HPLC故障排查及解決

1、HPLC故障排查及解決故障現(xiàn)象可能原因解決方法保留時(shí)間不穩(wěn)定柱塞頭有氣泡脫氣所有的溶劑，Purge溶劑管理系統(tǒng)單向閥故障清洗/更換單向閥柱塞密封泄漏更換柱塞密封溶劑過濾器堵塞清洗/更換溶劑過濾器保留時(shí)間縮短平衡時(shí)間不足延長(zhǎng)平衡時(shí)間，至少5-10倍柱體積柱過載減少進(jìn)樣量，增加柱體積（用更大直徑的色譜柱）色譜柱污染清洗/更換色譜柱，仔細(xì)閱讀色譜柱說明書，了解注意事項(xiàng)分析方法不正確1流速變快2流動(dòng)相組成是否正確3色譜柱溫度過高4色譜柱不正確保留時(shí)間延長(zhǎng)色譜柱污染清洗/更換色譜柱，仔細(xì)閱讀色譜柱說明書，了解注意事項(xiàng)漏液檢查接頭處是否漏液分析方法不正確1流速變慢2流動(dòng)相組成是否正確3色譜柱溫度過低4色譜

2、柱不正確重現(xiàn)性錯(cuò)誤樣品引起用已知的穩(wěn)定化合物重復(fù)進(jìn)樣，如果峰面積的RSD值符合要求，則是樣品不穩(wěn)定。如果仍舊不好，則是進(jìn)樣系統(tǒng)異常。檢查系統(tǒng)壓力穩(wěn)定性和短期內(nèi)流速的穩(wěn)定性。進(jìn)樣體積變化1進(jìn)樣器從樣品瓶瓶中吸到空氣，檢查樣品量2抽樣速度過快，根據(jù)樣品的粘稠度來定義抽樣速度3進(jìn)樣器流路中有空氣，沖洗進(jìn)樣器流路4進(jìn)樣閥/注射器（計(jì)量泵）泄漏，觀察進(jìn)樣閥和注射器（計(jì)量泵）處有無泄漏5進(jìn)樣密封泄漏，取一樣品瓶，加入約1.5ml純水，稱重記錄。連續(xù)進(jìn)樣10次（每次100ul），再次稱重。如果兩次稱重結(jié)果差小于1g，說明進(jìn)樣密封泄漏，需要更換。泄漏檢查進(jìn)樣系統(tǒng)接頭處有無泄漏基線波動(dòng)來自泵壓力的波動(dòng)泵壓力波動(dòng)

3、大會(huì)影響基線的波動(dòng)，觀察泵的壓力波動(dòng)情況。泵內(nèi)有氣泡1流動(dòng)相超聲脫氣，最好加在線脫氣2清洗泵3可用注射器在泵的出口處吸液4暫時(shí)用脫氣的有機(jī)相沖洗管路流通池內(nèi)有氣泡把柱子換成雙通，用有機(jī)相大流速?zèng)_洗流通池二十分鐘混合不勻可以增加混合器流動(dòng)相污染重新配置流動(dòng)相流動(dòng)相的質(zhì)量確保使用色譜級(jí)或更好質(zhì)量的流動(dòng)相。特別是對(duì)填料是2um的柱子或蒸發(fā)光檢測(cè)器。色譜柱污染更換色譜柱環(huán)境溫度波動(dòng)大穩(wěn)定環(huán)境溫度基線漂移色譜柱不平衡平衡色譜柱，根據(jù)色譜柱的說明書平衡色譜柱檢測(cè)器未預(yù)熱讓檢測(cè)器預(yù)熱。一般最少需要預(yù)熱30分鐘流動(dòng)相污染/脫氣不完全更換流動(dòng)相/進(jìn)行脫氣，檢查在線脫氣柱污染使用強(qiáng)的洗脫液沖洗色譜柱，如果可以將柱

