2021年最新理工科碩士研究生畢業(yè)答辯ppt模板

1、 集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲能力分析平臺(tái)的建立指導(dǎo)教師 方 瑾 教授 研 究 生 周 喆 腫瘤侵襲是惡性腫瘤最基本的生物學(xué)特征，其標(biāo)志是腫瘤細(xì)胞突破基底膜。 腫瘤侵襲是腫瘤細(xì)胞、周圍間質(zhì)相互作用的結(jié)果，是腫瘤轉(zhuǎn)移的第一步。立題依據(jù)腫瘤細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞表面受體附著于基質(zhì)膜或者細(xì)胞外基質(zhì)；腫瘤細(xì)胞分泌酶導(dǎo)致相鄰的基質(zhì)膜或細(xì)胞外基質(zhì)降解；在特殊化學(xué)因子刺激下，細(xì)胞遷移進(jìn)入靶組織。腫瘤侵襲機(jī)制腫瘤侵襲體外模型Transwell侵襲小室測(cè)定法Transwell小室上層培養(yǎng)液 細(xì)胞 基質(zhì)膠 下層培養(yǎng)液 細(xì)胞培養(yǎng)板 腫瘤侵襲體外模型Transwell侵襲小室測(cè)定法“貼壁”細(xì)胞計(jì)數(shù)將膜切下擦去膜上層細(xì)胞和基質(zhì)膠固定

2、膜下層細(xì)胞細(xì)胞染色鏡下多視野計(jì)數(shù) 非“貼壁”細(xì)胞計(jì)數(shù)收集下層培養(yǎng)液，用流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)或MTT法計(jì)數(shù)。Transwell小室法存在的問(wèn)題操作繁瑣、分析時(shí)間長(zhǎng)難以準(zhǔn)確計(jì)數(shù)穿膜細(xì)胞數(shù)量無(wú)法實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力費(fèi)用高無(wú)法回收細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)分析腫瘤侵襲體外模型如何解決？微流控芯片（芯片實(shí)驗(yàn)室）微流控芯片技術(shù)是一種新的微型分析系統(tǒng)，它采用微加工技術(shù)在厘米尺寸的玻璃、塑料及硅橡膠材料上刻蝕出微米尺寸的反應(yīng)管道及分析元件，使各種分析過(guò)程可在微米尺寸的結(jié)構(gòu)中完成。 微流控芯片的特點(diǎn) 樣品消耗小 分析時(shí)間短 費(fèi)用低 將多個(gè)分析過(guò)程集成于一體 高度的自動(dòng)化研究目標(biāo) 在微流控芯片上效仿Transwell的原理，建立

3、集細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞穿膜、細(xì)胞動(dòng)態(tài)計(jì)數(shù)于一體的微流控腫瘤細(xì)胞侵襲體外定量分析技術(shù)平臺(tái)，實(shí)現(xiàn)腫瘤侵襲檢測(cè)的集成化，為腫瘤侵襲機(jī)制研究及相關(guān)藥物篩選提供新的方法。研究方案集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲能力分析平臺(tái)的建立集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲系統(tǒng)的功能評(píng)價(jià)集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲系統(tǒng)的擴(kuò)展應(yīng)用集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲能力分析平臺(tái)的建立芯片的設(shè)計(jì)及制作：設(shè)計(jì)制作包含雙層微流控網(wǎng)絡(luò)的芯片結(jié)構(gòu)，并將膜集成到兩層通道之間。集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲能力分析平臺(tái)的建立2.流式細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和制作：由十字交叉通道和光學(xué)檢測(cè)裝置共同組成。集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲能力分析平臺(tái)的建立3.微流控腫瘤侵襲分析平臺(tái)的建立：包括芯

4、片處理、細(xì)胞培養(yǎng)及侵襲力檢測(cè)。集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲能力分析平臺(tái)的建立4.微流控腫瘤侵襲分析平臺(tái)的優(yōu)勢(shì) 避免了繁瑣操作過(guò)程中，人為原因造成的誤差 真正實(shí)現(xiàn)對(duì)侵襲過(guò)程的實(shí)時(shí)定量分析 提高分析的效率和準(zhǔn)確性 可回收細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步分析集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲系統(tǒng)的功能評(píng)價(jià) 不同細(xì)胞侵襲能力分析實(shí)驗(yàn)：根據(jù)已有文獻(xiàn)報(bào)道及本室研究結(jié)果選取20種具有不同侵襲力的細(xì)胞系作為實(shí)驗(yàn)分析對(duì)象，包括正常細(xì)胞系、低轉(zhuǎn)移細(xì)胞系、高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系及轉(zhuǎn)染細(xì)胞系等。分析20種不同轉(zhuǎn)移能力的細(xì)胞，并與目前廣泛使用的transwell方法比較。集成化微流控腫瘤細(xì)胞侵襲系統(tǒng)的擴(kuò)展應(yīng)用 高侵襲細(xì)胞亞群的篩選：在細(xì)胞穿膜的不同時(shí)間收取細(xì)胞

5、擴(kuò)大培養(yǎng)后，在該系統(tǒng)上進(jìn)行多次穿膜實(shí)驗(yàn)，得到的細(xì)胞通過(guò)動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)及相關(guān)基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)，篩選到具有更高轉(zhuǎn)移能力的不同細(xì)胞亞群進(jìn)行相關(guān)的腫瘤研究。創(chuàng)新之處首次將腫瘤侵襲能力的分析過(guò)程移植到微流控系統(tǒng)上，實(shí)現(xiàn)集成化連續(xù)檢測(cè)，提高芯片細(xì)胞分析系統(tǒng)和流式計(jì)數(shù)系統(tǒng)的功能性。改變以往侵襲能力檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中計(jì)數(shù)附著于膜上的細(xì)胞的慣例，針對(duì)微流控系統(tǒng)便于集成化的優(yōu)勢(shì)，提出細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞穿膜和細(xì)胞計(jì)數(shù)連續(xù)進(jìn)行的新思路，既便于操作，又提高了檢測(cè)的效率和準(zhǔn)確性。微流控芯片細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的建立芯片材料的選取階段性成果 芯片材料多采用PDMS（聚二甲基硅氧烷，俗稱硅橡膠），該類材料具有良好的生物相容性，對(duì)氣體有一定的通透性，有利于細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中O2和CO2氣體的交換。 微流控芯片細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的建立芯片的制作階段性成果芯片通道表面處理多聚賴氨酸涂層階段性成果無(wú)PLL涂層12h后細(xì)胞有PLL涂層12h后細(xì)胞毛細(xì)蒸發(fā)驅(qū)動(dòng)微泵原理：以濾紙柱的毛細(xì)作用和大氣蒸發(fā)相結(jié)合作為驅(qū)動(dòng)力，實(shí)現(xiàn)液體的驅(qū)動(dòng)。優(yōu)點(diǎn)： 不需外界電源 制作簡(jiǎn)單、造價(jià)低 體積小，易于集成 流速穩(wěn)定、易于調(diào)節(jié) 可長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)使用 可脫離培養(yǎng)箱，進(jìn)行實(shí)時(shí)觀察毛細(xì)-蒸發(fā)微泵與微流控芯片集成 階段性成果階段性成果 流速測(cè)試濾紙柱暴露高度 45mm, 直徑7.5mm室溫下：H2O v=1.877uL/min DMEM培養(yǎng)基 v=2.5