協(xié)和 一般藥理新講稿

1、一般藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)朱 海 波中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥物研究所心腦血管藥理學(xué)研究組1共五十一頁一、發(fā)展史二、定義三、指導(dǎo)原則內(nèi)容(nirng)四、方法學(xué)五、小結(jié)提 綱2共五十一頁1968年在德國伯林召開藥理學(xué)會(huì)議，Irwin, S.教授作了一份全面性檢測評(píng)價(jià)的重要報(bào)告，系統(tǒng)性定量(dngling)評(píng)價(jià)小鼠行為和生理狀態(tài)的程序。這為一般藥理學(xué)研究的發(fā)展奠定了重要的基礎(chǔ)。1991年Haggerty, GC教授發(fā)表了名叫新藥神經(jīng)毒性檢測的策略和經(jīng)驗(yàn)的文章后, 它對(duì)檢測新藥的神經(jīng)毒性具有特別重要的指導(dǎo)意義。1991年日本厚生勞動(dòng)省頒布的一般藥理學(xué)研究，對(duì)新藥必須進(jìn)行一般藥理學(xué)研究的嚴(yán)格規(guī)定。一般

2、藥理的研究目的是發(fā)現(xiàn)沒有預(yù)測到的對(duì)器官功能的作用和尋找其他的藥理學(xué)作用，而安全藥理學(xué)的研究著眼點(diǎn)則集中在發(fā)現(xiàn)新藥的不良反應(yīng)上。1993年7月中國衛(wèi)生部藥政局頒布的新藥（西藥）臨床前研究指導(dǎo)原則匯編中，首次在我國出現(xiàn)新藥一般藥理研究的指導(dǎo)原則。方法較簡單，未提及到藥物的次要新作用和不良反應(yīng)的觀察，不利于對(duì)新藥一般學(xué)藥理研究的全面考慮。一、發(fā)展史3共五十一頁1994年Murphy, DJ教授發(fā)表了安全藥理學(xué)中呼吸系統(tǒng)的研究方法和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的文章后, 它對(duì)新藥安全藥理學(xué)中呼吸系統(tǒng)研究方法具有重要貢獻(xiàn)和實(shí)際應(yīng)用的指導(dǎo)意義。1996年Mattsson, JL教授等發(fā)表了大鼠功能性觀測的系統(tǒng)檢查指導(dǎo)臨床的操

3、作規(guī)程的文章后，對(duì)一般藥理學(xué)研究中功能性系統(tǒng)檢查具有特別重要的意義。1997年美國FDA分別頒發(fā)ICH M3 非臨床安全性研究的時(shí)程對(duì)藥品臨床試驗(yàn)的指導(dǎo)原則和ICH S6 生物技術(shù)藥品的臨床前安全性評(píng)價(jià)文件。這兩份文件首次把一般藥理學(xué)研究改為安全性藥理學(xué)，它使安全性藥理學(xué)提高到一個(gè)(y )新的階段。1999年9月中國新藥審批文件修訂的一般藥理研究的指導(dǎo)原則（討論稿），參考了國外的一些文獻(xiàn)，強(qiáng)調(diào)根據(jù)藥物的藥理作用，在較廣泛的研究不同系統(tǒng)功能的基礎(chǔ)上，根據(jù)藥物的治療領(lǐng)域、作用特點(diǎn)進(jìn)行系統(tǒng)的專項(xiàng)研究，但對(duì)一般藥理或推測藥物與人用安全性的關(guān)系方面未進(jìn)行深入探討。4共五十一頁 2001年美國FDA的IC

