植物組織培養(yǎng)試卷

1、植物組織培養(yǎng)試卷一、名詞解釋：（每小題3分，共15分）初代培養(yǎng)基：是指用來(lái)第一次接種外植體的培養(yǎng)基。脫分化：一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。一個(gè)已停止分裂的 成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。液體培養(yǎng)：指在進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中不加瓊脂等凝固劑，一般需要通過(guò)振蕩等方法解決培養(yǎng)基的通氣情況。細(xì)胞全能性：一個(gè)細(xì)胞能產(chǎn)生一個(gè)完整植株的固有能力，或植物細(xì)胞具有全部的遺傳信息，不論是性細(xì)胞還 是體細(xì)胞，在特定環(huán)境下，能進(jìn)行表達(dá)而產(chǎn)生一個(gè)獨(dú)立完整的個(gè)體。再分化：愈傷組織形成不定芽或不定根或胚狀體。二、填空（每空1分，共40分）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，最常

2、用的培養(yǎng)基是，培養(yǎng)基的pH因外植體的來(lái)源不同而異，常用和調(diào)節(jié)pH，大多數(shù)植物的pH要求調(diào)節(jié)在范圍內(nèi)。 2. 可以通過(guò)、等措施預(yù)防褐變的發(fā)生。3. 植物組織培養(yǎng)時(shí)，外植體可以是、。4.應(yīng)用微尖嫁接技術(shù)進(jìn)行脫毒培養(yǎng)無(wú)病毒苗，主要程序?yàn)?5.組織培養(yǎng)植株的再生途徑有兩條：一是發(fā)生，另一是發(fā)生 6.在配制培養(yǎng)基時(shí)，可以在培養(yǎng)基中添加，利用其吸附能力，可以降低褐變的發(fā)生，但它對(duì)物質(zhì)的吸附。7.培養(yǎng)基的滅菌要求壓力為、溫度為、維持時(shí)間為。8.組織培養(yǎng)中常用的生長(zhǎng)素有吲哆乙酸（IAA），2，4-二氯苯氧乙酸（2, 4-D），吲哆丁酸（IBA），萘乙酸（NAA），它們的作用 強(qiáng)弱順序?yàn)椤?.莖尖微繁殖過(guò)程一般

3、包括五個(gè)階段，即、。10.莖尖分生組織培養(yǎng)的目的主要是，其莖尖一般取毫米。為了使脫毒效果更好，可以將莖尖分生組織培養(yǎng)與結(jié)合起來(lái)。脫毒處理的試管苗，在用于生產(chǎn)之前，必須進(jìn)行。11.污染的原因從病源菌上分析主要有兩大類、。三、判斷正誤，并改錯(cuò)。（每小題2分，共20分）一般將微量元素母液均配制成10倍，在配制培養(yǎng)基時(shí)，使用量為10ml/Lo細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素的比值較高時(shí)， 有利于愈傷組織的誘導(dǎo)。對(duì)于金邊虎尾蘭等遺傳學(xué)上的嵌合體植物，要是組織培養(yǎng)繁殖的植株保持原有的園藝價(jià)值，只能通過(guò)葉培養(yǎng)。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí)，材料也容易褐變，生長(zhǎng)素有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。利用莖尖分生組織進(jìn)行脫毒培養(yǎng)時(shí)

4、，莖尖外植體大小與脫毒效果成正比。某些植物通過(guò)愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無(wú)病毒苗。無(wú)病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病毒之后，體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和生理狀況發(fā)生改變，因而對(duì)其他病毒和 病原體的侵染更為敏感，因此在種植脫毒苗的一定要隔離種植。微繁不定芽的產(chǎn)生有兩個(gè)途徑，一是不定芽不通過(guò)愈傷組織由外植體直接產(chǎn)生，二是外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組 織，由愈傷組織上產(chǎn)生不定芽。后一途徑相對(duì)較為優(yōu)越，因?yàn)橥ㄟ^(guò)愈傷組織不會(huì)出現(xiàn)一些突變。細(xì)胞的全能性，可以通過(guò)分裂細(xì)胞的脫分化和再分化過(guò)程得以體現(xiàn)。培養(yǎng)基中的鐵鹽，常用不易分解的乙二胺四乙酸鐵螯合物，以防在pH較高時(shí)鐵被氧化為不溶的氫氧化鐵。四、簡(jiǎn)答題：（每小題5分，共15分）植

