《中藥化學(xué)》課件第八章 三萜類(lèi)化合物

1、名稱(chēng)碳原子數(shù)(C5H8)n 存在形式半萜51植物葉單萜102揮發(fā)油倍半萜153揮發(fā)油二 萜204樹(shù)脂、苦味素、植物醇、葉綠素二倍半萜 255海綿、植物病菌、昆蟲(chóng)代謝產(chǎn)物三 萜306皂苷、樹(shù)脂 、植物乳汁四 萜 407植物胡蘿卜素類(lèi)多 萜7.5*103至3*1058橡膠、硬橡膠第八章三萜類(lèi)化合物2011-10-4目錄三萜類(lèi)化合物概述結(jié)構(gòu)與分類(lèi)鏈狀三萜單環(huán)三萜雙環(huán)三萜三環(huán)三萜四環(huán)三萜五環(huán)三萜理化性質(zhì)與溶血作用物理性質(zhì)化學(xué)性質(zhì)溶血作用提取與分離提取方法分離方法檢識(shí)理化檢識(shí)色譜檢識(shí)結(jié)構(gòu)研究UV光譜MS譜NMR譜結(jié)構(gòu)研究實(shí)例中藥實(shí)例人參甘草柴胡第一節(jié) 概述一、概述1、定義由30個(gè)碳原子組成的萜類(lèi)化合物，

2、符合“異戊二烯定則” 2、存在 1）游離三萜（C5H10）6 2）苷 又名三萜皂苷 （水液振搖起泡） 3）廣泛存在于自然界，雙子葉植物中分布最多3、因?yàn)樵S多三萜皂苷具有羧基，因此又稱(chēng)為“酸性皂苷” 游離的三萜類(lèi)化合物幾乎不溶或難溶于水，可溶于常見(jiàn)的有機(jī)溶劑；三萜苷類(lèi)化合物則多數(shù)可溶于水，其水溶液振搖后能產(chǎn)生大量持久性肥皂樣泡沫，故被稱(chēng)為三萜皂苷(triterpenoid saponins)。一、概述4、三萜及其苷的存在形式多以游離或成苷、成酯的形式存在苷元：四環(huán)三萜、五環(huán)三萜常見(jiàn)的糖：D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-阿拉伯糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸等，特殊糖（如D-芹糖、乙酰氨基糖等

3、）糖鏈：?jiǎn)翁擎?、雙糖鏈、三糖鏈成苷位置：3、28（酯皂苷）或其它位-OH次皂苷：原生苷由于水解或酶解等被部分降解的產(chǎn)物一、概述5、生物活性 三萜類(lèi)化合物具有廣泛的生理活性 溶血 抗癌烏蘇酸夏枯草 抗炎雷公藤三萜雷公藤 抗菌 抗病毒甘草次酸甘草 降低膽固醇柴胡皂苷柴胡 殺軟體動(dòng)物 抗生育等活性-雷公藤三萜雷公藤一、概述6、研究進(jìn)展一、概述7、生源途徑 三萜類(lèi)化合物的生物合成途徑從生源來(lái)看，(squalene)通過(guò)不同的環(huán)化方式轉(zhuǎn)變而來(lái)的，而鯊烯是由焦磷酸金合歡酯(farnesyl pyrophosphate，F(xiàn)PP)尾尾縮合生成。焦磷酸金合歡酯焦磷酸金合歡酯鯊烯 第二節(jié) 三萜類(lèi)化合物的結(jié)構(gòu)與分類(lèi)

4、二、結(jié)構(gòu)與分類(lèi)一、鏈狀三萜二、單環(huán)三萜三、雙環(huán)三萜四、三環(huán)三萜五、四環(huán)三萜 六、五環(huán)三萜 三萜類(lèi)化合物三萜皂苷三萜皂苷元其它三萜類(lèi)存在形式、結(jié)構(gòu)和性質(zhì) 一般依據(jù)碳環(huán)的有無(wú)和多少（一）鏈狀三萜 多為鯊烯類(lèi)化合物，鯊烯(角鯊烯)主要存在于鯊魚(yú)肝油及其他魚(yú)類(lèi)的魚(yú)肝油中的非皂化部分，也存在于某些植物油(如茶籽油、橄欖油等)的非皂化部分。角鯊烯2,3-環(huán)氧角鯊烯三環(huán)三萜四環(huán)三萜五環(huán)三萜（一）鏈狀三萜肝臟環(huán)氧酶（一）鏈狀三萜2，3-環(huán)氧角鯊烯 羊毛脂醇 2，3-環(huán)氧基角鯊烯在環(huán)化酶(從鼠肝中提得)或弱酸性介質(zhì)中很容易被環(huán)化。（二）單環(huán)三萜蓍醇A（三）雙環(huán)三萜細(xì)胞活性伏石蕨（四）三環(huán)三萜 從蕨類(lèi)植物伏石蕨(

