胞突變和Ig種類切換與淋巴細胞特異性的酶AID有關。體液免疫應答與抗體產生規(guī)律有什么聯系？（簡答）抗體的產生過程就是體液免疫應答的過程，T細胞依賴性抗原能誘導抗體產生的初應答和再 應答，再應答產生抗體的速度，數

6、量和親和力均高于初應答。初應答主要是IgM，再應答主補體系統(tǒng)：由一系列蛋白分子組成，能參與破壞或者清除那些與抗體結合的抗原或細胞。20.補體系統(tǒng)的比較（簡、填）替換途役A補體新溶麗！Ag-AbCoI趴島B及多糖類物質與的樸體成除C1-G9C4, C2-C9因乎，C5-C3新需的二價高子Ca2+,C舟梅耕Y3輯化酶G4b細以因C5傳化酶C4b2a3brabd5bJbn作用效慰參與體液免疫鑼寫體液艘善與伸液免暖有瞥#ft無特昇性天特岸性補體反應的調控（填空）血清中的補體活化調節(jié)蛋白：C1NH、S蛋白、I因子、H因子、過敏毒素鈍化因子、C4bp。 細胞膜上的調節(jié)蛋白：促衰變因子（DAF）、膜輔助蛋白

7、（MCP）、同源限制因子（HRF）、溶 膜抑制劑（CD59）。補體受體：CR1、CR2、CR3、CR4、C3a/C4a-R、C5a-R、C3e-R。補體的生物活性功能（簡答）（1）免疫粘附和調理：Ab-Ag復合物黏附于紅細胞，血小板，增加復合物的敏感性，增加 粒細胞和巨噬細胞的吞噬作用。（2）膜損傷：在靶細胞膜上形成非專一性離子通道，引起紅細胞溶解，有核細胞通透性增 加，G-細菌溶菌。（3）過敏毒素：使肥大細胞釋放組胺及其他作用于血管的介質，增加血管的通透性（4）趨化性和化學激動作用：通過趨化性將多形核白細胞吸引到炎癥部位，通過化學激動 作用增強這些細胞活性。淋巴細胞循環(huán)（簡答）淋巴細胞在淋巴

8、組織之間和血液中反復循環(huán)交換就是淋巴細胞的循環(huán)。小的B細胞和T細胞在沒受到抗原刺激之前不表現免疫效應，為“處女”淋巴細胞，當其離 開中樞淋巴器官，通過血液進入外周淋巴組織。進入淋巴結的過程是借助于細胞表面的歸巢 受體，可以識別淋巴結皮質部的毛細血管后小靜脈上的配體，從而使淋巴細胞得以通過血管 的內皮細胞而到達淋巴結的皮質部，T細胞進入到副皮質區(qū)。淋巴結中許多抗原呈遞細胞， 包括樹突細胞、巨噬細胞及來自皮膚的朗格漢斯細胞由輸入淋巴管進入淋巴結。淋巴細胞從 皮質進入髓質，再通過薄壁的輸出淋巴管離開髓部回到血管。小的淋巴管匯集到大的淋巴管， 最后匯集入淋巴胸導管，混合的淋巴與血液通過腔靜脈回到心臟，

9、開始下次的循環(huán)。淋巴細胞循環(huán)的意義（簡答）（1）增加了淋巴細胞與抗原、侵入物等接觸的機會，被活化的淋巴細胞變?yōu)樾毎麉?與免疫應答。（2）能使B、T細胞和記憶細胞很快地分布全身的組織和器官怎樣區(qū)分幼B細胞和成B細胞（實驗設計）幼B細胞表達IgM，成B細胞表達IgM和IgD，用GFP標記的抗IgD抗體處理細胞。B淋巴細胞的表面標志（填、簡）BCR、CD40 分子、B7 分子、MHC-I、MHC-II 等中樞淋巴器官和外周淋巴器官在功能上有何重要區(qū)別？（簡答）中樞淋巴器官是淋巴細胞的產生和發(fā)育的場所，有骨髓，胸腺，法氏囊（鳥類），外卜周淋巴 是成熟T、B淋巴細胞等免疫細胞定居的場所，也是產生免疫

