醫(yī)學(xué)專題血液一般檢驗(yàn)

1、 四、血細(xì)胞比容測定 血細(xì)胞比容（hematocrit，HCT，Ht，HCT）是指在一定條件下經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細(xì)胞在全血標(biāo)本中所占體積的比值。 2021/7/20 星期二12021/7/20 星期二2【原理】 Wintrobe法和微量法：均屬離心法?？鼓齽┨幚淼娜⑷隬introbe管或毛細(xì)管內(nèi)，以一定轉(zhuǎn)速離心一定時間后，計算紅細(xì)胞層占全血的體積比。血液分析儀法： HCT=紅細(xì)胞計數(shù)*紅細(xì)胞平均體積2021/7/20 星期二3【方法學(xué)評價】 手工法：離心沉淀法、放射性核素法、比重計法、折射儀法和黏度計法等。1放射性核素法最為準(zhǔn)確，被ICSH規(guī)定為參考方法；但方法繁瑣，不適用于臨床常規(guī)檢查。

2、2微量離心法相對離心力大，紅細(xì)胞間殘留的血漿含量低，標(biāo)本用量少。但高速離心容易導(dǎo)致靠近封口端的紅細(xì)胞變形，而靠近血漿端的紅細(xì)胞中容易混入白細(xì)胞及血小板，也影響了測定的準(zhǔn)確性。3溫氏法無需特殊儀器，但不能完全排除紅細(xì)胞間殘留血漿，且需單獨(dú)采血，用血量大，通常用于血液流變學(xué)檢查。但有被微量離心法取代的趨勢。 2021/7/20 星期二4血液分析儀法 簡便快速、精密度高的優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)當(dāng)注意患者為紅細(xì)胞增多癥或血漿滲透壓異常時儀器常會出現(xiàn)誤差。2021/7/20 星期二5表2-10 臨床常用HCT檢測方法的比較方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)Wintrobe法無需特殊儀器，應(yīng)用廣泛不能完全排除殘留血漿，且單獨(dú)采血，用血量大，

3、有逐漸被淘汰的趨勢微量法快速（5min）標(biāo)本用量小、結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好。WHO推薦的首選參考方法殘留血漿較溫氏法少，但高速離心易使毛細(xì)管底端的紅細(xì)胞壓縮變形甚至破壞電阻抗法簡便快速（515s）白細(xì)胞、血小板增多可引起血液導(dǎo)電異常，使結(jié)果不可靠血液分析儀法簡便快速、精密度高，無需單獨(dú)采血準(zhǔn)確性稍低，結(jié)果僅供參考2021/7/20 星期二6【質(zhì)量控制】 手工法：采血 、抗凝 、離心速度血液分析儀法： HCT與紅細(xì)胞計數(shù)和紅細(xì)胞平均體積測定的相關(guān)性2021/7/20 星期二7【參考值】 表2-11 HCT參考范圍成年男性成年女性新生兒Wintrobe法0.420.490.370.480.470.67

4、微量離心法0.4670.0390.4210.0542021/7/20 星期二8【臨床意義】 臨床補(bǔ)液量的參考：各種原因?qū)е虏∪嗣撍畷r，HCT都會升高，補(bǔ)液時可監(jiān)測HCT，HCT 恢復(fù)正常表示血容量得到糾正。真性紅細(xì)胞增多癥的診斷指標(biāo)：當(dāng)HCT0.7；RBC為(710)1012/L；Hb180g/L，即可成立診斷。紅細(xì)胞平均值計算的基本參數(shù)之一：利用RBC、Hb、HCT三個指標(biāo)可計算出紅細(xì)胞的三個平均值，可用以進(jìn)行貧血的形態(tài)學(xué)分類。重要的血液流變學(xué)指標(biāo)：HCT升高表明紅細(xì)胞數(shù)量偏高，可導(dǎo)致全血黏度增加，可用于監(jiān)測血栓前狀態(tài)。 2021/7/20 星期二9 五、紅細(xì)胞平均指數(shù) 由于血紅蛋白存在于紅

5、細(xì)胞內(nèi)，不同原因造成的貧血，其紅細(xì)胞、血紅蛋白下降的程度未必一致；同時，不同數(shù)量、大小及形態(tài)的紅細(xì)胞占全血容積的比例也不盡相同。由此可見，RBC、Hb、HCT三個參數(shù)之間有著內(nèi)在的聯(lián)系。計算三者之間的關(guān)系，可加深對紅細(xì)胞的特征認(rèn)識，進(jìn)而為貧血的鑒別診斷提供更多線索。2021/7/20 星期二10【檢測原理】 手工法：1紅細(xì)胞平均體積（mean corpuscular volume，MCV） 指每個紅細(xì)胞平均體積的大小。單位：fl（1fl=10-15L）。 MCV=HCT/RBC1015(fl) 2021/7/20 星期二112平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（mean corpuscular hemog