5、Lemmaphyllum microphyllum var.obovatum)的新鮮全草中分離到兩個(gè)油狀三環(huán)三萜類(lèi)碳?xì)浠衔?3H-malabaricatriene和13H-malabaricatriene(1和2)， malabaricatriene 1 C13-H malabaricatriene 2 C13-H 四環(huán)三萜類(lèi)在中藥中分布很廣，許多植物包括高等植物和低等菌藻類(lèi)植物以及某些動(dòng)物都可能含有此類(lèi)成分。 它們大部分具有環(huán)戊烷駢多氫菲的基本母核；母核的17位上有一個(gè)由8個(gè)碳原子組成的側(cè)鏈；在母核上一般有5個(gè)甲基，即4位有偕二甲基、10位和14位各有一個(gè)甲基、另一個(gè)甲基常連接在13位或8

6、位上。存在于天然界中的四環(huán)三萜或其皂苷苷元主要有以下類(lèi)型。（五）四環(huán)三萜環(huán)戊烷駢多氫菲 羊毛脂甾烷型 茯苓酸 大戟烷型 大戟醇 達(dá)瑪烷型 人參皂苷 葫蘆素烷型 雪膽甲素及乙素 原萜烷型 澤瀉萜醇A、B 楝烷型 川楝素 環(huán)菠蘿蜜烷型 環(huán)黃芪醇（五）四環(huán)三萜1羊毛脂甾烷(lanostane)型 羊毛脂甾烷也叫羊毛脂烷，其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： （五）四環(huán)三萜 四環(huán)稠和 反 、反 、反（30個(gè)C） 8個(gè)CH3 C4 C10 C13 C252 C4 C14 C20 C20 R構(gòu)型 C17 側(cè)鏈1羊毛脂甾烷(lanostane)型 羊毛脂醇(lanosterol)是羊毛脂的主要成分，它也存在于大戟屬植物Euphor

7、bia balsamifera的乳液中。羊毛脂甾烷 羊毛脂醇 2大戟烷(euphane)型（甘遂烷型） 大戟烷是羊毛脂甾烷的立體異構(gòu)體，基本碳架相同，只是C13、C14和C17上的取代基構(gòu)型不同，即是13、14、17-羊毛脂甾烷。 羊毛脂甾烷 狼毒 大戟醇(euphol)存在于許多大戟屬植物乳液中，在甘遂、狼毒和千金子中均有大量存在。乳香中含有的乳香二烯酮酸(masticadienonic acid)和異乳香二烯酮酸(isomasticadienonic acid)也屬于大戟烷衍生物。 大戟醇 乳香二烯酮酸 7（8） 異乳香二烯酮酸 8(9)大戟烷3達(dá)瑪烷(dammarane)型 四環(huán)稠和：反

8、、反、反 8位角甲基 C4 、C8、C10、C25 -2 C4、C14、C20 C-20為R或S構(gòu)型。 多數(shù)C3、C12OH取代與羊毛脂烷型不同之處：C13CH3移到C8位 棒錘三萜A(neoalsamitin A)是從葫蘆科植物棒錘瓜(Neoalsomitra integrifoliola)莖皮中分到的達(dá)瑪烷型三萜類(lèi)成分。4葫蘆素烷(cucurbitane)型 基本骨架同羊毛甾烷型，唯其A/B環(huán)上的取代基稍有不同：不同之處四環(huán)稠和：反、順、反C19-CH3移到 C9CH3C5H 、C10H 5.原萜烷(protostane)型 其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是C10位和C14位上有-CH3，C8上有-CH3，C

