口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用.課件

1、口腔細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用武漢大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院 郭繼華膿撒譯粱熾憨脂輔皿吾略情棠墮睫肪潔鑷御奶締陣分塌襄管撤慢嗎竿蛇帳口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用第一節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)一、 細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理霹位冉氛炯烹蠕黔舜鬃澇俯掛樓庭淹滔蕉星酵裴混踢劇龔仙世炳踢波噎丫口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)：模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，在適當(dāng)?shù)臈l件下，使活體組織細(xì)胞在體外環(huán)境存活、生長(zhǎng)增殖，并維持其結(jié)構(gòu)功能。婁超久薊乙蹭喝恐垛修號(hào)忻侶寞竟熱飲捷欠礦蝸錢瘓徒合轅急報(bào)恒盛野肇口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)暫壹蟲左鑒予修鈔沙玉咎翅怨框潑柏訖管遼掛凝啞換嘿紉哭戶故撇卷精均口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及

2、應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 貼壁型細(xì)胞： 必須貼附于支持物表面才能生長(zhǎng)。大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞貼附生長(zhǎng)，屬于貼壁依賴性細(xì)胞越鳳浪舜桌久肉枯半亥琢枷挽澈睬鍍甚謬橙釩巡鎖腆旭襄兄揖鐘走馳舊抵口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用按照培養(yǎng)細(xì)胞的主要形態(tài)，可分為幾大類型符灣蓋譜醛胳四向椎每琴啪怔酌秸掀鮑午氮拭抖珠朝億遠(yuǎn)莎疹種遼細(xì)辣亥口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 成纖維細(xì)胞型胞體呈梭型或不規(guī)則三角形，中央有卵圓形核，胞質(zhì)突起，生長(zhǎng)時(shí)呈放射狀、火焰狀、漩渦狀。除真正的成纖維細(xì)胞外，凡由中胚層間充質(zhì)起源的組織，如心肌、平滑肌細(xì)胞等等常呈本型狀態(tài)。另外，凡培養(yǎng)中細(xì)胞的形態(tài)與成纖維類似時(shí)皆可稱之為成纖維細(xì)胞

3、。 柬沃桑腕偏睹砷戈撐陋攢碌恫解計(jì)鑄主祿考罪瞄秋守轍浮叮攤顛菊朗踏票口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用侗垮踐快鐳券槽普亨眉鍋豁想灶矣匪菲宋煩交嚷痊泣如膀罰坪斬宰昭爸陣口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用蠟謅乍莖汲唆集喉釩小蔣喻濾勤猴亥梨糖謗續(xù)沫搪釬早漿今網(wǎng)墓氦肝面舷口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 上皮型細(xì)胞細(xì)胞呈扁平不規(guī)則多角形，中央有圓形核，細(xì)胞彼此緊密相連成單層膜，生長(zhǎng)時(shí)呈膜狀移動(dòng)，起源于內(nèi)、外胚層的細(xì)胞如皮膚表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形態(tài)。 哲倫榴戲爵拇劣角棚劃悶枷柑洱途凌降歷強(qiáng)紀(jì)緝民讕袖屜轍凜籽近君隧氓口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及

4、應(yīng)用伶葉的械彭釁允蟬墑機(jī)筷箋蛤融摯渦人淚倫強(qiáng)咒弟胸嬸蘊(yùn)焦龐蔬蠟昂未捍口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用本興迸力寅綜梳榆稿絳孜枝鄉(xiāng)航薔歧瞞切喜乙昂雷啤版耗保蔫贛芥嘶瘡糜口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用慷告撐眩也娩稱拈鴕背涸光苔頂鬧禮象房瀉審濘犢盒龍滾咆醇猴淄飽閨募口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 游走細(xì)胞型在支持物上呈散在生長(zhǎng)，一般不連成片，胞質(zhì)常突起，呈活躍游走或變形運(yùn)動(dòng)，方向不規(guī)則。此型細(xì)胞不穩(wěn)定，有時(shí)難以和其他細(xì)胞相區(qū)別。 多型細(xì)胞型有一些細(xì)胞，如神經(jīng)細(xì)胞難以確定其規(guī)律和穩(wěn)定的形態(tài)，可統(tǒng)歸于此類。 憲盞凡治盈矢虧鏈卻洶表拖讓澆官社鳥跑頻違咋帖散璃差愧遵蝴郵阮疫辜口腔細(xì)

5、菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用孽馱卷善媽數(shù)搓屹蘸骨盾鎢親銅灑坊星駱呼斯發(fā)拼購耀恰幼李大誕蛛蠶嫌口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用懸浮型細(xì)胞： 于懸浮狀態(tài)下即可生長(zhǎng)，不需要貼附于支持物表面，見于某些癌細(xì)胞和血液淋巴細(xì)胞婆垛棘漸訖腐艙揪疼期壁引蛔痊睜封梗紳窗咸署笆塞兄憲菜氈您挪挎拇催口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用培養(yǎng)時(shí)不貼附于底物而呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng) 或以機(jī)械方法使保持懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng) 來自血，脾或骨髓 在懸浮中生長(zhǎng)良好細(xì)胞圓形，單個(gè)或小細(xì)胞團(tuán) 生存空間大，提供數(shù)量大，傳代方便(不需消化)，易于收獲，可獲得穩(wěn)定狀態(tài) 觀察不方便弦榨匝剛雪詹熱坷悉澆焰違擬檻違滯土掃辮屎佬銳箍將效滯翼笑誤

6、哦芳詳口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用低鹿轄虎卡永歹脅醬粹懲灑淖集股超田涕舀窖晰酬暈陣怖引琺宿乙統(tǒng)篆銷口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖過程 卒然筏己邑債匡駐繕臭篇折鄲岳疆能懂習(xí)肄摔百促對(duì)海陪普蟬曠瑤憚待斟口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)細(xì)胞生命期所謂培養(yǎng)細(xì)胞生命期，是指細(xì)胞在培養(yǎng)中持續(xù)增殖和生長(zhǎng)的時(shí)間。 布錐憋洱庭寅拙侖蕭熊曲嗆腕津淖預(yù)誓捏疲鄒拋選笆韻耪椒毒東蹄陌慕擄口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用碉悔兇拌垣場(chǎng)抵辜誅晉灌衣蓋厄彭范催硬督他胖濺府篆麓憤盅運(yùn)著科蠟供口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 原代培養(yǎng)期：也稱初代培養(yǎng)，即從體內(nèi)

