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文檔簡介

1、實(shí) 驗(yàn) 一免疫原和抗血清的制備實(shí)驗(yàn)內(nèi)容顆粒型抗原的制備可溶性抗原與佐劑的混合顆粒性抗原與可溶性抗原免疫動(dòng)物 皮內(nèi)、肌肉、靜脈等途徑動(dòng)物采血及血清的分離 靜脈采血法、動(dòng)脈放血法、心臟采血法 顆粒性抗原細(xì)胞、細(xì)菌等可溶性抗原蛋白質(zhì)、糖蛋白、脂蛋白、核酸等一、免疫原的制備顆粒性抗原的制備1、抽取綿羊靜脈血，抗凝。2、取1ml綿羊靜脈血放入離心管，加入2ml生理鹽 水混勻后，2000rpm離心10min，吸去上清，同 上法洗滌二次。沉淀即主要為綿羊紅細(xì)胞。3、取綿羊紅細(xì)胞加入生理鹽水，配成1%的綿羊紅 細(xì)胞懸液。組織細(xì)胞抗原的制備： 高速搗碎法組織搗碎機(jī)搗碎 研磨法用玻璃勻漿器或乳缽研磨 可溶性抗原的

2、制備用于人體的佐劑：氫氧化鋁、胞壁酰二肽、細(xì)胞因子、熱休克蛋白常用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的佐劑：弗氏不完全佐劑羊毛脂與液體石蠟的混合物 弗氏完全佐劑弗氏不完全佐劑加卡介苗常用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的佐劑：弗氏不完全佐劑羊毛脂與液體石蠟的混合物弗氏完全佐劑弗氏不完全佐劑加卡介苗二、抗血清的制備 抗血清的制備是將制備好的免疫原按照一定的免疫程序接種給所選擇的動(dòng)物，該動(dòng)物在含有多種抗原表位的抗原刺激下，體內(nèi)多個(gè)B細(xì)胞克隆被激活并產(chǎn)生針對(duì)某一抗原多種不同表位的抗體，其混合物為多克隆抗體。 多克隆抗體的產(chǎn)生示意圖多克隆抗體：天然抗原刺激多種B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生 的多種抗體的混合物 免疫原的劑量 中間劑量范圍內(nèi)，免疫原劑量增加可獲得高效價(jià)抗體 免疫間隔時(shí)間 第一次和第二次間隔1020天，三次及以后間隔710天免疫途徑 皮內(nèi)、皮下、肌肉、靜脈、腹腔、淋巴結(jié) 免疫程序頸動(dòng)脈采血法：家兔、綿羊、山羊 心臟采血法： 家兔、豚鼠、大鼠、雞 靜脈采血法： 家兔、山羊、綿羊 動(dòng)物采血法28保存：短期保存冰凍保存：保存5年真空干燥保存：保存510年抗血清的保存三、單克隆抗體的制備 臨床免疫學(xué)與檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告專業(yè) 08檢驗(yàn)組別第組姓

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