9、20為S構(gòu)型。澤瀉 澤瀉萜醇A澤瀉萜醇B 可降低血清總膽固醇，用于治療高脂血癥 6楝烷 (meliacane)型 楝科楝屬植物果實(shí)及樹(shù)皮中含多種三萜成分，具苦味，總稱(chēng)為楝苦素類(lèi)成分，其由26個(gè)碳構(gòu)成，屬于楝烷型。 不同之處四環(huán)稠和：反、反、反C17側(cè)鏈-4個(gè)脂肪C鏈7個(gè)CH3 CH3 ： C4、C8、C10、C20、 C22 CH3： C4、 C13 川楝素(chuanliansu)和異川楝素(isochuanliansu)是川楝(Melia toosendan)皮所含成分。川楝皮為驅(qū)蛔藥，川楝素和異川楝素均有驅(qū)蛔作用，但異川楝素的毒性遠(yuǎn)比川楝素大。川楝素 異川楝素 7環(huán)菠蘿蜜烷(cycloa

10、rtane)型 此類(lèi)化合物分子中雖然有5個(gè)碳環(huán)，但其基本碳架與羊毛脂甾烷很相似，差別僅在于10位上的甲基與9位脫氫形成三元環(huán)，且化學(xué)轉(zhuǎn)變的關(guān)系也較密切，故仍將此類(lèi)化合物視為四環(huán)三萜。黃芪絕大多數(shù)為環(huán)菠蘿蜜烷型三萜皂苷，其苷元多為環(huán)黃芪醇(cycloastragenol)。環(huán)黃芪醇在黃芪中以與糖結(jié)合成單糖鏈、雙糖鏈或三糖鏈皂苷的形式而存在。黃芪苷V(astragaloside V)亦是雙糖鏈皂苷，其皂苷元的3位和25位羥基分別與糖相連。黃芪苷(astragaloside )則是自然界發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)三糖鏈三萜苷。環(huán)菠蘿蜜烷 R1 R2 R3 環(huán)黃芪醇 H H H 黃芪苷 xyl(2，3-diAc)

11、glc H 黃芪苷V glc(12)xyl- H glc 黃芪苷 xyl glc glc黃芪醇（六）五環(huán)三萜 五環(huán)三萜類(lèi)成分在中草藥中較為常見(jiàn)，主要的結(jié)構(gòu)類(lèi)型有齊墩果烷型烏蘇烷型羽扇豆烷型木栓烷型1齊墩果烷(oleanane)型又稱(chēng) 香樹(shù)脂醇型 1、五環(huán)稠和反、反、反、順 2、8個(gè)CH3有順?lè)?C10、C8、C17型 C14-型 C4、2個(gè)CH3 C20、2個(gè)CH3 3、C3OH 12（13） 4、COOH多在C28、C24例：齊墩果酸（人參皂苷C型）、甘草酸、柴胡皂苷、遠(yuǎn)志皂苷 齊墩果酸(oleanolic acid)首先由木樨科植物油橄欖(Olea europaea，習(xí)稱(chēng)齊墩果)的葉中分得

12、。該化合物廣泛分布于植物界。 齊墩果酸在中草藥中有的以游離形式存在，如青葉膽、女貞子、白花蛇舌草、柿蒂、連翹，但大多數(shù)以與糖結(jié)合成苷的形式存在，如人參、三七、紫菀、柴胡、八月札、木通、牛膝、楤木等。2烏蘇烷(ursane)型又稱(chēng)香樹(shù)脂醇型或熊果烷型 立體構(gòu)型同齊墩果烷 不同之處C30的CH3 移到C19位女貞子 熊果酸（Ursolic acid） 來(lái)源于木犀科植物女貞(Ligustrum lucidum Ait.)葉中，熊果酸又名烏索酸，烏蘇酸，屬三萜類(lèi)化合物。具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗?jié)儭⒔档脱堑榷喾N生物學(xué)效應(yīng)。 中藥地榆 (Sanguisorba officinalis)具有涼

13、血止血的功效，其中含有地榆皂苷B, E (sanguisorbin B and E)，是烏蘇酸的苷。 羽扇豆烷型與齊墩果烷型不同點(diǎn)是：C21與C19連成五元環(huán)E環(huán)，且D/E環(huán)的構(gòu)型為反式。同時(shí)，在E環(huán)的19位有-構(gòu)型的異丙基取代。3. 羽扇豆烷(lupane)型四、木栓烷型（friedelane）木栓烷型的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： A/B、B/C、C/D環(huán)均為反式，D/E環(huán)為順式； C4、C5、C9、C14位各有一個(gè)-CH3取代； C17位多為-CH3(有時(shí)為-CHO、-COOH或-CH2OH)取代； C13-CH3為-型；C2、C3位常有羰基取代。木栓烷雷公藤酮是失去25甲基的木栓烷型衍生物。 這兩種類(lèi)型