6、lobin，MCH） 指每個紅細(xì)胞內(nèi)平均所含血紅蛋白的量。單位：pg(1pg=10-12g)。 MCH =Hb/RBC 2021/7/20 星期二123.平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC） 指測定紅細(xì)胞比容時被壓緊的紅細(xì)胞血紅蛋白濃度。單位：g/L。 MCHC=Hb/Hct2021/7/20 星期二13血液分析儀法:能直接導(dǎo)出MCV，計算MCH 、MCHC2021/7/20 星期二14【方法學(xué)評價】手工法和儀器法：MCV:儀器法CV值小于1%，手工法在10%左右。MCH:儀器法CV值為0.6%-1.2%，手工法

7、在10%左右.MCHC:儀器法CV值1%-1.5%,手工法MCHC受HB和HCT的影響2021/7/20 星期二15【質(zhì)量控制】手工法：必須用同一血標(biāo)本血液分析儀法： 必須注意三個平均指數(shù)的相關(guān)性2021/7/20 星期二16【參考值】表2-12 MCV、MCH、MCHC參考值人群MCV（fL）MCH（pg）MCHC（g/L）成年人82-94273132036013歲791042532280350新生兒8612027362503702021/7/20 星期二17【臨床意義】MCVMCHMCHC紅細(xì)胞形態(tài)特征意義正常正常正常正細(xì)胞正色素性貧血慢性腎病、慢性炎癥、內(nèi)分泌疾病、消化吸收不良、惡性腫瘤

8、正常升高升高正細(xì)胞高色素性貧血體外溶血、高脂血癥、溶血性貧血升高升高正常/升高 大細(xì)胞高色素性貧血巨幼細(xì)胞貧血/伴高濃度冷凝集素，腫瘤、乙醇中毒升高減低減低增生性貧血仍有足夠補(bǔ)充的鐵，銅或VitB6缺乏性貧血的前幾天減低增加增加小細(xì)胞高色素性貧血重型遺傳性球性細(xì)胞增多癥正常減低正常輕微低色素性貧血缺鐵性貧血早期減低減低減低小細(xì)胞低色素性貧血常見于缺鐵性貧血，偶見于銅、VitB6缺乏2021/7/20 星期二18六、紅細(xì)胞體積分布寬度(RDW)是由血液分析儀根據(jù)紅細(xì)胞體積的直方圖導(dǎo)出，反映所測標(biāo)本中紅細(xì)胞體積大小異質(zhì)程度，常用變異系數(shù)表示，它比血圖片上紅細(xì)胞形態(tài)大小不均的觀察更為客觀和準(zhǔn)確。20

9、21/7/20 星期二19檢測原理多采用電阻抗原理，紅細(xì)胞經(jīng)過小孔時產(chǎn)生脈沖信號，有多少紅細(xì)胞經(jīng)過小孔就有多少脈沖信號，脈沖信號的強(qiáng)弱與細(xì)胞大小成正比。對被檢測的所有紅細(xì)胞體積進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，則導(dǎo)出RDW的值2021/7/20 星期二20方法學(xué)評價對紅細(xì)胞體積大小的評價，過去僅靠血圖片上RBC形態(tài)的觀察，受血圖片的制作及觀察者主觀因素的影響較大，儀器法克服以上缺點(diǎn)，且能定量。比較而言，MCV作為貧血的形態(tài)學(xué)分類參考依據(jù)，則可能掩蓋病理性RBC體積大小的異質(zhì)性實(shí)際情況，從而影響貧血分類的準(zhǔn)確性2021/7/20 星期二21參考值成人：11.6%-14.6%2021/7/20 星期二22臨床意義缺

10、鐵貧的篩選診斷和療效觀察 RDW增大對缺鐵貧診斷的靈敏度為95%，但特異性不強(qiáng)，可作為缺鐵貧的篩選指標(biāo)。缺鐵貧時RDW增大，尤其是MCV尚處于參考值范圍時， RDW增大更是早期診斷缺鐵貧指標(biāo)。給予鐵劑治療有效時， RDW將比給藥前更大。鑒別缺鐵貧和B珠蛋白生成障礙性貧血 前者RDW增大，而后者常正常2021/7/20 星期二23 七、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞（reticulocyte，Ret或RET）:是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過渡細(xì)胞，其胞質(zhì)中殘存嗜堿性物質(zhì)核糖核酸，經(jīng)煌焦油藍(lán)活體染色后，嗜堿性物質(zhì)凝聚成藍(lán)黑色顆粒，呈現(xiàn)點(diǎn)狀或線網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故名網(wǎng)織紅細(xì)胞。2021/7/20 星期二

