探索淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用-供參考

1、 探究淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用1、實驗?zāi)康?（1）初步學會探索酶催化特定化學反應(yīng)的方法。 （2）探索淀粉酶是否只能催化特定的化學反應(yīng)。 2、實驗原理 淀粉和蔗糖都沒有還原性,也就是都不能使斐林試劑還原,所以都不能與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)。唾液淀粉酶將淀粉水解成的麥芽糖則具有還原性,能夠使斐林試劑還原,生成磚紅色的沉淀。蔗糖水解產(chǎn)生的葡萄糖和果糖都具有還原性,但唾液淀粉酶不能將蔗糖水解。 試驗中可以用菊糖代替蔗糖。這是因為菊糖是由多個果糖分子縮合而成的，與淀粉同屬于多糖，用菊糖與淀粉進行對比實驗，更具有說服力。 3、實驗材料 質(zhì)量分數(shù)分別為3%的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液；質(zhì)量分數(shù)為2%的新鮮淀粉酶

2、（化學試劑商店有售）溶液。 4、試劑與儀器 斐林試劑（也可以用班氏試劑）試管、大燒杯、量筒、滴管、溫度計、試管夾、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、火柴。 5、實驗方法與步驟 （1）取兩支潔凈的試管，編上號，然后向1號注入2mL可溶性淀粉溶液和2mL新鮮淀粉酶溶液。向2號注入2mL蔗糖溶液和2mL新鮮淀粉酶溶液。 （2）輕輕振蕩這兩支試管，使試管內(nèi)的液體混合均勻，然后將試管的下半部浸到60左右的熱水中，保溫5min。 （3）取出試管，各加入2mL斐 林試劑（邊加入斐林試劑，邊輕輕振蕩這兩支試管，以便使試管內(nèi)的物質(zhì)混合均勻）。 （4）將兩支試管的下半部放進盛有熱水的大燒杯中,用酒精燈加熱,煮沸并保持1mi

3、n。 （5）觀察并記錄兩支試管內(nèi)的變化 6、注意事項 做好本實驗的關(guān)鍵是蔗糖的純度和新鮮程度。這是因為蔗糖是非還原性糖，如果其中混有少量的葡萄糖或果糖，或蔗糖放置久了受細菌作用部分分解成單糖，則與斐林試劑共熱時能生成磚紅色沉淀，使人產(chǎn)生錯覺。為了確保實驗的成功，實驗之前應(yīng)檢驗一下純度。普通的細粒蔗糖往往是由于部分水解而具有一些還原糖?？捎檬惺鄞髩K冰糖，水洗去其表面葡萄糖得到純凈的蔗糖。 實驗中要將試管的下半部浸到37的溫水中，因為淀粉酶在適宜的溫度條件下催化能力最強。 在實驗中，質(zhì)量分數(shù)為3%的蔗糖溶液要現(xiàn)配現(xiàn)用（以免被細菌污染變質(zhì)），取唾液時一不定期要用清漱口，以免食物殘渣進入唾液中。 制備

4、的可溶性淀粉溶液，一定要完全冷卻后才能使用，因為溫度過高會使酶活性降低，甚至失去催化能力。 實驗中如果2號試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀，可能的原因是：蔗糖溶液放置的時間過長，蔗糖被溶液中的微生物分解成還原性的糖，從而影響實驗效果。這時應(yīng)臨時配制蔗糖溶液。另一個可能的原因是試管不干凈，所以實驗之前應(yīng)將試管用清水再清洗一次，試管編號要醒目。 實驗步驟一定要按要求的程序進行，不可隨意改變。 如果實驗中，自己的實驗結(jié)果與結(jié)論上的預期結(jié)果不一致，應(yīng)再設(shè)計實驗，進行進一步的驗證或找出問題所在。 7、實驗結(jié)果與討論 1號管中出現(xiàn)磚紅色沉淀，2號管無顏色變化。 實驗思路拓展 酶的專一性驗證 1、實驗?zāi)康?通過對不同

5、酶消化作用的比較來驗證酶作用的專一性。 2、實驗原理 酶是由生物活細胞所產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì)，在生物體內(nèi)新陳代謝的許多化學反應(yīng)中起催化劑作用。作為生物催化劑的酶，跟一般的化學催化劑不同，它表現(xiàn)出高度的專一性，這是酶作用的顯著特征。 3、材料器具 蛋白花、菠蘿汁、稀釋唾液、試管、移液管、燒杯、酒精燈、三角架、石棉網(wǎng)、溫度計、火柴；1%淀粉糊，胃蛋白酶液、革蘭氏碘液。 方法一 唾液淀粉酶的特性 4、實驗步驟 驗證酶作用的專一性，準備2支試管，分別編號后，在2支試管內(nèi)各裝入1%淀粉糊2mL。在1號試管加入稀釋唾液2 mL，2號試管加入胃蛋白酶液2 mL，把這2支試管放在37水浴中保溫處理10min。 用

6、革蘭氏碘液測試并觀察水樣的顏色變化。 5、注意事項 在使唾液逐漸稀釋過程中，應(yīng)該注意把試管中的唾液充分搖勻。 6、分析和討論 1號試管水樣用革蘭氏碘液測試，不出現(xiàn)藍色反應(yīng)，說明管內(nèi)淀粉已被唾液中唾液淀粉酶所分解，而沒有淀粉的存在；而2號試管中的水樣用草蘭氏碘液測試則呈現(xiàn)藍色，說明有淀粉存在。結(jié)果表明，對淀粉產(chǎn)生消化作用的酶是唾液淀粉酶，而不是胃蛋白酶，由此證明了酶作用的專一性。 方法二 菠蘿蛋白酶的特性 4、實驗步驟 驗證酶作用的專一性，準備2支試管，分別編號后，在2支試管內(nèi)各裝入2 mL蛋白花。在1號試管內(nèi)加入新鮮菠蘿汁2 mL，2號試管中加入稀釋唾液2 mL。充分混勻后，放在37水浴中保溫處理。 2030min后觀察各管中蛋白花的形狀。 5、分析和討論 菠蘿汁中含有分解蛋白質(zhì)的菠蘿蛋白酶，因此，把1號試管跟2號試管彼此對照就不難看出，2號試管內(nèi)蛋白花仍保持原狀，而1號試管內(nèi)的蛋