ASTM-E2149-2010翻譯-測(cè)定動(dòng)態(tài)接觸條件下固定化抗菌劑抗微生物活性的試驗(yàn)方法

1、測(cè)定動(dòng)態(tài)接觸條件下固定化抗菌劑抗微生物活性的試驗(yàn)方法.范圍本試驗(yàn)方法用于評(píng)價(jià)非濾瀝的抗菌活性，動(dòng)態(tài)條件下的抗菌處理試樣。這 種燒瓶震蕩測(cè)試是為了常規(guī)質(zhì)量控制和篩選試驗(yàn)，以克服在使用傳統(tǒng)抗菌試驗(yàn) 方法評(píng)價(jià)底物結(jié)合的抗菌劑時(shí)遇到的困難。這些困難包括確保接種體接觸要處 理的表面（如AATCC 100-2004 ,在不同接觸時(shí)間的靈活性，在靜態(tài)條件下的 不適當(dāng)使用（如AATCC 147-2004 ,靈敏度和重現(xiàn)性。本測(cè)試方法可以適用于評(píng)估許多類型的處理原材料和廣泛范圍的微生 物。在本試驗(yàn)方法中所使用的原材料可以承受各種物理/化學(xué)的應(yīng)力，而且可以適應(yīng)各種測(cè)試中的污染，比如硬水、蛋白質(zhì)，血液，血清，各種化

2、學(xué)品與其他 污染物。表面抗菌活性是通過(guò)對(duì)比同時(shí)測(cè)試的試驗(yàn)樣品的結(jié)果來(lái)確定的。浸出抗菌的能力是通過(guò)測(cè)試前和測(cè)試后的兩方面因素確定的。本測(cè)試方法只能由通過(guò)微生物技術(shù)訓(xùn)練的人員執(zhí)行。數(shù)值用SI單位制做為標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)中不會(huì)使用其他計(jì)量單位。本標(biāo)準(zhǔn)可能涉及危險(xiǎn)材料、操作和設(shè)備。本標(biāo)準(zhǔn)不會(huì)列舉所有與使用有 關(guān)的安全問(wèn)題。本標(biāo)準(zhǔn)使用者有責(zé)任建立合適的安全和健康的實(shí)施方式，確定 使用前法規(guī)限制的適用性。.相關(guān)文件AATCC5：件AATCC 147-2004紡織品的抗菌性一平行劃線法AATCC 100-2004抗菌紡織品的評(píng)價(jià)方法.測(cè)試方法總結(jié)底物結(jié)合非瀝濾抗菌劑的抗菌活性，是通過(guò)細(xì)菌直接接觸活性化學(xué)試劑 來(lái)確定

3、的。此項(xiàng)測(cè)試所得到的抗菌活性，是通過(guò)處理試樣在高濃度的菌懸液中 振蕩接觸一小時(shí)后確定。其中懸浮液通過(guò)接觸培養(yǎng)前后的連續(xù)稀釋，最后對(duì)比 在懸浮液中存活生物體的數(shù)目，與之前正常試樣中的存活生物體數(shù)目，計(jì)算得 到減少百分?jǐn)?shù)（或者是10g10數(shù)值）。.意義和應(yīng)用然后在通常使用情況下，由于化學(xué)鍵的作用，抗菌劑不會(huì)自由擴(kuò)散到它 們的環(huán)境中。通常的紡織品測(cè)試方法是不適合對(duì)固定抗菌劑作評(píng)價(jià)的，例如 AATCC147-200鉆種方法，它是直接在處理后織物上使用已過(guò)濾好的抗菌劑。 這種測(cè)試方法通過(guò)在測(cè)試期間不斷的攪拌，保證了細(xì)菌與處理過(guò)的纖維，織 物，或其他原材料的良好接觸。被測(cè)試物種的代謝狀態(tài)直接影響抗菌劑效果

4、或是試劑濃度的測(cè)量。被測(cè) 試物種對(duì)特定滅菌劑的敏感性會(huì)通過(guò)生命周期發(fā)生改變。在緩沖液中的一小時(shí) 接觸時(shí)間可以使物種的新陳代謝時(shí)間暫時(shí)停滯。本測(cè)試方法同時(shí)規(guī)定了被測(cè)試 物種的生長(zhǎng)條件和與原材料的接觸時(shí)間，以減少微生物在成長(zhǎng)過(guò)程中的多變 性。對(duì)非浸出劑的液態(tài)抗菌活性分析可以提供完全濕潤(rùn)測(cè)試原材料。隨著表 面潤(rùn)濕活性劑的使用，可以減少使用疏水和親水性原材料時(shí)帶來(lái)的負(fù)面影響。這種測(cè)試方法不適合直接對(duì)比浸出與非浸出抗菌劑活性劑。在液態(tài)環(huán)境 下，浸出劑可以以不同的速率釋放活性成分。此時(shí)，浸出劑的抗菌活性可能會(huì) 在連續(xù)稀釋后還殘存于懸浮液中，并在接觸時(shí)間后繼續(xù)發(fā)揮作用，除非在實(shí)驗(yàn) 結(jié)束時(shí)可以完全分離。對(duì)這些