4、H協(xié)調(diào)會(huì)制訂了人用藥安全藥理學(xué)的指導(dǎo)原則S7A，重視了對(duì)藥物的安全性評(píng)價(jià)與臨床的相關(guān)意義。 2002年美國FDA的ICH協(xié)調(diào)會(huì)制訂了安全藥理學(xué)研究評(píng)價(jià)人用藥對(duì)延遲心室復(fù)極化（QT間期延長(ynchng)）的指導(dǎo)原則S7A。 這將使人生命功能最重要的器官-心臟具有更安全的藥物評(píng)價(jià)。 2003年最新研究表明科學(xué)合理的一般藥理學(xué)/安全藥理學(xué)研究對(duì)提高臨床用藥的安全性具有特別重要的意義。 5共五十一頁二、定義(dngy)何謂一般藥理學(xué)？一般藥理學(xué)的研究目的一般藥理學(xué)包括哪些研究內(nèi)容？一般藥理學(xué)在新藥安全評(píng)價(jià)(pngji)中有何意義？如何設(shè)計(jì)一般藥理學(xué)試驗(yàn)？6共五十一頁一般(ybn)藥理學(xué)（genera

5、l pharmacology ）是對(duì)主要藥效學(xué)作用以外進(jìn)行的廣泛的藥理學(xué)研究，包括次要藥效學(xué)和安全藥理學(xué)的研究。二、定義(dngy)7共五十一頁1、次要藥效學(xué)：主要研究藥物非期望的、與治療目的不相關(guān)的效應(yīng)和作用機(jī)制。2、安全藥理學(xué)：研究藥物治療范圍內(nèi)或治療范圍以上的劑量時(shí)，潛在不期望出現(xiàn) 的對(duì)生理功能的不良影響。3、根據(jù)需要可能進(jìn)行追加和/或補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究。 3.1 追加的安全藥理學(xué)研究：根據(jù)藥物的藥理性質(zhì)和化學(xué)類型，估計(jì)可能出現(xiàn) 的不良反應(yīng)。如果(rgu)對(duì)已有的動(dòng)物和臨床試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生懷疑，可能影響人的 安全性，此時(shí)應(yīng)做進(jìn)一步追加的安全藥理學(xué)研究，即對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心 血管系統(tǒng)和呼吸系

6、統(tǒng)進(jìn)行深入的研究。 3.2 補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究：是評(píng)價(jià)受試藥物對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和 呼吸系統(tǒng)以外的器官功能的影響，包括對(duì)泌尿系統(tǒng)腎臟、自主神經(jīng)系統(tǒng)、 胃腸道系統(tǒng)和其它器官組織的研究。二、定義(dngy)8共五十一頁研究目的確定藥物可能關(guān)系到人的安全性的非期望藥理作用評(píng)價(jià)藥物在毒理學(xué)和/或臨床研究中所觀察(gunch)到的藥物不良反應(yīng)和/或病理生理作用研究所觀察到的和/或推測的藥物不良反應(yīng)機(jī)制。9共五十一頁三、化學(xué)(huxu)藥物一般藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則2005.4.31基本原則實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本要求(yoqi)主要研究內(nèi)容數(shù)據(jù)處理與結(jié)果評(píng)價(jià)參考文獻(xiàn)附錄起草說明10共五十一頁（一）實(shí)驗(yàn)方

7、法應(yīng)根據(jù)藥物的用途和特性，采用合理的方法進(jìn)行一般藥理學(xué)研究。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需根據(jù)藥物作用的特點(diǎn)和臨床使用的目的而變化，選用國內(nèi)外認(rèn)可的方法，包括科學(xué)而有效的新技術(shù)和新方法。某些安全性藥理檢測可根據(jù)藥效反應(yīng)的模型、藥代動(dòng)力學(xué)的特征、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類、敏感性和可重復(fù)性來選擇實(shí)驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)可采用體內(nèi)和/或體外的方法。（二）可免做一般藥理學(xué)研究的藥物1 、在全身體內(nèi)血藥濃度低，或其它組織器官(qgun)分布很少的局部用藥，如皮膚、 眼科用藥等。2 、只用于治療晚期癌癥病人的細(xì)胞毒類藥物，在首次用于臨床前可不做一般 藥理學(xué)研究。但具有新的作用機(jī)制的此類藥物例外?；?jbn)原則11共五十一頁（三）追加和/或補(bǔ)

