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文檔簡介
1、關(guān)于檢驗與臨床實驗室應(yīng)用第一張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月檢驗一般了解1檢驗科方法簡單了解2PCT3CRP4心臟標(biāo)準(zhǔn)物5總結(jié)第二張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月檢驗科和實驗室區(qū)別檢驗科 : 常規(guī)工作 量大 臨床要求快臨床檢驗工作最基本要求及時 方便 準(zhǔn)確臨床檢驗人員對儀器及試劑要求管用 好用 實用實驗室:特殊項目 科研為主 量少 檢驗項目:形態(tài)學(xué) 定性和定量 第三張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月檢驗報告形式一濃度分析1定性2定量二形態(tài)報告1細(xì)胞2細(xì)菌3管型第四張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月一按反應(yīng)原理分類(定量)1 用化學(xué)試劑測定方法叫化學(xué)法。如蛋白
2、 鈣 鎂2 用酶測定方法叫酶法。如葡萄糖 谷丙轉(zhuǎn)氨酶3用抗原抗體反應(yīng)原理方法叫免疫法。HBsAg 4用原子吸收方法叫色譜法。鉀 鈉5用電泳分離方法叫電泳法。蛋白電泳 高壓液相色譜6測定蛋白分子用酶聯(lián)聚合反應(yīng)即PCR方法。DNA7生物傳感器。血氣 血糖第五張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月二按方法敏感性分類1 超微量法 微克以下 皮克 納克 一般用免疫發(fā)光法 激素 腫瘤標(biāo)志物 2 微量法 毫克以下 微克 一般用金標(biāo)法或膠乳法散射法 RF CRP3 常量法 克以下 毫克 一般用生化法 白蛋白 甘油三脂第六張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月根據(jù)反應(yīng)產(chǎn)物特性分1比色 常用生化測定2比濁
3、 抗原抗體測定3散射 可標(biāo)記乳膠 4測定光強(qiáng)度 往往標(biāo)記第七張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月主要反應(yīng)方式1液體反應(yīng) 生化 免疫等成本低 線性寬 靈敏度高 2干式反應(yīng) 干生化 免疫層析 滲濾法 相對靈敏度低 線性窄 成本高 往往單人份包裝第八張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)記技術(shù)分類1 放射物質(zhì)標(biāo)記2 熒光物質(zhì)標(biāo)記3 酶物質(zhì)標(biāo)記4 金標(biāo)記(鐵 銅 硒)5 發(fā)光物標(biāo)記第九張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月測定方法1決定性方法2參考方法3常規(guī)方法123的過程叫正確度傳遞321的過程叫溯源第十張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月超微量分析(化學(xué)發(fā)光)目前按方法形式分
4、類 1 板式發(fā)光(包被在板上) 須洗滌和分離 反應(yīng)手續(xù)多 反應(yīng) 慢均相發(fā)光 分洗滌和無洗滌二種 簡單和反應(yīng)快 發(fā)光按反應(yīng)方式: 干式反應(yīng)和濕反應(yīng) 儀器分: 全自動 半自動 第十一張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月化學(xué)發(fā)光免疫化學(xué)發(fā)光分: 1 酶底物發(fā)光(鹼性磷酸酶)貝克曼2 直接發(fā)光(丫叮脂) 西門子 3電發(fā)光(釕) 羅氏 4時間分辨熒光(銪) 德普5微粒熒光 透景6無須分離直接發(fā)光 博陽第十二張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月方法學(xué)要求1精密度 批內(nèi) 批間 變異系數(shù)CV表示2正確度 和目前公認(rèn)結(jié)果比較 偏差53穩(wěn)定性好4反應(yīng)快5抗干擾能力強(qiáng)第十三張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2
5、022年6月分析儀器按反應(yīng)狀態(tài)分類 1 干式反應(yīng) 萬孚飛測 金標(biāo)定量 2 濕式反應(yīng) 生化儀 發(fā)光儀 第十四張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月四 按反應(yīng)方便程度分類 1 手工法 2 半自動 3 全自動第十五張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月儀器要求1精密度好 CV38C 或90次/每分3呼吸頻率20次/每分4白細(xì)胞12000/uL或4000/uLSIRS主要由微生物感染所引起,其他非感染如嚴(yán)重缺氧,燒傷、急性胰腺炎等也可以造成。第二十八張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月炎癥診斷試驗1,體溫測量2,白細(xì)胞計數(shù)和分類3,血沉4,血清蛋白電泳5,CRP6, IL-6 IL-8第
6、二十九張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月PCT在膿毒血癥應(yīng)用 1, 區(qū)分是否細(xì)菌感染,越高感染病情越重 2,肺炎中應(yīng)用 鑒別細(xì)菌性和病毒性 3,全身性真菌感染應(yīng)用 4, 腦膜炎鑒別中應(yīng)用 5,新生兒感染中應(yīng)用 第三十張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月PCT監(jiān)控具有高度感染的患者應(yīng)用1,重危患者2,大手術(shù)后3,器官移植第三十一張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月PCT在療效觀察中應(yīng)用1,膿毒癥2,多器官衰竭3,休克4,感染后手術(shù)治療第三十二張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月CRP1肝臟合成,結(jié)構(gòu)五聚體 是一種急性時相反應(yīng)蛋白。2特點:本地很低,當(dāng)受到刺激時(一般6小