14、的三萜成分，可認(rèn)為是羽扇豆烷型的異構(gòu)體，E環(huán)上的取代基在C22位上，而C8位上的角甲基轉(zhuǎn)到C13位上。 白茅素(cylindrin)、蘆竹素(arundoin)和羊齒烯醇(fernenol)等。前者為異羊齒烷型，C13甲基-構(gòu)型，C14甲基-構(gòu)型；后二者為羊齒烷型，C13甲基-構(gòu)型，C14甲基-構(gòu)型。 5羊齒烷(fernane)型和異羊齒烷(lsofernane)型 6何帕烷(hopane)型和異何帕烷 (isohopane)型 互為異構(gòu)體的何帕烷和異何帕烷均為羊齒烷的異構(gòu)體，C14和C18位均有角甲基是其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。 7其他類(lèi)型 如石松(Lycopodium clavatum)中的石松素(ly

15、coclavanin)和石松醇(lycoclavanol)是C環(huán)為七元環(huán)的三萜類(lèi)化合物。 第三節(jié) 理化性質(zhì)與溶血作用 三、理化性質(zhì)與溶血作用理化性質(zhì)與 溶血作用物理性質(zhì)化學(xué)反應(yīng)性狀熔點(diǎn)與旋光溶解度發(fā)泡性顏色反應(yīng)沉淀反應(yīng)皂苷的水解溶血作用（一）物理性質(zhì)1.性狀：苷元有較好晶型，皂苷多為無(wú)定形粉末。皂苷因極性較大，常具有吸濕性。皂苷多具苦味，辛辣。對(duì)粘膜有刺激（可用于祛痰止渴）有吸濕性,有吸濕性。皂苷類(lèi)具有表面活性2. 熔點(diǎn)與旋光性游離三萜類(lèi)化合物有固定的熔點(diǎn)，有羧基者熔點(diǎn)較高，皂苷在熔融前易分解，故一般測(cè)得的大多是分解點(diǎn)，多在200 -360之間。三萜類(lèi)化合物均有旋光性。 3. 溶解度皂苷：可溶

16、于水，易溶于熱水，溶于含水醇（甲醇、乙醇、丁醇、戊醇等），溶于熱甲醇、乙醇；幾不溶于乙醚、苯、丙酮等有機(jī)溶劑。皂苷在提取的過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生次級(jí)苷，水溶性下降，溶于中等極性有機(jī)溶劑（醇，乙酸乙酯）。皂苷元：不溶于水，易溶于石油醚、苯、CHCl3、Et2O。注：皂苷在含水丁醇或戊醇中溶解度較好，因此，在實(shí)驗(yàn)研究中常將正丁醇作為提取分離皂苷的溶劑 親水性基團(tuán)為糖，親脂性基團(tuán)為苷元，當(dāng)二種基團(tuán)比例適當(dāng)時(shí)具有表面活性。皂苷水溶液經(jīng)強(qiáng)烈振搖能產(chǎn)生持久性的泡沫，且不因加熱而消失。4.發(fā)泡性（二）化學(xué)性質(zhì)1. 顏色反應(yīng)1、醋酐-濃硫酸反應(yīng) AC2O濃H2SO4 （Liebermann-Burchard反應(yīng)） 黃

17、紅 紫 藍(lán) 褪色 三萜皂苷2、五氯化銻反應(yīng)（Kahlenberg反應(yīng)） 紅色 SbCL5反應(yīng)6070加熱：藍(lán)色、灰籃色、灰紫色等多種顏色 3、三氯醋酸反應(yīng)（Rosen-Heimer反應(yīng)） 100顯紅色 三萜皂苷（）4、氯仿濃硫酸反應(yīng) （Salkowski ） H2SO4紅或蘭色 CHCL3層 綠色熒光5、冰HAC乙酰氯 反應(yīng)（Tschugaeff ） 稍加熱紅色紫色6.沉淀反應(yīng)皂苷的水溶液可以和一些金屬鹽類(lèi)如鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產(chǎn)生沉淀。此性質(zhì)可用于皂苷的分離：先用金屬鹽使皂苷沉淀下來(lái)，分離出來(lái)之后在對(duì)其分解脫鹽。 如：三萜皂苷+PbAc2沉淀分解脫鉛皂苷三萜皂苷為酸性皂苷，可用中性PbAc2沉

