單因素對(duì)甘露醇的提取檢測分析(共8頁)

1、武漢長江(chn jin)工商學(xué)院生物制藥工程技術(shù)論文(lnwn)院： 工學(xué)院 專業(yè)(zhuny)：生物工程 年級(jí)：2010級(jí) 題目: 單因素對(duì)甘露醇的提取檢測分析 學(xué)生： 羅忠 學(xué)號(hào)：1004011106 指導(dǎo)教師：胡佳 職稱: 講師 2013年 4 月 19 日目錄(ml) TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc353801735 摘 要1 HYPERLINK l _Toc353801736 關(guān)鍵詞1 HYPERLINK l _Toc353801737 Abstract1 HYPERLINK l _Toc353801738 Key words1 HYPERLINK

2、 l _Toc353801739 前言(qin yn)2 HYPERLINK l _Toc353801740 1 材料(cilio)與儀器2 HYPERLINK l _Toc353801741 1.1 實(shí)驗(yàn)主要材料和試劑2 HYPERLINK l _Toc353801742 1.2 主要儀器2 HYPERLINK l _Toc353801743 2 實(shí)驗(yàn)方法3 HYPERLINK l _Toc353801744 2.1 主要試劑的配制3 HYPERLINK l _Toc353801745 2.2 海帶提取物中甘露醇含量測定3 HYPERLINK l _Toc353801746 2.2.1 甘露

3、醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備3 HYPERLINK l _Toc353801747 2.2.2 甘露醇標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備3 HYPERLINK l _Toc353801748 3 結(jié)果與分析3 HYPERLINK l _Toc353801749 3.1 甘露醇標(biāo)準(zhǔn)曲線3 HYPERLINK l _Toc353801750 3.2單因素實(shí)驗(yàn)4 HYPERLINK l _Toc353801751 3.2.1 提取溫度對(duì)甘露醇的影響4 HYPERLINK l _Toc353801752 3.2.2 提取時(shí)間對(duì)甘露醇的影響4 HYPERLINK l _Toc353801753 3.2.3 液固比對(duì)甘露醇的影響4 HY

4、PERLINK l _Toc353801754 4 小結(jié)與討論4 HYPERLINK l _Toc353801755 參考文獻(xiàn)5 PAGE 7單因素對(duì)甘露醇的提取檢測(jin c)分析摘 要：研究(ynji)采用(ciyng)水浴提取法從海帶中提取甘露醇的工藝。研究了提取時(shí)間、提取溫度和固液比對(duì)甘露醇提取量的影響規(guī)律。通過實(shí)驗(yàn)得出了海帶甘露醇提取工藝的最佳參數(shù)為: 提取溫度80 ，提取時(shí)間3 h，固液比為130。關(guān)鍵詞：海帶；甘露醇；提取。 The Testing Analysis on the Extraction of Mannitol from Kelp on Singly Elemen

5、t Abstract：In this paper, it reports the studies of extracting mannitol from the common kelp by water. The influences of different extracting temperature, extracting time and solid- liquid ratio were studied. The optimum parameters of extracting mannitol were obtained by or the test, extracting temp

6、erature 80 , time 3 h, solid- liquid ratio 130. Key words：kelp; mannitol; extracting前言(qin yn)海帶(hidi)學(xué)名Laminaria japonica Aresch。別名(bimng)昆布、江白菜。 褐藻的一種，生長在海底的巖石上，形狀像帶子，含有大量的碘質(zhì)，可用來提制碘、鉀等。我國北部和東南沿海有大量養(yǎng)殖，海藻有“長壽菜”、“海上之蔬”、“含碘冠軍”的美譽(yù)【1】。海帶性味咸寒，具有軟堅(jiān)、散結(jié)、平喘、消炎等功效。海帶膠質(zhì)能促使體內(nèi)的放射性物質(zhì)隨同大便排出體外，從而減少放射性物質(zhì)在人體內(nèi)的積聚，也減少了

7、放射性疾病的發(fā)生幾率【2】。海帶營養(yǎng)豐富，含有較多的碘質(zhì)、鈣質(zhì)，有治療甲狀腺腫大之功效。海帶具有復(fù)雜的、多方面的生物活性【3】, 特別是海帶富含甘露醇。甘露醇具有利尿消腫的作用，可防治腎功能衰竭、老年性水腫、藥物中毒等【4】。甘露醇與碘、鉀、煙酸等協(xié)同作用，對(duì)防治動(dòng)脈硬化、高血壓、慢性氣管炎、慢性肝炎、貧血、水腫等疾病，都有較好的效果。甘露醇在醫(yī)療上主要作為脫水藥和利尿藥，來治療腦積水，降低顱內(nèi)壓; 用于腎功能衰竭的輸液和針劑的配料，可作為防止早期腎功能不全的藥物中間體和腦血管舒張劑；還可用于治療高膽固醇血癥、動(dòng)脈硬化、腦膜炎、急性休克等頑固疾病和糖尿病的代用糖【5】。在食品方面，該品在糖及糖

