試管嬰兒與生殖工程課件

1、試管嬰兒與生殖工程上海醫(yī)學院 細胞與遺傳醫(yī)學系左 伋第1頁，共40頁。INFERTILITYInfertility is defined as no ongoing pregnancy after 9-12 months of sexual activity without contraception. There is no distinction between not using contraception and trying to conceive. 第2頁，共40頁。STATISTICSIn 1995, 15% of women of childbearing age had ev

2、er sought infertility advice, that includes medical advice, tests, drugs surgery or assisted reproductive technologies (ART). 第3頁，共40頁。Infertility among Married Women, by Education Level8.5% of women without high school or equivalent8.1% of women with just high school or the equivalent6.6% of those

3、who have some college, but no bachelors5.6% of women with bachelors or higher第4頁，共40頁。Infertile Couples7.1% or about 2.1 million of married couples were infertile in 1995.2.3 million were infertile in 1988, and 2.4 in 1982.第5頁，共40頁。6.1 million or 10% of married couples in 1995 had impaired fecundity

4、 (either infertile or had problems conceiving or carrying a child to term.)第6頁，共40頁。Infertility by Race7% of Hispanic women are infertile6.4% of white women are infertile10.5% of black women are infertile13.6% of other groups are infertile第7頁，共40頁。The causes of infertilityMale Factor: Sperm producti

5、on and sperm quality.Ovulation: Egg production, egg quality and preparation of the uterine lining for implantation.Passage: The joining of sperm and egg in the Fallopian tubes and transport of the fertilized egg into the uterus.第8頁，共40頁。Factors causing infertilityTubal factor: 31%Endometriosis: 14%U

6、terine Factor: 1%Male Factor: 18%Other factors: 18%Unexplained: 15%第9頁，共40頁。 The National Institutes of Health found that from 1938 to 1996, sperm counts in the United States have fallen annually about 1.5%. European countries have fallen at twice that rate. 第10頁，共40頁。Female Age and Fertility The lo

7、ss of female fertility is due to the loss of high quality eggs. The receptiveness of the uterus is not decreased. This loss of fertility magnifies the impact of any other fertility factors present. 第11頁，共40頁。In 1995, there were 59,142 cycles of ART. 11,315 women had a live birth delivery through ART

8、.第12頁，共40頁。Type of ART procedures90% in vitro fertilization (IVF)8% gamete intrafallopian transfer (GIFT)2% zygote intrafallopian transfer (ZIFT)11% of ART procedures involved intracytoplasmic sperm injection to fertilize eggs (ICSI). 第13頁，共40頁。One cycle of IVF costs an average of $7,800. (Includes

9、everything from consultation to transfer) 第14頁，共40頁。1995 ART Success RatesCYCLES using fresh embryos from non-donor eggs:Live births per stimulation: 19.6%Live births per retrieval: 22.8%Live births per transfer: 25.1%Multiple births per transfer: 9.1%CYCLES using frozen embryos from nondonor eggs:L

10、ive births per transfer: 15.1% CYCLES using donor eggs:Live births per transfer: 5.5%第15頁，共40頁。Singletons vs. Multiple Births in ART49.8% singletons23.8% twins4.5% triplets or higher第16頁，共40頁。輔助生殖技術(shù)超排卵治療的內(nèi)分泌監(jiān)測 體外受精和胚胎培養(yǎng)基人類移植胚胎的評估和選擇 人類胚胎輔助孵化技術(shù) 人類胚胎和卵子的冷凍保存 人類胚胎活檢和著床前遺傳學診斷卵子胞漿內(nèi)精子注射 第17頁，共40頁。一、人類體外受精

11、和胚胎培養(yǎng)基培養(yǎng)基的主要類型 簡單鹽溶液能量 復合性組織培養(yǎng)基（HamsF-10）培養(yǎng)基的基本成分和作用 水、無機離子、氣體 能量物質(zhì) （早期丙酮酸、乳酸，后期葡萄糖） 氨基酸、維生素、核酸前體、蛋白質(zhì)、 激素、生長因子、緩沖系統(tǒng) 第18頁，共40頁。二、人類胚胎共培養(yǎng)系統(tǒng) 早期胚胎在體內(nèi)和體外的發(fā)育 50以上胚胎發(fā)育至48細胞期（體外培養(yǎng)第3天）發(fā)生阻斷現(xiàn)象第19頁，共40頁。二、人類胚胎共培養(yǎng)系統(tǒng)共培養(yǎng)系統(tǒng)對胚胎發(fā)育的影響 被動條件：降低O2代謝水平 減少次黃嘌呤含量 控制代謝物的變化（葡萄糖、乳酸） 穩(wěn)定pH和O2， O2/C O2主動條件：分泌抗氧化劑?；撬?釋放低分子量組份 分泌多種

