SPD-20 高效液相色譜儀驗(yàn)證方案

1、 SPD-20A高效液相色譜儀確認(rèn)方案文件編號(hào): ZD-VP-06-438起草人： 起草日期： 審核人： 審核日期： 批準(zhǔn)人： 批準(zhǔn)日期： 頒發(fā)部門：驗(yàn)證委員會(huì)分發(fā)部門：質(zhì)量管理部目 錄概述3驗(yàn)證目的3驗(yàn)證依據(jù)及驗(yàn)證范圍3驗(yàn)證工作小組3驗(yàn)證方案審批3驗(yàn)證方案起草3驗(yàn)證方案會(huì)簽3驗(yàn)證方案批準(zhǔn)3驗(yàn)證方案實(shí)施3驗(yàn)證的準(zhǔn)備4文件資料的確認(rèn)4售后服務(wù)4關(guān)鍵性儀表及消耗性備品備件4安裝檢查4計(jì)算機(jī)的安裝情況檢查5安裝確認(rèn)結(jié)論及批準(zhǔn)5安裝驗(yàn)證內(nèi)容 5評(píng)價(jià)設(shè)備性能、質(zhì)量、適用性是否符合采購(gòu)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求5評(píng)價(jià)儀器的安裝條件是否符合GMP及供應(yīng)商提議的要求5起草標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程5儀器校正5運(yùn)行確認(rèn)（也即功能試驗(yàn)）5測(cè)

2、試項(xiàng)目和認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)5驗(yàn)證所需的材料5玻璃儀器設(shè)備5試劑、標(biāo)準(zhǔn)溶液5其它輔助設(shè)備5軟件系統(tǒng)安全性確認(rèn)(必要時(shí))5運(yùn)行確認(rèn)的實(shí)施6運(yùn)行確認(rèn)評(píng)價(jià)及結(jié)論7性能確認(rèn)(適用性預(yù)試驗(yàn))7擬訂再驗(yàn)證項(xiàng)目及周期7驗(yàn)證結(jié)論 7概述高效液相色譜法系采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動(dòng)相泵入裝有填充劑的色譜柱，對(duì)供試品進(jìn)行分離測(cè)定的色譜法。注入供試品，由流動(dòng)相帶入柱內(nèi)，各組分在柱內(nèi)被分離，并依次進(jìn)入檢測(cè)器，由數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和處理色譜信號(hào)，得到測(cè)定結(jié)果。由于應(yīng)用了各種特性的微粒填料和加壓的液體流動(dòng)相，本法具有分離性能高、分析速度快的特點(diǎn)。SPD-20A 高效液相色譜儀是根據(jù)質(zhì)量控制的目的和要求，在調(diào)研的基礎(chǔ)上，公司于 2009

3、年 8 月購(gòu)置的精密儀器，其生產(chǎn)廠為 日本島津 ，主要用于樣品的 含量測(cè)定 分析測(cè)試。 由 組成。 應(yīng)用軟件為 ，版本號(hào) 。驗(yàn)證目的 按照 GMP 的要求，需要對(duì)該儀器進(jìn)行安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)、性能確認(rèn)，以確定目前的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境能否滿足該儀器的正常操作和使用，儀器是否具有良好的檢測(cè)性能，能否滿足驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn)和我們?nèi)粘７治鰷y(cè)試工作的需要。驗(yàn)證范圍及驗(yàn)證依據(jù)本方案適用于對(duì)高效液相室 SPD-20A 高效液相色譜儀的驗(yàn)證。 本方案驗(yàn)證依據(jù)GB/T21187-2007高效液相色譜儀檢定規(guī)程 高效液相色譜儀操作規(guī)程驗(yàn)證工作小組組 長(zhǎng) 姓 名職務(wù)/職稱部門成 員 驗(yàn)證方案審批驗(yàn)證方案起草起草部門簽名日 期中