8、充的安全藥理學(xué)研究根據(jù)藥物的藥理特性和化學(xué)類型，估計(jì)可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)，或?qū)σ延械膭?dòng)物和臨床試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生懷疑，可能影響人的安全性，此時(shí)應(yīng)做追加和/或補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究。（四）研究的階段性一般(ybn)藥理學(xué)研究貫穿在新藥研究全過程中，可分階段進(jìn)行。在藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)前，應(yīng)完成對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)影響的研究。追加和/或補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究可在臨床研究期間進(jìn)行。（五）執(zhí)行GLP 的要求安全藥理學(xué)研究，應(yīng)執(zhí)行GLP 規(guī)范。12共五十一頁（一）生物材料生物材料有以下幾種：整體動(dòng)物，離體器官及組織，血液及血液成分，體外培養(yǎng)的細(xì)胞、菌種或病毒，提純或重組的受體、酶或因子等。整體動(dòng)物常用小

9、鼠、大鼠、豚鼠、家兔、犬等。動(dòng)物選擇應(yīng)與試驗(yàn)方法相匹配，同時(shí)還應(yīng)注意品系、性別及年齡等因素。生物材料選擇應(yīng)注意敏感性、重現(xiàn)性和可行性，以及與人的相關(guān)性等因素。體內(nèi)研究最好使用清醒動(dòng)物。如果使用麻醉動(dòng)物，應(yīng)注意麻醉藥物和麻醉深度的選擇。（二）受試物受試物的質(zhì)量應(yīng)符合臨床用藥的要求。外用藥物和注射劑一般用制劑。（三）樣本量每組動(dòng)物數(shù)以能夠科學(xué)合理地解釋所獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果、能恰當(dāng)?shù)胤从成飳W(xué)上有意義的作用(zuyng)，并符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求為原則。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本(jbn)要求13共五十一頁（四）劑量(jling)安全藥理學(xué)研究：安全藥理學(xué)研究的低劑量應(yīng)不低于有效劑量，高劑量以不產(chǎn)生嚴(yán)重毒性反應(yīng)為限。可能的

10、情況下，應(yīng)對(duì)副作用的時(shí)程（如效應(yīng)的起始和持續(xù)時(shí)間）進(jìn)行研究。一般來說，對(duì)引起副作用的劑量進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)，應(yīng)與在試驗(yàn)動(dòng)物中觀察到的主要藥效作用的劑量或在人體上產(chǎn)生預(yù)期治療作用的劑量相比較。其最低劑量（或濃度）一般設(shè)定為主要藥效學(xué)ED50 以上劑量（或濃度），其最高劑量（或濃度）可設(shè)定為高于藥效劑量（或濃度）但不產(chǎn)生毒性作用的劑量（或濃度）。體內(nèi)研究應(yīng)觀察到劑量-效應(yīng)關(guān)系。體外研究應(yīng)盡量確定受試物的濃度-效應(yīng)關(guān)系，受試物的最低濃度至少應(yīng)對(duì)生物材料產(chǎn)生作用。14共五十一頁（五）對(duì)照一般可選用溶媒對(duì)照。如為了說明新藥與已知藥物的異同或特性，可選用陽性對(duì)照藥。（六）給藥途徑(tjng)整體動(dòng)物試驗(yàn)，首先考慮

11、應(yīng)與臨床擬用途徑一致，否則需有明確理由。（七）給藥次數(shù)一般采用單次給藥。但是若主要藥效學(xué)研究表明，該受試物需要在給藥一段時(shí)間后才能起效，或者重復(fù)給藥非臨床研究和人用結(jié)果出現(xiàn)令人關(guān)注的安全性問題時(shí)，應(yīng)根據(jù)這些作用合理設(shè)計(jì)給藥次數(shù)。（八）觀察時(shí)間應(yīng)根據(jù)受試物的藥效學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)特性選擇觀察時(shí)間點(diǎn)和觀察時(shí)間。15共五十一頁（一）對(duì)重要生命功能系統(tǒng)的影響根據(jù)(gnj)對(duì)生命功能的重要性，觀察受試物對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響。1 、中樞神經(jīng)系統(tǒng)定性和定量評(píng)價(jià)給藥后動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)功能、行為改變、協(xié)調(diào)功能、感覺/運(yùn)動(dòng)反射和體溫的變化，以確定藥物對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響。2 、心血管系統(tǒng)測定并記錄給藥