11、24Heilmyer根據(jù)其發(fā)育階段分五型：O型（有核網(wǎng)織紅細(xì)胞）：僅見于正常骨髓型（絲球型）：存在于正常骨髓型（網(wǎng)型）：大量存在于骨髓型（破網(wǎng)型）：僅有少量釋放到周圍血型（點(diǎn)粒型）：多見于正常周圍血。2021/7/20 星期二25 新亞甲藍(lán)染色2021/7/20 星期二262021/7/20 星期二27 美藍(lán)染色2021/7/20 星期二28煌焦油藍(lán)染色 2021/7/20 星期二29【檢測原理】手工法 ：在光鏡下計數(shù)至少1000個紅細(xì)胞分布區(qū)域內(nèi)的Ret就可得到Ret的百分率。網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)儀法：用熒光染料使含RNA的網(wǎng)織紅細(xì)胞著色，用流式細(xì)胞術(shù)計數(shù)并計算出網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比。血液分析儀法：最

12、新型的血液分析儀，采用流式細(xì)胞法也可對RET作分類計數(shù) 2021/7/20 星期二30【方法學(xué)評價】手工法 ：具有操作簡便、成本低的優(yōu)點(diǎn) ；但該法操作煩瑣、工作量大，且影響因素多、重復(fù)性差的缺點(diǎn)網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)儀法：流式細(xì)胞術(shù)Ret計數(shù)法可提供Ret絕對值、高熒光強(qiáng)度、中等強(qiáng)度和低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率（LFR）等多種參數(shù)。臨床應(yīng)用價值更大。血液分析儀法：提高了檢測的靈敏度、精密度和檢測速度。但本法成本高，假陽性增高，其檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性并不十分理想。無法完全取代手工計數(shù)法。2021/7/20 星期二31【質(zhì)量控制】采血后及時測定 染液用量要適宜掌握網(wǎng)織紅細(xì)胞的判定標(biāo)準(zhǔn) 定期進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量考核和室

13、間質(zhì)量評價 2021/7/20 星期二32【參考值】表2-18網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)參考范圍報告方式成人初生兒分?jǐn)?shù)0.0050.0150.020.06百分比0.5%1.5%2%6%絕對值109/L24843個月后達(dá)成人水平 相對值2021/7/20 星期二33【臨床意義】判斷骨髓紅細(xì)胞造血情況網(wǎng)織紅細(xì)胞增多：失血、溶血性貧血、放療和化療后網(wǎng)織紅細(xì)胞減少：再生障礙性貧血 觀察貧血療效:缺鐵性貧血，巨幼細(xì)胞性貧血治療過程中，如網(wǎng)織紅增高，表明治療有效，如網(wǎng)織紅不增高，表明治療無效，并提示有骨髓造血功能障礙。骨髓移植后監(jiān)測造血功能恢復(fù)：移植后第21天，若RET大于15*109/L,常表示無移植并發(fā)癥；若RE

14、T小于15*109/L,伴中性粒細(xì)胞和血小板增高可能為移植失敗。2021/7/20 星期二34 八、紅細(xì)胞沉降率測定紅細(xì)胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）簡稱血沉：是指離體抗凝血在靜置后，紅細(xì)胞在單位時間內(nèi)沉降的速度。正常情況下，紅細(xì)胞表面的唾液酸帶負(fù)電荷，形成Zeta電位，紅細(xì)胞彼此排斥，使之保持25nm距離而懸浮于流動的血漿中。離體血液靜置時，盡管紅細(xì)胞之間的排斥作用仍存在，但因紅細(xì)胞比重大于血漿，終將受地心引力而下沉。 2021/7/20 星期二35【檢測原理】Westergren法 ：將離體抗凝血置于特制刻度測定管內(nèi)，將其直立于血沉架上，靜