5、物生長(zhǎng)物質(zhì)如何調(diào)控外植體形態(tài)發(fā)生？答案要點(diǎn)：在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，常用的植物激素有生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂素類，在高生長(zhǎng)素（如使用高濃度4-D）時(shí)能促進(jìn)外植體的脫分化，在生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值較高時(shí)，促進(jìn)不定根的發(fā)生，比值較低時(shí)促進(jìn) 不定芽的發(fā)生。為什么要對(duì)脫毒苗進(jìn)行多次檢定？答案要點(diǎn)：由莖尖分生組織培養(yǎng)獲得的試管苗，經(jīng)第一次擴(kuò)繁后要對(duì)試管苗進(jìn)行病毒檢測(cè)，以確定材料的脫毒情 況。因?yàn)閯內(nèi)∏o尖的大小直接關(guān)系到脫毒效果，一船剝?nèi)〉那o尖愈小成苗率愈低，但脫毒率高，而培養(yǎng)的莖尖愈 大，成苗率愈高，但脫毒率低。脫毒苗中病毒有可能再次出現(xiàn)，病毒的再現(xiàn)可能有三方面的原因，一是脫毒不徹底，脫毒后試管苗血清檢測(cè)沒(méi)有病

6、毒反映，是因?yàn)橹仓牦w內(nèi)病毒含量非常少，以致檢測(cè)不到，試管苗多次 繼代后，病毒逐漸積累，從而再次出現(xiàn)病毒侵染；二是一些弱系病毒或一些暫時(shí)沒(méi)有條件檢測(cè)到的病毒，在強(qiáng)系 病毒脫掉后快速繁殖造成危害，三是由于操作及其它一些原因造成的病毒再次侵染。莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)的目的和取材大小可分為哪幾種類型？各有何特點(diǎn)？答案要點(diǎn)：莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為莖尖分生組織培養(yǎng)和普通莖尖培養(yǎng)兩種類型。莖尖分生組織 培養(yǎng)主要是指對(duì)莖尖長(zhǎng)度不超過(guò)0.l mm，最小只有幾十微米的莖尖進(jìn)行培養(yǎng)，這種培養(yǎng)可獲得無(wú)病毒植株。但這 樣小的莖點(diǎn)分離實(shí)際上是很困難的，而且成苗時(shí)間也很長(zhǎng)，需要一年乃至更長(zhǎng)的時(shí)間。因此在莖尖分生組織

7、培養(yǎng) 中往往采用帶有l(wèi)2個(gè)葉原基的生長(zhǎng)錐進(jìn)行培養(yǎng)。普通莖尖培養(yǎng)是指對(duì)幾毫米乃至幾十毫米長(zhǎng)的莖尖、芽尖及 側(cè)芽的培養(yǎng)，這類莖尖的培養(yǎng)技術(shù)簡(jiǎn)單，操作方便，莖尖容易成活，成苗所需要的時(shí)間短，能加快繁殖速度。五、綜述題（每小題10分，共10分） 試管苗移栽時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？保持試管苗的水分平衡2.要選擇合適的基質(zhì)3.要防止雜菌滋生4.要注意光、溫的管理。二、填空（每空1分，共40分）1.MS、HCL、NaOH、5.66.0 2. 適宜外植體、最佳的培養(yǎng)基、連續(xù)轉(zhuǎn)接、加抗氧化劑、加活性炭。器官、組織、細(xì)胞、去掉細(xì)胞壁的原生質(zhì)體 4. 無(wú)菌砧木、莖尖準(zhǔn)備、嫁接、嫁接苗培養(yǎng)、移植 5. 器官、胚胎 6. 活