12、前后血壓（包括收縮壓、舒張壓和平均壓）、心電圖（包括QT 間期、PR 間期、ST 段和QRS 波等）和心率等的變化。如藥物從適應(yīng)癥、藥理作用或化學(xué)結(jié)構(gòu)上屬于易于引起人類QT間期延長類的化合物，例如：抗精神病類藥物、抗組織胺類藥物、抗心律失常類藥物和氟喹諾酮類藥物，應(yīng)進(jìn)行深入的實(shí)驗(yàn)研究，觀察藥物對(duì)QT 間期的影響。3 、呼吸系統(tǒng)測定并記錄給藥前后動(dòng)物的呼吸頻率和呼吸深度的變化。主要(zhyo)研究內(nèi)容16共五十一頁（二）其他觀察指標(biāo)-追加(zhuji)和/或補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究當(dāng)安全性藥理試驗(yàn)、臨床試驗(yàn)、流行病學(xué)、體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)、以及文獻(xiàn)報(bào)道提示藥物存在潛在的與人安全性有關(guān)的不良反應(yīng)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行追加和

13、/或補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究。1 、追加的安全藥理學(xué)研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)：觀察藥物對(duì)行為(xngwi)藥理、學(xué)習(xí)記憶、神經(jīng)生化、視覺、聽覺和/或電生理等的影響。心血管系統(tǒng)：觀察藥物對(duì)心輸出量、心肌收縮作用、血管阻力等心血管功能的影響，并探討其作用機(jī)制。呼吸系統(tǒng)：觀察藥物對(duì)氣道阻力、肺動(dòng)脈壓力、血?dú)夥治龅鹊挠绊憽?7共五十一頁2 、補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究泌尿系統(tǒng)：觀察藥物對(duì)腎功能的影響，如對(duì)尿量、比重、滲透壓、pH 、電解質(zhì)平衡、蛋白質(zhì)、細(xì)胞和血生化（如尿素氮、肌酐、蛋白質(zhì)）等指標(biāo)的檢測。自主神經(jīng)系統(tǒng)：觀察藥物對(duì)自主神經(jīng)系統(tǒng)的影響，如與自主神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)受體的結(jié)合，體內(nèi)(t ni)或體外對(duì)激動(dòng)劑或拮抗劑的功

14、能反應(yīng)，對(duì)自主神經(jīng)的直接刺激作用和對(duì)心血管反應(yīng)、壓力反射和心率的影響。胃腸系統(tǒng)：觀察藥物對(duì)胃腸系統(tǒng)的影響，如胃液分泌量和pH 、胃腸損傷、膽汁分泌、體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間、體外回腸收縮等指標(biāo)的測定。3 、其它研究在其它相關(guān)研究中，尚未研究藥物對(duì)下列器官系統(tǒng)的影響并懷疑有影響的可能性時(shí)，如潛在的依賴性、骨骼肌、免疫和內(nèi)分泌功能等的影響，則應(yīng)考慮藥物對(duì)這方面的影響，并做出相應(yīng)的評(píng)價(jià)。18共五十一頁根據(jù)詳細(xì)的試驗(yàn)記錄，選用合適的統(tǒng)計(jì)方法，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行定量和定性分析。應(yīng)結(jié)合(jih)藥效、毒理、藥代以及其他研究資料進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，為臨床研究設(shè)計(jì)提出建議。用離體動(dòng)物或人體心肌細(xì)胞、培養(yǎng)心肌細(xì)胞系或克隆人離子通道的異種