4、心化驗(yàn)室 質(zhì)量管理部 驗(yàn)證方案會(huì)簽部 門簽 名日 期質(zhì)量管理部質(zhì)量管理部 驗(yàn)證方案批準(zhǔn)批 準(zhǔn) 人簽 名日 期質(zhì)量管理部 驗(yàn)證方案實(shí)施實(shí)施部門職 責(zé)中心化驗(yàn)室負(fù)責(zé)儀器的安裝確認(rèn)。質(zhì)量管理部負(fù)責(zé)儀器的運(yùn)行確認(rèn)、性能的確認(rèn)。驗(yàn)證的準(zhǔn)備文件資料的確認(rèn)序號(hào)文件/資料編號(hào)存放地1設(shè)備采購(gòu)合同2原版操作說(shuō)明書 安裝手冊(cè)和維修手冊(cè)（如必要）3儀器操作規(guī)程SOP4儀器使用、維修記錄5中華人民共和國(guó)國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程 JJG694-20076儀器檔案（如必要）7中國(guó)藥典（2010版）附錄8標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書9驗(yàn)證方案結(jié)論：檢查人 檢查日期 復(fù)核人 復(fù)核日期 售后服務(wù)維修單位：聯(lián)系 ：地址： ：聯(lián)系人： 檢查人 日期 關(guān)鍵

5、性儀表及消耗性備品備件：見(jiàn)附件2 檢查人 日期 安裝檢查對(duì)照使用說(shuō)明書要求安裝，確認(rèn)環(huán)境、電源等符合要求。檢查內(nèi)容要求方法結(jié)果環(huán)境室內(nèi)不得存放與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的易燃、易爆和強(qiáng)腐蝕性的物質(zhì)，無(wú)強(qiáng)烈的機(jī)械震動(dòng)和電磁干擾。目測(cè)環(huán)境溫度1535溫濕度儀測(cè)環(huán)境相對(duì)濕度35%75%溫濕度儀測(cè)安裝位置儀器應(yīng)平穩(wěn)而牢固地安置在工作臺(tái)上按要求安裝電壓220V22V電壓儀測(cè)頻率50Hz接地接地良好接地電阻表測(cè)定電源線與插孔吻合按要求安裝氣體管路氣體管路應(yīng)適用。按要求安裝冷卻水流量充足、穩(wěn)定目測(cè) 檢查人 日期 計(jì)算機(jī)的安裝情況檢查項(xiàng) 目安裝的主要軟件文件格式安裝位置數(shù)據(jù)文件保存位置密碼復(fù)雜性工作站安裝安裝確認(rèn)結(jié)論及批準(zhǔn)結(jié)

6、論：所有物品與檢查清單相符，實(shí)驗(yàn)室電、氣設(shè)計(jì)安裝合理，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境良好，符合儀器安裝要求。氣、電及管路連接符合供貨方的要求。儀器安裝 檢查人 日期 批準(zhǔn)人 日期 安裝確認(rèn)評(píng)價(jià)設(shè)備性能 、質(zhì)量、適用性是否符合采購(gòu)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求：見(jiàn)附件3。評(píng)價(jià)儀器的安裝是否符合GMP及供應(yīng)商提議的要求查閱設(shè)備采購(gòu)定單、操作手冊(cè)等，列出設(shè)備安裝、使用所需條件，包括溫度、濕度、通風(fēng)條件、電路等。檢查儀器安裝與使用所處的環(huán)境條件，是否符合上述要求。檢查結(jié)果記錄于附件4。起草標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(可驗(yàn)證后補(bǔ)充)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程校正規(guī)程儀器校正由廠商技術(shù)人員現(xiàn)場(chǎng)安裝、調(diào)試，進(jìn)行運(yùn)行確認(rèn)前的校正。運(yùn)行確認(rèn)（功能試驗(yàn)）測(cè)試項(xiàng)目和認(rèn)

7、可標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)中華人民共和國(guó)國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程JJG694-2007、中國(guó)藥典（2010版）附錄確定。如無(wú)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，參考儀器說(shuō)明書確定。驗(yàn)證所需的材料玻璃儀器設(shè)備 計(jì)量玻璃儀器需徹底清洗并經(jīng)檢定，一般玻璃儀器要保證潔凈。試劑、標(biāo)準(zhǔn)溶液 a) 甲醇（色譜純）；純化水（0.45nm微孔濾膜過(guò)濾）b) 丙酮（色譜純）；c) 0.25mg/ml的甲硝唑?qū)φ掌?；d) 流動(dòng)相：0.3%丙酮-水；甲醇：水（20:80）。儀器a) 安捷倫1200高效液相色譜儀；b) 用于藥品預(yù)處理和衍生的各種玻璃儀器和設(shè)備。軟件系統(tǒng)安全性確認(rèn)打開(kāi)計(jì)算機(jī)開(kāi)關(guān)，待屏幕運(yùn)行 Windows xp 操作系統(tǒng)以后，由可以授權(quán)操作該儀器的檢驗(yàn)

