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1、【資料搜集】DNA的特性及應(yīng)用強(qiáng)奸案、無名尸源 確認(rèn)、碎尸案的同一認(rèn)定等案件用不同材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定江蘇省海門中學(xué) 路洪娜DNA提取與鑒定的原理DNA的理化性質(zhì)在“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用b.DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。c.DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中某些物質(zhì)則溶于酒精。a. 洗滌劑可瓦解細(xì)胞膜,但對(duì)DNA沒有影響。d.蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但對(duì)DNA沒有影響。2.去除DNA中的蛋白質(zhì)雜質(zhì)5.鑒定DNA1.調(diào)節(jié)溶液濃度使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀3.使DNA從細(xì)胞中釋放4.析出DNA除去溶解的雜質(zhì)e.沸水浴條件下,DNA與二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色。
2、其中含有的SDS,使蛋白質(zhì)變性此時(shí)溶液的濃度?實(shí)驗(yàn)步驟粗提取DNA1.先加食鹽研磨、再加SDS混勻2.過濾,取濾液6.獲得絲狀提取物5.加冷酒精3.嫩肉粉處理(60,10min)7. 溶解在10ml的2mol/l的NaCl中4.過濾,取濾液將濾液倒入試管中,貼標(biāo)簽實(shí)驗(yàn)步驟鑒定DNA步驟A試管B試管15mL溶有DNA的NaCl溶液24mL二苯胺試劑(現(xiàn)用現(xiàn)配)3沸水浴中加熱5min冷卻后觀察并記錄現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)須遵循的原則:對(duì)照原則、單因子變量原則5ml NaCl溶液4ml 二苯胺試劑對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組自變量實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 若想使實(shí)驗(yàn)結(jié)果明顯,應(yīng)選擇DNA含量較高的實(shí)驗(yàn)材料。另外,實(shí)驗(yàn)材料的保存方法對(duì)實(shí)驗(yàn)成敗也至關(guān)重要。 獼猴桃中的DNA含量明顯多于香蕉。 香蕉中染色體數(shù)為3n=33;獼猴桃中染色體數(shù)為2n=58實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析為何加蛋白酶處理后,提取物反而明顯減少? DNA含量較少,而雜質(zhì)量較多拓展延伸 進(jìn)行基因工程等操作時(shí),實(shí)驗(yàn)樣本往往很有限,且對(duì)純度要求高。如何改進(jìn)實(shí)驗(yàn)步驟,提取純度更高的DNA? 1、研磨時(shí)加入細(xì)胞核提取液,使核DNA充分釋放2、用氯仿異戊醇處理,去除蛋白質(zhì)雜質(zhì)3、用離心代替過濾,減少DNA損
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