8、醇中的吸水性最小，并具有爽口的甜味，用語麥芽糖、口香糖、年糕等食品的防粘，一般用作糕點(diǎn)的防粘粉。在工業(yè)上，甘露醇可用語塑料行業(yè)，制松香酸酯及人造甘油樹脂、炸藥、雷管等。在化學(xué)分析中用于硼的測定，生物檢驗(yàn)上用作細(xì)菌培養(yǎng)劑等【6】。在醫(yī)藥、化工和食品行業(yè)中，海帶都有廣闊的應(yīng)用前景。目前，世界上工業(yè)生產(chǎn)甘露醇主要有兩種工藝【7】，一種以海帶為原料，在生產(chǎn)海藻酸鹽的同時(shí)，將提碘后的海帶浸泡液，經(jīng)過多次提濃、除雜、離交、蒸發(fā)濃縮、冷卻結(jié)晶而得：一種以蔗糖和葡萄糖為原料，通過水解、差向異構(gòu)與酶異構(gòu)，然后加氫而得。利用海帶提取甘露醇的工藝簡單易行，在我國已有幾十年歷史，但由于受到原料資源、提取收率、氣候條件

9、、能源消耗等限制，長期以來，其發(fā)展受到制約【8】。本試驗(yàn)采用水浴提取法，以海帶為原料，提取分離甘露醇，研究了海帶甘露醇的提取工藝【9】，旨在為海帶的開發(fā)利用提供依據(jù)。1 材料與儀器1.1 實(shí)驗(yàn)主要材料和試劑 市售海帶； 濃硫酸，分析純，平煤開封東大化工有限公司試劑廠集團(tuán)； 無水乙醇，分析純，天津市凱通化學(xué)試劑有限公司； 高碘酸鈉，分析純，上海山浦化工有限公司； 乙醇胺，分析純，上海山浦化工有限公司； 冰醋酸，分析純，天津市凱通化學(xué)試劑有限公司； 甘露醇，分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司； 乙酰丙酮，分析純，天津市紅巖化學(xué)試劑廠； 甲醇，分析純，天津市凱通化學(xué)試劑有限公司。1.2 主要儀器 恒溫

10、水浴鍋，江蘇金壇中大儀器廠； 721分光光度計(jì)，上海光譜儀器有限公司； 電子天平，上海精密(jngm)科學(xué)儀器有限公司； 電冰箱，美的集團(tuán)電冰箱制造(zhzo)有限公司。2 實(shí)驗(yàn)(shyn)方法2.1 主要試劑的配制 配制0.015 mol/L NaIO4【9】溶液的方法：精密稱取NaIO4 0.323 g 溶于250 mL濃度為0.12mol/L 的鹽酸溶液中，定容。 配制Nash【10】試劑的方法：稱取75.054 g 的NH4Ac固體并加蒸餾水溶解，再加1 mL冰乙酸和1 mL 乙酰丙酮，混合加水定容至500 mL。 用無水乙醇配制95% 的乙醇溶液。2.2 海帶提取物中甘露醇含量測定2

11、.2.1 甘露醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精密稱取甘露醇50 mg 溶于蒸餾水中，定容至500 mL，得到濃度為0.1 mg/mL 的甘露醇溶液。分別移取5 mL、10 mL、15 mL、20 mL、25 mL上述甘露醇溶液于5個(gè)50 mL 的容量瓶中，并依次編為1、2、3、4、5定容至刻度。即可得到濃度分別為0.01 mg/mL、0.02 mg/mL、0.03 mg/mL、0.04 mg/mL、0.05 mg/mL的不同濃度甘露醇溶液。2.2.2 甘露醇標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別移取1 mL 不同濃度的甘露醇對(duì)照品溶液加入試管中，空白對(duì)照管中加入蒸餾水1 mL，加入0.015 mol/L NaIO4 溶液1 m

