十流感病毒PPT課件(PPT 55頁(yè))

1、第九章 流感病毒第1頁(yè)，共55頁(yè)。傳染性強(qiáng)，傳播速度快；引起的并發(fā)癥嚴(yán)重；全球每年流感病例為6億12億，重癥流感的病死率為810；人感染高致病性禽流感，死亡率60%；容易變異，人群缺乏持久免疫力。第2頁(yè)，共55頁(yè)。20世紀(jì)5次大流行：1900、1918、1957、1968、19771918-1919第一次世界大戰(zhàn)期間，發(fā)生一次大流行，當(dāng)時(shí)全世界20億人口，10億被感染死亡人數(shù)2000萬(wàn)，超過(guò)一戰(zhàn)中死亡人數(shù)的總和第3頁(yè)，共55頁(yè)。12435678PB2PB1RNAM2M1NAHA分節(jié)段的(-)ssRNA核蛋白（NP)3種RNA多聚酶 (PA, PB1, PB2)PA RNA多聚酶核糖核蛋白（RN

2、P）NP核衣殼基質(zhì)蛋白：M1,M2包膜蛋白內(nèi)層中層外層第4頁(yè)，共55頁(yè)。一、分類(lèi)1、型 根據(jù)核蛋白（NP）和基質(zhì)蛋白（MA）抗原性的不同，分A、B和C 3型，或稱(chēng)甲、乙、丙3型。甲型（A)：易變異，常可造成大流行。宿主：多種動(dòng)物、人。根據(jù)HA和NA抗原性的不同，再區(qū)分若干亞型：H1H16, N1N9乙型（B)：變異小，造成局部爆發(fā)。感染人和豬丙型（C)：不易變異，主要侵犯嬰幼兒。只感染人第5頁(yè)，共55頁(yè)。2、亞型 A型流感病毒根據(jù)血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）的不同進(jìn)一步分成亞型。 禽流感病毒的HA有16個(gè)亞型（H1-H14），NA有9個(gè)亞型（N1-N9）。第6頁(yè)，共55頁(yè)。二、病毒的性質(zhì)

3、 形態(tài) 典型的流感病毒粒子呈球狀，直徑80120nm，平均為100nm。病毒體有多形性，新分離的毒株通常為絲形，長(zhǎng)短不一，長(zhǎng)的可達(dá)數(shù)微米。第7頁(yè)，共55頁(yè)。第8頁(yè)，共55頁(yè)。2. 基因組： A、B兩型流感病毒由8個(gè)節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA組成 C型流感病毒基因組由7個(gè)RNA節(jié)段組成。 流感病毒RNA總分子量為5.91066.3 106，甲、乙、丙流感病毒基因組的大小和堿基組成不盡相同，AU：GC比率甲型為1.25，乙型為1.42，丙型為1.46。第9頁(yè)，共55頁(yè)。3. 病毒體表面結(jié)構(gòu)第10頁(yè)，共55頁(yè)。1）HA糖蛋白 HA內(nèi)有4個(gè)抗原位點(diǎn)，這些位點(diǎn)中個(gè)別氨基酸的改變可引起病毒抗原性的微小改變，即發(fā)

4、生抗原性漂移。第11頁(yè)，共55頁(yè)。 HA的生物學(xué)活性：1）是病毒的吸附蛋白；2）與病毒的侵入過(guò)程有關(guān)。病毒以膜融合方式進(jìn)入細(xì)胞需要HA的水解；3）有血細(xì)胞凝集活性；4）是病毒表面的主要抗原，誘生中和抗體和細(xì)胞免疫反應(yīng)，決定病毒的亞型。第12頁(yè)，共55頁(yè)。血凝素HA的作用 雞紅細(xì)胞糖蛋白受體HA紅細(xì)胞凝集+抗體血凝抑制現(xiàn)象現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)第13頁(yè)，共55頁(yè)。2）NA糖蛋白完整的NA糖蛋白為蘑菇狀，由48.5nm的頭部和410nm的柄組成，單一的寡糖鏈可決定病毒的亞型。作用： 1) 可水解細(xì)胞表面受體特異性糖蛋白末端的N-乙酰基神經(jīng)氨酸。 2) 病毒在細(xì)胞表面成熟時(shí)，NA可以移去細(xì)胞膜出芽點(diǎn)上的神經(jīng)氨酸酶

5、，有利于病毒粒子的成熟和釋放。 3) 具有免疫原性，能誘發(fā)相應(yīng)的抗體第14頁(yè)，共55頁(yè)。HA和NA的關(guān)系HA結(jié)合唾液酸NA水解唾液酸病毒與受體結(jié)合，進(jìn)入細(xì)胞病毒釋放第15頁(yè)，共55頁(yè)。3)抗原性流感病毒的主要抗原成分有NP、MA、HA和NA。NP、MA具有型特異性，相應(yīng)抗體對(duì)病毒感染無(wú)保護(hù)力。HA、NA是種特異性抗原，HA能使動(dòng)物產(chǎn)生中和抗體，對(duì)機(jī)體有保護(hù)作用；NA抗體不能中和病毒，但能減少病毒增殖，改變病程。第16頁(yè)，共55頁(yè)。抗原漂移（antigenic drift)：由于基因組自發(fā)的點(diǎn)突變引起小幅度的變異，當(dāng)氨基酸的改變積累到一定程度或突變氨基酸正好使抗原決定簇改變，則引起抗原性的變異。

