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文檔簡介
1、尿紅細(xì)胞形態(tài)項(xiàng)目名稱尿紅細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)?zāi)康?臨床常規(guī)檢驗(yàn)2泌尿系統(tǒng)疾病3其他疾病診斷和鑒別診斷、治療監(jiān)控及健康普查等臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)原理:1檢測原理:將尿液離心,倒掉上清尿液、用戊二醛固定一小時(shí)后涂成薄膜, 經(jīng)W-G染色后,于顯微鏡下,按尿紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征逐個(gè)分?jǐn)?shù),得出正常紅細(xì) 胞和異常紅細(xì)胞的百分比。2染色原理(瑞氏-吉姆薩復(fù)合法染色):使細(xì)胞著色既是有化學(xué)親和反應(yīng),又 有物理吸附作用。對染料的親和力也不一樣,因此,染色后各種細(xì)胞呈出現(xiàn)各自 的染色的特點(diǎn)。3瑞氏-吉姆薩復(fù)合法染色法學(xué)溯源:其原理與瑞氏染色染色原理相同,但提 高了塞秦染料的質(zhì)量,加強(qiáng)了天青的作用,對細(xì)胞核著色效果較好,但對中性顆
2、粒著色瑞氏染色差。因此,瑞氏-吉姆薩復(fù)合染色法可取長補(bǔ)短,使血細(xì)胞的顆 粒及胞核均能獲得滿意的染色效果。性能參數(shù)4. 1 重復(fù)性:CV=2%2分析和計(jì)算參數(shù):報(bào)告單位百分比()3標(biāo)本量:適量,染液量:緩沖液=1:1固定液量:尿液=1:14. 4細(xì)胞計(jì)數(shù):100 (個(gè))5精密度范圍:原始樣品系統(tǒng):晨尿(中段尿)容器清潔的尿試管(有蓋)試劑及顯微鏡瑞氏-吉姆薩復(fù)合法染液吉姆薩7. 1 I液:取瑞氏染料1g,吉姆薩染料0.3G,置潔凈研缽中,加少量甲醇(分 析純),研磨片刻,析出上層染液。再加少量甲醇繼續(xù)研磨,再吸出上層 染液。如此連續(xù)幾次,共用甲醇500ML。收集于棕色玻璃瓶中,每天早. 晚各振搖
3、3MIN,共5天,以后存放一周即能使用。7. 1. 2使用方法:液體染料,直接使用7. 1. 3儲存:常溫保存7. 2 II液:PH6.4-6.8磷酸鹽緩沖液磷酸二氫鉀(無水)6.64G磷酸氫二鈉(無水)2.56G加少量蒸餾水溶解,用磷酸鹽調(diào)整PH,加水至1000ML。7. 2. 1使用方法:液體染料,直接使用7. 2. 3儲存:常溫保存 7. 3.戊二醛7. 4顯微鏡4. 1商標(biāo)校準(zhǔn)程序:顯微鏡的驗(yàn)證,光路系統(tǒng)校正燈泡大約半年更換一次程序步驟:1標(biāo)本采集與要求1. 1標(biāo)本的采集:患者在清晨起床后,在未進(jìn)早餐和其他運(yùn)動之前排泄的尿液,但在采集的前 一天醫(yī)生應(yīng)提供收集的容器和書面或口頭收集說明,
4、如外陰、生殖器清潔方法、 留中段尿等,并在試管上做好標(biāo)識。留取后應(yīng)及時(shí)送到檢驗(yàn)科(最好30min內(nèi)完 成),需要運(yùn)輸時(shí)應(yīng)在避光條件下。1. 2不合格標(biāo)本的處理對標(biāo)本中混入異物的(如糖紙、煙灰)有污染的容器裝標(biāo)本的、無標(biāo)識等不 合格的標(biāo)本,距采集時(shí)間超過2小時(shí)并沒有按要求儲存的標(biāo)本,按程序文件樣 品核收、登記和保存程序處理1. 3標(biāo)本的保存尿液標(biāo)本采集后,一般應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)及時(shí)送檢,最好在30分鐘內(nèi)完成檢驗(yàn)。 如不能及時(shí)檢驗(yàn)者一般放在4攝氏度冰箱可保存6小時(shí),在極特殊的情況下需加 適量的防腐劑(一般尿液篩查時(shí)盡量不使用防腐劑)。9. 2檢驗(yàn)前準(zhǔn)備9. 2. 1把接收到的標(biāo)本按順序編寫序號。9. 2