7、時)迅速升高可達(dá)1000倍。3臨床應(yīng)用普遍。第三十三張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月CRP與PCT的應(yīng)用比較CRP:炎癥過程的篩選 6小時后上升2天達(dá)高峰 CRP高提示病變存在。PCT:診斷和監(jiān)測細(xì)菌性疾病感染一個參數(shù) 是嚴(yán)重細(xì)菌性和真菌感染特異性標(biāo)志。也是膿毒癥和炎癥活動有關(guān)多臟器衰竭的可靠指標(biāo)。患者好轉(zhuǎn)PCT比CRP反應(yīng)快,而CRP有較長時間才下降。第三十四張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月CRP和PCT的比較相同:都是急性時相反應(yīng)蛋白CRP是臨床運用特點是炎癥指標(biāo),在感染性炎癥和非感染性炎癥,組織損傷、局部和全身的輕度 中度 重度的感染和各種輕中度損傷中應(yīng)用。PCT運用
8、在嚴(yán)重細(xì)菌感染及膿毒血癥 第三十五張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月CRP和PCT的比較PCT指標(biāo)在細(xì)菌感染方面相對特異CRP指標(biāo)相對特異性差在病毒感染中PCT不升高,CRP會輕中度升高,在細(xì)菌感染中CRP呈現(xiàn)一般中度以上升高,持續(xù)時間長,PCT只有在嚴(yán)重細(xì)菌感染時才會升高,治療好轉(zhuǎn)就下降。第三十六張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月檢測項目主要臨床意義臨床意義:共性有二點 1,診斷和鑒別診斷 2,療效觀察PCT臨床意義 PCT作為急性時相反應(yīng)蛋白(APR)一種,一般認(rèn)為在持續(xù)毒素刺激下,68小時開始升高第三十七張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月CRP臨床意義1主要用于各
9、種損傷、感染、治療等觀察。2超敏CRP主要用于心血管疾病。BNP 主要用于慢性心衰的評估肌鈣蛋白主要用于心肌損傷及梗死第三十八張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月PCT臨床意義總結(jié)PCT只有在嚴(yán)重細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染及膿毒癥和多臟器功能衰竭時測定才有意義。 在自身免疫、過敏和病毒感染時不升高。因此PCT在細(xì)菌性疾病鑒別、監(jiān)控細(xì)菌性感染及病程預(yù)后估計等方面有意義。第三十九張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月檢驗科發(fā)展方向臨床檢驗發(fā)展基本要求:圍繞 及時 方便 準(zhǔn)確方針1 整個檢驗科全自動2 POCT(即時檢驗)系統(tǒng)化 優(yōu)點 溯源性 不準(zhǔn)確度4 信息化第四十張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作
10、于2022年6月提高內(nèi)涵、把握方向、持續(xù)進(jìn)步1做企業(yè)或公司:誘惑多 最重要不是選擇而是放棄 得到空間更大 堅信基本判斷 項目找對 成功一大半2生存法則:守住底線、創(chuàng)造空間3確定方向:想做什么?能做什么?4市場要什么:不是你有我有。而是排他性即唯 一性5社會需要什么:可靠、放心、方便、環(huán)保 最好創(chuàng)造新產(chǎn)業(yè)第四十一張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月目前市場上哪些品牌可以真正實現(xiàn)一步法加樣?PCT/心標(biāo)等:明德、樂普、基蛋(金標(biāo)半定量)CRP:迪倍思(金標(biāo)半定量,加樣后需補(bǔ)加緩沖液),其他品牌均需要加樣前稀釋/預(yù)處理第四十二張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月國賽CRP-散射比濁法操作
11、步驟:第四十三張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月禾柏CRP-散射比濁法第四十四張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月艾克美CRP-熒光免疫法第四十五張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月奧普CRP-金標(biāo)法第四十六張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月凱創(chuàng)CRP-金標(biāo)法第四十七張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月熱景CRP-上轉(zhuǎn)發(fā)光法第四十八張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月檢驗科需要項目和方法 檢測簡單方便 檢測快速,成本低, 高的特異性和敏感性 能夠反映疾病的嚴(yán)重程度 早期準(zhǔn)確診斷 反映預(yù)后和治療的療效全自動 信息化第四十九張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于202
12、2年6月熒光免疫法干式(POCT)國內(nèi)代表萬孚第五十張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月特點:專一激發(fā)光及雙抗體保證高特異性;信號級聯(lián)放大保證高靈敏度光路特異(專一激發(fā)光和吸收光),吸收光背景干凈,光信號特異性高熒光微球共價標(biāo)記:偶聯(lián)效率高,級聯(lián)放大熒光信號,靈敏度高,量程大夾心法:免疫反應(yīng)特異性較高第五十一張,PPT共五十四頁,創(chuàng)作于2022年6月常見免疫學(xué)檢測方法方法學(xué)/免疫學(xué) 標(biāo)記物 檢測方法 代表廠家舉例 POCT 熒光定量 熒光免疫層析 雙抗體夾心法 異硫氰酸熒光素 熒光強(qiáng)度 萬孚、艾克美 時間分辨免疫層析雙抗體夾心法 鑭系元素時間分辨測量熒光雷度微流控雙抗體夾心法熒光素?zé)晒鈴?qiáng)度博適、微點比濁法抗原抗體一步法 / / orion、國賽、禾柏 金標(biāo)法雙抗體夾心法膠體金 膠體金顆粒顏色 奧普、凱創(chuàng)、瑞萊上轉(zhuǎn)
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