4、子反沖（仔細(xì)閱讀色譜柱說明書）流通池污染/泄漏清洗流通池，或者更換流量（壓力）波動(dòng)Purge溶劑管理系統(tǒng)，或者更換單向閥，泵密封（請(qǐng)參閱“保留時(shí)間不穩(wěn)定”故障現(xiàn)象溶劑波長(zhǎng)錯(cuò)誤確保溶劑在所用波長(zhǎng)無吸收燈能量低檢查燈能量環(huán)境條件不穩(wěn)定穩(wěn)定環(huán)境條件（溫度），確保燈和流通池的前面板門是關(guān)閉的樣品殘留以前進(jìn)樣的濃度太大減小濃度洗針液不足或者選擇不充分，無法溶解所有樣品組分選擇合適的洗針液色譜柱內(nèi)殘留沖洗或者更換色譜柱無峰無溶劑流量檢查流量檢測(cè)器燈未開檢查燈的狀態(tài)錯(cuò)誤的波長(zhǎng)檢查波長(zhǎng)設(shè)置溶劑管路泄漏檢查溶劑管路，接頭沒有進(jìn)樣確保有足夠的樣品量，檢查進(jìn)樣是否正常峰拖尾緩沖能力不足增加緩沖液的濃度柱外死體積效應(yīng)

5、過大使用短的毛細(xì)管進(jìn)行連接；檢查毛細(xì)管的內(nèi)徑柱外體積不能大于最小峰體積的1/10色譜柱塌陷沖洗色譜柱。更換色譜柱色譜柱降解更換色譜柱；避免高溫時(shí)使用腐蝕性緩沖液（比如磷酸）寬峰檢測(cè)器流通池體積過大檢查好流通池的類型，分清是型號(hào)是分析還是制備用的。流通池體積應(yīng)該不超過最小峰體積的1/10.柱外死體積過大檢查毛細(xì)管的規(guī)格和長(zhǎng)度，樣品環(huán)體積靈敏度降低樣品管理系統(tǒng)漏液排查有無漏液處色譜柱被污染/柱效降低清洗/更換色譜柱流通池泄漏檢查流通池流速不正確確認(rèn)流速是否正常流通池被污染1清洗流通池窗口外部2用水沖洗流通池，如有必要去掉色譜柱，用強(qiáng)溶劑沖洗流通池壓力/流速不穩(wěn)定泵內(nèi)有空氣1流動(dòng)相脫氣2 Purge

6、溶劑管理系統(tǒng)去除氣泡入口或出口單向閥臟超聲清洗單向閥單向閥或柱塞密封圈故障柱塞密封圈泄漏，則需要更換。如果超聲清洗單向閥后，壓力還是不穩(wěn)定，則需要更換單向閥溶劑濾頭堵塞超聲清洗溶劑濾頭或者更換壓力過高緩沖鹽析出造成堵塞在使用緩沖鹽后沒有很好的沖洗系統(tǒng)，會(huì)造成鹽析出堵塞系統(tǒng)。需要排查 在線過濾器（過濾白頭），保護(hù)柱，色譜柱，流通池，管路等是否堵塞。高流速或低柱溫更改設(shè)置柱老化/堵塞色譜柱隨著使用時(shí)間增加，壓力會(huì)逐漸增加，屬于正?，F(xiàn)象。如出現(xiàn)不正常的壓力增加，需要檢查連接的管路，柱溫的設(shè)定，或者更換柱子。壓力過低管路連接處漏液檢查接頭處是否擰緊（特別是peek頭是否完好）低流速或低柱溫更改設(shè)置針對(duì)

7、儀器報(bào)錯(cuò)信息的詳解報(bào)錯(cuò)信息原因/解決辦法Bubble found on compression（壓縮時(shí)發(fā)現(xiàn)氣泡）Purge 溶劑管理系統(tǒng)Bubble found on intake（吸入時(shí)發(fā)現(xiàn)氣泡）將流動(dòng)相徹底脫氣System over pressure（系統(tǒng)超壓）在線過濾器或色譜柱堵塞System under pressure（系統(tǒng)壓力過低）系統(tǒng)泄露Column temp h/w fault（色譜柱溫度硬件故障）重啟主機(jī)電源，如果錯(cuò)誤仍在，請(qǐng)與工程師聯(lián)系Lost prime（灌注丟失）Purge 溶劑管理系統(tǒng)（很有可能需要更換單向閥）Solv delivery motor lost sync（溶劑輸送電機(jī)不同步）重啟主機(jī)電源，如果錯(cuò)誤仍在，請(qǐng)與工程師聯(lián)系Solv delivery h/w fault（溶劑輸送硬件故障）重啟主機(jī)電源，如果錯(cuò)誤仍在，請(qǐng)與工程師聯(lián)系Needle is busy（針頭忙）關(guān)閉樣品室門Column heater door open（色譜柱加熱器門打開）關(guān)閉柱溫箱門，清除警報(bào)Plunger homing over press