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文檔簡介

1、綠豆皮可溶性膳食纖維的制備及其性質(zhì)研究導(dǎo) 師:羅 磊匯報人:王雅琪河南科技大學(xué)2014級碩士研究生中檢報告匯報內(nèi)容立題背景及意義01研究內(nèi)容與方法02下一步工作計劃03研究成果04我國是綠豆年產(chǎn)量達(dá)100多萬噸,綠豆皮在加工過程中被丟棄,造成環(huán)境污染和極大資源浪費01大部分營養(yǎng)物質(zhì)存在于綠豆皮中,具有多種生理功能02綠豆皮中約含60%的纖維素,已證實其中可溶性膳食纖維(SDF)具有較強生理功能03一、立題背景及意義 采用超微粉碎技術(shù)對綠豆皮預(yù)處理并進(jìn)行SDF提取工藝研究對綠豆皮SDF的性質(zhì)進(jìn)行研究研究內(nèi)容與方法綠豆皮一般營養(yǎng)成分的測定綠豆皮膳食纖維組成測定:Southgate改良法(未完成)水

2、分測定:直接干燥法灰分測定:灼燒重量法蛋白質(zhì)測定:凱氏定氮法脂肪測定:索氏抽提法淀粉測定:酶水解法水溶性非消化性多糖水不溶性非纖維素多糖纖維素木質(zhì)素單因素試驗二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計粉末粒度液料比酶底比酶解時間酶解溫度酶底比酶解時間酶解溫度持水力、膨脹力膽酸鹽體外吸附試驗:糠醛比色法體外抗氧化試驗體內(nèi)抗氧化試驗二、研究內(nèi)容與方法小鼠體內(nèi)抗氧化(正在進(jìn)行)細(xì)胞抗氧化(未完成)還原力清除自由基綠豆皮一般營養(yǎng)成分的測定 水分測定:直接干燥法(GB/T 5009.32003); 灰分測定:灼燒重量法(GB/T 5009.42003); 蛋白質(zhì)測定:凱氏定氮法(GB/T 5009.52003); 脂肪測定:

3、索氏抽提法; 淀粉測定:酶水解法(GB/T 5009.92003)。測定結(jié)果:2.1、 綠豆皮膳食纖維組成的研究表2-1 綠豆皮一般營養(yǎng)成分樣品水分/%蛋白質(zhì)/%脂肪/%淀粉/%灰分/%綠豆皮11.480.29.601.20.240.064.330.981.200.982.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化SDF2.2.1 提取方法依次加入-淀粉酶、蛋白酶和葡萄糖苷酶用含纖維素酶用醋酸-醋酸鈉緩沖溶液溶解水浴、滅酶水浴、滅酶、離心離心40電熱鼓風(fēng)干燥箱中干燥稱重用4倍體積的無水乙醇沉淀沉淀上清液綠豆皮樣品綠豆皮超微粉超微粉碎綠豆皮2.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化表2-2 單因素試驗結(jié)果因素最佳水

4、平指標(biāo)粉末粒度2538m(過400目篩不過500目) SDF提取率(%)液料比30mL/g酶底比200U/g酶解時間2h酶解溫度552.2.2 單因素試驗結(jié)果2.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化表2-3 三元二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計試驗因素水平表Table 2-3 Factors and levels of three-factor second order rotation combination experimental design編碼因素液料比 X1/(mL/g)酶解溫度X2/酶底比X3/(U/g)-1.68226.6446.59149.55-128501700305520013260230

5、1.68233.3663.41250.45j25302.2.3 二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計試驗結(jié)果 通過二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計試驗得出超微粉碎輔助提取綠豆皮可溶性膳食纖維的優(yōu)化回歸數(shù)學(xué)模型為:Y=12.556461.52783X10.89335X20.85381X30.96375X2X30.59995X120.78910X220.96942X32;相關(guān)系數(shù) R2=0.9590液料比酶解溫度酶底比SDF提取率X1/(mL/g)X2/X3/(U/g)Y/%11115.96211-19.4331-118.8441-1-113.155-11110.236-11-111.867-1-119.328-1-1-11