8、性炭、無(wú)選擇性。7. 10005000Lx、16h、252C 8. 2, 4-D、NAA、 IBA、IAA 9. 無(wú)菌外植體的建立、芽的增殖、中間繁殖體的增殖、誘導(dǎo)生根、試管苗的移栽。10. 脫 毒、0.1熱處理、病毒檢定11. 細(xì)菌、真菌三、判斷正誤，并改錯(cuò)。1. x一般將微量元素母液均配制成100 倍，在配制培養(yǎng)基時(shí)，使用量為10ml/L。2. x細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素的比值較高時(shí)，有利于愈傷組織芽的誘導(dǎo)。3. x 對(duì)于金邊虎尾蘭等遺傳學(xué)上的嵌合體植物，要是組織培養(yǎng)繁殖的植株保持原有的園藝價(jià)值，只能通過(guò)莖尖和側(cè) 芽培養(yǎng)。4. x植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí)，材料也容易褐變，細(xì)胞分裂有刺激多酚氧化

9、酶活性提高的作用。5. x利用莖尖分生組織進(jìn)行脫毒培養(yǎng)時(shí)，莖尖外植體大小與脫毒效果成反比。6寸某些植物通過(guò)愈傷組織培養(yǎng)可 以獲得無(wú)病毒苗。7*無(wú)病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病毒之后，體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和生理狀況發(fā)生改變， 因而對(duì)其他病毒和病原體的侵染更為敏感，因此在種植脫毒苗的一定要隔離種植。8. x微繁不定芽的產(chǎn)生有兩 個(gè)途徑，一是不定芽不通過(guò)愈傷組織由外植體直接產(chǎn)生，二是外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，由愈傷組織上產(chǎn)生不 定芽。前一途徑相對(duì)較為優(yōu)越，因?yàn)橥ㄟ^(guò)愈傷組織會(huì)出現(xiàn)一些突變。9. W細(xì)胞的全能性，可以通過(guò)成熟細(xì)胞的 脫分化和再分化過(guò)程得以體現(xiàn)。10. W培養(yǎng)基中的鐵鹽，常用不易分解的乙二胺四

10、乙酸鐵螯合物，以防在pH 較高時(shí)鐵被氧化為不溶的氫氧化鐵。一、填空：（10個(gè)小題，每小題2分，共20分）1、組織培養(yǎng)植株再生的途徑主要有兩條：一 ，另一個(gè)是。2、試管苗的生態(tài)環(huán)境與外界環(huán)境條件相比有四大差異：即。3、B 5培養(yǎng)基特點(diǎn) ； MS培養(yǎng)基的特點(diǎn)是。4、 使用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)時(shí)要注意：、。5、莖尖分生組織培養(yǎng)主要是對(duì)莖尖進(jìn)行培養(yǎng)， 目的是。6、由胚乳培養(yǎng)得到的植株，除少數(shù)是倍體外，多數(shù)是由 細(xì)胞組成的嵌合體。7、受精胚珠培養(yǎng)的目的：一是，二是。8、是檢測(cè)花粉發(fā)育時(shí)期的簡(jiǎn)便有效方法，常用染色劑是。9、離體培養(yǎng)的花粉粒成苗途徑與花藥培養(yǎng)相同，即有和 兩條途徑。10、鑒定雜種植株的方法有、

11、和。二、名詞解釋：（10個(gè)小題，每小題2分，共20分）植物組織培養(yǎng)：將植物的離體器官、組織、細(xì)胞放在離體無(wú)菌條件下，在人工控制的環(huán)境條件下，培養(yǎng)在人工 配置培養(yǎng)基上，使其生長(zhǎng)、分化成植株的過(guò)程。外植體：由活體植物體上提取下來(lái)的，接種在培養(yǎng)基上的無(wú)菌細(xì)胞、組織或器官等。 微尖嫁接技術(shù)：指在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)實(shí)生砧木，嫁接無(wú)病毒莖尖以培養(yǎng)脫毒苗的技術(shù)。 脫分化：將已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體的抑制性影響下解脫出來(lái)，恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。 花藥培養(yǎng)：是將花粉發(fā)育至一定階段的花藥接種到人工培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，以形成花粉胚或愈傷組織進(jìn)而分化 成植株的技術(shù)?；ǚ叟囵B(yǎng)：是將花粉從花藥中分離出來(lái)進(jìn)行離體培養(yǎng)

