藥代動(dòng)力學(xué)研究與生物的等效性試驗(yàn)設(shè)計(jì)基礎(chǔ)

1、藥代動(dòng)力學(xué)研究與生物的等效性試驗(yàn)設(shè)計(jì)基礎(chǔ)第一講 化學(xué)藥物臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則一、概述二、生物樣品分析方法的建立和確證三、具體內(nèi)容四、臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究與合理用藥一、概 述 新藥的臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究旨在闡明藥物在人體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄的規(guī)律。對藥物上述處置過程的研究，是全面認(rèn)識人體與藥物間相互作用不可或缺的重要組成部分；既是臨床制定合理用藥方案、亦是個(gè)體化藥物治療的科學(xué)依據(jù)。 在藥物臨床試驗(yàn)階段，創(chuàng)新藥物的臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究主要涉及如下內(nèi)容：1、健康志愿者藥代動(dòng)力學(xué)研究2、藥物相關(guān)適應(yīng)癥患者的藥代動(dòng)力學(xué)研究3、特殊人群藥代動(dòng)力學(xué)研究4、藥代動(dòng)力學(xué)與藥效動(dòng)力學(xué)的相關(guān)性研究二、生物

2、樣品分析方法的建立和確證（一）常用分析方法（1）色譜法：氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、色譜質(zhì)譜聯(lián)用法（LCMS、LC-MS-MS、GC-MS、GC-MS-MS）等，可用于大多數(shù)藥物的檢測；（2）免疫學(xué)方法：放射免疫分析法、酶免疫分析法、熒光免疫分析法等，多用于蛋白質(zhì)多肽類物質(zhì)檢測；（3）微生物學(xué)方法:可用于抗生素藥物的測定。（二）方法學(xué)確證一般應(yīng)進(jìn)行以下幾方面的考察：1、特異性2、標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量范圍3、定量下限4、精密度與準(zhǔn)確度5、樣品穩(wěn)定性6、提取回收率7、微生物學(xué)和免疫學(xué)分析8、方法學(xué)質(zhì)控 &整個(gè)分析過程應(yīng)當(dāng)遵從預(yù)先制訂的實(shí)驗(yàn)室SOP以及GLP原則。（三）分析數(shù)據(jù)的記錄與

3、報(bào)告提交提交的數(shù)據(jù)至少包括： 1、方法建立數(shù)據(jù) 2、樣品分析數(shù)據(jù) 3、其他相關(guān)信息三、具體內(nèi)容（一）健康志愿者藥代動(dòng)力學(xué)研究1、單次給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究受試者的選擇:健康，男、女各半，在1845 歲，自愿參加試驗(yàn)，并簽訂書面知情同意書。受試者例數(shù)：每組812 例對試驗(yàn)藥物的要求：試驗(yàn)藥品應(yīng)當(dāng)在符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范條件的車間制備，并經(jīng)檢驗(yàn)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并有專人保管，記錄藥品使用情況。 藥物劑量: 一般選用低、中、高三種劑量。劑量的確定主要根據(jù)期臨床耐受性試驗(yàn)的結(jié)果，并參考動(dòng)物藥效學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)及毒理學(xué)試驗(yàn)的結(jié)果，以及經(jīng)討論后確定的擬在期臨床試驗(yàn)時(shí)采用的治療劑量推算。研究步驟：采樣點(diǎn)的研究：服藥

4、前采空白血樣品，在吸收分布相至少需要23 個(gè)采樣點(diǎn)，平衡相至少需要個(gè)采樣點(diǎn)，消除相至少需要6 個(gè)采樣點(diǎn)。一般不少于11 個(gè)采樣點(diǎn)。應(yīng)有35 個(gè)消除半衰期的時(shí)間，或采樣持續(xù)到血藥濃度為CMAX 的1/101/20藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算: 使用藥代動(dòng)力學(xué)軟件如WINNONLIN、NONMEN、3P87(3P97)、PKBP-N1、NDST 及ABE，繪制各受試者的藥-時(shí)曲線及平均藥-時(shí)曲線，進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算，求得藥物的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù).&受試者的選擇標(biāo)準(zhǔn)、受試者例數(shù)、試驗(yàn)藥物的要求同單次給藥&試驗(yàn)藥物劑量&研究步驟&采樣點(diǎn)的確定& 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算2.多次給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究3.進(jìn)食對口