12、L?；旌暇鶆蚝笤谑覝叵路胖?0 min，然后在每支試管中加入Nash試劑4 mL，之后在53 水浴保溫15 min 使其顯色，加入冰箱后即刻冷卻，然后取出，至室溫后用分光光度計(jì)在413 nm 處測出吸光度，以濃度（g/mL）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出回歸方程和R2值。 3 結(jié)果與分析3.1 甘露醇標(biāo)準(zhǔn)曲線按照甘露醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備方法，進(jìn)行甘露醇標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。以濃度（g/mL）為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如下圖所示，并得出回歸方程和R2值。 Y=0.009x+0.0068 R2=0.9983表1 甘露醇標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度(ug/mL)01020

13、304050吸光度A00.1000.1860.2820.3720.4453.2單因素(yn s)實(shí)驗(yàn)3.2.1 提取(tq)溫度對(duì)甘露醇的影響將粉碎(fn su)的海帶在液固比為20時(shí)回流2 h，考察50 ，60 ，70 ，80 ，90 五個(gè)回流溫度下對(duì)甘露醇的影響見表2。表2 提取溫度對(duì)甘露醇的影響溫度（）5060708090A4130.5070.5320.5560.6310.573甘露醇得率(%)0.1390.1460.1530.1730.157 由表1可知，當(dāng)溫度小于80 時(shí)，提取量由溫度上升而增加，當(dāng)溫度達(dá)到80 時(shí)出現(xiàn)最大值，當(dāng)溫度大于80 時(shí)，提取量隨溫度上升而下降，為了提高效率，

14、提取溫度應(yīng)控制為80 。3.2.2 提取時(shí)間對(duì)甘露醇的影響 將粉碎的海帶在沸點(diǎn)下按照液固比為20進(jìn)行回流，選取0.5 h，1 h，2 h，3 h，4 h，5個(gè)回流時(shí)間，考察不同提取時(shí)間對(duì)甘露醇的影響見表3。表3 提取時(shí)間對(duì)甘露醇的影響時(shí)間（h）0.51234A4130.2350.3690.5330.7350.740甘露醇濃度（g/mL）0.06340.1010.1460.2020.204 由表2可知，隨著提取時(shí)間的延長，提取量也在增加，當(dāng)提取時(shí)間大于3 h時(shí)提取量趨于穩(wěn)定，這是因?yàn)樵? h 的時(shí)間中, 原料海帶中的甘露醇幾乎全部溶出, 再延長提取時(shí)間, 甘露醇的提取量已沒有多大變化, 為了提高

15、效率, 提取時(shí)間應(yīng)控制為3 h左右。3.2.3 液固比對(duì)甘露醇的影響將粉碎的海帶在沸點(diǎn)下回流2 h，選擇的液固比分別為10，20，30，40，50，考察不同液固比對(duì)甘露醇的影響見表4。表4 固液比對(duì)甘露醇的影響固液比1020304050A413提取物過于固化，不測吸光度 0.533 0.6020.5120.452甘露醇濃度（g/mL） 0.1460.1650.1400.124由表4可知，固液比為10時(shí)，有一定的提取物，但離心液較少，不利于提取工藝的效率，未測定(cdng)結(jié)果。隨著水量的增大，提取量不斷上升，這是因?yàn)榧铀吭酱?，提取出的甘露醇越易溶解。?dāng)固液比為30 的時(shí)候。達(dá)到最大值。過多的

16、加水量稀釋甘露醇濃度。所以(suy)固液比控制在30為宜。4 小結(jié)(xioji)與討論 本試驗(yàn)采用水浴提取法，以海帶為原料，提取分離甘露醇，研究了海帶甘露醇的提取工藝。提取溫度、提取時(shí)間和固液比是影響海帶甘露醇提取的主要因素提取溫度為80 ,提取時(shí)間為3 h，固液比為1:30時(shí)使甘露醇的得率較高。本實(shí)驗(yàn)旨在進(jìn)行單因素對(duì)甘露醇提取的影響，如果條件允許，建議通過正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行多因素綜合考察，以得到其最佳的提取工藝，為生產(chǎn)研究提供必要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 參考文獻(xiàn)1 夏仙兵，蔡邦肖.海洋技術(shù).化工學(xué)報(bào)J，2010,61（11）：7-102 武文潔.從海帶乙醇預(yù)處理液中提取純化甘露醇的研究J.食品研究與開發(fā)，2006,（4）:16-183 黃宗國. 中國海洋生物種類與分布M. 北京: 海洋出版社, 1994: 201.4 董公芝，王鵬.甘露醇治療腦血管病并發(fā)急性腎衰竭臨床分析J.實(shí)用醫(yī)技雜志，2008，15（33）：4776-4777.5 吳國荃, 聶美麗, 羅書凱. 我國甘露醇的生產(chǎn)狀況與發(fā)展趨勢(shì)J. 化工技術(shù)經(jīng)濟(jì), 20