5、. 2準(zhǔn)備清潔、干燥、無塵、無油脂的離心管、載玻片,玻璃筆。9. 3病人標(biāo)本的檢驗(yàn)9. 3. 1離心及固定取清潔的離心管,倒入混合后的新鮮的尿液10ml,用12001300r/min轉(zhuǎn)速, 離心5min。待離心停止后,取出離心管,棄去上層清夜,留下0.2ML沉渣,輕搖離 心管,使沉渣有形成分充分混勻。向離心管中加與沉渣等量的戊二醛,進(jìn)行沉渣固定。需靜止放在試管架上 1小時(shí)。9. 3. 2涂片的制備尿沉渣固定一小時(shí)后,取出離心管,棄去上層清液,留下0.2ML沉渣, 輕搖離心管。用塑料吸管取出沉渣12滴到載玻片的中心,然后用離心管的口端與沉渣 接觸,由里向外,輕輕涂片。的膜的薄厚與沉渣的有形成分的
6、多少和沉渣量的多 少有關(guān),如沉渣的粘稠則取少量的沉渣涂片面積大些,這樣形成的涂片就比較??; 反之亦然。涂片應(yīng)在室溫或37攝氏度溫箱中干燥。9. 3. 3涂片的染色制成厚薄適宜的涂片。用玻璃筆把膜圈上,然后將涂片平放在染色架上。加瑞吉染液數(shù)滴,以覆蓋整個(gè)血膜為宜,定血膜約1MIN。滴加約等量的緩沖液與染液混合,室溫下染色510MIN。用流水沖去染液,待干燥后鏡檢。【附注】未十透的尿沉渣膜不能染色,否則染色時(shí)膜易脫落。染色時(shí)間與染色濃度、染色時(shí)溫度成反比;而與細(xì)胞數(shù)量成正比。沖洗時(shí)不能先倒掉染料,應(yīng)用流水沖洗去,以防染料沉淀在血膜上。如血膜上有染料顆粒沉積,可加少許甲醇溶解,但需立即用水沖掉甲醇,
7、 以免脫色。染色過淡,可以復(fù)染。復(fù)染時(shí)先加緩沖液,創(chuàng)造良好的染色環(huán)境,而 后加染液,或加染液與緩沖液的混合液,不可先加染液。染色過深可用水沖洗或侵泡水中一定時(shí)間,也可用甲醇脫色。染色偏酸或偏堿時(shí),均應(yīng)更換緩沖液再重染。3. 4鏡下尿紅細(xì)胞分類先用低倍下瀏覽全片,了解染色好壞和細(xì)胞分布情況。選擇染色及細(xì)胞分布良好的區(qū)域,在油鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)尿紅細(xì)胞,按其形 態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。求出變形紅細(xì)胞和正常紅細(xì)胞占百分?jǐn)?shù)絕對值?!靖阶ⅰ糠诸悤r(shí)應(yīng)從膜的邊緣向另一邊緣一次上下呈城垛狀迂回移動,計(jì)數(shù)時(shí)不 能重復(fù)和遺漏。紅細(xì)胞數(shù)明顯減少的血片,應(yīng)檢查多張涂片。紅細(xì)胞形態(tài)變化較大,遇有疑問應(yīng)請問上級主管或主任進(jìn)行核
8、實(shí),以減 少錯誤。質(zhì)量控制影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素比較多,如夜放置過久可變堿性、尿液中拄紅細(xì)胞可能 會破壞。尿酸堿度、滲透量變化對尿紅細(xì)胞成分都會有影響。如下表高滲尿低滲尿酸性尿堿性尿紅 細(xì) 胞皺縮,體積變 小星形或桑 葚形膨脹,體積變大 不定形或無色可存在一定時(shí)間體積變小溶解破裂, 粒形成褐色顆1標(biāo)本采集正確流去尿標(biāo)本對尿紅細(xì)胞檢查極其重要,一般宜用新鮮、早 晨中段尿液。要避免污染,如女性應(yīng)避免月經(jīng)血、陰道分泌物混入,必要時(shí)應(yīng)采 用導(dǎo)尿術(shù)采集標(biāo)本。尿液標(biāo)本最好在收集后2小時(shí)內(nèi)完成檢查,盡量不加如防腐 劑,不能及時(shí)送檢者應(yīng)妥善的保存和處理標(biāo)本,必要時(shí)應(yīng)選擇正確的防腐劑防腐, 以避免相應(yīng)的成分別破壞。