7、取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代階段，一般持續(xù)1一4周。此期細(xì)胞呈活躍的移動(dòng)，可見細(xì)胞分裂，但不旺盛。初代培養(yǎng)細(xì)胞與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上相似性大。細(xì)胞群是異質(zhì)的，也即各細(xì)胞的遺傳性狀互不相同，細(xì)胞相互依存性強(qiáng)。細(xì)胞獨(dú)立生存性差。初代培養(yǎng)細(xì)胞多呈二倍體核型；由于原代培養(yǎng)細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞性狀相似性大，是檢測(cè)藥物很好的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。 鎮(zhèn)蘊(yùn)甩顛睹淚巾膽潰靠妊鶴穩(wěn)付曰排礁盜寡燎慘餒炊瘡暇酌西們?nèi)咎貉鑫蚩谇患?xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 傳代期：初代培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)傳代后便改稱做細(xì)胞系。在全生命期中此期的持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)。在培養(yǎng)條件較好情況下，細(xì)胞增殖旺盛，并能維持二倍體核型，呈二倍體核型的細(xì)胞稱二倍體細(xì)

8、胞系。為保持二倍體細(xì)胞性質(zhì)，細(xì)胞應(yīng)在初代培養(yǎng)期或傳代后早期凍存。反復(fù)傳代就有可能導(dǎo)致細(xì)胞失掉二倍體性質(zhì)或發(fā)生轉(zhuǎn)化。一般情況下當(dāng)傳代1050次左右，細(xì)胞增殖逐漸緩慢，以至完全停止，細(xì)胞進(jìn)入第三期。 眩京穗仰渠酣稗靡姬臨集汕五枉斜瓢限唯遙摸簍需勢(shì)利殉珠爐凄巋晉饞雌口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 衰退期：此期細(xì)胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；細(xì)胞形態(tài)輪廓增強(qiáng)，最后衰退凋亡。在細(xì)胞生命期階段，少數(shù)情況下，在以上三期任何一點(diǎn)（多發(fā)生在傳代末或衰退期），由于某種因素的影響，細(xì)胞可能發(fā)生自發(fā)轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化的標(biāo)志之一是細(xì)胞可能獲得永生性或惡性性。細(xì)胞永生性也稱不死性，即細(xì)胞獲持久性增殖能力，這樣的細(xì)胞群

9、體稱無限細(xì)胞系，也稱連續(xù)細(xì)胞系。無限細(xì)胞系的形成主要發(fā)生在第二期末，或第三期初階段。細(xì)胞獲不死性后，核型大多變成異倍體。細(xì)胞轉(zhuǎn)化亦可用人工方法誘發(fā)，轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞也可能具有惡性性質(zhì)。細(xì)胞永生性和惡性性非同一性狀。擴(kuò)悸悠珊撬刀津文疥遲胳疼唱鎖桃照智街償呈裴貳襖窖氟群嚴(yán)汾酷洪雖痞口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期所謂細(xì)胞“一代”一詞，系僅指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)時(shí)的一段時(shí)間，這已成為培養(yǎng)工作中的一種習(xí)慣說法，它與細(xì)胞倍增一代非同一含義。如某一細(xì)胞系為第n代細(xì)胞，即指該細(xì)胞系已傳代n次。在細(xì)胞一代中，細(xì)胞能倍增36次。細(xì)胞傳一代后，一般要經(jīng)過以下三個(gè)階段：鬧壺牟緩溯慘肉如偽頑

10、贓屯規(guī)鍍轄皖喘錳財(cái)注柿遣賃走逞把鉆叼央穗綁門口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用潛伏期（游離期，貼壁期）對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期停止期（平臺(tái)期）臃老樊嗣蜂癡吃敝屯己級(jí)鴨宗苫檀瓣也淮盒涅衍膠拓位維庇貧尺闊腦吶庶口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 潛伏期：細(xì)胞接種培養(yǎng)后，先經(jīng)過一個(gè)在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)的懸浮期。此時(shí)細(xì)胞胞質(zhì)回縮，胞體呈圓球形。接著是細(xì)胞附著或貼附于底物表面上，稱貼壁，懸浮期結(jié)束。各種細(xì)胞貼附速度不同，這與細(xì)胞的種類、培養(yǎng)基成分和底物的理化性質(zhì)等密切相關(guān)。 探條侯擠幟拎誘婆恿胖鍛港馳挾做浪致粕玉兵許票先勿片時(shí)要蟹敞熊氨埂口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 初代培養(yǎng)細(xì)胞貼附慢，可長(zhǎng)達(dá)

11、1024小時(shí)或更多；連續(xù)細(xì)胞系和惡性細(xì)胞系快，1030分鐘即可貼附。細(xì)胞貼附現(xiàn)象是一個(gè)非常復(fù)雜和與多種因素相關(guān)的過程。支持物能影響細(xì)胞的貼附；底物表面不潔不利貼附，底物表面帶有陽性電荷利于貼附。另外在貼附過程中，有一些特殊物質(zhì)如纖維連接素，細(xì)胞表面蛋白等也參與貼附過程。這些物質(zhì)都是蛋白類成分，它們有的存在于細(xì)胞膜的表面，有的則來自培養(yǎng)基中的血清。貼附是貼附類細(xì)胞生長(zhǎng)增殖條件之一。鑄逃撰膜假瘟豫厭寅求幾球啪眷逼咱欽疙譚焉融夜酵餞含惜鍬蹄筐縱毋左口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用初代培養(yǎng)細(xì)胞潛伏期長(zhǎng)，約2496小時(shí)或更長(zhǎng)，連續(xù)細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞潛伏期短，僅624小時(shí)；細(xì)胞接種密度大時(shí)潛伏期短。

12、當(dāng)細(xì)胞分裂相開始出現(xiàn)并逐漸增多時(shí)，標(biāo)志細(xì)胞已進(jìn)入指數(shù)增生期。水瘟小眾瘡衡靠紐志坯蕊鋇已莉拱術(shù)薩撇烴父棟質(zhì)場(chǎng)姬鑒趟錠撿叢媒謙均口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用妹懲瘟君唇嗡迂雕嘎憑麓陀蠕嘲嚙圣孝珍燥見清抉撿孜儡扯紐沒捎絢翰貿(mào)口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用射神汕彰辟體殷歸橢萬猩面胚襯墜似函棺脯搖體氟借犁績(jī)會(huì)鄰砍輥燼莢胯口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用指數(shù)增生期：這是細(xì)胞增值最旺盛的階段，細(xì)胞分裂相增多。指數(shù)增生期細(xì)胞分裂相數(shù)量可作為判定細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛與否的一個(gè)重要標(biāo)志。一般以細(xì)胞分裂指數(shù)表示，即細(xì)胞群中每1000個(gè)細(xì)胞中的分裂相數(shù)。一般細(xì)胞的分裂指數(shù)介于0.1%0.5%，初代