10、應答的部位。有淋巴結、脾及 與黏膜有關的淋巴組織和皮下組織等。MHC-I類分子和MHC-II類分子的結構功能及表達狀況有那些不同？（簡）（1）MHC-I類分子含有兩條多肽鏈a鏈（五個結構域）和8鏈，其中a 1和a 2區(qū)共同形成 了一個寡肽抗原結合槽，結合槽很小。其主要功能是遞呈內源性抗原給CD8+TC細胞亞群， 呈現MHC-I類識別。MHC-I類分子表達于所有有核細胞表面。（2）MHC-II類分子由兩條非共價相連的。、8多肽鏈構成，a 和8 1構成a螺旋形成抗原 肽結合槽，結合槽兩端開放較大。其主要功能是將外源性抗原呈遞給CD4+Th細胞亞群，呈 現MHC-II類限制性識別。HLA-1類和II

11、分子的分型檢測方法有何不同？為什么？（實驗題）（1）HLA-I類是依據特異性抗體介導的補體系統(tǒng)對靶細胞溶解的原理進行的。實驗必須有 HLA標準抗血清，這些標準分型血清中抗體與待檢淋巴細胞相應的HLA結合，使抗體分子的 空間構型發(fā)生改變而暴露補體結合位，此時加入的補體被活化使淋巴細胞膜上形成孔道而導 致細胞死亡。此后加入臺盼藍或伊紅，檢測死亡細胞百分率。受損或死亡細胞被染色，此為 細胞毒陽性。提示待檢個體HLA抗原型與標準HLA相一致。如果細胞不被染色，則提示為 陰性，說明HLA型別與標準血清不一致。（2）HLA-II表達于B淋巴細胞以及抗原呈遞細胞表面，因此HLA-II檢測前必須先分離B細 胞

12、，HLA- I類抗原表達于所有的有核細胞，所以B細胞表面除有HLA-I類抗原外，還有I 類A、B、C抗原。所用的DR、DQ標準分型血清先用多個個體血小板吸附除去HLA-I類抗 體。其余操作與HLA-I相同。多克隆抗體制備方案(實驗題)抗原制備與純化：通過基因工程等方式獲取抗原蛋白，并通過凝膠過濾，SDS等 方法純化蛋白，保證最后蛋白含量在10mg以上，并配成溶液使最終蛋白濃度為1mg/ml。佐劑制備：取西咪替丁晶體1g溶于0.9%NaCl溶液中，制成1mg/ml的西咪替丁佐劑。動物免疫：取兩只健康成年雄性家兔，用剪刀剪去家兔兩后腳掌的部分毛，以酒精及 碘酒消毒皮膚；第一次免疫：用2ml注射器吸

13、取抗原1ml，并于每側腳掌皮下各注射0.5ml,同時于每側腳掌 皮各注射0.5ml西咪替丁佐劑；第二次免疫：間隔2周，與第一次免疫方法相同的分別免疫兩只家兔。第三次免疫：間隔2周，用2ml注射器吸取抗原1ml，并于每側腳掌皮下各注射0.5ml。間隔10天，從耳靜脈采血1ml，分離血清，以酶聯反應吸附法測效價，若達到1:16以上， 則可以采血；若未達到1:16則可以再次免疫，若想得到高親和性力抗體，可用抗原液注射 免疫。即于1周內注射3次，每次每側分別注射0.1、0.3、0.5ml。間隔1周再試血。如效 價達到要求應立即放血。頸動脈放血：將兔仰臥，固定于兔臺，剪去頸部的毛，切開皮膚，暴露頸動脈，

14、插管， 放血。放血過程中要嚴格按無菌要求進行。分離血清與保存：將三角燒瓶的血置37溫箱1h，再置4C冰箱內3h。待血液凝固 血塊收縮后，用毛細滴管吸取血清。于3000rpm離心15min，取上清加入于飽和硫酸銨溶液 然后透析除去鹽離子，用含1%BSA對抗體進行適當稀釋并加入等量的甘油，然后分裝放置 于-20 C冰箱內冷凍。直接/間接雙抗夾心法檢測未知抗原(細胞凋亡)。(實驗題)包被：用pH9.0、0.05M碳酸緩沖液將鼠抗組蛋白抗體稀釋至10mg/L.在每個聚苯乙烯 板的孔中加0.1ml，4C過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌液洗三次，每次3分鐘(簡稱 洗滌，下同)。封閉：用5%的脫脂奶粉加入到

15、酶標記板中，封閉酶標記板后，孵育2h。洗滌：棄去孔內液體，用洗滌液洗三次，控干。加樣：加一定稀釋的裂解液上清液0.1ml于上述已包被的反應孔中，置37C孵育1h。 然后洗滌，陽性對照用紫外光照射的凋亡細胞，陰性對照用未免疫兔的血清，空白組加蒸餾 水。加第一抗體：于各反應孔中，加鼠抗DNA抗體，置37C孵育1h，然后洗滌。或加酶標抗體：于各反應孔中，加辣根過氧化物酶酶標的鼠抗DNA抗體，置37C孵育1h， 然后洗滌。加酶標第二抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的辣根過氧化物酶標的羊抗鼠抗抗體 0.1mloS 37C孵育1h，洗滌。(直接法省略此步驟)加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底