12、的過(guò)程。平板培養(yǎng)法：把單個(gè)細(xì)胞與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合，并平鋪一薄層在培養(yǎng)皿底上的培養(yǎng)方法。 無(wú)病毒苗：指不含該種植物的主要危害病毒，即經(jīng)檢測(cè)主要病毒在植物體內(nèi)的 存在表現(xiàn)陰性反應(yīng)的苗木 無(wú)土栽培：也稱水培，就是不用土壤，而用無(wú)機(jī)化肥溶液，即營(yíng)養(yǎng)液來(lái)栽培植物的技術(shù)。-連續(xù)培養(yǎng)：指在 培養(yǎng)過(guò)程中，以不斷抽取懸浮培養(yǎng)物并注入等量新鮮培養(yǎng)基，使培養(yǎng)物不斷得到養(yǎng)分補(bǔ)充，保持其恒定體積的培 養(yǎng)基。胚狀體：指在組織培養(yǎng)中，由一個(gè)非合子細(xì)胞（體細(xì)胞），經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過(guò)程形成的具有雙極性的胚 狀結(jié)構(gòu)。三、選擇題：（單項(xiàng)選擇題，10個(gè)小題，每小題1.5分，共15分）1、將細(xì)胞分裂素類物質(zhì)配制成0.5-

13、1mg/ml的母液時(shí)，可先用少量的（）溶解，再定容到所需的體積。A、 95%酒精B、0.1mol NaOH C、85%酒精D、0.1mol HCl 2、外植體接種時(shí)，刀、剪、鑷子等用具一般 在使用前浸泡在（）中，用時(shí)在火焰上灼燒滅菌，冷卻后使用。A、70%酒精B、85%酒精C、95%酒 精D、0.1%升汞 3、KNO 3和（NH 4 ） 2 SO 4含量高，不含鉬的培養(yǎng)基是（）。A、White培養(yǎng)基B、 N 6培養(yǎng)基C、MS培養(yǎng)基D、B 5培養(yǎng)基 4、培養(yǎng)室的濕度一般保持在（）。A、50%-60% B、 60%-70% C、70%-80% D、 80%-90%5、培養(yǎng)基進(jìn)行高壓滅菌時(shí)，當(dāng)壓力升

14、到108kPa時(shí)維持15-20min，即可達(dá)到滅菌目的。此時(shí)滅菌鍋內(nèi)的溫度可達(dá)（）。A、101 C B、110 C C、121 C D、 120 C 6、瓊脂在固體培養(yǎng)基中的用量一般為（）g/L。A、6-10 B、0.6-1.0 C、2-6 D、0.2-0.67、進(jìn)行莖尖培養(yǎng)脫毒時(shí)，通常以帶1-3個(gè)幼葉原基的莖尖作外植體較合適。則莖尖的長(zhǎng)度約為（）。A、0.1-0.3mm B、0.3-0.5mm C、0.4-0.6mm D、0.6-0.8mm8、適合水稻、小麥、玉米等禾谷類作物花藥培養(yǎng)的培養(yǎng)基是（）。A、MS培養(yǎng)基B、B 5培養(yǎng)基C、N 6培養(yǎng)基D、White培養(yǎng)基 9、在細(xì)胞懸浮液 成批培養(yǎng)