9、2使用標(biāo)準(zhǔn)的器材應(yīng)用一次性清潔干燥容器,標(biāo)本容器必須有清楚的標(biāo)記 號(病人姓名、標(biāo)本留取時(shí)間、標(biāo)本編號等);使用標(biāo)準(zhǔn)的尿離心管,統(tǒng)一離心 條件等。3采用可靠的尿紅細(xì)胞質(zhì)控物尿紅細(xì)胞質(zhì)控物含有一定量保存完好的紅細(xì) 胞,用以室內(nèi)質(zhì)量控制。4加強(qiáng)與臨床聯(lián)系 應(yīng)將檢查結(jié)果及時(shí)反饋到臨床,如有疑問,應(yīng)與臨床 醫(yī)師共同分析原因。干擾1尿液混入經(jīng)血、白帶、糞便。2尿液混入煙灰等異物。3容器不潔凈。實(shí)驗(yàn)室解釋根據(jù)尿液中紅細(xì)胞的形態(tài)可將血尿分3種:即均一性紅細(xì)胞血尿(非腎小球源性 血尿)、非均一性紅細(xì)胞血尿(腎小球源性血尿)和混合性血尿。1均一性紅細(xì)胞血尿:紅細(xì)胞外形及大小多見正常,形態(tài)較一致,類似外周 血未染
10、色血片上的紅細(xì)胞形態(tài)。在少數(shù)情況下,也可見到丟失血紅蛋白的影細(xì)胞 或外形輕微改變的棘細(xì)胞。整個(gè)尿標(biāo)本中紅細(xì)胞形態(tài)不超出2種。據(jù)報(bào)道,均一 性紅細(xì)胞與腎活檢的診斷符合率92.6%。1. 1非腎源性血尿:見于1.暫時(shí)性鏡下血尿,如正常人,特別是青少年在 劇烈運(yùn)動、急性軍、冷水浴、久站或重體力勞動后。女性患者,還應(yīng)注意是否有 月經(jīng)血污染尿液,應(yīng)通過動態(tài)觀察加以區(qū)別。2.泌尿系統(tǒng)自身疾?。喝缑谀蛳到y(tǒng) 各部位的炎癥、腫瘤、結(jié)合、結(jié)石、創(chuàng)傷、腎移植排異反應(yīng)、先天性畸形等均可 引起不同程度的血尿。3.其它疾病:見于各種原因引起的出血性疾病,如特發(fā)血 小板減少性紫瘢、血友病、再生障礙性貧血和白血病合并血小板減
11、少、DIC、高 血壓、動脈硬化、高熱;某些免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡等;泌尿系統(tǒng)附近器 官的疾病如前列腺炎、精囊炎、盆腔炎等。2非均一性紅細(xì)胞血尿:即變形紅細(xì)胞血尿,紅細(xì)胞大小不一致體積可相差 34倍,尿中可見2種形態(tài)以上的多形性變化的紅細(xì)胞,如大紅細(xì)胞、小紅細(xì)胞、 棘形紅細(xì)胞、皺縮紅細(xì)胞等。非均一性紅細(xì)胞血尿與活檢的診斷符合率可達(dá)到 96.7%。12. 2. 1腎源性血尿 多見急性或慢性腎小球炎、腎盂腎炎、紅斑狼瘡性腎炎、 腎病綜合征。腎源性血尿時(shí),多伴尿蛋白增多明顯,而紅細(xì)胞增多不明顯,還常 伴有管型,如顆粒管型、紅細(xì)胞管型、腎小管上皮細(xì)胞等。3混合性血尿:指尿液中含有均一性和非均一性兩類紅細(xì)胞。依據(jù)哪一類紅 細(xì)胞超過50%,又可分為以非均一性紅細(xì)胞為主和以均一性紅細(xì)胞為主的兩組。安全性防護(hù)措施1在操作顯微鏡時(shí)應(yīng)按照儀器作業(yè)指導(dǎo)書進(jìn)行操作,防止受傷、觸電等2請帶上橡膠手套進(jìn)行染色、沖片,在工作完成后,用消毒液清洗雙手,以免發(fā) 生感染3在檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎,應(yīng)始終戴上橡膠手套,以避免發(fā)生細(xì)菌感染,若樣本濺 入眼睛或者傷口,須用大量清水沖洗,并立即就診4在配制染液時(shí):如果試劑不慎落入眼睛,立即用大量清水沖洗,并接受治療; 如果不慎吞入試劑,立即向醫(yī)生
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