15、置1小時紅細(xì)胞下沉的距離。 2021/7/20 星期二362021/7/20 星期二37血沉儀法：主要根據(jù)紅細(xì)胞下沉過程中血漿濁度的改變，采用光電比濁、紅外線掃描或攝影法動態(tài)分析紅細(xì)胞下沉各個時段血漿的透光度。以計算機(jī)記錄并打印結(jié)果，還可繪出血沉不同階段紅細(xì)胞下沉高度（H）與時間（t）的H-t曲線。 2021/7/20 星期二38【方法學(xué)評價】魏氏法： ICSH推薦的參考方法，使用方便 。血沉儀法： 1.能動態(tài)觀察血沉情況 2.可以快速測定，特別適用于急診病人 3.由于真空封閉采血和使用一次性血沉管，減少血標(biāo)本污染的機(jī)會，保障操作人員的安全。 4.某些儀器已經(jīng)做到可以同血液分析儀檢測使用同一份

16、EDTA鹽抗凝的血標(biāo)本 5.缺點(diǎn)：由于儀器型號繁多，測定原理各不相同，難于達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化 2021/7/20 星期二39表2-22 血沉測定的幾種方法學(xué)評價方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)魏氏法操作簡便，ICSH對此法有嚴(yán)格的規(guī)定，為ICSH推薦的參考方法。但只反映血沉終點(diǎn)的變化，且耗時、易造成污染，缺乏特異性，一次性血沉測定器材質(zhì)量難以保證潘氏法測定毛細(xì)血管血，較適用于兒童，結(jié)果與魏氏法具有可比性。但采血時易混入組織液，臨床較少使用溫氏法按HCT測定的方法要求采血，并通過HCT計算血沉方程K值，克服了貧血對結(jié)果的影響， 僅用于血液流變學(xué)檢查。2021/7/20 星期二40血沉率使用專用的離心機(jī)，有配套的平底離心管。

17、目前已達(dá)到微量化測定。結(jié)果無年齡性別差異，不受貧血及實(shí)驗(yàn)條件的影響。靈敏度高、測試時間短， 需專用的離心機(jī)，操作繁瑣，在我國未能得到普及自動血沉儀可反映血沉不同階段的差異，微量化、自動化、快速化，適用于急診病人。目前儀器型號復(fù)雜，尚未達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化2021/7/20 星期二41【質(zhì)量控制】血漿中各種蛋白的比例紅細(xì)胞數(shù)量和形狀血沉管與血沉架血標(biāo)本 室溫保持1825。溫度高，血黏度降低，血沉快，反之血沉慢 使用質(zhì)控標(biāo)本 2021/7/20 星期二42表2-24影響血沉的血漿和紅細(xì)胞因素因素影響因素血漿纖維蛋白原、球蛋白、其他異常免疫球蛋白、球蛋白、球蛋白、CRP、熱休克蛋白、鐵蛋白等。表面帶正電荷，有

18、利于紅細(xì)胞緡錢狀形成，增高可使ESR加快清蛋白、磷脂酰膽堿可抑制紅細(xì)胞緡錢狀形成，阻止紅細(xì)胞下沉三酰甘油、膽固醇也有促紅細(xì)胞緡錢狀形成的作用，使ESR加快紅細(xì)胞數(shù)量：紅細(xì)胞增多，下降阻力加大；數(shù)量減少，所承受的血漿阻逆力減小，ESR加快；但紅細(xì)胞嚴(yán)重減少則不利于緡錢狀形成，ESR并不加快大?。捍蠹t細(xì)胞容易形成緡錢狀，使ESR加快；紅細(xì)胞大小不均，不利于緡錢狀形成形態(tài)：球形、鐮狀細(xì)胞增多，表面積減小，不利于緡錢狀形成，ESR不加快表面電荷：病毒、細(xì)菌、藥物等改變紅細(xì)胞表面的結(jié)構(gòu)和組成，表面電荷減少，便于紅細(xì)胞聚集，ESR加快2021/7/20 星期二43【參考值】魏氏法 ： 50歲：男 020mm/h 女 030mm/h潘氏法 ：成人 男 010mm/h 女 012mm/h 2021/7/20 星期二44【臨床意義】血沉加快 1.生理性 ：（1）年齡與性別：新生兒因紅細(xì)胞數(shù)量較高而纖維蛋白原含量低，血沉較慢12歲以下的兒童因紅細(xì)胞數(shù)量生理性低下使血沉較成年人稍快，但無性別差異。50歲后，纖維蛋白原含量逐漸升高，血沉開始高于青壯年時期，且女性高于男性。（2）女性月經(jīng)期：由于出血、子宮內(nèi)膜損傷等原因，月經(jīng)期血沉較平時略有加快。 （3）妊娠與分娩：妊娠期3個月直至分娩3周后，血沉也暫時加快，以后逐漸恢復(fù)正常，可能因纖維蛋白原增加、胎盤剝離、產(chǎn)傷、貧