15、過(guò)程中，細(xì)胞數(shù)目會(huì)不斷發(fā)生變化，其中細(xì)胞數(shù)目迅速增加，增長(zhǎng)速率保持不變的是（）。 A、減 慢期B、延遲期C、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期D、靜止期 10、在組織培養(yǎng)中，可通過(guò)（）獲得單倍體植株。A、受精胚珠的培養(yǎng)B、胚培養(yǎng)C、未授粉子房的培養(yǎng)D、胚乳培養(yǎng)四、簡(jiǎn)答題：（5個(gè)小題，每小題5分，共25分）1、什么是植板率？小細(xì)胞團(tuán)的計(jì)數(shù)方法有幾種？植板率是指已形成細(xì)胞團(tuán)的單細(xì)胞與接種總細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)。小細(xì)胞團(tuán)的計(jì)數(shù)方法：在低倍顯微鏡直接計(jì)算視野中的小細(xì)胞團(tuán)數(shù)。細(xì)胞團(tuán)顯影法。在暗室中，在平板下放一張印相紙，打開(kāi)平板上方的光源，平板上的 細(xì)胞團(tuán)就印到相紙上，然后沖洗相紙即得細(xì)胞團(tuán)呈白色、培養(yǎng)基呈淡黑色的照片，再計(jì)算白點(diǎn)的

16、數(shù)目，即為形成 細(xì)胞團(tuán)的數(shù)目。2、試管苗與常規(guī)苗相比有哪些特點(diǎn)？生長(zhǎng)細(xì)弱；（2）光合作用差（3）葉片氣孔數(shù)目少，活性差 根的吸收功能弱（5）對(duì)逆境的適應(yīng)和抵抗能力差3、闡述外植體的成苗途徑。1）外植體先形成愈傷組織，再形成完整植株（1）同時(shí)長(zhǎng)芽和根（2）先長(zhǎng)芽，再長(zhǎng)根（3）先長(zhǎng)根，再長(zhǎng)芽2）形成 胚狀體，再發(fā)育成完整植株3）外植體直接形成芽和根。4、目前鑒定脫毒苗的方法有哪些？直接檢測(cè)法；指示植物法；抗血清鑒定法；分子生物學(xué)鑒定法：1、雙鏈RNA法（dsRNA）： 2、互補(bǔ)DNA（cDNA） 檢測(cè)法： 電鏡檢查法5、試管苗的生根培養(yǎng)時(shí)應(yīng)注意哪些方面？1）用無(wú)機(jī)鹽濃度低的White及1/2，1/

17、3或1/4 MS、B 5培養(yǎng)基2）適當(dāng)加大生長(zhǎng)素-NAA的濃度，不用 或少用細(xì)胞分裂素。也可在無(wú)激素的培養(yǎng)基上生根。3）降低蔗糖的濃度到1.0-1.5%，以增強(qiáng)植株的自養(yǎng)能力。 4）加入1%左右的活性碳；以免培養(yǎng)基過(guò)硬5）將光強(qiáng)度增加到3000-10000 lux，以提高小植株的光合能力 6 ）光周期可用24小時(shí)光照或16小時(shí)，8小時(shí)黑暗以利于形態(tài)建成。五、論述題：（3個(gè)小題，任選2個(gè)，每小題10分，共20分）1、無(wú)菌操作接種外植體時(shí)，應(yīng)注意哪些方面？（1）在接種4h前用甲醛熏蒸接種室；（2）在接種前15- 20min，打開(kāi)超凈工作臺(tái)的風(fēng)機(jī)以及臺(tái)上的紫外燈；（3） 接種員先洗凈雙手，在緩沖間換