18、淀，而甾體皂苷則為中性皂苷，須用堿性PbAc2沉淀。3. 皂苷的水解 酸水解 乙酰解 Smith降解 酶水解 糖醛酸苷鍵的裂解 酯苷鍵的水解3.1 酸水解 有些三萜皂苷在酸水解時(shí)，易引起皂苷元發(fā)生脫水、環(huán)合、雙鍵轉(zhuǎn)位、取代基移位、構(gòu)型轉(zhuǎn)化等而生成人工產(chǎn)物，得不到原始皂苷元，如欲獲得真正皂苷元，則應(yīng)采用兩相酸水解、酶水解或Smith降解等方法。3.2 乙酰解 將化合物的全乙?；镌贐F3催化下用乙酸酐使苷鍵裂解，得到全乙?；烟呛腿阴；赵?。3.3 Smith降解 此法水解條件比較溫和，許多在酸水解中不穩(wěn)定的皂苷元可以用此法獲得真正的皂苷元，如人參皂苷的水解。3.4 酶水解 某些皂苷對(duì)酸堿均不

19、穩(wěn)定，用NaIO4降解也易被破壞，可采用酶水解。3.5 糖醛酸苷鍵的裂解 對(duì)難水解的糖醛酸苷除常規(guī)方法外，需采用一些特殊的方法，如光解法，四乙酸鉛-乙酸酐法，微生物轉(zhuǎn)化法等。3.6 酯苷鍵的水解 含有酯鍵的皂苷易被堿水解。 （三） 溶血作用皂苷水溶液能與紅細(xì)胞壁上的膽甾醇結(jié)合，生成不溶于水的分子復(fù)合物，破壞了紅細(xì)胞的正常滲透，使細(xì)胞內(nèi)滲透壓增加而發(fā)生崩解，從而導(dǎo)致溶血現(xiàn)象，故皂苷又稱(chēng)為皂毒素(saptoxins)。因此，皂苷水溶液不能用于靜脈注射或肌肉注射。但并不是所有的皂苷都具有溶血作用，如以人參二醇為苷元的皂苷則無(wú)溶血作用。溶血指數(shù)： 指在一定條件下能使血液中紅細(xì)胞完全溶解的最低皂苷濃度。

20、如甘草皂苷，溶血指數(shù)1：4000，溶血性能較強(qiáng)；薯蕷皂苷的溶血指數(shù)為1:400000?？诜t沒(méi)有溶血作用，可能在胃腸不被吸收 第四節(jié) 提取與分離四、提取與 分離（一） 三萜類(lèi)化合物 的提取方法1. 醇類(lèi)溶劑 提取法2. 酸水解有機(jī)溶劑萃取 將植物原料在酸性溶液中加熱水解，過(guò)濾，藥渣水洗后干燥，然后用有機(jī)溶劑提取出皂苷元。也可先用醇類(lèi)溶劑提取出皂苷，然后加酸水解，濾出水解物，再用有機(jī)溶劑提取出皂苷元。適于提取皂苷元。3堿水提取法 某些皂苷含有羧基，可溶于堿水，因此可用堿溶酸析法提取。（二） 三萜類(lèi)化合物 的分離方法 利用皂苷難溶于乙醚、丙酮的性質(zhì)，將皂苷溶于甲醇或乙醇，滴加乙醚或丙酮或乙醚：丙

21、酮（1：1）的混合物液，邊加邊搖，皂苷即可析出。優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單易行缺點(diǎn)：難以分離完全，不易得到純品。1.分段沉淀法 皂苷可與膽甾醇生成難溶性的分子復(fù)合物，此性質(zhì)曾被用于皂苷的分離，即先將粗皂苷溶于少量乙醇中，再加入膽甾醇的飽和乙醇溶液，至不再析出沉淀為止(混合后需稍加熱)，濾過(guò)，取沉淀用水、醇、乙醚順次洗滌以除去糖類(lèi)、色素、油脂和游離的膽甾醇。然后將此沉淀干燥后，用乙醚回流提取，膽甾醇被乙醚提出，使皂苷解脫下來(lái)，殘留物即為較純的皂苷。2.分段沉淀法3. 色譜分離法 由于中藥中的三萜類(lèi)成分常與其它極性相近的雜質(zhì)共存，且有些三萜類(lèi)化合物間結(jié)構(gòu)差別不大，因此用上述分離方法獲得單體較為困難。色譜法是目前分