16、物溶液。.，置37C孵育20 分鐘。終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05mlo結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越 強，陰性反應為無色或極淺。依據所呈顏色的深淺，以“+”、-”號表示。也可測A值：在 ELISA讀數儀上，于波405nm照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1 倍，即為陽性。凝集反應測效價（實驗題）（1）制備紅細胞懸浮液：a）配制100ml3.8%檸檬酸溶液，置于250ml燒杯中；b）抽取動物血清，置于含3.8%檸檬酸適量的5ml離心管中，30005000rpm離心5min；c）棄上清，用生理鹽水重懸，30005000

17、rpm離心5min；d）棄上清，用生理鹽水重懸至3%5%懸浮液備用。（2）配制生理鹽水：準確稱取1.8gNaCl溶于200ml容量瓶中，配制成0.9%的生理鹽水。（3）倍比稀釋抗血清，做5個稀釋度：a）用移液槍的吸打方式依次做1:2,1:4,1:8,1:16,1:325個稀釋度；b）在載玻片上做相應標記，并滴加適量不同稀釋度的抗血清于相應載玻片上，并設置陽性 對照（未稀釋抗血清）和陰性對照（蒸餾水）。（4）用不同稀釋度的抗血清觀察凝集現象：在不同稀釋度的抗體溶液中滴加1滴紅細胞懸液，靜置15min后，觀察現象。免疫雙擴散測效價（實驗題）（1）配置0.9%NaCl溶液；（2）用0.9%NaCl溶

18、液配置1%瓊脂凝膠；（3）用微波爐加熱瓊脂使之溶化，倒入培養(yǎng)皿制成瓊脂平板并打孔，使中央孔圓心與周圍 各孔圓心直徑為1cm；（4）倍比稀釋抗體溶液，做1:2,1:4,1:8,1:16,1:32 5個稀釋度；（5）在中央孔加抗原，在四周五個孔中加不同稀釋度的抗體；（6）將瓊脂平板放入濕盒，37孵育24小時后觀察實驗結果。主動免疫：抗原刺激一個個體而產生的免疫性，受到免疫的個體再遇到相同的抗原刺激 便會作出強烈的免疫應答。被動免疫：一種特異性抗體人工轉移給未受到過某病毒侵染的個體，使該個體獲得抗該 病毒的能力。隨著抗體在體內被代謝消失，免疫力也消失。過繼免疫：通過轉移免疫的淋巴細胞到一個未免疫的個

19、體，使其與供體具有同樣特異的 免疫性。無應答：抗原特異性的免疫性的免疫耐受現象，指淋巴細胞雖存在，但受到了抑制，對 免疫原的再刺激不能作出反應。免疫耐受：抗原特異性的免疫不應答現象，具有抗原特異型性、可誘導性、可轉移性和 非遺傳性等特點，是免疫調控的方式之一。動物免疫結果分析（細菌免疫應答）。（大題）免疫注射側淋巴結出現腫大，并呈現黃色且充血，免疫注射異側也出現腫大現象，但是較免 疫注射側小，較未免疫動物同側大。解釋：Td抗原感染0-4h，開始非特異性應答，如機體皮膚表面的自然屏障，吞噬細胞的吞 噬等；4-96h，誘導效應細胞的識別與活化，包括吞噬細胞和腸上皮細胞的模式識別受體Toll 樣受體

20、TLR-4等的識別；適應免疫應答發(fā)生于細菌感染后96h?？乖浛乖f呈細胞表面 MHC-II分子遞呈，并將抗原分解成抗原肽后與T細胞表面的TCR結合，活化第一信號，抗 原遞呈細胞表面B7分子與T細胞表面CD28分子結合活化第二信號，然后通過白細胞介素1 和2活化第三信號。經Ras-MAP激酶途徑、蛋白激酶G與鈣調磷酸酶途徑以及蛋白激酶途 徑，Th細胞被激活后，開始增殖并表達膜分子CD40L等，CD40L與巨噬細胞、B細胞等表面 的CD40結合并使其活化，促進B細胞增殖分化成漿細胞并使其分泌抗體。發(fā)生中和抗原反 應，抗體Fab區(qū)與抗原決定簇結合，Fc端與吞噬細胞Fc受體結合，從而將抗原吞噬清除；