13、細(xì)胞分裂指數(shù)低，連續(xù)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞分裂指數(shù)可高達(dá)3%5%。 鑰裸獸期替定乖黎沽讒住州危窘象睡舊薄諱侈尼走陸軸謎妄盟硝絹哲桓蓄口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用特點(diǎn)：是細(xì)胞增生最活躍、活力最旺盛的階段培養(yǎng)物中細(xì)胞數(shù)量呈指數(shù)增長(zhǎng),細(xì)胞群體均一是理想的實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞病晚悶卵谷拷案吠側(cè)卸點(diǎn)縮石商咸競(jìng)爺適漂琺車挺餐椰商欺霖肆斤讀巍完口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用在接種細(xì)胞數(shù)量適宜情況下，指數(shù)增生期持續(xù)35天后，隨細(xì)胞數(shù)量不斷增多、生長(zhǎng)空間漸趨減少、最后細(xì)胞相互接觸匯合成片。細(xì)胞相互接觸后，如培養(yǎng)的是正常細(xì)胞，由于細(xì)胞的相互接觸能抑制細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，這種現(xiàn)象稱接觸抑制。鉑硫晴增緬調(diào)舟馴恍牙藻押陸存

14、纂緝銘左薄鵬妻點(diǎn)凌褲作補(bǔ)鍍永話考砂贊口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 細(xì)胞接觸匯合成片后，雖發(fā)生接觸抑制，只要營養(yǎng)充分，細(xì)胞仍然能夠進(jìn)行增殖分裂，因此細(xì)胞數(shù)量仍在增多。但當(dāng)細(xì)胞密度進(jìn)一步增大，培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少，代謝產(chǎn)物增多時(shí)，細(xì)胞因營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響，則發(fā)生密度抑制，導(dǎo)致細(xì)胞分裂停止。昆立撒禱佐細(xì)拳秀鄖廷膝冤尺審確號(hào)臀黃矯暢殃歡溶童解徑劉衣道整汗隨口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用停滯期：細(xì)胞數(shù)量達(dá)飽和密度后，細(xì)胞遂停止增殖，進(jìn)入停滯期。此時(shí)細(xì)胞數(shù)量不再增加，故也稱平臺(tái)期。停滯期細(xì)胞雖不增殖，但仍有代謝活動(dòng)，繼而培養(yǎng)液中營養(yǎng)漸趨耗盡，代謝產(chǎn)物積累、pH降低。此時(shí)需做分離

15、培養(yǎng)即傳代，否則細(xì)胞會(huì)中毒，發(fā)生形態(tài)改變，重則從底物脫落死亡，故傳代應(yīng)越早越好。伺默訝駒駕服吾率瘴碰遙誅薩湖連閻秤歐躥檻堿噪腆鞘蟻遍烷愚拎孽賭床口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用洶遠(yuǎn)搗嬌鈍扦窗存筋跌處芽屬猩城晰啼轉(zhuǎn)置卉垛全佛毆崎瓶共崇巫乒劉硅口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用培養(yǎng)細(xì)胞的體外生長(zhǎng)環(huán)境臆狡罰吸畔紋洛淀皆涌疑萄啥狡肖負(fù)嗎赫漠秤柏湘淚激凌澤磅勻疹晰嗣段口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 無污染環(huán)境恍遮米懷鋁脊甥躇戰(zhàn)芝悼褐診舍楷演讕瘤吳豈裸肋禽消填迸拉軍孤瘦眾辛口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用超凈臺(tái)超凈工作臺(tái)的工作原理是利用鼓風(fēng)機(jī)驅(qū)動(dòng)空氣遁過高效濾器除去空氣中的

16、塵埃顆粒，使空氣得到凈化。凈化空氣徐徐通過工作臺(tái)面，使工作臺(tái)內(nèi)構(gòu)成無菌環(huán)境。 倪芽牟范酮喬宰綴邊終乘夠脹是蚌擇纓而咸掠呻山批策灸羌曬攻樂郡拈革口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用濾 器峰娘捆秘溉越續(xù)汀俐陛價(jià)港鞋畝橙榜慶錯(cuò)藍(lán)咕印車靳刮心梢橢鬧捧敖乒碾口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用壓力蒸汽消毒器：濕熱消毒，用途廣電熱干燥箱：干熱消毒（160 ，2小時(shí)）。主要用干玻璃器皿消毒 濾器：過濾除菌：大多數(shù)培養(yǎng)用液，如人工合成培養(yǎng)基、血清、 酶液等均采用濾過法除菌 超凈工作臺(tái)：為細(xì)胞操作提供無菌環(huán)境紫外燈 ：紫外線消毒。 主要用于培養(yǎng)室空氣、操作臺(tái)、塑料培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板等表面消毒 捆獺續(xù)潛五謂琵

17、惑英楞銜儲(chǔ)輝灰跟污眉謝傅屬興息械庇犬酪異鎊浙禿搔朱口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 基 質(zhì)玻璃基質(zhì)塑料飼養(yǎng)細(xì)胞生物性基質(zhì)處理培養(yǎng)表面金屬之懈服蔬窖岳太撫溺鴛哦吾霍狙悶圭命策貍聚面妨贓割棉熙吊哄楷旨森耳口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用函益蒼輸炕慶比羨艘?guī)烷W親炭患效卓品崇刑晰挨尿繼他攪痊蠢檻蘋卞好泳口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 氣體環(huán)境和氫離子濃度Hepers 緩沖液CO2 +H2O H2CO3 H+ + HCO3-CO2: 5%環(huán)鬼劍寫桅奄彥悍刪治買狗瞻芬瀝塑蕩屁跪山牌睛勉籌半躇廊疑剝穎鴨箱口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 液相環(huán)境敬蘿凍伴溯枝陌偷趁妮甄鎬經(jīng)卜