5、服藥物制劑藥代動(dòng)力學(xué)影響的研究受試者例數(shù)：每組1012 例。藥物劑量及給藥途徑：同擬定的期臨床試驗(yàn)單次給藥。進(jìn)食試驗(yàn)餐的方法：試驗(yàn)餐要在開始進(jìn)食后30 分鐘內(nèi)吃完。并且在兩個(gè)試驗(yàn)周期應(yīng)保證試驗(yàn)餐的配方一致4.藥物代謝產(chǎn)物的藥代動(dòng)力學(xué)研究5.藥物藥物的藥代動(dòng)力學(xué)相互作用研究（二）患者藥代動(dòng)力學(xué)研究 藥物在相應(yīng)患者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究，包括單次給藥或和多次給藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究，試驗(yàn)設(shè)計(jì)除受試者為相應(yīng)患者外，其它試驗(yàn)條件和要求均與健康志愿者臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究相同。（三）特殊人群的藥代動(dòng)力學(xué)研究&肝功能損害患者的藥代動(dòng)力學(xué)研究&腎功能損害患者的藥代動(dòng)力學(xué)研究&老年人藥代動(dòng)力學(xué)研究&兒科人群藥代動(dòng)力學(xué)研

6、究（四）不同個(gè)體、種族的藥代動(dòng)力學(xué)研究（五）臨床藥代動(dòng)力學(xué)與藥效動(dòng)力學(xué)的相關(guān)性研究第二講 化學(xué)藥物制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術(shù)指導(dǎo)原則一、BA和BE基本概念二、BA和BE 研究方法三、BA和BE研究具體要求四、特殊制劑生物利用度（BIOAVAILABILITY BA）:BA）：是指藥物或藥物活性成分從制劑釋放吸收進(jìn)入全身循環(huán)的程度和速度。生物等效性（BIOEQUIVALENCE BE）:是指藥學(xué)等效制劑或可替換藥物在相同試驗(yàn)條件下，服用相同劑量，其活性成分吸收程度和速度的差異無統(tǒng)計(jì)意義。一、基本概念原創(chuàng)藥：是指已經(jīng)經(jīng)過全面的藥學(xué)、藥理學(xué)和毒理學(xué)以及臨床研究數(shù)據(jù)證實(shí)其安全有效性并首次被

7、批準(zhǔn)上市的藥品藥學(xué)等效性：如果兩藥品含有相同量的同一活性成分，具有相同的劑型，符合同樣的或可比較的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，則可以認(rèn)為他們是藥學(xué)等效的。治療等效性：如果兩制劑含有相同活性成分，并且臨床上顯示具有相同的安全性和有效性，可以認(rèn)為兩藥具有治療等效性基本相同藥物：如果兩個(gè)制劑具有相同數(shù)量且符合同一質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的活性成分，具有相同劑型，并且經(jīng)過證明具有生物等效性,則兩個(gè)制劑可以認(rèn)為是基本相同藥物。生物利用度（BA）和生物等效性（ BE ）的聯(lián)系和區(qū)別BA 和BE 均是評價(jià)制劑質(zhì)量的重要指標(biāo)BA 強(qiáng)調(diào)反映藥物活性成分到達(dá)體內(nèi)循環(huán)的過程，是新藥研究過程中選擇最佳給藥途徑和確定用藥方案(如給藥劑量和給藥間隔)的重