18、好專用實(shí)驗(yàn)服，并換穿拖鞋等；（4）上工作臺(tái)后，用酒精棉球擦拭雙手，特別 是指甲處。然后70%酒精噴霧降塵，并擦拭工作臺(tái)面；（5）接種工具蘸95%酒精，灼燒；（6）接種時(shí)將試管斜 著，使試管口在酒精燈火焰上轉(zhuǎn)動(dòng)，灼燒數(shù)秒鐘。接完種后，將管口在火焰上再灼燒數(shù)秒鐘。（7）接種時(shí)，接 種員雙手不能離開(kāi)工作臺(tái)，不能說(shuō)話、走動(dòng)和咳嗽等；（8）接種完畢后要清理干凈并用酒精擦工作臺(tái)。2、如何純化分離的植物原生質(zhì)體并鑒定其活力？原生質(zhì)體的純化：1 ）離心沉淀法：應(yīng)用原生質(zhì)體的比重大于溶液的性質(zhì)，將原生質(zhì)體沉于底部。2 ）漂浮 法：應(yīng)用滲透劑含量較高的洗滌液使原生質(zhì)體漂浮于液體表面。3 ）界面法：選用兩種不同滲透

19、濃度的溶液， 使原生質(zhì)體介于兩種溶液之間。原生質(zhì)體活力的測(cè)定：1）、形態(tài)識(shí)別：形態(tài)上完整，呈圓形，含有飽滿的細(xì) 胞質(zhì)，顏色鮮艷的即為存活的原生質(zhì)體。2）、染色識(shí)別：1、0.1%酚蕃紅或Evans藍(lán)染色，有活力的不被 染色，死亡的被染上色。2、雙醋酸鹽熒光素（FDA）染色法：熒光顯微鏡下有熒光的即為有活性的原生質(zhì) 體。3、無(wú)土栽培過(guò)程中應(yīng)注意哪些問(wèn)題？（1）、配制營(yíng)養(yǎng)液時(shí)，忌用金屬容器，更不能用它來(lái)存放營(yíng)養(yǎng)液，最好使用玻璃、搪瓷、陶瓷器皿。（2）、配制營(yíng)養(yǎng)液時(shí)如使用自來(lái)水，應(yīng)加入少量的乙二胺四乙酸鈉或腐殖酸鹽化合物來(lái)處理水中氯化物和硫化物。（3）基質(zhì)應(yīng)選用具有保水性、排水性和一定強(qiáng)度及穩(wěn)定性，而

20、且無(wú)害的物質(zhì)。（4）在栽培中，需經(jīng)常測(cè) 營(yíng)養(yǎng)液中的pH，使其保持恒定。（5）在水培中，植物需從營(yíng)養(yǎng)液中吸氧，注意增加營(yíng)養(yǎng)液中氧的含量。 一、填空：（10個(gè)小題，每小題2分，共20分）1、體細(xì)胞胚胎發(fā)生，器官發(fā)生2、高溫、高濕、 弱光和無(wú)菌3、含較低的銨鹽，較高的硝酸鹽和鹽酸硫胺素；無(wú)機(jī)鹽的濃度高。4、種類和濃度、生長(zhǎng) 素和細(xì)胞分裂素的比值5、莖尖長(zhǎng)度不超過(guò)0.1mm，最小只有幾十微米的，獲得無(wú)病毒植株。6、三，各 種倍性7、用來(lái)打破種子的休眠，挽救胚的發(fā)育，以獲得雜交種8、壓片染色法，醋酸洋紅9、胚狀 體成苗，愈傷組織再分化成苗10、形態(tài)學(xué)鑒定、細(xì)胞學(xué)觀察、DNA內(nèi)切圖譜分析、同工酶分析 三、

21、選擇題 1.D 2.C 3.B 4.C 5.C 6.A 7.B 8.C 9.C 10.C一、 填空：（10個(gè)小題，每小題2分，共20分）1、原生質(zhì)體的分離方法有 和。2、 胚胎培養(yǎng)包括。3、White培養(yǎng)基特點(diǎn)是 ； N 6培養(yǎng)基的特點(diǎn)是。4、進(jìn)行紙橋培養(yǎng)的最大優(yōu)點(diǎn)是 ；缺點(diǎn)是。5、組織培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)選擇具 外植體。6、花藥和花粉培養(yǎng)時(shí)，適宜的花粉發(fā)育時(shí)期是。7、在細(xì)胞培養(yǎng)中，常由分散性較好的 來(lái)制備單細(xì)胞，也可以用 從植物不同組織直接制備單細(xì)胞。8、原生質(zhì)體培養(yǎng)時(shí)常用的三個(gè)指標(biāo)：、和。9、原生質(zhì)體 融合的方法有、 和。10、細(xì)胞全能性學(xué)說(shuō)的內(nèi)容為：。二、名詞解釋：（每小題2分，共20分）1、外植