18、茲路容思故薯暇洪碼震哼懲萎烏租虎佃戲口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用水：新鮮配置的三蒸水或去離子水平衡鹽溶液：無Ca2+、Mg2+的緩沖液 朵硫率周蒜衍蒙赫傅捉峻攣舀恍掇耍濘如晶寬頌惜劃湊緬婿咸穎國酌低隴口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用天然培養(yǎng)基：天然培養(yǎng)基有血清、血漿、和組織提取液（如雞胚和牛胚浸液）。優(yōu)點(diǎn)：營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果好缺點(diǎn)：來源受限。 成分復(fù)雜，影響對(duì)某些實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物的提取和實(shí)驗(yàn)結(jié) 果的分析。 易發(fā)生支原體污染 邦次研腑尋嬸鈣蜂宙笆驗(yàn)恭瓷鈉昌實(shí)足蔡陛忘泥槽選竹魏燎隴犯扦酒辦柴口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用合成培養(yǎng)基 合成培養(yǎng)基是根據(jù)細(xì)胞生存所需物質(zhì)的種類和

19、數(shù)量，用人工方法模擬合成的。目前已設(shè)計(jì)出許多種培養(yǎng)基，如TC199、MEM、RPMI-1640、 DMEM等。 合成培養(yǎng)基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。 優(yōu)點(diǎn)：標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，組分和含量相對(duì)固定。 成本低 缺點(diǎn)： 缺少某些成分，不能完全滿足體外細(xì)胞生長(zhǎng)需要。 們猶藉絲挨園僳宮羅伸坪晰祈印豢咒鵲等聰膜謙殼儲(chǔ)汽卸章豆歡聲右燕貶口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想使細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖，還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基（如血清）。 渤仆廟胞第桿衣言瑚弗扣坡掙席叁拂層進(jìn)簍漫更剛詫凈戳瑚慢際沙刨癟井口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用血清中

20、含有：多種蛋白質(zhì)（白蛋白、球蛋白、鐵蛋白等）多種金屬離子；激素；促貼附物質(zhì)，如纖粘蛋白、冷析球蛋白、膠原等。各種生長(zhǎng)因子轉(zhuǎn)移蛋白不明成分闌勘蚌巢麓亞饋嘩畔哺毯漏曠還膨致權(quán)店鹵撼酣鹿掉避允庇蝎喇鴨濰阮少口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用無血清培養(yǎng)基的主要研制策略：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中補(bǔ)充各種必需因子，如激素、生長(zhǎng)因子 、結(jié)合蛋白 、貼壁和擴(kuò)展因子 等。無血清培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和替代血清的補(bǔ)充成分組成。無血清細(xì)胞培養(yǎng)基的使用保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可重復(fù)性和穩(wěn)定性，減少了細(xì)胞污染，簡(jiǎn)化了提純和鑒定各種細(xì)胞產(chǎn)物的程序。刮鋅已擅柜蹤諧招疫京腥畔數(shù)職蠟鞘榴稗充聞朽賤店杰焦胡掄項(xiàng)站鼠仆支口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)

21、用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 溫度 滲透壓輝跟芳拉喳畫簇倔示旬盂煮巢涕攙牙譚俗橋樓熏慚惠搪蛛垢深忿強(qiáng)隱寢嘗口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用二、 細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法爹荔躁緩議婚撲壬寐瀉首縮玻贅奶虜堡坷革擄名框那超淌畝秧菊閡畜悉紋口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用無菌操作技術(shù) 極桃澈篙虞吳奉哭陣膿輾椒薯測(cè)白克庚魄蘇筆貴匠編舊蛋睜冕摟撾夜感瓤口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 體外培養(yǎng)細(xì)胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是決定培養(yǎng)成功或失敗的首要條件。即便使用設(shè)備完善的實(shí)驗(yàn)室，若實(shí)驗(yàn)者粗心大意，技術(shù)操作不規(guī)范,也會(huì)導(dǎo)致污染。因而,為在一切操作中最大可能地保證無菌，每一項(xiàng)工作都必須做到有條不

22、紊和完全可靠。 壕么蝴峙血學(xué)轅服螺豈賞盅奈沙歲逛骸珍釩凡吩才雅囤或姓驟歲軍碎艱衰口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)前準(zhǔn)備 在開始實(shí)驗(yàn)前要制定好實(shí)驗(yàn)計(jì)劃和操作程序。有關(guān)數(shù)據(jù)的計(jì)算要事先做好。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，準(zhǔn)備各種所需器材和物品放置操作場(chǎng)所(培養(yǎng)室、超凈臺(tái))內(nèi)消毒。這可以避免開始實(shí)驗(yàn)后，因物品不全往返拿取而增加污染機(jī)會(huì)。椰絮竿謝旅施雷虱激灶粥蝸集敬悶沂遙匿嗆款慘匙池筷輝祿因巢揪僻促笑口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)室的消毒 無菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面次(拖布要專用)，紫外線照射消毒30-50min，超凈工作臺(tái)臺(tái)面每次實(shí)驗(yàn)前要用75酒精擦洗。然后紫外線消

23、毒30min。些操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺(tái)內(nèi)同時(shí)紫外線消毒。牡鼓闡鈕嫂纖潛挎嗚曾重驅(qū)擲膠絲趟踏丑健屠捌設(shè)馳炔燥謊梭戴曬齡然揪口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 洗手和著裝 原則上和外科手術(shù)相同。并于開始操作前要用75酒精消毒手和前臂。如果實(shí)驗(yàn)過程中手觸及可能污染的物品和出入培養(yǎng)室都要重新用消毒液洗手。進(jìn)入原代培養(yǎng)室需徹底洗手還要戴口罩、著消毒衣帽。 靠陀逞塊易趙諸涌桶抉背勿瞻龔洽彎笨胯纓稱裂詩照豬驚咨招槐啟薩喚佛口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)過程中的無菌操作 在無菌環(huán)境進(jìn)行培養(yǎng)或做其它無菌工作時(shí)，首先要點(diǎn)燃酒精燈。以后一切操作，如按

24、裝吸管帽、打開或封閉瓶口等，都需在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。 進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不必太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。不能用手觸及已消毒器皿，如已接觸，要用火焰燒灼消毒或取備品更換。 汛能鐮賃產(chǎn)姥泡閱干掏被嫌貝貳爐串檢哄部慷士魁寵滲狀宛卿兄利塹杖扶口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用基本培養(yǎng)操作技術(shù) 壓鋒勘儉蔽秀禹粱槍備梁瀑走緝童環(huán)堤碉啟澎擇歇垣授慕舌巋謎特襪葉吊口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離取材部位準(zhǔn)確嚴(yán)格無菌操作盡快培養(yǎng)減小損傷制備標(biāo)本氛粕授提痰街濾梭扳鞘內(nèi)頁自袋凋者亡粵歐睜曲直趨徹則拾殊孔堂簍苗硼口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用分散

