樣本采集運(yùn)輸及送檢課件(PPT 24頁(yè))

1、對(duì)基層醫(yī)務(wù)人員的培訓(xùn) 提高對(duì)人禽流感的發(fā)現(xiàn)報(bào)告能力標(biāo)本采集、保存與送檢 自治區(qū)疾控中心 李新蘭 2008.4.第1頁(yè)，共24頁(yè)。 流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，及其保存運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)。第2頁(yè)，共24頁(yè)?，F(xiàn)場(chǎng)標(biāo)本采集準(zhǔn)備工作標(biāo)本采集和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)用品1)人感染高致病性禽流感病例或密切接觸者采樣登記表;2)采血用品:1Oml外螺旋帶密封墊圈螺口塑料管、醫(yī)用5ml或lOml一次性注射器針管或5ml真空針管、2ml血清管、帶有冰排的冰壺或冰包、止血帶、棉拭子、酒精、腆酒;3)采集鼻咽拭子用物品:鼻咽拭子保存管、15ml螺口管、3-5ml樣本運(yùn)送液（常用普通肉湯培養(yǎng)基、MEM、等滲鹽溶液或

2、磷酸鹽緩沖）、15ml螺口管,棉拭子;4）糞便、痰液、尸檢組織保存管:5Oml螺旋帶密封墊圈螺口塑料管;5)其他:油性記號(hào)筆;一次性紙杯、一次性紙漏斗、冰壺;污物袋;樣品編號(hào)標(biāo)簽紙或條碼紙。第3頁(yè)，共24頁(yè)。采集物品包裝好VTM的樣品采集管聚酯纖維拭子無(wú)菌生理鹽水 (0.85% NaCl)痰或粘液吸取管壓舌板采樣杯或平皿吸管其它樣品管冰袋采血的物品PPE防水的Marker筆,用于標(biāo)本的標(biāo)記第4頁(yè)，共24頁(yè)?，F(xiàn)場(chǎng)標(biāo)本采集準(zhǔn)備工作 現(xiàn)場(chǎng)個(gè)人防護(hù)用品:手套、防護(hù)眼鏡、符合N95標(biāo)準(zhǔn)的防護(hù)口罩、全面型呼吸防護(hù)器、鞋套、白大衣、隔離衣、洗手液、75%酒精等消毒液等。第5頁(yè)，共24頁(yè)。采樣對(duì)象單個(gè)不明原因

3、肺炎病例當(dāng)縣級(jí)衛(wèi)生行政部門組織的專家組會(huì)診后，仍不能排除SARS或人禽流感時(shí)聚集性不明原因肺炎病例發(fā)現(xiàn)后立即采樣送檢第6頁(yè)，共24頁(yè)。標(biāo)本種類和采集時(shí)間（1）臨床標(biāo)本呼吸道標(biāo)本上呼吸道標(biāo)本：咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、深咳痰液下呼吸道標(biāo)本：呼吸道抽取物、支氣管灌洗液、肺組織活檢標(biāo)本盡早采集上述標(biāo)本，發(fā)病一至兩周也可采集血清標(biāo)本第一份血清應(yīng)盡早（最好在發(fā)病后7天內(nèi)）采集第二份血清應(yīng)在發(fā)病后第34周采集在病愈出院或死亡前采集血標(biāo)本1份糞便標(biāo)本發(fā)病后盡可能早的采集糞便標(biāo)本第7頁(yè)，共24頁(yè)。標(biāo)本種類和采集時(shí)間（2）尸檢標(biāo)本病人死亡后應(yīng)盡早進(jìn)行解剖，在嚴(yán)格按照生物安全防護(hù)的條件下，進(jìn)行尸檢主要采

4、集肺、氣管、肝、腎、脾、心臟、腦、胃、腸、淋巴結(jié)等可疑組織標(biāo)本同時(shí)采集血標(biāo)本、分泌物或滲出物沒(méi)有條件進(jìn)行尸體解剖的，可采集呼吸道灌洗液或經(jīng)皮穿刺采集肺組織標(biāo)本 其他標(biāo)本可采集胸水、肺活檢標(biāo)本，還可采集枸櫞酸鹽抗凝血第8頁(yè)，共24頁(yè)。標(biāo)本采集方法-1鼻拭子：將1根帶有聚丙烯纖維頭的拭子輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以另一拭子拭另側(cè)鼻孔。將拭子頭浸入采樣液中，尾部棄去，旋緊蓋管。咽拭子：用2根帶有聚丙烯纖維頭的拭子擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，同樣將拭子頭浸入采樣液中，尾部棄去，旋緊蓋管。 注：亦可將鼻、咽拭子收集于同一采樣管中，以便提高分離率，減少工作量。鼻咽抽取物：用與負(fù)壓泵相連的