6、抗原變異幅度小，屬于量變，中小型流行，每年有發(fā)生。 變異機(jī)理：編碼血凝素基因發(fā)生一系列點(diǎn)突變，（某一核苷酸的堿基發(fā)生改變）導(dǎo)致氨基酸序列改變。第17頁(yè)，共55頁(yè)?？乖频?8頁(yè)，共55頁(yè)?？乖D(zhuǎn)變（antigenic shift)：由于突變幅度較大，導(dǎo)致產(chǎn)生新的亞型，這種變異稱(chēng)為抗原轉(zhuǎn)變。變異幅度大，質(zhì)變，大流行。每10-40年出現(xiàn)一次。變異機(jī)理：基因重組(交換核酸片斷）第19頁(yè)，共55頁(yè)。人肺細(xì)胞人流感病毒雞流感病毒新病毒株第20頁(yè)，共55頁(yè)。甲型流感病毒抗原轉(zhuǎn)變與流行年代近年來(lái)流行型別：H3N2、H1N1第21頁(yè)，共55頁(yè)。三、病毒的復(fù)制 第22頁(yè)，共55頁(yè)。流感病毒的復(fù)制過(guò)程第23頁(yè)，

7、共55頁(yè)。四、理化特性抵抗力不強(qiáng)；56 30min，滅活；對(duì)干燥、日光、紫外線(xiàn)敏感；室溫下感染性很快消失；乙醚、甲醛等敏感；酸性條件下更易滅活；但在-70或冷凍干燥后活性可長(zhǎng)期保存。 第24頁(yè)，共55頁(yè)。（一）傳染源、傳播方式、潛伏期傳染源Source 急性感染者 傳播方式Spread 飛沫或污染物 潛伏期Incubation 1-3 days. 五、致病性第25頁(yè)，共55頁(yè)。(二)流感病毒的致病機(jī)制病毒局部炎癥呼吸道毒素樣物質(zhì)血流全身癥狀肺炎少數(shù)呼吸道局部感染, 不引起病毒血癥第26頁(yè)，共55頁(yè)。（三）常見(jiàn)癥狀 全身癥狀：發(fā)熱fever、頭痛headache，肌肉酸痛myalgia（重）上炎

8、：鼻塞、咽痛、咳嗽（輕）致病性第27頁(yè)，共55頁(yè)。（四）并發(fā)癥1. 肺炎（合并細(xì)菌感染，常見(jiàn)的有肺炎球菌、金黃色葡萄球菌等） 2.其他病毒的雙重感染, eg. Adenovirus（腺病毒）常發(fā)生于老年人、兒童、心肺功能異常者（五）免疫性：感染后獲得對(duì)同型V免疫力第28頁(yè)，共55頁(yè)。六. 微生物學(xué)檢查法1.快速診斷檢測(cè)病毒抗原：取材：鼻粘膜，呼吸道脫落上皮細(xì)胞免疫熒光法、ELISA檢測(cè)核酸：RT-PCR第29頁(yè)，共55頁(yè)。2.血清學(xué) 急性期，恢復(fù)期雙份血清檢測(cè)抗體效價(jià)，如果后者比前者升高4倍以上，可作出診斷。 第30頁(yè)，共55頁(yè)。3. 病毒分離鑒定取急性期患者咽嗽液或鼻咽拭子，加抗生素處理后，

9、放冰瓶?jī)?nèi)送實(shí)驗(yàn)室接種雞胚接種培養(yǎng)細(xì)胞第31頁(yè)，共55頁(yè)。七、預(yù)防與治療1、建立流感檢測(cè)站，及時(shí)發(fā)現(xiàn)與隔離病人2、預(yù)防接種亞單位疫苗，70% protection. 第32頁(yè)，共55頁(yè)。抗流感病毒藥物金剛烷胺：M2阻滯劑奧司米韋：可以抑制神經(jīng)氨酸酶活性。干擾素中藥：清熱解毒板藍(lán)根、大青葉、連翹、魚(yú)腥草，等第33頁(yè)，共55頁(yè)?？沽鞲行滤帯斑_(dá)菲”八角大腸桿菌+炸藥莽草酸30：1葡萄糖“達(dá)菲”成分中竟包含一種可爆炸物質(zhì)、一種中國(guó)調(diào)味料以及一種無(wú)害的大腸桿菌。 第34頁(yè)，共55頁(yè)。八、獸醫(yī)臨床上常見(jiàn)的流感病毒 第35頁(yè)，共55頁(yè)。（一）禽流感1.分類(lèi)地位：正粘病毒科/甲型流感病毒屬。 第36頁(yè)，共55頁(yè)