15、表達(dá)體系測定離子流。用離體心臟標(biāo)本進(jìn)行動(dòng)作電位參數(shù)的測定，或?qū)β樽韯?dòng)物檢測具有動(dòng)作電位周期特異性的電生理參數(shù)。測定清醒或麻醉動(dòng)物的ECG 參數(shù)。用離體心臟標(biāo)本或動(dòng)物進(jìn)行致心律失常(xn l sh chn)作用的測定。數(shù)據(jù)處理與結(jié)果評(píng)價(jià)推薦的QT 間期試驗(yàn)方法：可通過4 個(gè)方面的電生理實(shí)驗(yàn)，研究藥物延遲心室復(fù)極化作用。附錄19共五十一頁本指導(dǎo)原則以1993 年西藥一般藥理研究的指導(dǎo)原則、1999 年新藥一般藥理研究的指導(dǎo)原則（討論稿）為基礎(chǔ)，參考ICH 的指導(dǎo)原則，結(jié)合我國實(shí)際國情進(jìn)行修訂。1993 年7 月衛(wèi)生部藥政局頒布的新藥（西藥）臨床前研究指導(dǎo)原則匯編中，已有新藥一般藥理研究的指導(dǎo)原則，

16、它重視的是對(duì)主要藥效作用以外廣泛藥理作用的研究，未提及對(duì)可能發(fā)現(xiàn)藥物新的作用、不良反應(yīng)的觀察。1999 年9 月修訂的一般藥理研究的指導(dǎo)原則（討論稿），參考了國外的一些文獻(xiàn)，強(qiáng)調(diào)根據(jù)藥物的藥理作用，在較廣泛的研究不同系統(tǒng)(xtng)功能的基礎(chǔ)上，根據(jù)藥物的治療領(lǐng)域、作用特點(diǎn)進(jìn)行系統(tǒng)(xtng)的專項(xiàng)研究，但其對(duì)一般藥理與確定或推測藥物與人用安全性的關(guān)系方面未進(jìn)行深入的探討。起草(q co)說明20共五十一頁安全藥理學(xué)研究，是探討(tnto)在治療或治療劑量以上劑量范圍時(shí)，對(duì)生理機(jī)能潛在不期望出現(xiàn)的不良作用。安全藥理學(xué)研究概念最早出現(xiàn)于1997 年ICH 的實(shí)施新藥臨床研究所需非臨床安全性試驗(yàn)的

17、時(shí)間安排（M3 指導(dǎo)原則）和生物技術(shù)藥物的臨床前安全性評(píng)價(jià)（S6 指導(dǎo)原則）中，要求在非臨床安全性評(píng)價(jià)中必須進(jìn)行安全藥理學(xué)研究，用于支持藥物的人體臨床研究。在安全藥理學(xué)概念被采用前，廣泛使用的是一般藥理學(xué)研究的概念。日本厚生勞動(dòng)省于1991 年頒布的一般藥理學(xué)研究指南，闡明一般藥理學(xué)的研究目的是發(fā)現(xiàn)新藥對(duì)器官功能不能預(yù)測的作用和其他藥理學(xué)作用，而安全藥理學(xué)的研究重點(diǎn)是發(fā)現(xiàn)新藥的不良反應(yīng)。如ICH M3 和S6 中要求的一樣，安全藥理學(xué)研究的目的和意義在于發(fā)現(xiàn)可能與臨床安全性有關(guān)的不期望出現(xiàn)的藥理作用，評(píng)價(jià)在毒理實(shí)驗(yàn)或臨床研究中觀察到的不良反應(yīng)或病理作用，探討發(fā)生不良反應(yīng)的作用機(jī)理。從而最大限度

