上海生物樣本庫最佳實踐規(guī)范及標(biāo)準操作流程文件匯編

1、SHANGHAICLINICALRESEARCHCENTER工實亠u范標(biāo)準操I最佳實踐規(guī)范及標(biāo)準操作流程文件匯編（第二版）2010年5月上海醫(yī)錯崎麻研穽中町二流程文件匯編V2.01 #工實亠UY范標(biāo)準操作流程文件匯編 上海醫(yī)錯崎麻研穽（01111SHANGHAICLI忡ICALRESEARCHCENTERV2.01上海醫(yī)錯崎麻研穽中町二流程文件匯編V2.01 工實亠UY范標(biāo)準操作流程文件匯編 #上海生物樣本庫編號SOP-SC-008-01實施日期質(zhì)量管理體系文件文件名稱血液樣本米集操作規(guī)程批準人批準日期血液樣本米集操作規(guī)程1目的規(guī)范組織樣本庫采集人體血液樣本的活動。2適用范圍本規(guī)程適用于使用真

2、空采血管采血法采集人體血液樣本的活動過程。3定義和術(shù)語3.1知情同意保證被收集者了解并理解研究的目的和內(nèi)容，并自愿同意參加試驗的原則。知情同意具有國際性，是對所有進行人體研究或人體取樣調(diào)查的研究人員的倫理要求。在以人為研究/試驗對象的科研領(lǐng)域，收集者必須獲得研究對象/參與者的知情同意，保護被收集者合法權(quán)益的同時保護收集者免于訴訟。3.2知情同意書知情同意書，是每位被收集者表示自愿參加某一項試驗而簽署的文件。知情同意的具體體現(xiàn)是知情同意書的簽署。知情同意書由收集者和被收集者共同簽署，一式兩份。正本由收集者保存，被收集者保存副本。3.3真空采血管采血法將有頭蓋膠塞的采血試管預(yù)先抽成不同的真空度，利

3、用其負壓自動定量采集靜脈血樣。3.4血清和血凝塊指在凝血過程中，血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗艿难w維。血纖維交織成網(wǎng)，將很多血細胞網(wǎng)羅在內(nèi)，形成血凝塊。血液凝固后，血凝塊又發(fā)生回縮，并釋放出淡黃色液體，稱為血清，其中已無纖維蛋白原。3.5血漿SHANGHAICLINICALRESEARCHCENTER工實亠u范標(biāo)準操I血漿是離開血管的全血經(jīng)抗凝處理后，通過離心沉淀，所獲得的不含細胞成分的液體，其中含有纖維蛋白原。3.6白細胞白細胞是血液中的一類細胞，人體血液及組織中的無色細胞，有細胞核。根據(jù)形態(tài)特征可分為粒細胞、淋巴細胞核單核細胞。3.7枸櫞酸鈉（檸檬酸鈉）枸櫞酸能與血液中的鈣離子結(jié)合形成螯合

4、物，從而阻止血液凝固。3.8乙二胺四乙酸二鉀（EDTAK）2抗凝機制與枸櫞酸鈉相同。用EDTAK1.5-2.2mg可阻止1ml血液凝固。23.9肝素一種含有硫酸基團的黏多糖，相對分子質(zhì)量為15000,與抗凝血酶III結(jié)合，促進其對凝血因子和凝血酶活性的抑制，抑制血小板聚集從而達到抗凝。職責(zé)4.1臨床護理人員按照標(biāo)準操作規(guī)程采集血液。4.2樣本管理員樣本管理員由專業(yè)的病理醫(yī)（技）師或受過專業(yè)培訓(xùn)的醫(yī)技人員擔(dān)任，協(xié)助和進行樣本采集處理的工作，記錄樣本采集處理的過程。工作過程中不應(yīng)影響正常的診斷和治療活動。設(shè)備和器材5.1個人防護裝備手套、口罩、實驗防護服、護目鏡及其它相關(guān)防護裝備。5.2設(shè)備血液樣

5、本運輸箱。5.3采血針系統(tǒng)軟接式雙向米血針系統(tǒng)（頭皮靜脈雙向來血式），一端為穿刺針，另一端為刺塞針。5.4真空采血管血液樣本搜集推薦使用一次性真空采血器，采血器應(yīng)遵照國家WS/T 工實亠UY范標(biāo)準操作流程文件匯編 #上海醫(yī)錯崎麻冊穽miniSHANGHAICLINICALRESEARCHCENTER、工實范標(biāo)準操作流程文件匯編V2.01224-2002技術(shù)規(guī)范。準備非抗凝管和抗凝管各一管，共兩管：分別是5ml非抗凝管，和5ml抗凝管。常用彩色真空采血容器用途如下，具體操作時可以根據(jù)樣本的用途來選擇非抗凝管和抗凝管。用途蓋子顏色紅色促/抗凝劑無使用要求凝塊形成約需30min分離血清金黃色分離膠/

6、凝需顛倒混勻5次，使血液與激活劑充分刀離血清金黃色塊激活劑接觸。凝塊完全形成后離心橘黃色凝血酶需顛倒混勻8次淡藍色枸櫞酸鈉須顛倒混勻，血液與抗凝劑比例為9：1分離血漿綠色肝素鈉、肝素鋰等根據(jù)實驗需要，選擇不同類型肝素紫色EDTA需顛倒混勻6-8次表1常用彩色真空采血管的用途5.5試劑30g/L碘酊、75%醫(yī)用酒精。主要流程6.1知情同意6.1.1樣本的捐贈者應(yīng)在手術(shù)前簽訂知情同意書，該知情同意書簽署時應(yīng)有第三人在場，確保簽字的真實，確信病人已經(jīng)了解知情同意的內(nèi)容。6.1.2知情同意書應(yīng)貼上事先準備好的條形碼標(biāo)簽（標(biāo)簽的編碼規(guī)則見條碼標(biāo)簽設(shè)定使用規(guī)范）并在血液樣本采集紀錄表中記錄該條碼標(biāo)簽的編號