6、1.669-1.682008.35101.6820013.77110-1.68208.53120-1.682012.521300-1.6828.2414001.68211.321500012.461600012.541700012.731800011.481900013.432000012.63試驗號變異來源平方和自由度均方比值FP值X129.6645129.664581.068600.0001X210.1422110.142227.717080.0003X39.264319.264325.317860.0004X124.827014.827013.191340.0037X228.350418

7、.350422.820420.0006X3212.6026112.602634.441010.0001X1X20.279510.27950.763710.3863X1X31.688511.68854.614380.0501X2X36.914416.914418.896100.0011回歸85.664399.5183F2=26.0120.0001剩余3.6592100.3659 失擬1.693050.3386F1=0.8610.5632誤差1.966150.3932 總和89.323519 表2-5 三元二次通用旋轉(zhuǎn)組合試驗結(jié)果方差分析表Table 2-5 Analysis of varianc

8、e for the regression model developed for extraction yield of polysaccharides表2-4 三元二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計試驗結(jié)果Table 2-4 Three-factor second order rotation combination experimental results2.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化2.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化酶解溫度/酶解溫度/最佳參數(shù)組合:酶底比酶解溫度液料比提取率(實際)提取率(理論)190U/g6033mL/g14.02%14.08%2.3 綠豆皮可溶性膳食纖維性質(zhì)研究2.3.1 綠

9、豆皮持水力和膨脹力試驗結(jié)果編號持水性/%膨脹力/(mL/g)13742.5624012.8133932.64平均值3892.67表2-6 綠豆皮SDF持水力和膨脹力測定結(jié)果Table2-6 The water-holding capacity and swelling capacity of SDF from Phaseolus Radiatus hull2.3 綠豆皮可溶性膳食纖維性質(zhì)研究2.3.2 膽酸鹽體外吸附試驗結(jié)果圖2-1 膽酸鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2-1 calibration curve of bile sodium圖2-2 膽酸鈉溶液吸光度值隨時間變化圖Fig.2-2 Absorb

10、ance of Sodium cholate solution at different time3.732.612.3 綠豆皮可溶性膳食纖維性質(zhì)研究2.3.3 體外抗氧化試驗結(jié)果圖2-5 綠豆皮SDF對羥自由基的清除作用Fig.2-5 Scavenging effects of SDF from Phaseolus Radiatus hull against hydroxyl radicals圖2-4 綠豆皮SDF對DPPH自由基的清除作用Fig.2-4 Scavenging effects of SDF from Phaseolus Radiatus hull against DPPH r

11、adicals圖2-3 綠豆皮SDF的還原力Fig.2-3 Reducing power of SDF from Phaseolus Radiatus hull當(dāng)質(zhì)量濃度為4mg/mL時,其還原力為1.526當(dāng)濃度為和4mg/mL時,其對DPPH自由基清除率為82.65%當(dāng)濃度為4mg/mL時,其對羥自由基清除率為85.16%2.3.4 小鼠體內(nèi)抗氧化研究分組皮下注射灌胃正常對照組生理鹽水生理鹽水模型對照組D-半乳糖生理鹽水樣品低劑量組D-半乳糖低濃度樣品(200 mg/kg)樣品中劑量組D-半乳糖中濃度樣品(400 mg/kg)樣品高劑量組D-半乳糖高濃度樣品(600 mg/kg)表2-6小

12、鼠分組給藥方案小鼠品種: BarB/C小鼠、8周齡、體重202g。分組情況: 50只小鼠隨機分成5組,每組10只,雌雄各半喂養(yǎng)情況: 小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)2周,給藥30d,試驗期間飼喂普通飼料,自由攝食和飲水,按右表方案給藥,給藥最后一天空腹過夜。稱重后眼眶采血,取血后的小鼠頸椎脫臼處死,取其肝臟,以冰生理鹽水洗去浮血,濾紙吸干,稱重。2.3.4 小鼠體內(nèi)抗氧化研究2.3.4 小鼠體內(nèi)抗氧化研究總抗氧化能力的測定:total antioxidant capacity, T-AOC試劑盒;總超氧化物歧化酶活力測定:superoxide dismutase, T-SOD試劑盒;丙二醛含量測定:maleic dialdehyde, MDA試劑盒;谷胱甘肽過氧化物酶活力測定:glutathione

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