18、的保障新藥進(jìn)入臨床研究之前或上市之后，發(fā)現(xiàn)可能出現(xiàn)的治療作用之外的不良反應(yīng)。21共五十一頁2001 年的ICH 協(xié)調(diào)會(huì)，制訂了安全藥理學(xué)的指導(dǎo)原則，即：S7ASafety Pharmacology Studies for Human Pharmaceuticals ，重視了對(duì)藥物的安全性評(píng)價(jià)與臨床的相關(guān)意義。我們?cè)谄鸩荼局笇?dǎo)原則時(shí)，力求將一般藥理學(xué)研究與安全藥理研究完全分開，安全藥理學(xué)只是一般藥理學(xué)的一部分內(nèi)容，本指導(dǎo)原則主要是關(guān)于安全藥理學(xué)的內(nèi)容。但在實(shí)際上很難將二者截然分開，因此，在本指導(dǎo)原則可能見到一般藥理學(xué)、安全藥理學(xué)的兩個(gè)概念。目前國內(nèi)一般藥理學(xué)研究方面存在的主要問題是：國內(nèi)新藥研發(fā)

19、單位對(duì)一般藥理學(xué)的研究重視不夠(bgu)，對(duì)其研究目的認(rèn)識(shí)不清，僅為滿足注冊(cè)要求而機(jī)械的執(zhí)行指導(dǎo)原則，對(duì)一般藥理學(xué)研究的意義沒有充分的認(rèn)識(shí)。科學(xué)合理的一般藥理學(xué)研究可提高臨床人用的安全性。我們?cè)谄鸩荼局笇?dǎo)原則中，引入了ICH 的追加和/或補(bǔ)充安全藥理學(xué)研究、QT 間期延長研究的內(nèi)容，突出了一般藥理學(xué)研究與安全性研究密切相關(guān)；提出可免做安全藥理學(xué)研究的藥物，有利于掌握根據(jù)藥物的具體情況，進(jìn)行一般藥理學(xué)研究；研究階段性的提出，符合新藥研究是逐步進(jìn)行過程的規(guī)律。22共五十一頁 （三）藥理毒理研究資料 16、藥理毒理研究資料綜述。 17、主要藥效學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 18、一般藥理研究的試驗(yàn)資料及文

20、獻(xiàn)資料。 19、急性毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 20、長期毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 21、過敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、 皮膚、粘膜、肌肉等）刺激 性等主要與局部、全身給藥相關(guān)的特殊安全性試驗(yàn)研究和文獻(xiàn)資料。 22、復(fù)方制劑中多種成份(chng fn)藥效、毒性、藥代動(dòng)力學(xué)相互影響的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 23、致突變?cè)囼?yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 24、生殖毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 25、致癌試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 26、依賴性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 27、動(dòng)物藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。 23共五十一頁四、方法學(xué)24共五十一頁如何設(shè)計(jì)一般(ybn)藥理學(xué)試驗(yàn)？核心組合實(shí)驗(yàn)（core

21、battery）中樞神經(jīng)系統(tǒng)：運(yùn)動(dòng)功能(gngnng)、行為改變、協(xié)調(diào)功能(gngnng)、感覺/運(yùn)動(dòng)反射、體溫心血管系統(tǒng)：血壓（收縮壓、舒張壓、平均壓）、心率、心電圖（QT間期、PR間期、ST段和QRS波）呼吸系統(tǒng)：呼吸頻率和呼吸深度追加的安全藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)（Follow-up Safety Pharmacology Studies）中樞神經(jīng)系統(tǒng)心血管系統(tǒng)呼吸系統(tǒng)補(bǔ)充的安全藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)（Supplemental Safety Pharmacology Studies）泌尿腎臟系統(tǒng)自主神經(jīng)系統(tǒng)胃腸系統(tǒng)25共五十一頁動(dòng)物：動(dòng)物常用小鼠、大鼠、貓、狗等，性別不限，但觀察循環(huán)和呼吸系統(tǒng)一般不宜用小鼠和兔。

