X染色體STR基因座在同胞親緣鑒定中的應(yīng)用

1、X染色體STR基因座在同胞親緣斷定中的應(yīng)用吳淑珍，林刻智，張洪勤【摘要】目的:探究X染色體STR基因座奇特的遺傳方法在同胞親緣干系斷定中的應(yīng)用。要領(lǐng):應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒错慞R、聚丙烯酰胺凝膠電泳及銀染顯帶技能對(duì)1名未知女性個(gè)別與3名同胞兄妹的22個(gè)基因座舉行分型，并對(duì)線粒體D環(huán)高變區(qū)作序列測(cè)定。效果:得到具有去除代價(jià)的2個(gè)X染色體基因座DXS7132、DXS6804和4個(gè)常染色體基因座D1S549、D2S441、D16S539、D5S818，否認(rèn)了未知個(gè)別與3名同父同母兄妹的親緣干系。結(jié)論:X染色體基因座在男性的基因組中呈單倍型情勢(shì)存在，特別實(shí)用于法醫(yī)學(xué)理論中在怙恃缺如環(huán)境下姐妹之間的親緣斷定。

2、【關(guān)鍵詞】法醫(yī)物證學(xué)；X染色體；短串聯(lián)重復(fù)序列；同胞親緣斷定Abstrat:bjetive:TstudytheappliatinfspeifigenetipatternfX-hrseSTRliinsiblingsidentifiatin.ethds:22STRlifhlebldfsuspiiusneandthreesiblingsereexainedithplyerasehainreatin(PR),PAGEandsilverstainingtehnique,andthehypervariablereginftheithndrialD-lperesequened.Results:TX-hrse

3、STRliDXS7132、DXS6804andFurautsalSTRliD1S549,D2S441,4D16S539andD5S818havebeenfund,hihanbeusedtexludethesuspiininsiblingsidentifiatin.nlusin:X-hrseSTRliexistinthealegeneinthefrfhaplid,hihisespeiallyusefulfrfrensisieneappliatin,suhasthesiblingsidentifiatinintheabsenefparents.Keyrds:frensibilgialevidene

4、;Xhrse;shrttanderepeats;siblingsidentifiatinX染色體短串聯(lián)重復(fù)序列(shrttanderepeats,STR)普及漫衍于真核基因組中，高度不變且具有高度多態(tài)性，在男性的基因組中呈單倍型情勢(shì)存在，遺傳方法奇特-父親的等位基因只能遺傳給女兒，以是它具有一些常染色體遺傳標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟無(wú)法相比的長(zhǎng)處，特別實(shí)用于法醫(yī)學(xué)理論中在怙恃缺如環(huán)境下姐妹之間的親緣斷定，這種奇特的遺傳方法已引起了一些法醫(yī)事情者的留意1，2。1質(zhì)料和要領(lǐng)1.1同胞干系斷定的案例由狀師事件所托付,對(duì)一位未知女性個(gè)別與3位同胞兄妹之間是否存在同胞親緣干系舉行斷定。1.3STR基因座的檢測(cè)取未知個(gè)

5、別1號(hào)和三名同胞兄妹2、3、4號(hào)的血樣，接納helex-100快速法3提取基因組DNA后舉行擴(kuò)增:94預(yù)變性3in，9450s，5840s，7240s，34個(gè)循環(huán)，72末次延伸10in，4保存。檢測(cè)位點(diǎn)包羅DXS7132、DXS6804、DXS6799等3個(gè)X染色體STR基因座和D6S477、D1S549、D3S1754、D12S391、D12S375、D18S865、D18S535、D7S2846、D16S539、D3S1358、D8S1179、SFIP、VA、D5S818、D19S400、D18S1364、D13S317、D2S441、D20S85等19個(gè)STR基因座。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)6%非變性

6、聚丙烯酰胺凝膠電泳分散,銀染表現(xiàn)電泳譜帶，用尺度等位基因Ladder確定其基因型。1.4線粒體D環(huán)高變區(qū)DNA序列測(cè)定將1號(hào)與2號(hào)的線粒體D環(huán)高變區(qū)DNA經(jīng)PR擴(kuò)增和產(chǎn)物純化后，托付上海Sangn用雙脫氧停頓法在ABI公司的3730測(cè)序儀上測(cè)定序列。2效果2.1所檢測(cè)的22個(gè)STR基因座分型效果見表1，兩個(gè)違犯遺傳紀(jì)律的X染色體基因座闡發(fā)見表2；圖1為22個(gè)STR基因座中的12個(gè)基因座，此中包羅6個(gè)對(duì)付本案親緣干系的闡發(fā)斷定具有緊張代價(jià)的基因座。2.2比力1號(hào)與2號(hào)在線粒體D環(huán)高變區(qū)1602016423位置上的DNA測(cè)序效果，共檢出11處堿基序列不雷同表3，僅1621716327片斷上就檢出5