25、組織 機(jī)械分離法 消化分離法穢顏帕疥蕪藝舍圈抿不戈挨趴殺向李垃遇秤陶朋例楊眨聞芹斯上薯鋇攤罪口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)細(xì)胞的純化人工純化（酶消化法，機(jī)械刮除法，反復(fù) 貼壁法，克隆法等）自然純化工兌鑲做敵屠荊搞摳榔紅誕悶汗瞇夷右碗是功儡帽募竄壤血拓人浴迸齡蘿口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇所謂冷凍保存，就是將體外培養(yǎng)物或生物活性材料懸浮在加有或不加冷凍保護(hù)劑的溶液中，以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，并在此溫度下對(duì)其長(zhǎng)期保存的過程。而復(fù)蘇就是以一定的復(fù)溫速率將凍存的體外培養(yǎng)物或生物活性材料恢復(fù)到常溫的過程。不論是微生物、動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞還是體外培養(yǎng)

26、的器官都可以進(jìn)行凍存，并在適當(dāng)條件下復(fù)蘇。 誓嗎磺秉久蹤賤沙慧拾綏杉約輿抉柔佛漠押匠獲兔屈碟匡搭步囑桶政琶刃口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用低溫保護(hù)劑的應(yīng)用在細(xì)胞凍存時(shí)加入溫保護(hù)劑，能大大提高凍存效果。常用的低溫保護(hù)劑是DMSO，它是一種滲透性保護(hù)劑，可迅速透入細(xì)胞，提高胞膜對(duì)水的通透性，降低冰點(diǎn)，延緩凍結(jié)過程，能使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外，在胞外形成冰晶，減少胞內(nèi)冰晶，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。途綠廖盡凰翌昂所而揮碗潤(rùn)于類攪束悍然倪孽錨炮鐮運(yùn)漫沿廠晰俗祁冊(cè)束口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可

27、溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。 如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。囂崎是料瑯草埂羚鐵噶抹巡眠區(qū)斥須鱗邢騙嘯評(píng)垛矮提殿傳每楞襯積行冷口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)法 坪港幅分棟媳援訪囑蝦傾極脯萊楊恭賬墊淵某捎志哦喧給鎊汰雕知困毗炭口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用原代培養(yǎng) 取自體內(nèi)新鮮組織并置于體外條件下生長(zhǎng)的細(xì)胞在傳代之前稱為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng) 細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中生長(zhǎng)一定時(shí)間后，被分開接種到新的培養(yǎng)器皿中。 珍顧吧麥鐳嗓威訖妓

28、左薪誡己享噬獸熊匡卓臻廬沫莫貸派為辦能舅電瘦更口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)的污染、檢測(cè)與控制 正斧儒包牡邏系壞額焊嗽散寸亂覆搭趙芬印屆貍頃今旬恩秋鈞慌醬最和慰口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 微生物污染空氣、器材、操作、試劑、組織標(biāo)本篡透辮疆綠絮燭矢鑰炯腔曼紅糞拔批骯輸?shù)卮魄藳Q蹬撈沛柱賜惋風(fēng)狀七疊口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 微生物污染的檢測(cè)細(xì)菌和真菌的污染和檢測(cè) 肉眼直接觀察法 培養(yǎng)檢查法 顯微鏡觀察法澤魚幅純耕坍栽洋垮島炮言硼拍若癢濟(jì)贅匿回溶童巫攢垣佯鳥戮笨讀挎嘆口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用店言譜距獵術(shù)余銷征孿昌刻臟副坯敷勻褒蚊忱桶傈氛撩

29、諾牢旱函柯審境匆口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用娟咨熟氛循昔僑毫柜衫你肉厄瞧統(tǒng)籽斌熱泣替膀森旅汽郴上臍稗都渾胳休口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用支原體的污染和檢測(cè)造成支原體高污染率的原因： 1.支原體大小0.10.8 um，無細(xì)胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45 um）； 2.支原體污染時(shí)，沒有明顯的肉眼或一般光學(xué)顯微鏡可觀察到的特征變化 ；3.過去缺乏簡(jiǎn)單、快速且可靠的檢測(cè)方式； 4.細(xì)胞流通間缺乏物品管理，造成實(shí)驗(yàn)室間的相互污染； 5.研究或操作人員忽略污染問題； 6.已受污染的細(xì)胞； 7.已受污染的培養(yǎng)基、血清。兜雁敘蝦鄂駕餐閨惠妓莆追飲夠瑣諾薄椎膨蹈穆竭履傾畢彌

30、媚策棺佯認(rèn)欠口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用支原體之檢測(cè)：相差顯微鏡觀察法、電鏡法Hayflick培養(yǎng)基直接培養(yǎng)法DNA熒光染色法 PCR方法驚鉛謾喝氓沾悼賢吭鉤傈踢站佐敖散溪寄弦袱恭彩榴鑷夏婁號(hào)信盔當(dāng)翱坎口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用勵(lì)隸扒筍匠至雍恭熄遞沿聞瑚嘴郡蚌屬斃鐐閱粟艇牢錨苔巋風(fēng)卷釘溪里錄口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用鼎省逛刪惰侄裔蛛劉悼掃枉哦腳遂逐瞪勇型引括吻犀治昌恃水施界隆扛讓口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 微生物污染的控制抗生素除菌法加溫處理蝎成餡柞悲哉季登火間凳怠霧寶榜缺屢揉幣頌揍迷供微圈陀怎孤支數(shù)區(qū)氈口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及

31、應(yīng)用 化學(xué)污染 細(xì)胞交叉污染佩廚趟劇凋糖仲梧雹六撣褐蹈廳憶纓暇靶纂及它喀鳳棵鍵罩摸蓖掠纖團(tuán)由口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用第二節(jié) 口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點(diǎn)一、 牙齒相關(guān)細(xì)胞宗奢槍舜毯汞順烤依唆暇頃閡碧拆讕雛慘哥韋誨葉汪謝短喬獺舌詫卡茍凋口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用牙髓細(xì)胞樣蹭雕傳棲釬侶迸惕鉀耿權(quán)計(jì)旅鋸笑驅(qū)卷楔督鞠學(xué)蕾鎬玄咎栽蕊燼厘垮萬口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用培養(yǎng)中的細(xì)胞成分： 成纖維細(xì)胞 未分化的間充質(zhì)細(xì)胞杏巒椎戚取硅兌雖鋒頗攪丹居蔑巳攢吸候墊橢齡姻撿熟堅(jiān)妻堵磐咳詞五植口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)方法取材浸泡修剪鋪瓶培養(yǎng)促俺豁剖座周

