植物組織培養(yǎng) 題

1、植物組織培養(yǎng)題細(xì)胞培養(yǎng)：將從植物體或其培養(yǎng)物游離的細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)的方法.植板率：采用平板法進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，成團(tuán)的細(xì)胞團(tuán)數(shù)與接種的總細(xì)胞數(shù)的比率。條件培養(yǎng)基：培養(yǎng)低密度細(xì)胞時采用的曾經(jīng)培養(yǎng)過高密度細(xì)胞的培養(yǎng)液，其中含有高密度細(xì) 胞培養(yǎng)時分泌的利于細(xì)胞生長的因子。植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)：將植物細(xì)胞或小的細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)的技術(shù)次生代謝：對于植物正常的生長發(fā)育非必需的代謝，產(chǎn)物為相對穩(wěn)定的次生代謝產(chǎn)物。單倍體：具有配子體的染色體組成的（植物體）抱子體。雄核發(fā)育：由小抱子沿抱子體途徑發(fā)育成花粉植株的過程.細(xì)胞全能性：一個生活活細(xì)胞所具有的發(fā)育成完整個體的潛在能力。外植體：從植株上切取

2、下來的用于培養(yǎng)的材料。脫分化：成熟細(xì)胞回復(fù)到未分化的分生狀態(tài)的過程。再分化：已脫分化的細(xì)胞重新轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂幸欢ㄐ螒B(tài)結(jié)構(gòu)和功能的細(xì)胞團(tuán)或組織，從而構(gòu)成一 個完整植株的過程。愈傷組織：外植體上由于脫分化細(xì)胞迅速分裂形成的一團(tuán)無序生長的薄壁細(xì)胞團(tuán)。離體形態(tài)發(fā)生:體外離體培養(yǎng)條件下，外植體通過器官發(fā)生或體細(xì)胞胚胎發(fā)生方式，完成植 物器官或機(jī)體形態(tài)結(jié)構(gòu)的發(fā)生和形成過程。胚胎發(fā)生:又稱體細(xì)胞胚胎發(fā)生，指在離體培養(yǎng)條件下，一個非合子細(xì)胞沒有經(jīng)過受精作用， 但卻經(jīng)歷胚胎發(fā)育過程，形成具有萌發(fā)潛力的類似于合子胚的一種結(jié)構(gòu)。人工種子:離體條件下，將胚狀體、人工胚乳包裹在人工種皮中，經(jīng)過特殊處理形成的一種 能在大田播

3、種，以替代天然種子的球狀結(jié)構(gòu)。繼代培養(yǎng):將組織培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上培養(yǎng)的過程與方法。1、單細(xì)胞培養(yǎng)的幾種方法及其原理；（1）平板法：采用適當(dāng)密度的細(xì)胞在薄層平皿培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。（2）看護(hù)培養(yǎng)：看護(hù)組織為單細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)及生長因子（3）飼養(yǎng)培養(yǎng)：利用高密度細(xì)胞分泌的生長因子透過濾紙支持地密度細(xì)胞的生長。（4）微室培養(yǎng)：在玻片上人造一個微小密封環(huán)境培養(yǎng)單細(xì)胞。2、懸浮培養(yǎng)技術(shù)的路線：外植體單細(xì)胞分離錐形瓶振蕩培養(yǎng)篩選高產(chǎn)細(xì)胞系小試中試大規(guī)模培養(yǎng)3、獲得松散型愈傷組織的策略：（1）采用高濃度培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。（2）對結(jié)構(gòu)松散的愈傷組織進(jìn)行繼代培養(yǎng)。（3）在培養(yǎng)基中采用些天然物質(zhì)如CM培養(yǎng)。4、

4、懸浮培養(yǎng)的方法及特點(diǎn)；（1）分批培養(yǎng)：是一個放大的懸浮培養(yǎng)。（2）連續(xù)培養(yǎng)：通過流動培養(yǎng)延長培養(yǎng)周期和目的產(chǎn)物的積累時間，增加目的產(chǎn)物的產(chǎn)量。（3）半連續(xù)培養(yǎng)：完成成批培養(yǎng)一個周期后，取出大部分細(xì)胞懸液，保留小部分細(xì)胞懸液 作為下一培養(yǎng)周期的種子細(xì)胞，然后加入新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法。（4）固定化培養(yǎng)：將細(xì)胞固定在支持物上后采用流動培養(yǎng)最大限度提取次生代謝產(chǎn)物。5、懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞同步化的處理方法物理法：按細(xì)胞團(tuán)大小選擇；低溫休克選擇法等?；瘜W(xué)法：饑餓法：通過使細(xì)胞缺乏代謝物質(zhì)而處于饑餓狀態(tài)同步化于G1期或G2期。抑制法：如加入DNA合成抑制劑使細(xì)胞同步化于S期的方法，分級分離法：利用流式細(xì)胞儀等同

5、步化細(xì)胞。6、細(xì)胞數(shù)量與活力測定的方法；（1）測定懸浮系細(xì)胞數(shù)量的方法：細(xì)胞計數(shù)；干重、鮮重測定；細(xì)胞密實體積（PVC）。（2）細(xì)胞活力測定：二乙酸熒光素法（FDA）；伊凡藍(lán)染色法；相差顯微鏡鏡檢；四唑鹽還原法（TTC）。7、簡介愈傷組織形成經(jīng)歷幾個時期，各自特點(diǎn)。誘導(dǎo)期：細(xì)胞特點(diǎn)：細(xì)胞大小沒有多大變化，外觀無明顯特征；細(xì)胞內(nèi)合成代謝活躍；RNA含量迅速增加；細(xì)胞核體積明顯增大。分裂期：細(xì)胞特點(diǎn)：細(xì)胞的數(shù)目迅速增加；每個細(xì)胞平均鮮重下降；細(xì)胞體積小，內(nèi)無液泡；細(xì)胞的核和核仁增大到最大；細(xì)胞中RNA含量最高。分化期：細(xì)胞特點(diǎn)：細(xì)胞形態(tài)大小保持相對穩(wěn)定，分裂方式由半周分裂轉(zhuǎn)為內(nèi)部的局部細(xì)胞分裂，形成局部的片狀或瘤狀結(jié)構(gòu)。生化方面表現(xiàn)為多種酶活性增強(qiáng)，胞內(nèi)淀粉增多，蛋白質(zhì)合成速度加快。8、比較胚狀體與合子胚的異同。（1）不同點(diǎn)：結(jié)構(gòu)不同：胚狀體存在多