格里斯試劑分光光度法

1、亞硝酸鹽氮測定一格里斯試劑分光光度法1原理亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸作用，可生成不穩(wěn)定的化合物，隨即與a-萘胺作用，生成一種紅色偶氮化合物，反應如下：NHeC HJCCJOH = N十唱HQOUN日十調(diào)QSO,HS（AH頃W N 叫MH】此偶氮化合物在524nm處有最大吸收波長，因此可以通過此反 應產(chǎn)生紅色偶氮化合物的吸光值計算出no2-的濃度，從而計算 出亞硝態(tài)氮濃度。此方法的有效范圍最大值為0.5mg/L。2實驗用品2.1儀器：100ml容量瓶、10ml容量瓶、試管若干、最大量程分別為1ml、0.2ml的移液槍一支、分光光度計、水浴鍋；2.2藥品：對氨基代苯磺酸、冰醋酸、a-萘胺、亞硝酸鈉；2

2、.3試劑配制（1）格里斯試劑A.對氨基代苯磺酸試劑:稱取對氨基苯磺酸0.5 g，溶于30 mL冰醋酸和100 mL蒸餾水的混合液中（過濾避光保存一 個月內(nèi)可用）；B.a-萘胺試劑:稱取0.1 g a-萘胺試劑，溶解于100 mL熱蒸餾 水中，冷卻后加入30 mL冰醋酸（過濾避光保存一個星期內(nèi) 可）；臨用前將A和B兩溶液等量混合。（2）NaNO2標準溶液（0.01 mg/mL）：稱取0.0150g分析純亞硝 酸鈉溶于水中，定容至100 mL；吸取1 mL此溶液，再稀釋 定容至10 mL，即為標準溶液。3實驗步驟3.1標準曲線取7支10 ml比色管，分別按表加入試劑，在波長524 nm處以 蒸餾水

3、作參比，依次測定吸光度A，各值減去空白試驗（即0號管）繪制標準曲線。編號0123456NaNO2標準溶液（mL）00.0250.050.10.150.20.25加蒸餾水至5mL濃度（mg/L）00.050.10.20.30.40.5格里斯試劑（mL）0.20.20.20.20.20.20.2搖勻，沸水浴加熱1min，冷卻至室溫吸光值a5240.0020.0390.0690.1310.1920.2410.311A=A524-a524（0）0.0370.0670.1290.1900.2390.309以編號16的數(shù)據(jù)（紅色字體的數(shù)據(jù)）作標準曲線，橫坐標為配制成溶液亞硝酸鹽氮濃度（mg/L），縱坐標為

4、A；3.2樣品測定取0.4ml水樣(必要時可以用稀釋后水樣代替，記下稀釋的 倍數(shù)D)用蒸餾水稀釋至5ml后，加入0.2ml格里斯試劑，。在 波長524 nm處以蒸餾水作參比，依次測定吸光度A524，各值減 去空白試驗(即標準曲線0號管的吸光值)即為校正值A(chǔ) (此全 過程應與標準曲線同時操作)；編號ABCDEF 水樣/ml0.40.40.40.40.40.4 加蒸餾水至5mL格里斯試劑/ml0.20.20.20.20.20.2 搖勻，沸水浴加熱1min，冷卻至室溫；A524 A=A524-A524(0) 濃度/ (mg/L) 3.3水中亞硝酸鹽氮濃度按下式計算：PN (NO2-) = 5X(A-a) /(bXV) XD式中：PN(NO2-)原水樣中亞硝酸鹽氮濃度，mg/L,以N計;A 試樣校正后的吸光值；b標準曲線的斜率；a標準曲線的截距；V所取試樣的體積，ml；D稀釋倍數(shù)(水樣未經(jīng)稀釋時此值為1)；4注意事項該方法最大有效范圍比起原樣品中亞硝酸鹽氮濃度可能最大值有相當大差距，注意稀釋但又不可過量稀釋，避免測得的吸光值過小以致不準確；出于對所用蒸餾水