12、生長因子 各種糖蛋白第20頁，共40頁。二、人類胚胎共培養(yǎng)系統(tǒng)共培養(yǎng)系統(tǒng)輔助細胞的建立 異體細胞：人輸卵管上皮細胞 牛輸卵管上皮細胞 人子宮內(nèi)膜細胞 胎牛子宮細胞自體細胞：人顆粒細胞 人卵丘細胞 人子宮內(nèi)膜細胞第21頁，共40頁。二、人類胚胎共培養(yǎng)系統(tǒng)共培養(yǎng)系統(tǒng)在IVF中的應用 增加受精率和提高胚胎質(zhì)量 胚胎活力改善 增加冷凍保存胚胎的存活率 卵細胞體外成熟和受精的改善 有助于胚胎顯微操作后的修復第22頁，共40頁。三、人類移植胚胎的評估和選擇胚胎活性的評估方法胚胎的形態(tài)特征卵子質(zhì)量對胚胎的影響精子質(zhì)量對胚胎的影響綜合因素對胚胎質(zhì)量的影響 第23頁，共40頁。三、人類移植胚胎的評估和選擇胚胎活

13、性的評估方法 胚胎活性的直接評估（FDA） 胚胎活性的間接評估第24頁，共40頁。三、人類移植胚胎的評估和選擇胚胎的形態(tài)特征 28細胞的六級分級：1級最佳；6級最次第25頁，共40頁。第26頁，共40頁。三、人類移植胚胎的評估和選擇卵子質(zhì)量對胚胎的影響精子質(zhì)量對胚胎的影響綜合因素對胚胎質(zhì)量的影響 第27頁，共40頁。四、人類胚胎輔助孵化技術(shù) 透明帶對于胚胎的保護作用囊胚的擴張和自然孵化輔助孵化的基本技術(shù)輔助孵化的技術(shù)在IVF中的應用 第28頁，共40頁。四、人類胚胎輔助孵化技術(shù)輔助孵化技術(shù) 侵入性輔助孵化：機械方法 化學方法 激光方法 非侵入性輔助孵化：機械方法 化學方法第29頁，共40頁。五

14、、人類胚胎和卵子的冷凍保存 胚胎和卵子的冷凍保存的原理冷凍保護劑的作用機制胚胎和卵子冷凍保存方法胚胎和卵子冷凍保存的臨床應用 第30頁，共40頁。第31頁，共40頁。六、人類胚胎和卵子捐獻受卵者的指征受卵者的準備受卵者的激素替代療法供卵者的來源供卵者的基本要求卵子捐獻的臨床應用胚胎捐獻的臨床應用 第32頁，共40頁。六、人類胚胎和卵子捐獻受卵者的指征 沒有自然月經(jīng)周期：卵巢功能早衰 性腺發(fā)育不良 醫(yī)源性卵巢衰竭 手術(shù)切除卵巢 具有自然月經(jīng)周期：IVF失敗 遺傳缺陷第33頁，共40頁。六、人類胚胎和卵子捐獻供卵者的基本要求 年齡 經(jīng)產(chǎn) 生理特征 血型 遺傳病 傳染病第34頁，共40頁。七、人類胚胎活檢和著床前遺傳學診斷適合活檢的不同發(fā)育時期胚胎活檢的基本方法著床前胚胎遺傳學診斷方法 第35頁，共40頁。七、人類胚胎活檢和著床前遺傳學診斷適合活檢的不同發(fā)育時期 第一極體的活檢 卵裂細胞的活檢 滋養(yǎng)外胚層細胞的活檢第36頁，共40頁。七、人類胚胎活檢和著床前遺傳學診斷胚胎活檢的基本方法 吸出法 擠壓法 機械分離法 疝形