8、要依據(jù)之一。BE 則重點(diǎn)在于以預(yù)先確定的等效標(biāo)準(zhǔn)和限度進(jìn)行的比較，是保證含同一藥物活性成分的不同制劑質(zhì)量一致性的依據(jù)，是判斷后研發(fā)產(chǎn)品是否可替代已上市藥品使用的依據(jù)。二、生物等效性研究的方法藥代動(dòng)力學(xué)研究藥效動(dòng)力學(xué)研究臨床試驗(yàn) 體外研究三.BA和BE研究具體要求 （一）生物樣本分析方法的建立和確證（1）色譜法（2）免疫學(xué)方法（3）微生物學(xué)方法2. 方法學(xué)確證特異性標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量范圍定量下限 精密度與準(zhǔn)確度 樣品穩(wěn)定性提取回收率 微生物學(xué)和免疫學(xué)方法確證3方法學(xué)質(zhì)控每個(gè)分析批生物樣品測定時(shí)應(yīng)建立新的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并隨行測定高、中、低三個(gè)濃度的質(zhì)控樣品。每個(gè)濃度至少雙樣本，并應(yīng)均勻分布在未知樣品測試順

9、序中。當(dāng)一個(gè)分析批中未知樣品數(shù)目較多時(shí)，應(yīng)增加各濃度質(zhì)控樣品數(shù)，使質(zhì)控樣品數(shù)大于未知樣品總數(shù)的5%。質(zhì)控樣品測定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于15%，低濃度點(diǎn)偏差一般應(yīng)小于20%，最多允許1/3 不在同一濃度的質(zhì)控樣品結(jié)果超限。濃度高于定量上限的樣品，應(yīng)采用相應(yīng)的空白介質(zhì)稀釋后重新測定。對于濃度低于定量下限的樣品，在進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)分析時(shí)，在達(dá)到CMAX以前取樣的樣品應(yīng)以零值計(jì)算，在達(dá)到CMAX以后取樣的樣品應(yīng)以無法定量（NOT DETECTABLE, ND）計(jì)算，以減小零值對AUC計(jì)算的影響4分析數(shù)據(jù)的記錄與報(bào)告提交至少應(yīng)當(dāng)提交的數(shù)據(jù)包括：方法建立數(shù)據(jù)樣品分析數(shù)據(jù)項(xiàng)目編號、分析方法編號、分析方法類型、分

10、析方法確證進(jìn)行簡化的理由、以及相應(yīng)的項(xiàng)目計(jì)劃編號、標(biāo)題等相關(guān)信息。1.設(shè)計(jì)方法交叉設(shè)計(jì)是目前應(yīng)用最多最廣的方法,對每位受試者都采取自身交叉對照，可以將制劑因素對藥物吸收的影響與其他因素區(qū)分開來，減少了不同試驗(yàn)周期和個(gè)體差異對試驗(yàn)結(jié)果的影響。而對于某些高變異性的藥物,可能應(yīng)采用重復(fù)設(shè)計(jì),對同一受試者兩次接受同一制劑時(shí)可能存在的個(gè)體內(nèi)差異進(jìn)行測定。（二） 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與操作2.受試者的選擇受試者入選條件：一般情況應(yīng)選擇男性健康受試者。特殊作用的藥品，則應(yīng)根據(jù)具體情況選擇適當(dāng)受試者。受試者例數(shù)：18-24 例可滿足大多數(shù)藥物對樣本量的要求，但對某些變異性大的藥物可能需要適當(dāng)增加例數(shù)。受試者分組：隨機(jī)方法

11、分組，各組間應(yīng)具有可比性，兩組例數(shù)最好相等。倫理學(xué)要求：須提供倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)書，受試者簽署知情同意書。3.受試制劑和參比制劑受試制劑，應(yīng)為符合臨床應(yīng)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的放大產(chǎn)品。應(yīng)提供該制劑的體外溶出度、穩(wěn)定性、含量或效價(jià)測定、批間一致性報(bào)告等供試驗(yàn)單位參考。個(gè)別藥物尚需提供多晶型及光學(xué)異構(gòu)體的資料。參比制劑和受試制劑均應(yīng)注明研制單位、批號、規(guī)格、保存條件、有效期。參比制劑和受試制劑含量差別不能超過5%。試驗(yàn)結(jié)束后受試制劑和參比制劑應(yīng)保留足夠長時(shí)間直到產(chǎn)品批準(zhǔn)上市以備查。4.給藥劑量給藥劑量一般應(yīng)與臨床單次用藥劑量一致，受試制劑和參比制劑最好應(yīng)用相等劑量。在某些情況下可能需要考慮進(jìn)行多次給藥研究，如