7、。6.2器材和標(biāo)簽準備6.2.1樣本管理員應(yīng)在采血前根據(jù)知情同意書的編碼，通過樣本信息管理系統(tǒng)自動分配打印初始條形碼標(biāo)簽和血液樣本采集紀錄表標(biāo)簽的規(guī)則見條碼標(biāo)簽設(shè)定使用規(guī)范6.2.2樣本管理員應(yīng)在采血前準備血液樣本運輸箱，采血針系統(tǒng)，以及貼有初始條形碼標(biāo)簽的非抗凝和抗凝的真空采血管。6.3血液采集6.3.1選擇靜脈：捐贈者取坐位，前臂水平伸直置于桌面枕墊上，選擇容易固定、明顯可見的肘前靜脈或手背靜脈，幼兒可用頸外靜脈采血。上海醫(yī)錯崎麻研穽中町二流程文件匯編V2.01 工實亠UY范標(biāo)準操作流程文件匯編 #SHANGHAICLINICALRESEARCHCENTER工實亠u范標(biāo)準操I6.3.2消毒

8、：用30g/L碘町自所選靜脈穿刺處從內(nèi)向外、順時針方向消毒皮膚，待碘町揮發(fā)后，再用75%乙醇以同樣方式脫腆，待干。6.3.3采血:拔除采血穿剌針的護套，以左手固定捐贈者前臂，右手拇指和食指持穿刺針，沿靜脈走向使針頭與皮膚成30角，快速刺入皮膚，然后成5角向前刺破靜脈壁進入靜脈腔，見回血后將刺塞針端（用橡膠管套上的）直接刺穿入非抗凝真空采血管蓋中央的膠塞中，血液自動流入試管內(nèi)，收集5ml左右的全血后，將刺塞端拔出，刺入抗凝真空采血管再收集5ml左右的全血。達到采血量后，松壓脈帶，囑捐贈者松拳，拔下刺塞端的采血試管。將消毒干棉球壓住穿刺孔，立即拔除穿刺針，囑捐贈者繼續(xù)按壓針孔數(shù)分鐘。6.3.4樣本

9、管理員立即按照5.4表1的使用要求對不同真空采血管進行處理。6.3.5條件允許的情況下應(yīng)立即進行血液成份的分離。參見血漿樣本分離操作規(guī)程、白細胞樣本Ficoll分離操作規(guī)程、血清樣本分離操作規(guī)程和血凝塊樣本分離操作規(guī)程如需轉(zhuǎn)運后再分離，應(yīng)使用血液樣本運輸箱低溫、一、厶運送。6.3.6樣本管理員在血液樣本采集紀錄表中記錄非抗凝和抗凝的真空管中血液狀態(tài)的簡單描述、以及樣本采集和分離的時間。6.4數(shù)據(jù)錄入6.4.1樣本管理員在采集處理工作結(jié)束后將血液樣本采集紀錄表所記錄的信息輸入樣本信息管理系統(tǒng)中。6.4.2填寫完的血液樣本采集紀錄表應(yīng)歸檔保存。6.5注意事項6.5.1容器不潔凈、接觸水、強力震蕩、

10、操作不慎等可引起溶血，應(yīng)避免。6.5.2使用真空采血器前應(yīng)仔細閱讀廠家說明書，嚴格按說明書要求操作，血液采集應(yīng)使用一次性的針頭和針管，防止交叉污染和感染。6.5.4刺塞針端的乳膠套能防止拔除采血試管后繼續(xù)流血污染周圍，達到封閉采血防止污染環(huán)境的作用，因此不可取下乳膠套。6.5.5使用前不要松動一次性真空采血試管蓋塞，以防采血量不準。6.5.6血液采集的過程應(yīng)迅速準確，減少捐贈者的痛苦。用作樣本庫保存的血液最好和常規(guī)化驗一起抽取，以減少捐贈者的不適。SHANGHAICLINICALRESEARCHCENTER工實亠u范標(biāo)準操I6.5.7盡量選粗大的靜脈進行穿刺。6.5.8止血帶結(jié)扎時間應(yīng)該小于1

11、分鐘，如超過2分鐘，大靜脈血流受阻而使得毛細管內(nèi)壓增高，分子質(zhì)量小于5000的物質(zhì)逸入組織液，或缺氧引起血液成分的變化。這種情況下的血液不應(yīng)該采集。相關(guān)文件樣本采集控制程序SOP-SC-OO1-O1血漿樣本分離操作規(guī)程SOP-SC-OO9-O1白細胞樣本分離操作規(guī)程SOP-SC-O11-O1血清樣本分離操作規(guī)程SOP-SC-O12-O1血凝塊樣本分離操作規(guī)程SOP-SC-O13-O1血液樣本儲存操作規(guī)程SOP-SC-O16-O1條碼標(biāo)簽設(shè)定使用規(guī)范SOP-IT-OO1-O1樣本信息管理系統(tǒng)用戶手冊V3.08參考標(biāo)準與文獻BiorepositoryProtocolsAustralianBiospecimenNetwork,2007CommonMinimalTechnicalStandardsandProtocolWHO全國臨