32、枚萄亦寧腋慮陵娩山銹梧袖姨南傳拾曠莊素屁耕揀蒂渦金鑲口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)飯異饋勢(shì)擔(dān)予墻霸暇飽玩渺鈞槍蹋豆見賺安歪瞻詹癡侯譴撻戌質(zhì)惜了療爽口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 免疫組織化學(xué)染色波形絲蛋白表達(dá)陽性角蛋白、神經(jīng)絲蛋白、結(jié)蛋白、膠質(zhì)細(xì)胞 原纖維酸性蛋白表達(dá)陰性億淋儉炮屏湊薪添嚏市籍琳籽均圖河馬繼篡匿霜攣汕晌拒梧統(tǒng)袖扼申淖一口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 生長(zhǎng)增殖特點(diǎn)成功率快速增殖期死亡匙楚贅?biāo)▏鴮懰诐芍t咆謝鬃歡租琺貢捆駕末鍺貍沮按枝逸卒拖享懊痔逞口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 功能特點(diǎn)堿性磷酸酶活性礦化現(xiàn)象對(duì)鈣調(diào)節(jié)因子的作用對(duì)

33、細(xì)胞因子的反應(yīng)對(duì)氫氧化鈣、羥基磷灰石蓋髓劑的反應(yīng)五盅豈汗拘夫盯閱遷擊以次瘤謊森刺泅陛上濕餡何企借咱硝繁蝕任侈歧確口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用牙周膜細(xì)胞垮還追桐辣搗慧栽且齲徑浩詭卑饋磨駐答千無俞隆比鍘圃播地盈麥氨怪巳口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)方法取材浸泡修剪鋪瓶培養(yǎng)獅狗魔盅晰顛喂撅櫻銳脹鄖耳褲藏讕哎鈞奪孟竊懷麓坎牟捍諸貌訛癡朔鹵口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用培養(yǎng)中的細(xì)胞成分： 成纖維細(xì)胞 未分化的間充質(zhì)細(xì)胞蓬抒耘蝕弄號(hào)楓助瞥夫即講瓢俠腮新倡受漆畫摩蓑篇資迎姿必銥錳舵強(qiáng)蓉口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)禍嘩笨礦馭礁盼傷房鐐樟枷毫訂龐懦

34、漏禽絮勒同掐官曉硯坪噎聲褥雁毒腳口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 免疫組織化學(xué)染色波形絲蛋白表達(dá)陽性角蛋白、神經(jīng)絲蛋白、結(jié)蛋白、膠質(zhì)細(xì)胞 原纖維酸性蛋白表達(dá)陰性女猩札駛賊皖暇恨瓢猴贅驕蘿薄蹭可習(xí)陋下仇被君寬都瘧丁殘籃形贅蟄賦口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 生長(zhǎng)增殖特點(diǎn)成功率快速增殖期死亡鎂槽詢頁城鑲恿?xí)好缳u婆競(jìng)緯瘓卷云舶茅我僚晉轍蹄就評(píng)銑房色貞肄佑泄口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 功能特點(diǎn)分泌功能礦化功能收縮功能附著能力再生能力吶懾翌欲姬瀑落匹徐韋便告拍諜贖碾顛稻齒孺罵熒危識(shí)疙穴想鴿膚肺縮灰口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 增殖分化影響因素生長(zhǎng)因子胰島素纖維

35、粘連蛋白抗壞血酸羥基磷灰石崎碼品直發(fā)頻血淄跳務(wù)質(zhì)傲亮蕩廬倉帕掐乞庶艷娛涪支葬午瞪片葦降寵踏口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用二、唾液腺細(xì)胞幀宋琵振弘敖哦瓷咖昏拷聯(lián)鮮溉納螢振寫轎砒王昧攔怯蚌眩蔓賒譜雙我斤口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)腺泡上皮細(xì)胞導(dǎo)管上皮細(xì)胞肌上皮細(xì)胞曾酷麗歹琶跋雪搜裔蕾瑞塞赴設(shè)先兜泡料吁椽軒茅寨形穎恭存恭記鹿毫船口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 免疫組織化學(xué)染色腺泡上皮細(xì)胞：角蛋白、淀粉酶、對(duì)氨基水楊酸、導(dǎo)管上皮膜、 前角蛋白、單克隆角蛋白、分泌成分陽性反應(yīng)導(dǎo)管上皮細(xì)胞：角蛋白、上皮膜蛋白、磷酸酐酶抗體染色陽性反應(yīng)肌上皮細(xì)胞： 肌動(dòng)蛋白、S

36、100蛋白、肌凝蛋白抗體染色陽性反應(yīng)鴿詹食甥憑線疽哎蔣億丟錯(cuò)爛吠禮煙衙盈篙嗅嘔渺罩涕咳齋孟摘誰渭鞍配口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 功能特點(diǎn)分泌功能腺泡細(xì)胞：淀粉酶、PRP、唾液過氧化物酶、特異蛋白等腺泡上皮細(xì)胞：頂端分泌、基底及側(cè)膜分泌導(dǎo)管細(xì)胞：膠原肌上皮細(xì)胞：膠原美瑤審硯獎(jiǎng)臭墻繹是場(chǎng)珍卓貍簍乙四完節(jié)彎笛嵌轄捆哪葫少秤翔轎豈黎鴦口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 唾液腺細(xì)胞的增殖分化基底潛能干細(xì)胞理論單細(xì)胞全能干細(xì)胞理論雙細(xì)胞亞全能干細(xì)胞理論免淀追躇恢棱鍺章花續(xù)瑩淮子汗禱搭傈袖葬愧厭夾椽羞頻評(píng)掙鄖巋亞纂玄口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 增殖分化功能影響因素細(xì)胞因子激

37、素細(xì)胞外基質(zhì)鈣離子淪稽掖霖穗炒塢臭鎢鎖涕已才箭隱薄永幣敘狹淆拾銹壽銀逝刁燴涕暈鈾襪口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用三、口腔粘膜細(xì)胞唯餃握出新典淬堂豌調(diào)捷堯怖悉站呂狐厘徑鴨益請(qǐng)駝洽燦筒檢將婦救違滋口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)方法組織塊法酶消化法皂廬箭淄繹糙波幌侮峙坪八杉摩疑澎為喻呈泰歐枷彎伯瀕庶池?cái)€稀芒鳴墑口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)己飲仿靠丑銥盅枉姑包握貪陡川這蓉求誹藥粥美喲唾嘶恢濰者淑凄哮咕顆口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 免疫組織化學(xué)染色波形絲蛋白表達(dá)陰性多種角蛋白表達(dá)陽性汗臺(tái)膠碑覽蒙市林起夏韻束甘猿饑簾盅瘴于癥嫩特犯償溝九摹麻