22、體：是指植物組織培養(yǎng)中的各種接種材料。包括植物體的各種器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。2、愈傷組織培養(yǎng)：是指將母體植株上的各個(gè)部分切下，形成外植體，接種到無(wú)菌的培養(yǎng)基上，進(jìn)行愈傷組織誘 導(dǎo)、生長(zhǎng)和發(fā)育的一門(mén)技術(shù)。3、胚培養(yǎng)：是指將胚從種子、子房或胚珠中分離出來(lái)，在進(jìn)行組織培養(yǎng)，使其生長(zhǎng)發(fā)育形成幼苗的過(guò)程。4、看護(hù)培養(yǎng)法：指用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織來(lái)看護(hù)單個(gè)細(xì)胞，并使其生長(zhǎng)和增殖的方法。5、體細(xì)胞雜交：即原生質(zhì)體融合，就是使分離下來(lái)的不同親本的原生質(zhì)體，在人工控制的條件下，像性細(xì)胞受 精作用那樣互相融合成一體。6、快速繁殖（微繁殖）：用組織培養(yǎng)的方法，使植物的部分器官、組織在人工控制的適宜條件下，

23、迅速擴(kuò)大培養(yǎng)， 并移植到溫室或農(nóng)田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。7、紙橋培養(yǎng)法：用酒杯狀的濾紙代替瓊脂，使杯底朝上塞入試管中，與液體培養(yǎng)基接觸，將離體莖尖置于濾紙 上方進(jìn)行培養(yǎng)。8、體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑：由外植體形成胚狀體，經(jīng)類似合子胚發(fā)育過(guò)程形成新植株的過(guò)程。9、無(wú)病毒苗：是指不含該種植物的主要危害病毒，即經(jīng)檢測(cè)主要病毒在植物內(nèi)的存在表現(xiàn)陰性反應(yīng)的苗木。10、胚狀體：指在組織培養(yǎng)中，由一個(gè)非合子細(xì)胞（體細(xì)胞），經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過(guò)程形成的具有雙極 性的胚狀結(jié)構(gòu)。三、 選擇題：（單項(xiàng)選擇題，10個(gè)小題，每小題1.5分，共15分）1、無(wú)菌操作接種時(shí)，在操作前和操作期間要經(jīng)常用（）擦拭雙手和臺(tái)面。A

24、、70%酒精B、85%酒精C、 95%酒精D、0.1%升汞2、在組織培養(yǎng)中，一般用蔗糖作為碳源，其濃度為（）。A、1%-3% B、3%-5% C、5%-10% D、1%-5% 3、在進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)時(shí)，最適宜的花粉發(fā)育時(shí)期是（）。A、成熟花粉粒B、 單核花粉期C、二核花粉期D、三核花粉期4、無(wú)機(jī)鹽的濃度高，尤其硝酸鹽的用量大，還含有一定數(shù)量鉉 鹽的培養(yǎng)基是（）。A、White培養(yǎng)基B、N 6培養(yǎng)基C、MS培養(yǎng)基D、B 5培養(yǎng)基5、進(jìn)行莖尖 培養(yǎng)脫毒時(shí)，通常以帶1-3個(gè)幼葉原基的莖尖作外植體較合適；則莖尖的長(zhǎng)度約為（）。A、0.1-0.3mm B、 0.3-0.5mm C、0.4-0.6mm