12、：（1）受試藥品單次服用后原形藥或活性代謝物濃度很低，難以用相應(yīng)分析方法精密測定血藥濃度時(shí)；（2）受試藥的生物利用度有較大個(gè)體差異；（3）藥物吸收速度有較大差異；（4）緩控釋制劑。5取樣在血藥濃度一時(shí)間曲線各時(shí)相及預(yù)計(jì)達(dá)峰時(shí)間前后應(yīng)有足夠采樣點(diǎn)，使血藥濃度曲線能全面反應(yīng)藥物在體內(nèi)處置的全過程。當(dāng)受試藥不能用血藥濃度測定方法進(jìn)行生物利用度檢測時(shí)，若該藥原形或活性代謝物主要由尿排泄，可以考慮尿藥法測定。一些前體藥物在體內(nèi)迅速代謝無法測定生物樣品中原形藥物，可采用測定生物樣品中相應(yīng)活性代謝物濃度的方法，進(jìn)行生物利用度和生物等效性試驗(yàn)。6.藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算一般用非房室數(shù)學(xué)模型分析方法來估算藥代動(dòng)力學(xué)

13、參數(shù)7. 研究過程標(biāo)準(zhǔn)化整個(gè)研究過程應(yīng)當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)化，以使得除制劑因素外，其他各種因素導(dǎo)致的體內(nèi)藥物釋放吸收差異減少到最小。（三） 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析 1.數(shù)據(jù)表達(dá)2.藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)3.統(tǒng)計(jì)分析 （對數(shù)轉(zhuǎn)換、等效判斷標(biāo)準(zhǔn))4.群體生物等效性和個(gè)體生物等效性 （四）結(jié)果的評價(jià) 結(jié)果的評價(jià)應(yīng)結(jié)合研究目的出發(fā)，進(jìn)行生物等效性評價(jià)的目的是保證臨床用藥的可互換性，進(jìn)行相對生物利用度研究，則主要分析獲得的相對生物利用度數(shù)值進(jìn)一步確定新劑型的臨床使用劑量，并非一定要求等效。 （五）提交臨床報(bào)告內(nèi)容（1）實(shí)驗(yàn)?zāi)康?（2）生物樣本分析方法的建立和考察的數(shù)據(jù)，提供必要的圖譜；（3）詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作方法;（4）原始測

14、定未知樣品濃度全部數(shù)據(jù)，每個(gè)受試者藥代參數(shù)和藥時(shí)曲線;（5）采用的數(shù)據(jù)處理程序和統(tǒng)計(jì)分析方法以及詳細(xì)統(tǒng)計(jì)過程和結(jié)果；（6）服藥后的臨床不良反應(yīng)觀察結(jié)果，受試者中途退出和脫落記錄及 原因；（7）生物利用度或生物等效性結(jié)果分析以及必要的討論；（8）參考文獻(xiàn)。五、特殊制劑1.口服緩控釋制劑 單次給藥試驗(yàn)旨在比較受試者于空腹?fàn)顟B(tài)下服用緩釋、控釋受試制劑與參比制劑的吸收速度和吸收程度的生物等效性，確認(rèn)受試制劑的緩釋、控釋藥代動(dòng)力學(xué)特征。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本同普通制劑.多次給藥試驗(yàn)旨在比較緩釋、控釋受試制劑與參比制劑多次連續(xù)用藥達(dá)穩(wěn)態(tài)時(shí)，藥物的吸收程度、穩(wěn)態(tài)血藥濃度和波動(dòng)情況。給藥方法：應(yīng)提供的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)與數(shù)據(jù)：（1）各受試者緩釋、控釋受