21、 發(fā)生抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用；還可以活化補體的旁路途徑，通過C3等成分形成 穩(wěn)定的C3bBb復合物可催化產生更多C3b分子，構成了旁路途徑的反饋性放大機制。也可 引起細胞免疫應答，產生致敏淋巴細胞。Ti抗原在刺激B細胞產生抗體時不需要T細胞輔助， 只引起體液免疫應答。脾主要是對血液帶來的抗原進行應答的場所，而淋巴結是對淋巴中抗原的應答場所。淋巴結 內帶有生發(fā)中心的次級濾泡聚集，有處于分裂休止狀態(tài)的B細胞，但是一旦受到抗原刺激， B細胞便母細胞化，母細胞化的細胞比其他淋巴細胞大，因此表現出腫大現象。免疫異側淋 巴結也出現腫大是因為抗原從注射側經過毛細淋巴管部分進入毛細血管到達注射異側，并

22、產 生免疫應答。病毒的特異性免疫應答過程（大題）病毒主要引起宿主的細胞免疫應答，也可引起體液免疫應答。體液免疫：病毒侵入機體，首先要突破皮膚和黏膜保護層，并被吞噬細胞所吞噬，活化T 細胞活化的三信號激活T細胞。T細胞活化信號傳導至巨噬細胞、B細胞，并促進B細胞增 殖分化成漿細胞并使其分泌抗體。產生體液免疫應答效應：中和抗原；抗體依賴的細胞介導 的細胞毒作用ADCC和抗體介導的補體依賴的細胞毒作用CDC。細胞免疫：病毒通過宿主蛋白合成工廠合成蛋白（內源性抗原），被泛素化酶作用并進入蛋 白酶體水解成8-11肽，通過抗原肽運載體TAP運送至MHC-I類分子并與其結合，被CD8+殺 傷性細胞表面TCR

23、識別和結合，在協同刺激信號B7-CD28分子的協同作用下可激活前體Tc 細胞。巨噬細胞分泌的IL-1激活T細胞表面IL-2受體，CD4+Th細胞分泌IL-2等細胞因子對 Tc細胞增殖、分化、成熟至關重要。前體Tc細胞活化后，細胞內合成顆粒酶、穿孔素等， 導致靶細胞裂解，胞內大分子流出，最后死亡，而Tc自身表面有一層保護蛋白，從而免受 PFP的傷害。Tc除直接殺傷作用外，在病毒抗原的刺激下，釋放多種淋巴因子，擴大和加強 非特異性免疫和特異性免疫。41 .正選擇：CDI+和CD8+的雙正T細胞TCR基因發(fā)生重排時，如果重排的TCR不能與MHC 匹配，則不被選擇，并發(fā)生程序性細胞死亡的過程。負選擇：

24、CD4+或CD8+的單正T細胞具有與自身MHC-肽結合反應潛能的T細胞克隆發(fā)生 凋亡。自身反應性T細胞克隆刪除的過程?；钜呙纾喝斯ざㄏ蜃儺惢驈淖匀唤绾Y選獲得毒力減弱或基本無毒的病原微生物制成的預 防制品。死疫苗：用物理或化學方法將標準微生物株殺死滅活而制成的預防制劑。多聯多價疫苗：為減少注射時的痛苦，將多種疫苗混合在一起的疫苗。詳細敘述四種超敏反應及其機制(簡答)1型超敏反應是已免疫的機體在再次接觸相同抗原時所發(fā)生的反應。其特點是：反應 迅速、強烈、消退亦快，通常不遺留組織損傷，其發(fā)病有明顯的個體差異。機體接受變應原刺激后，有些個體在體內產生相當量的IgE類抗體。IgE具有親細胞的特性， 能與肥大細胞和嗜堿性粒細胞上的IgE的Fc結合。當相同變應原再次入侵時，變應原與上 述細胞表面的IgE特異地結合，所形成的變應原-IgE復合物能激活肥大細胞和嗜堿性粒細胞 使之脫顆粒。從被排出的顆粒中和細胞內釋放出一系列生物活性介質，如組胺、白三烯等， 引起毛細血管擴張，血管通透性增加等。11型超敏反應是抗體(IgG、IgM)直接作用于相應的細胞或組織上的抗原，在補體、 巨噬細胞和K細胞參與下，造成損傷的反應，所以此型超敏反應也稱細胞毒型。II型超敏反應的機制有：抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用，