25、D、0.6-0.8mm 6、培養(yǎng)室溫度一般要求常年保持在（）左右。A、25CB、22CC、28CD、24C7、在組織培養(yǎng)中，可通過(guò)（）獲得單倍體植株。A、受精胚珠的培養(yǎng)B、胚培養(yǎng)C、胚乳培養(yǎng)D、未授粉子房的培養(yǎng)8、大多數(shù)植物在進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，要求培 養(yǎng)基的pH為（）。A、5.6-5.8 B、5.8-6.0 C、6.0-6.2 D、6.3-6.5 9、適合雙子葉植物花藥培養(yǎng)的培養(yǎng) 基是（）。A、MS培養(yǎng)基B、B 5培養(yǎng)基C、N 6培養(yǎng)基D、White培養(yǎng)基10、將生長(zhǎng)素類物質(zhì) 配制成0.5-1mg/ml的母液時(shí)，可先用少量的（）溶解，再定容到所需的體積。A、100%酒精B、0.1mol NaOH

26、 C、85% 酒精 D、0.1mol HCl四、簡(jiǎn)答題：（5個(gè)小題，每小題5分，共25分）1、簡(jiǎn)述莖尖微繁技術(shù)的過(guò)程（1）無(wú)菌培養(yǎng)體系的建立（2）芽的增殖（3）中間繁殖體的增殖（4）誘導(dǎo)生根（5）試管苗的移植2、無(wú)土栽培與常規(guī)土壤栽培相比有哪些優(yōu)點(diǎn)？3、單倍體植株染色體加倍的方法有哪些？1）自然加倍2）人工加倍：用秋水仙素溶液浸苗、處理愈傷組織和用含0.4%秋水仙素的羊毛脂涂抹單倍體植 株的頂芽、腋芽，可得到能結(jié)實(shí)的二倍體植株。3）愈傷組織反復(fù)繼代培養(yǎng)后，經(jīng)分化培養(yǎng)可得到二倍體植株。4、組織培養(yǎng)一般進(jìn)行哪幾道工序？1）、培養(yǎng)器皿的清洗；2）、培養(yǎng)基的配制、分裝和高壓滅菌；3）、無(wú)菌操作材料的表

27、面滅菌和接種；4）、將 培養(yǎng)物放到培養(yǎng)室培養(yǎng)；5）、試管苗的馴化、移栽和初期管理。5、愈傷組織的器官發(fā)生有哪4種情況？（1）愈傷組織僅有根或芽器官的分別形成，即無(wú)根的芽或無(wú)芽的根；（2）先形成芽，再在芽伸長(zhǎng)后，在其莖 的基部長(zhǎng)出根而形成小植株，多數(shù)植物屬這種情況；（3）先產(chǎn)生根，再?gòu)母幕糠只鲅慷纬尚≈仓?。這 種情況較難誘導(dǎo)芽的形成，尤其對(duì)于單子葉植物；（4 ）先在愈傷組織的鄰近不同部位分別形成芽和根，然后 兩者結(jié)合起來(lái)形成一株小植株。少見(jiàn)五、論述題：（3個(gè)小題，任選2個(gè)，每小題10分，共20分）1、什么是細(xì)胞懸浮培養(yǎng)？簡(jiǎn)述成批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)的的特點(diǎn)。細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是使離體的植物細(xì)胞懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行的無(wú)菌培養(yǎng)。1 ）成批培養(yǎng)的特點(diǎn)：（1）細(xì)胞生 長(zhǎng)在固定體積的培養(yǎng)基上，直至養(yǎng)分耗盡（2）用攪拌的方法使細(xì)胞團(tuán)和細(xì)胞均勻分布（3）細(xì)胞數(shù)目呈現(xiàn)慢- 快一慢一停止生長(zhǎng)的變化（4）必須更換新鮮培養(yǎng)基才能進(jìn)行下一批培養(yǎng)。2 ）連續(xù)培養(yǎng)的特點(diǎn)：（1 ）由 于不斷加入新鮮培養(yǎng)基，保證了養(yǎng)分的充分供應(yīng)，不會(huì)出現(xiàn)懸浮培養(yǎng)物發(fā)生營(yíng)養(yǎng)不足的現(xiàn)象（2 ）可在培養(yǎng)期 間使細(xì)胞保持在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期