22、盡量采用清醒動(dòng)物，也可以在麻醉動(dòng)物上進(jìn)行。小動(dòng)物數(shù)目不能少于10只，大動(dòng)物不等低于少于6只。給藥途徑應(yīng)與臨床推薦劑量相同。試驗(yàn)應(yīng)設(shè)2-3個(gè)劑量組及相應(yīng)的溶劑對(duì)照組，其中低劑量應(yīng)參考臨床用量或前期藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)的半數(shù)有效量進(jìn)行折算。觀察的系統(tǒng)(xtng)指標(biāo)：1.神經(jīng)精神系統(tǒng)2.心血管系統(tǒng)3.呼吸系統(tǒng)直接觀察給藥后動(dòng)物的一般行為表現(xiàn)，姿勢，步態(tài)，有無流涎，肌顫及瞳孔變化。對(duì)用藥后動(dòng)物的行為活動(dòng)進(jìn)行定性定量評(píng)價(jià)，以示有無興奮或抑制作用。出現(xiàn)明顯的興奮或抑制現(xiàn)象時(shí)，應(yīng)根據(jù)不同藥物采用不同實(shí)驗(yàn)方法測定其對(duì)小鼠或大鼠自發(fā)活動(dòng)的影響。測定記錄給藥前后動(dòng)物的血壓、心電，觀察心電圖的QRS、ST、T波、心率及心律

23、的變化。在治療有效劑量出現(xiàn)明顯的血壓及心電圖改變，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)整體或離體的分析性試驗(yàn)（如血流動(dòng)力學(xué)、離體心臟等），以確定心血管系統(tǒng)的變化對(duì)主要治療作用的影響。觀察給藥前后呼吸的頻率及幅度。在治療有效劑量出現(xiàn)明顯的呼吸興奮或抑制時(shí)，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)整體或離體的分析性試驗(yàn)（如呼吸中樞抑制試驗(yàn)、膈肌膈神經(jīng)試驗(yàn)等），以確定藥物對(duì)呼吸系統(tǒng)的影響。如何(rh)具體操作？26共五十一頁27共五十一頁28共五十一頁29共五十一頁30共五十一頁31共五十一頁 小獵兔犬（Beagle，比格犬）：原產(chǎn)英國，是獵犬中較小的一種。1880年引入美國，開始大量繁殖。因其有體型小（成年體重為710公斤，體長為3049公分），短毛形

24、態(tài)和體質(zhì)均一，稟性溫和，易于馴服和抓捕，親人，對(duì)環(huán)境的適應(yīng)力、抗病力較強(qiáng)、性成熟期（約812個(gè)月）早，產(chǎn)仔數(shù)多等優(yōu)點(diǎn)，被公認(rèn)為是較理想(lxing)的實(shí)驗(yàn)用家犬，已成為目前實(shí)驗(yàn)研究型別中最標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物，此種犬多用于長期的慢性實(shí)驗(yàn)。在國外，它已被廣泛用于生物化學(xué)、微生物學(xué)、病理學(xué)、病毒學(xué)、藥理學(xué)以及腫瘤學(xué)（如癌的病因?qū)W和癌的治療學(xué)等）等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的研究工作中，而農(nóng)藥的各種安全性試驗(yàn)，特別是制藥工業(yè)中的各種實(shí)驗(yàn)，使用該犬最多。近年來，上海有的單位、北京等地已引入Beagle種犬，且飼育繁殖成功。 血容量（%體重）5.68.3心率（次/分）120(100130)心輸出量（升/分）2.3血壓不麻醉（mmH

25、g）112（95136）56（4366）血壓戊巴比妥鈉麻醉(mmHg)149（108189）100（75122）呼吸頻率(次/分)18(1137)潮氣量（毫升）320(251432)通氣量（升/分）5.21(3.37.4)耗氧量（毫米3/克活體重）58032共五十一頁33共五十一頁34共五十一頁35共五十一頁36共五十一頁37共五十一頁38共五十一頁39共五十一頁40共五十一頁41共五十一頁42共五十一頁43共五十一頁44共五十一頁待測藥一般藥理學(xué)試驗(yàn)報(bào)告樣本 摘要 根據(jù)新藥審批辦法有關(guān)規(guī)定，本實(shí)驗(yàn)對(duì)待測藥進(jìn)行一般藥理學(xué)研究，結(jié)果證實(shí)待測藥 ? mg/kg體重、 ? mg/kg體重和? mg/