5、影響因素的控制不包括在此項(xiàng)測(cè)試方法內(nèi)，因此 必須有其它方法來(lái)確定浸出抗菌劑的殘留。本試驗(yàn)適用于評(píng)價(jià)破壞或修正樣品，條件是必須能對(duì)其有足夠的控制。注1 -破壞可能包括衣物洗滌，穿著與磨損，輻射與蒸汽滅菌，紫外線照 射，溶劑處理，溫度敏感變化，或類似的物理或化學(xué)處理。.設(shè)備帶孔瓊脂，直徑8mm;空氣置換吸管，100 -1000山，帶一次性吸管；分析天平，用于稱量化學(xué)品和原材料，移液管，用于量取培養(yǎng)液；玻璃器皿：具塞250mL錐形燒瓶，耐高溫；試管，18X 150mmC框細(xì)菌測(cè)試專用，用于測(cè)試生物增長(zhǎng)和連續(xù)稀 釋；保溫裝置，能夠保持溫度為35笈；腕式振蕩器，能夠連續(xù)振蕩細(xì)菌與底液；分光光度計(jì)，能夠測(cè)

6、量的吸光度 475nm;無(wú)菌血清移液管，50mL與100mL;消毒器，任何可以制造無(wú)菌條件的蒸汽消毒器；旋渦混合器，在溶液稀釋過(guò)程中攪拌稀釋液；水浴鍋，用于短期存儲(chǔ)液化瓊脂，維持在 45至50C。.試劑緩沖液一用分析級(jí)化學(xué)品配制以下溶液的制備從試劑級(jí)化學(xué)品。緩沖液 （0.25M磷酸二氫鉀）：每6個(gè)月至少配置一次新溶液：稱取34 0.1g磷酸二氫鉀，倒入1000mL燒杯中，加入500mL去離子水。用NaOH 溶液調(diào)節(jié)pH值至3 / 5士0.1。加入去離子水稀釋至1000mL,倒入燒井K中，在4c條件下保存。緩沖 液（0.3mM磷酸二氫鉀）：每2個(gè)月至少配置一次新溶液：用無(wú)菌移液管吸取0.01mL

7、的緩沖液，移至燒瓶中，加入 800mL去離子水稀釋。加塞，消毒， 在室溫下保存。介質(zhì)胰蛋白酶大豆培養(yǎng)基，根據(jù)客戶的要求制備；平皿計(jì)數(shù)瓊脂，根據(jù)客戶的要求制備；潤(rùn)濕劑，試劑必須預(yù)先通過(guò)測(cè)試，不會(huì)影起細(xì)菌數(shù)量的增多或減少。 DCQ2-5211 對(duì)于0.01 %的緩沖稀釋溶液必須是有效的。.測(cè)試用細(xì)菌大腸埃希氏菌，美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌庫(kù)，No.25922;測(cè)試菌體的培養(yǎng)應(yīng)通過(guò)良好的微生物測(cè)試，并保證純度。連續(xù)和準(zhǔn)確 的測(cè)試需要一個(gè)純凈，無(wú)污染的測(cè)試環(huán)境。通過(guò)良好的電鍍消毒技術(shù)避免污 染。定期通過(guò)平板劃線分離法檢查菌種純度，觀察大腸埃希氏菌與革蘭氏染色 菌落的特征。注2原始的方法，ASTM E2149-01指定克雷伯菌作為試驗(yàn)的有機(jī)體。本 試驗(yàn)方法中使用大腸桿菌因?yàn)樗菀滋幚?，而且是一種更普遍接受的測(cè)試類 型有機(jī)體。.參數(shù)表面處理或條件必須確定。樣品需要做預(yù)先處理以保證在測(cè)試時(shí)間內(nèi)能 達(dá)到最大活性，而且需要與之前相同處理過(guò)的樣品相比較；重量，尺寸，樣品的材料必須確定。試樣需要通過(guò)最大限度的攪拌來(lái)制備，使得它們可以真實(shí)反映測(cè)試中表 面面積的比值。.細(xì)菌培養(yǎng)液的制備測(cè)試前，在35 忑的胰蛋白酶大豆培養(yǎng)液中振蕩培養(yǎng)大腸桿菌1