22、離三萜類(lèi)化合物常用的方法。吸附柱色譜分配柱色譜HPLC大孔樹(shù)脂柱色譜凝膠色譜法常見(jiàn)色譜3.1、吸附柱色譜 適于各種存在形式的三萜化合物； 譜分為正相色譜和反相色譜； 正相：填充劑常用硅膠，洗脫劑：不同比例的混合溶劑，如氯仿-甲醇 反相：填充劑常反相鍵合相Rp-18等，洗脫劑常用甲醇-水等3.2、分配柱色譜 支持劑常用硅膠； 固定相：3%的草酸水溶液等； 流動(dòng)性：含水的混合溶劑，如氯仿-甲醇-水3.3、高效液相色譜 目前最常用的方法； 一般采用反相色譜柱； 流動(dòng)性：甲醇-水，乙腈-水等；3.4、凝膠色譜法 利用分子篩的原理分離分子量不同的化合物； 不同濃度的甲醇、乙醇或水洗脫時(shí)，按分子量遞減洗脫

23、； 常用Sephades 20；在實(shí)際操作中，一般采用各種方法組合使用，即大孔樹(shù)脂硅膠柱色譜低壓或中壓色譜高效液相色譜凝膠色譜薄層制備色譜大孔樹(shù)脂目標(biāo)成分 第五節(jié) 三萜化合物的檢識(shí)五、三萜類(lèi)化合物的檢識(shí)（一）理化檢識(shí)1泡沫試驗(yàn) 皂苷水溶液經(jīng)強(qiáng)烈振搖能產(chǎn)生持久性的泡沫由于有的皂苷沒(méi)有產(chǎn)生泡沫的性質(zhì)，而有些化合物如蛋白質(zhì)的水溶液等亦有發(fā)泡性，但其泡沫加熱后即可消失或明顯減少，因此，利用此法鑒別皂苷時(shí)應(yīng)該注意可能出現(xiàn)的假陽(yáng)性或假陰性反應(yīng)。3溶血試驗(yàn) 取供試液1ml，于水浴上蒸干，用0.9的生理鹽水溶解，加入幾滴2的紅細(xì)泡懸浮液，如有皂苷類(lèi)成分存在，則發(fā)生溶血現(xiàn)象，溶液由混濁變?yōu)槌蚊鳌?顯色反應(yīng) 通過(guò)

24、Liebermann-Burchard等顏色反應(yīng)和Molish反應(yīng)，可初步推測(cè)化合物是否為三萜或三萜皂苷類(lèi)化合物。（二）色譜檢識(shí)1薄層色譜-三萜類(lèi)化合物常用硅膠為吸附劑環(huán)己烷-乙酸乙酯（1:1）游離三萜三萜皂苷氯仿-乙酸乙酯（1:1）苯-丙酮（95:5）氯仿-丙酮（95:5）氯仿-甲醇-水（65:35:10，下層）氯仿-甲醇-水(65:35:10，下層)乙酸乙酯-乙酸-水（8:2:1）正丁醇-乙酸-水(4:1:5，上層）三萜類(lèi)化合物2紙色譜強(qiáng)極性三萜皂苷 弱極性或親脂性三萜皂苷乙酸乙酯-吡啶-水（3:1:3）正丁醇-乙酸-25%氨水（10:2:5）氯仿-四氫呋喃-吡啶（10:10:2,下層）氯

25、仿-二氧六環(huán)-吡啶（10:10:3,下層）三萜類(lèi)化合物 固定相-水移動(dòng)相-極性相應(yīng)增大正丁醇-乙醇-15%氨水（9:2:9）酸性皂苷 固定相-甲酰胺移動(dòng)相-甲酰胺飽和的氯仿溶液 第六節(jié) 結(jié)構(gòu)研究 多數(shù)三萜類(lèi)化合物不產(chǎn)生紫外吸收，但齊墩果烷型三萜化合物由于結(jié)構(gòu)中多具有雙鍵，有紫外吸收。六、結(jié)構(gòu)研究（一） UV 光譜 結(jié)構(gòu)中只有孤立雙鍵:205-250nm 處有微弱吸收; 、不飽和羰基則max:242-250nm； 異環(huán)共軛雙烯，則max:240、250、260nm； 同環(huán)共軛雙烯max:285nm。對(duì)于11-oxo，12-齊墩果酸型化合物，可用紫外判斷18-H構(gòu)型 當(dāng)C18為構(gòu)型時(shí)，最大吸收為2

