微生物培養(yǎng)ppt課件

1、課題1 微生物的實驗室培育專題2 :微生物的培育與運用.一、根底知識：一培育基 培育基培育液是由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁衍運用的混合營養(yǎng)液。1按物理形狀來分：培育基可分為固體培育基和液體培育基。其中固體培育基用于菌種分別、鑒定菌落等。2按功能來分，可分為選擇培育基和鑒別培育基。3按成分來分，可分為天然培育基和合成培育基。1.培育基的類型和用途. 2.不同的微生物往往需求采用不同的培育基配方 (參考教材附錄內(nèi)容) 3.不論哪種培育基，普通都含有水、碳源、和氮源、 無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，另外還需求滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì),例如:生長因子(即細菌生長必需，而本身不能合成的化合物,如

2、維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧氣、二氧化碳、浸透壓等的要求。 .選擇培育基參與青霉素的培育基: 分別酵母菌、霉菌等真菌參與高濃度食鹽的培育基: 分別金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培育基: 分別固氮菌不加含碳有機物的無碳培育基: 分別自養(yǎng)型微生物.二無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)的概念 無菌操作泛指在培育微生物的操作中，一切防止雜菌污染的方法。無論是隨后將要學(xué)到的倒平板、平板劃線操作，還是稀釋涂布平板法，其操作中的每一步都需求做到“無菌，即防止雜菌污染。.消毒定義：利用溫暖的理化方法，殺死大部分致病微生物的過程。2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別 2滅菌的定義：以劇烈的理化要素消滅一切微生物，包括一切

3、細菌的繁衍體、芽孢、霉菌及病毒。.1、煮沸消毒法:100煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75 下煮30min或 80 下煮15min3、化學(xué)藥劑消毒法:用75%酒精、新潔爾滅等進展皮膚消毒;氯氣消毒水源4、紫外線消毒(1)消毒的方法：3.常用的消毒與滅菌的方法.1、灼燒滅菌2、干熱滅菌：160-170 下加熱1-2h。3、高壓蒸氣滅菌：100kPa、121 下維持15-30min.(2)滅菌的方法：.3.微生物實驗室培育的根本操作程序1、器具的滅菌2、培育基的配制3、培育基的滅菌4、倒平板5、微生物接種6、恒溫箱中培育7、菌種的保管.1.無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培育物被其他外來微生物

4、污染外，還有什么目的？2.請他判別以下資料或器具能否需求消毒或滅菌。假設(shè)需求，請選擇適宜的方法。1 培育細菌用的培育基與培育皿2 玻棒、試管、燒瓶和吸管3 實驗操作者的雙手 答：無菌技術(shù)還能有效防止操作者本身被微生物感染。答：1、2需求滅菌；3需求消毒。旁欄思索.三、實驗操作 1.制備牛肉膏蛋白胨培育基用于培育細菌.1計算2. 稱量3溶化4調(diào)pH5滅菌6倒平板操作步驟.倒平板技術(shù). 1.培育基滅菌后，需求冷卻到50 左右時，才干用來倒平板。他用什么方法來估計培育基的溫度？問題討論 答：可以用手觸摸盛有培育基的錐形瓶，覺得錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進展倒平板了。2.為什么需求使錐形瓶

5、的瓶口經(jīng)過火焰？ 答：經(jīng)過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培育基。.3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，假設(shè)不小心將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培育微生物嗎？為什么？ 答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培育基外表的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培育基外表的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培育基，呵斥污染。 答：空氣中的微生物能夠在皿蓋與皿底之間的培育基上繁殖，因此最好不要用這個平板培育微生物。.2、純化大腸桿菌接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法 平板劃線法:經(jīng)過接種環(huán)在瓊脂固體培育基外表延續(xù)畫線的操作,將聚集的菌種逐漸稀釋分散到

6、培育基的外表. 在數(shù)次畫線后,可以分別到由一個細胞繁衍而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落.微生物的接種技術(shù).問題討論 1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作終了時，依然需求灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上能夠存在的微生物污染培育物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線終了后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而經(jīng)過劃線次數(shù)的添加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線終了后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防止細菌污染環(huán)境和感染操作者。. 2.在灼燒接種環(huán)之后，

7、為什么要等其冷卻后再進展劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。 3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開場劃線？ 答：劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開場，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的添加而逐漸減少，最終能得到由單個細菌繁衍而來的菌落。.問題討論 涂布平板的一切操作都應(yīng)在火焰附近進展。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進展無菌操作？ 應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌。例如，酒精燈與培育皿的間隔要適宜、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。.微生物的恒溫培育.菌種的保管 1、暫時保藏：接種到固體斜面培育基，菌落長成后置于4冰箱保管。 2、長期保管：甘油冷凍管藏法.四、課題成果評價 一培育基的制造能否合格 假設(shè)未接種的培育基在恒溫箱中保溫12 d后無菌落生長，闡明培育基的制備是勝利的，否那么需求重新制備。 二接種操作能否符合無菌要求 假設(shè)培育基上生長的菌落的顏色、外形、大小根本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點，那么闡明接種操作是符合要求的；假設(shè)培育基上出現(xiàn)了其他菌落，那么闡明接種過程中，無菌操作還未到達要求，需求分