7、處堿基序列差異圖2，從而去除兩者來(lái)自同一母系的大概性。3討論如今用于斷定同胞親緣干系的要擁有常染色體和性染色體STR基因座多態(tài)性闡發(fā)、線粒體測(cè)序。常染色體STR基因座具有種類多、漫衍廣、高度多態(tài)性、易于檢測(cè)等長(zhǎng)處，但在舉行同胞干系鑒按時(shí)，由后代的基因型反推怙恃的基因組適時(shí)，至少需提供3名或3名以上后代的樣本作參照4。如本文提供的樣本是1個(gè)未知個(gè)別和3個(gè)同胞兄妹，檢測(cè)19個(gè)常染色體STR基因座，反推同胞兄妹怙恃的基因型，共檢出具有去除代價(jià)的4個(gè)基因座：D1S549、D2S441、D16S539、D5S818基因座。按照德國(guó)親子斷定專家協(xié)會(huì)認(rèn)訂婚權(quán)干系的尺度，去除親權(quán)干系應(yīng)有3個(gè)或3個(gè)以上的STR

8、基因座去除證據(jù)為根據(jù)5，可以去除未知個(gè)別和同胞之間存在完全同胞的大概性，但不克不及去除同父異母或同母異父的半同胞干系。在一些缺乏雙親的特別的案例中，如斷定一個(gè)未知女性個(gè)別和另一個(gè)女性個(gè)別是否存在姐妹親緣干系時(shí)，常染色體STR基因座無(wú)法去除姐妹干系。線粒體DNA是位于真核細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的環(huán)狀DNA，由于線粒體呈母系遺傳，兄弟姐妹間的線粒體挨次均雷同,故可用于做身源斷定和同一認(rèn)定6。本研究將2號(hào)作為同胞兄妹的代表與1號(hào)舉行比對(duì)，測(cè)序創(chuàng)造兩者在線粒體D環(huán)高變區(qū)1602016423位置上有11處堿基序列不雷同，去除了同母干系，但不克不及去除同父干系。別的，線粒體測(cè)序有其范圍性，與被斷定人的母親為同一母系支

9、屬的全部個(gè)別，均與其母親有雷同的序列，以是查驗(yàn)效果雷同也不克不及作必定的結(jié)論。X染色體STR基因座由于其奇特的遺傳方法，在男性的基因組中呈單倍型情勢(shì)存在,并以單倍型遺傳給女兒而不遺傳給兒子7，也就是說(shuō)，女兒的等位基因只能泉源于父親。因此，X染色體STR基因座最大的應(yīng)用代價(jià)在于可以辦理兩個(gè)女性個(gè)別之間是否存在姐妹親緣干系的案件。比方本文的1號(hào)和4號(hào)，檢測(cè)兩人的DXS7132、DXS6804基因座，創(chuàng)造兩人間沒有雷同的等位基因，說(shuō)明她們的等位基因不是泉源于同一個(gè)父親，由此得出她們兩人不是同父所生的結(jié)論。固然，同胞中女性個(gè)別越多，去除同父干系就越輕易，如本文通過(guò)3號(hào)和4號(hào)在X染色體上所共有的等位基因

10、確定父親的基因型，從而對(duì)未知個(gè)別做出去除同父干系的斷定。固然X染色體STR基因座具有高度的多態(tài)性，但在同胞親緣斷定中只能起到去除同父干系的作用。要正確、快速、有用地舉行同胞親緣干系斷定，X染色體STR基因座提供的信息還不敷充實(shí)，必需與常染色體和線粒體等多態(tài)性標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟相結(jié)合，X染色體STR基因座僅是這些多態(tài)性標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟的緊張?jiān)鲅a(bǔ)2，8?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1SzibrR,Krazak,HeringS,etal.UsefX-linkedarkersfrfrensipurpseJ.IntJLegaled,2022,117(2):67-74.2呂德堅(jiān),劉秋玲.X染色體STR的法醫(yī)學(xué)應(yīng)用希望J.中王法醫(yī)學(xué)

11、雜志,2002,17(4):252-255.3Gehrig,HhEister,BrerUV,etal.Sissauasianppulatindatafr13STRliusingApFISTRprfilerplusandfilerPRaplifiatinkitsJ.JFrensiSi,1999,44(5):1035-1038.4趙慶國(guó),朱愛萍,張郁,等.使用基因座多態(tài)性斷定無(wú)雙親尋姐弟的同胞干系J.中王法醫(yī)學(xué)雜志,2002,17(1):45.5Kayser,SajantilaA.utatinsatY-STRli:iplia-tinsfrpaternitytestingandfrensianalysisJ.FrensiSiInt,2001,118(2-