26、kg體重十二指腸給藥后對(duì)麻醉犬的血壓、心電、呼吸沒有影響； ? mg/kg體重、 ? mg/kg體重和? mg/kg體重口服灌胃后對(duì)小鼠的自由活動(dòng)及一般行為未見明顯影響。材料2.1 藥品：待測藥：黃色粉末，先加入少量吐溫助溶，再用蒸餾水稀釋(xsh)，配制成所需濃度備用。2.2 動(dòng)物：昆明種小鼠，二級(jí)，56只，體重1822g，雌雄各半，由?提供，合格證號(hào)? ；beagle犬，雌雄兼用，24只，體重814kg，由?提供，合格證號(hào)?。2.3試劑：肝素鈉注射液（ ?生產(chǎn)，批號(hào)? ）；戊巴比妥鈉（ ?生產(chǎn)， 批號(hào)? ）；生理鹽水（ ?生產(chǎn)， 批號(hào)? ）。 2.4 儀器：MP100型多道生理記錄儀（美國

27、BIOPAC制造）；XZ4小鼠自由活動(dòng)記數(shù)器（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所制造）。 45共五十一頁方法3.1 對(duì)麻醉犬血壓、心電、呼吸的影響將24只犬隨機(jī)分為4組(高劑量組、中劑量組、低劑量組和溶劑對(duì)照組)，每組6只，分別十二指腸給待測藥?mg/kg體重、 ?mg/kg體重和?mg/kg體重及等體積的溶劑（含有少量吐溫的蒸餾水），均為1ml/kg體重。犬稱重麻醉（戊巴比妥鈉30mg/kg體重頭腹靜脈注射）。頸部手術(shù)分離氣管和一側(cè)頸總動(dòng)脈，作氣管插管、動(dòng)脈插管（預(yù)先充滿0.1%肝素液），分別通過呼吸換能器、壓力換能器與多道生理記錄儀相連，記錄呼吸和血壓。連接II導(dǎo)聯(lián)心電圖至多道生理記錄儀，記錄心電圖

28、。腹部手術(shù)作十二指腸插管（預(yù)先充滿生理鹽水(shnglynshu)）用于給藥。記錄正常血壓（收縮壓、舒張壓、平均壓）、心電圖、心率、呼吸的頻率和幅度后，十二指腸給藥，分別于給藥后0 、5、15 、30 、45 、60 、90 、120 、150 、180 各時(shí)間點(diǎn)記錄上述各指標(biāo)。3.2 小鼠自由活動(dòng)測定昆明種小鼠56只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組(高劑量組、中劑量組、低劑量組和溶劑對(duì)照組)，每組14只，分別灌胃給待測藥?mg/kg體重、 ?mg/kg體重和?mg/kg體重及等體積的溶劑（含有少量吐溫的蒸餾水），均為0.2ml/10g體重。給藥后1小時(shí)將小鼠放入自由活動(dòng)計(jì)數(shù)器中，記錄5分鐘內(nèi)自由活動(dòng)次數(shù)。46共五十一頁結(jié)果由表1可見待測藥高、中、低劑量組與溶劑對(duì)照組比較，均無顯著性差異（P0.05）。由表2和圖14可見待測藥高、中、低劑量組及溶劑對(duì)照組，給藥前后犬的收縮壓、舒張壓、平均壓、心電圖、心率、呼吸變化未見明顯改變，統(tǒng)計(jì)學(xué)表明無顯著性差異。結(jié)論待測藥 ?mg/kg體重、 ?mg/kg體重和?mg/kg體重十二指腸給藥后對(duì)麻醉犬的血壓、心電、呼吸沒有影響； ? mg/kg體