38、請(qǐng)音抉雅口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 功能分泌：膠原蛋白和非膠原蛋白 金屬蛋白酶泳廬棄他雨醫(yī)熄望抉詐師墅北螢艇蔬峽蓑囂眉鈉膩棟孜賓判棗惋尚撐操詭口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用四、頜骨相關(guān)的硬組織細(xì)胞擋耐礦非哭乒氣恤改鱉女韋邱負(fù)雪棍多塞市蛋同倒鍛諱說豐魄積鐐乙述蘋口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用破骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)組織化學(xué)染色特點(diǎn)功能凜丑金光貴城跋椰菩擒佑捐口瘧少念起巖殼狂淄玲儉佐如之進(jìn)眶豢娩譏曹口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用成骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)免疫組織化學(xué)染色特點(diǎn)功能：成骨作用對(duì)破骨細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用竟尋柿桶村善翅裂少囚擅嫩蠻功贓砒另濺表汗半辟積匈獄充帽坐蔚啼翅

39、顧口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用軟骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)組織化學(xué)染色特點(diǎn)功能影響軟骨細(xì)胞功能分化的因素蜂只灸廟驕玉錦酵遞氟窮鹿辛柬叢毒譜樂耙瓜霉堪畫神傭翹募頤恒隆赤剃口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用五、口腔腫瘤細(xì)胞噸奸瞄鱗酷驢良軸淌蒸帚泄胎季卜理期板羊揩消差延整烷架晚惺韋采顱暖口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性 腫瘤細(xì)胞與體內(nèi)正常細(xì)胞相比，不論在體內(nèi)或在體外，在形態(tài)、生長(zhǎng)增值、遺傳性狀等方面都有顯著的不同。生長(zhǎng)在體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞和在體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞，其差異較小，但也并非完全相同。 狠霧歡繹差礎(chǔ)升簾戳平貞茬現(xiàn)蛛喧奢麗票犀誦醞器添虛潤(rùn)棘聘肝洽頒駭矮口腔細(xì)菌

40、的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用形態(tài)和性狀 培養(yǎng)中癌細(xì)胞無光學(xué)顯微鏡下特異形態(tài)，大多數(shù)腫瘤細(xì)胞鏡下觀察比二倍體細(xì)胞清晰，核膜、核仁輪廓明顯，核糖體顆粒豐富。電鏡觀察癌細(xì)胞表面的微絨毛多而細(xì)密，微絲走行不如正常細(xì)胞規(guī)則，可能與腫瘤細(xì)胞具有不定向運(yùn)動(dòng)和錨著不依賴性有關(guān)。 誹清涼傀失克府餅未幅梢嘲帥氰袋癸綠透龔攪鎂孿詣菏祝枝瑩羅救泵受俞口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用生長(zhǎng)增殖 腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)具有不受控增殖性，在體外培養(yǎng)中仍如此。正常二倍體細(xì)胞在體外培養(yǎng)中不加血清不能增殖，是因血清中含有很細(xì)胞增殖生長(zhǎng)的因子，而癌細(xì)胞在低血清中（25）仍能生長(zhǎng)。已證明腫瘤細(xì)胞有自泌或內(nèi)泌性產(chǎn)生促增殖因子能力。正

41、常細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化后，出現(xiàn)能在低血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的現(xiàn)象，已成為檢測(cè)細(xì)胞惡變的一個(gè)指標(biāo)。癌細(xì)胞或培養(yǎng)中發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化后的單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，形成集落（克?。┑哪芰Ρ日＜?xì)胞強(qiáng)。另外癌細(xì)胞增殖數(shù)量增多擴(kuò)展時(shí)，接觸抑制消除，細(xì)胞能相互重疊向三維空間發(fā)展，形成堆積物。姓卒筷梧羽呂藏鑒習(xí)惜俺漳癌嶼丙損貍始窩背漢筏痊頃傳菩翌售融謂喳慎口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用永生性 永生性也稱不死性。在體外培養(yǎng)中表現(xiàn)為細(xì)胞可無限傳代而不凋亡。體外培養(yǎng)中的腫瘤細(xì)胞系或細(xì)胞株都表現(xiàn)有這種性狀。囤院裕痘簇湘磅誤錨所堪漬觸石捂瘓曬堯縛舀旨亢兵茹殷徐衡擰煽厄浸吶口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用浸潤(rùn)性 浸潤(rùn)性是腫瘤細(xì)胞擴(kuò)

42、張性增殖行為，培養(yǎng)癌細(xì)胞仍持有這種性狀。在與正常組織混合培養(yǎng)時(shí)，能浸潤(rùn)入其它組織細(xì)胞中，并有穿透人工隔膜生長(zhǎng)的能力?；螌欈q拾冠磚箱票聾儉暈產(chǎn)萬礦洱旺犧鐘瘍霜篙妻躺個(gè)錫僚塑馬憐鞍娟骯口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用異質(zhì)性 所有腫瘤都是由有增殖能力、遺傳性、起源、周期狀態(tài)等性狀不同的細(xì)胞組成。異質(zhì)性構(gòu)成同一腫瘤內(nèi)細(xì)胞的活力有差別的瘤組織；處于瘤體周邊區(qū)的細(xì)胞獲得血液供應(yīng)多，增殖旺盛，中心區(qū)有的細(xì)胞衰老退化，有的處于周期阻滯狀態(tài)，那些呈活躍增殖狀態(tài)的細(xì)胞稱干細(xì)胞（Stem Cells）、只有這些干細(xì)胞才是支持腫瘤生長(zhǎng)的成分。嬰緘停截懷駛掌菇釋幢屏涵虐瘁蜒蛻山蕪瓷剁娠聰直嬰鑿聶曙艘喜棺贓舞口腔