26、48-249nm； 當(dāng)C18為構(gòu)型時(shí)，最大吸收為242-243nm；（二） MS 譜1. 游離三萜類(lèi)化合物主要采用 EI-MS齊墩果12-烯型三萜化合物烷RDA裂解及失去相應(yīng)官能團(tuán)碎片羽扇豆醇型三萜化合物-可出現(xiàn)失去異丙基的M-43碎片 常采用FD-MS(場(chǎng)解析質(zhì)譜)或FAB-MS(快原子轟擊質(zhì)譜)準(zhǔn)分子離子峰一般為M+H、M+NaM+K、MA+k等2. 三萜皂苷三萜類(lèi)化合物質(zhì)譜裂解有較強(qiáng)的規(guī)律： 五環(huán)三萜：1）當(dāng)有環(huán)內(nèi)雙鍵時(shí)，一般都有較特征的反Diels-Alder(RDA)裂解；2）如無(wú)環(huán)內(nèi)雙鍵時(shí)，常從C環(huán)斷裂成兩個(gè)碎片；3）在有些情況下，可同時(shí)產(chǎn)生RDA裂解和C環(huán)斷裂。 四環(huán)三萜類(lèi)化合物

27、裂解的共同規(guī)律是失去側(cè)鏈。1、1H-NMR 譜（三） NMR 譜多個(gè)甲基單峰是三萜類(lèi)化合物的最大特征 H J峰數(shù)備注CH3一般0.60-1.50與雙鍵相連1.63-1.80可否定齊、烏型乙?；?1.82-2.07甲酯部分3.6二重峰烏型或羊型或環(huán)菠6去氧糖5位1.4-1.75.5-7.0二重峰C29300.8-1.06二重峰烏型C=C一般4.3-6.0環(huán)內(nèi)5;環(huán)外5; 例子見(jiàn)P234OH一般3.2-4.0CH3C=O4.0-5.52、13C-NMR 譜確定三萜及皂苷最有價(jià)值的技術(shù)碳值一般為60.0；烯碳在109160; 羰基碳為170-220；糖的端基碳為90 112; 苷元和糖上與氧相連的碳

28、的值為6090; 角甲基一般出現(xiàn)在8.933.7，其中23- CH3和29-CH3為e鍵甲基出現(xiàn)在低場(chǎng)，值依次為28和33左右。2.1 結(jié)構(gòu)母核的確定三萜及雙鍵位置烯碳值12-齊墩果烯C12:122124，C13:1441451l,13（18）齊墩果烯C11:126127，C12:1269,（11）,12齊墩果烯C 9:154155，C11:11611712-烏蘇烯C12:124125，C13:140白樺脂酸C20：150；C30:110.0齊墩果烷型：C4、C8、C10、C14、C17、C20-37.042.0 烏蘇烷型羽扇豆烷型C4、C8、C10、C14、C17只有5個(gè)季碳2.1.1、齊墩

29、果烷型、烏蘇烷型、羽扇豆烷型皂苷元的確定2.1.2、人參皂苷C-20異構(gòu)體的確定C13C16C17C20C21C2220(S)原人參二醇47.726.653.674.026.834.820(R)原人參二醇48.526.449.974.621.842.3差值-0.8+0.2+3.7-0.6+5.0-7.52.2 苷化位移的確定 三萜3-OH苷化，一般C-3向低場(chǎng)位移8-10，而且會(huì)影響C-4的值；糖之間連接位置的苷化位移約為+38；糖與苷元的-COOH成酯苷，羰基碳向高場(chǎng)位移，其苷化位移約為-2 -5；糖的端基碳一般位移至9596處 ；2.3 羥基取代位置的確定2.3.1、29,30-COOH和CH2OH位置的確定 C29或C30-CH3-COOH-CH2OHC19或C21基點(diǎn)向高場(chǎng)46C20基點(diǎn)向低