5、收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸道分泌物。先將收集器頭部插入鼻腔或氣管，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液3-5ml涮洗收集器3次。第9頁(yè)，共24頁(yè)。標(biāo)本采集方法-2漱口液：用10 ml生理鹽水漱喉。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動(dòng)。然后，用平皿或燒杯收集洗液鼻洗液：患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5 ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。然后讓患者低頭使生理鹽水流出，用平皿或燒杯收集洗液。重復(fù)此過(guò)程洗兩側(cè)鼻孔。第10頁(yè)，共24頁(yè)。標(biāo)本采集方法-3深咳痰液：要求病人深咳后，將咳出的痰液收集于50ml含3ml采樣液的螺口塑料

6、管中。呼吸道灌洗液：將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入氣管約30cm深處，注入5ml生理鹽水，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器（亦可用小孩道尿管接在50ml注射器上代替收集）。胸水：在B超定位下進(jìn)行胸腔穿刺，抽取胸水5ml，至于無(wú)菌的塑料螺口管中。第11頁(yè)，共24頁(yè)。標(biāo)本采集方法-4肺組織活檢標(biāo)本：在超聲或X線定位下，經(jīng)皮穿刺取肺組織活檢標(biāo)本，置于含3ml采樣液的塑料螺口管中。尸檢標(biāo)本：每一個(gè)采集部位分別使用不同消毒器械，以防交叉污染；每種組織應(yīng)多部位取材，各部位應(yīng)取20-50g，淋巴節(jié)取2個(gè)。糞便標(biāo)本：采集5-10g糞便置于含5-10ml采樣液的

7、無(wú)菌螺口管中，嚴(yán)格密封。血清標(biāo)本：用真空負(fù)壓采血管采集血液標(biāo)本5ml，室溫靜置換30分鐘，1500-2000rpm離心10分鐘，收集血清于2ml無(wú)菌螺口塑料管中。第12頁(yè)，共24頁(yè)。咽拭子容易操作在可疑的病例中發(fā)現(xiàn)禽流感病毒的可能性較高請(qǐng)病人盡量把嘴張開 當(dāng)拭子觸及咽后時(shí)病人不要往后躲，應(yīng)該抵住第13頁(yè)，共24頁(yè)。第14頁(yè)，共24頁(yè)。咽拭子第15頁(yè)，共24頁(yè)。例子correctwrong第16頁(yè)，共24頁(yè)。2. 鼻咽拭子插入干的拭子到鼻孔伸入鼻咽部停留片刻緩慢旋轉(zhuǎn)退出第17頁(yè)，共24頁(yè)。鼻咽拭子另一個(gè)鼻孔使用另一個(gè)棉簽將棉簽的尾部折斷后放入含有VTM的采樣管中。第18頁(yè)，共24頁(yè)。3. 鼻咽吸取液的收集將吸液管與真空泵相連將軟管與上腭平行插入鼻孔使用真空泵緩慢的移出同時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)使用同一個(gè)管子采集另一鼻孔的液體收集的液體用3 ml VTM 沖洗出，放入采樣管中第19頁(yè)，共24頁(yè)。采集血液樣本第20頁(yè)，共24頁(yè)。Serum separator tubes (SST)第21頁(yè)，共24頁(yè)。標(biāo)本保存醫(yī)院內(nèi)檢測(cè)的標(biāo)本可按本院規(guī)章對(duì)樣品進(jìn)行留樣及消毒處理。用于病毒分離和核酸檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)盡快送樣進(jìn)行檢測(cè)24小時(shí)內(nèi)能檢測(cè)的標(biāo)本可置于4保存24小時(shí)內(nèi)無(wú)法檢測(cè)的標(biāo)本則應(yīng)置于-70或以下保存如無(wú)70保存條件，則于20冰箱暫存血清可在4存放3天、-20以下長(zhǎng)期保存。標(biāo)本運(yùn)