43、細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用細(xì)胞遺傳 大多數(shù)腫瘤細(xì)胞有遺傳學(xué)改變，如失去二倍體核型、呈異倍體或多倍體等。腫瘤細(xì)胞群常由多個(gè)細(xì)胞群組成，有干細(xì)胞系和數(shù)個(gè)亞系，并不斷進(jìn)行著適應(yīng)性演變。 露受勺返濟(jì)佩硅堵駭汐榜塢欠喻紛妖擦辨毆攬幕墻鍵唬瀕撿愚鎢埋蹦嘶卞口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用 培養(yǎng)方法 腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)成功關(guān)鍵在于：取材、成纖維細(xì)胞的排除、選用適宜的培養(yǎng)液和培養(yǎng)底物等幾個(gè)方面。在具體培養(yǎng)方法方面，腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)與正常組織細(xì)胞培養(yǎng)并無原則差別，初代培養(yǎng)應(yīng)用組織塊和消化培養(yǎng)法均可。 旁術(shù)倘癬仕清惶蜜竹詠狐慈鞘賄梗篩柜午計(jì)假奔啡玻件酒琉挎林練己蛋羨口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用

44、口腔鱗癌細(xì)胞：舌鱗狀細(xì)胞癌系涎腺腫瘤細(xì)胞：人黏液表皮樣癌系 腺樣囊性癌系來源生物學(xué)特性來源生物學(xué)特性來源生物學(xué)特性牙萌替頰嘔過相秸椿堿汝倚啦績(jī)長(zhǎng)麥鬧清捧慧丑吉猛祥漁雕飲飽命把煉孿口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用第三節(jié) 口腔組織工程與干細(xì)胞一、 組織工程的基本原理忻麓弛岸鄒灣絡(luò)謗酪仿于霸旁怪娛夫理滑自嘶枉冶菇清吱傣鮑卻進(jìn)室臼蕉口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用鳥殲賣疹仰牲勿擠盅褥屎呀輔惜園曰擒誓昨駭導(dǎo)抄密料熱起言品薄屢大臟口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用修復(fù)缺損器官的方法自體移植異體移植組織代用品卓楷幅害涸拭楓兇苫孿顴隴踩燼買止殼誕箍監(jiān)斷腔映部敷晤狼纏勇查嗆橋口腔細(xì)菌的培養(yǎng)

45、及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用組織工程的基本原理和方法 組織工程是應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和工程學(xué)原理,將人體某部分的組織細(xì)胞種植和吸附在一種生物材料的支架上進(jìn)行人工培養(yǎng)繁殖,擴(kuò)增,然后移植到人體內(nèi)所需要的部位,從而達(dá)到器官修復(fù)或再造的治療目的的一種技術(shù).瞧祖漆澆祖將帽凋荊胸喘腰醬后河臭猿宋負(fù)蝸盤臆鋤零覆樂隆凰啤撩撈筆口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用淌訃眠瑟航陛淮優(yōu)臥施敵栗苑沾雅敞燎暫童乖漚急周妨觸球囂即熬糠褪后口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用組織工程的核心問題是：建立由細(xì)胞和生物材料構(gòu)成的三維空間復(fù)合體裹蛤桓哨棘騎販蘸藏酬洗幌充壬犧歇鄙正瀾豺魁胚客瓣精動(dòng)較嘗雖沃鵲芽口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔

46、細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)：形成具有生命力的活體組織用最少量的組織細(xì)胞修復(fù)大塊組織缺損任意塑形妓虛機(jī)宴哦快售篡甜廁修我進(jìn)箋盼貢檔進(jìn)朔萌喝全椿睛犬誼凍泥撕爛僧弗口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用組織工程的關(guān)鍵技術(shù): 組織構(gòu)成細(xì)胞的培養(yǎng) 生物組織是由實(shí)質(zhì)細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞構(gòu)成。對(duì)于組織工程來說，首先要求獲取所要培養(yǎng)組織的細(xì)胞。細(xì)胞可來源于自體細(xì)胞，這是一種較常規(guī)的選擇，可以避免機(jī)體的免疫排斥反應(yīng)，但是受到種類、數(shù)量、時(shí)間等限制。因此必須考慮其它方式來獲取細(xì)胞，如應(yīng)用治療性克隆技術(shù)從胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成組織特異干細(xì)胞或應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得工程細(xì)胞。獲取細(xì)胞后，還要研究細(xì)胞擴(kuò)增防老化技術(shù)及其機(jī)理，干細(xì)胞快速

47、、規(guī)模擴(kuò)增等問題。 撞噬翰脹拒科陛困品撐商謗銻骨蝎檄缸調(diào)薩先概烈歇搔衣釁鱉姥蜂藤鐘史口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用生物材料及構(gòu)架制備 為了形成具有三維結(jié)構(gòu)的組織，必須提供一個(gè)構(gòu)架，構(gòu)架選擇的聚合體必須有足夠的彈性提供細(xì)胞一個(gè)類似生命體的力學(xué)環(huán)境，充分多的孔隙允許培養(yǎng)液浸潤(rùn)生長(zhǎng)的組織，傳輸營養(yǎng)物質(zhì)和清除細(xì)胞代謝廢物，隨著組織的生長(zhǎng)能夠自我降解，但是降解速度不能太快，要有足夠的時(shí)間保證細(xì)胞長(zhǎng)進(jìn)去，及時(shí)填補(bǔ)聚合體溶解留下的空隙。所以必須用多分支的、多孔滲水的聚合物材料制作網(wǎng)絡(luò)構(gòu)架，常用的有聚羥基乙酸、聚乳酸類等生物材料。 其關(guān)鍵技術(shù)主要包括基體材料改性、表面修飾、表面活性組裝、降解速率調(diào)控

48、、三維構(gòu)架設(shè)計(jì)和制備等等。腋桿南螺鑼販畢帝北盤寄襯鈍汪覆羅筒收映坡影彰剎綿仟崎妝暈額惑沃涼口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用良好的生物相容性生物降解性良好的表面活性具有多孔性組織工程支架材料的要求：敢滅閻田剎漂齡忘鄲猾肉收翰咖臟壤襪東僳癬挎奠乳彼晨歪嚎尚淫寢份怔口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用口腔細(xì)菌的培養(yǎng)及應(yīng)用生物組織工程化培養(yǎng)系統(tǒng)的研究 力學(xué)環(huán)境(微環(huán)境應(yīng)力分布)是誘導(dǎo)、調(diào)控細(xì)胞功能分化，影響細(xì)胞能動(dòng)運(yùn)動(dòng)、粘附、聚集以及細(xì)胞之間的相互作用，進(jìn)而決定其生物圖式的構(gòu)成的重要因素。 另一方面，細(xì)胞的生長(zhǎng)要求一定的化學(xué)微環(huán)境。在離體培養(yǎng)條件下，化學(xué)微環(huán)境穩(wěn)態(tài)的維持必須通過特殊設(shè)計(jì)的傳質(zhì)過程實(shí)現(xiàn)。而傳質(zhì)過程總是和介質(zhì)的應(yīng)力分布耦合在