10、。2.禽流感病毒一般特性 球形，直徑為80120nm，但也常有同樣直徑的絲狀形式，長(zhǎng)短不一； 單股負(fù)股RNA，分8節(jié)段；螺旋對(duì)稱(chēng)核衣殼。 有囊膜，表面有1012nm的纖突（H and N）；H和N是囊膜表面的主要糖蛋白；具有型特異性和多變性，在病毒感染過(guò)程中起著重要作用。H決定病毒的致病性，能誘發(fā)感染宿主產(chǎn)生具有保護(hù)作用的中和抗體；N誘發(fā)的抗體無(wú)中和作用,但可減少病毒增殖；高致病性毒株主要是H5和H7。第37頁(yè)，共55頁(yè)。第38頁(yè)，共55頁(yè)。3.禽流感病毒的培養(yǎng) 常用：雞胚（初次羊膜腔、適應(yīng)后尿囊腔）及細(xì)胞培養(yǎng)（雞胚成纖維細(xì)胞、原代猴腎細(xì)胞、MDCK、Vero)； 有些毒株在鴿或其他細(xì)胞中培養(yǎng)

11、后，對(duì)雞的毒力減弱。 第39頁(yè)，共55頁(yè)。4、禽流感病毒來(lái)源及傳播水禽是禽流感病毒的主要貯藏庫(kù),水禽一般呈亞臨床感染 ;將水禽與家禽混合飼養(yǎng)非常容易將病毒引入家禽; 散養(yǎng); 使用不能防止野鳥(niǎo)進(jìn)入的禽舍 ;存在多種禽鳥(niǎo)的市場(chǎng)也可能是病毒的主要來(lái)源.豬是不同病毒基因重配的“混合器”或活載體, 是“禽-豬-人”種間傳播鏈中的中間宿主第40頁(yè)，共55頁(yè)。水禽和野生鳥(niǎo)類(lèi)、鷗類(lèi) 活禽市場(chǎng)豬混合器第41頁(yè)，共55頁(yè)。 主要來(lái)自野生禽類(lèi)（尤其是野生水禽）、受感染的家禽以及觀(guān)賞鳥(niǎo)等。 第42頁(yè)，共55頁(yè)。禽流感的傳播可在感染的鳥(niǎo)類(lèi)和禽群中持續(xù)存在數(shù)月 有多種傳播途徑 可通過(guò)污染的衣服、鞋、設(shè)施及鳥(niǎo)籠等傳播第43

12、頁(yè)，共55頁(yè)。第44頁(yè)，共55頁(yè)。5.禽流感病毒的致病性 引起各種類(lèi)型的禽流感（Avian influenza，AI)。 高致病性禽流感又稱(chēng)：真性雞瘟、歐洲雞瘟；OIE A類(lèi)傳染病，嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)。第45頁(yè)，共55頁(yè)。第46頁(yè)，共55頁(yè)。第47頁(yè)，共55頁(yè)。6.禽流感病毒的診斷 病毒的分離與鑒定 采取病禽的呼吸道滲出物或器官組織，制成懸液，離心沉淀或過(guò)濾以去除組織碎屑；無(wú)菌懸液0.1-0.2mL尿囊腔接種1011日齡雞胚，35-37中培養(yǎng)。取雞胚的尿囊液,以HA試驗(yàn)和HI試驗(yàn)鑒定病毒。 血清學(xué)試驗(yàn)：禽流感病毒抗體的檢測(cè)，這種抗體在感染后7d便可被檢測(cè)出來(lái)。用于血清學(xué)檢查的方法有：HI試驗(yàn)（檢測(cè)

13、抗H抗體）、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（檢測(cè)抗NP抗體）、病毒中和試驗(yàn)、神經(jīng)氨酸酶抑制試驗(yàn)、ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）以及瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)等。通常是采取發(fā)病初期和康復(fù)期(發(fā)病后1428d)的血清檢測(cè)，若康復(fù)期血清抗體比發(fā)病初期升高倍以上，則可證實(shí)禽流感的發(fā)生。第48頁(yè)，共55頁(yè)。分子生物學(xué)診斷 RT-PCR 和Realtime RT-PCR熒光RT-PCR、 RT-PCR-ELISA依賴(lài)核酸序列的擴(kuò)增技術(shù)(NASBA)環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)基因芯片技術(shù)第49頁(yè)，共55頁(yè)。7.預(yù)防與控制 第50頁(yè)，共55頁(yè)。（二）豬流感病毒（Swine influenza virus，SIV）（1）分類(lèi)地位：正粘病毒科/甲型流感病毒屬（2）血清型：主要有H1N1、H3N2；近年來(lái)，從豬體內(nèi)還分離到丙型流行性感冒病毒，但對(duì)豬不致病。（3）抵抗力：流感病毒存在于病豬和帶毒豬的呼吸道分泌物中，對(duì)熱和日光的抵抗力不強(qiáng)，一般消毒藥敏感。 第51頁(yè)，共55頁(yè)。（4）致病性：致豬的急性呼吸器