8、員設(shè)定登陸用戶名、密碼，重新啟動(dòng)系統(tǒng)。再讓其他不知被授權(quán)人員登陸，嘗試輸入用戶名和密碼，嘗試能否進(jìn)入計(jì)算機(jī)系統(tǒng)，連續(xù)嘗試 5 次。不知用戶名和密碼的操作人，應(yīng)無(wú)法登陸計(jì)算機(jī)系統(tǒng)。結(jié) 論： 檢查人： 日期： 運(yùn)行確認(rèn)的實(shí)施儀器各單元開(kāi)機(jī)性能確認(rèn)泵及進(jìn)樣器：打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，泵及進(jìn)樣器進(jìn)行自檢，并顯示主畫面。檢測(cè)器：打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，檢測(cè)器燈打開(kāi)，并進(jìn)行自檢6min，氘燈在三個(gè)內(nèi)置波長(zhǎng)257nm、521nm、656nm處校準(zhǔn)，若偏差小于1nm，自檢通過(guò)，若大于1nm，出現(xiàn)自檢錯(cuò)誤提示。泵流量設(shè)定值誤差和流量穩(wěn)定性誤差的確認(rèn)250mm；溫度：室溫。 b)測(cè)試方法：?jiǎn)?dòng)儀器，以水作為流動(dòng)相，待壓力穩(wěn)定后，在流

9、動(dòng)相出口處用稱重過(guò)的10ml容量瓶收集流動(dòng)相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，收收集五分鐘流出的流動(dòng)相，精密稱定，每個(gè)流速測(cè)定三次，記錄測(cè)試溫度，按下列計(jì)算流量設(shè)定值誤差S1和穩(wěn)定性誤差S2。 SS = (Fm -Fs) / Fs100%SR =（Fmax-Fmin）/100%式中：SS為泵流量設(shè)定值誤差（%）；SR為流量穩(wěn)定性誤差（%）；Fm=（W2-W1）/(t),為流量實(shí)測(cè)值（ml/min）；W2容量瓶+流動(dòng)相（g）； 3 W1容量瓶的質(zhì)量（g）；Fs流量設(shè)定值實(shí)驗(yàn)室溫度下水的密度（g/cm ）； t收集流動(dòng)相的時(shí)間（min）； 同一組測(cè)量值的算術(shù)平均值（ml/min）； Fmax同一組測(cè)量中流量最大值

10、（ml/min）； Fmin同一組測(cè)量中流量最小值（ml/min）。 c）測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)： 流量設(shè)定值F（ml/min）測(cè)量次數(shù)333收集流動(dòng)相時(shí)間（min）251510允許誤差SS5%3%3%SR3%2%2% a)測(cè)試條件： 流動(dòng)相：0.3%丙酮-水 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm 流速：1.000ml/min 柱溫：30。 b)測(cè)試方法：按下表設(shè)置梯度洗脫順序，以兩通代替色譜柱連接管路，先用超純水沖洗系統(tǒng)，待基線平穩(wěn)后開(kāi)始執(zhí)行梯度程序，畫出梯度變化曲線，測(cè)定三次，取各梯度級(jí)高度的平均值，由曲線圖測(cè)量100%B（C）梯度級(jí)平均高度各梯度級(jí)實(shí)際體積%，每個(gè)梯級(jí)的理論體積%和實(shí)際體積%之差即為梯度準(zhǔn)確度，以最大

11、差值為梯度準(zhǔn)確度誤差。 梯度洗脫表時(shí)間A通道（C通道）：超純水B通道（D通道）：0.3%丙酮水溶液100%0%100%0%0%100%0%100%20%80%20%80%40%60%40%60%60%40%60%40%80%20%80%20%100%0%24min100%0%c)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)：梯度準(zhǔn)確度誤差1%。a)測(cè)試條件： 色譜柱：C18色譜柱 檢測(cè)波長(zhǎng)：320nm 進(jìn)樣量：20 柱溫：37b)測(cè)試方法： 對(duì)照品置于進(jìn)樣瓶，共進(jìn)樣6針，記錄峰面積，求6針RSD。c）測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)：RSD1.5% a)測(cè)試條件： 色譜柱：C18色譜柱 檢測(cè)波長(zhǎng)：320nm 進(jìn)樣量：（1、5、10、15、20） 柱溫：

12、37 b)測(cè)試方法：對(duì)照品置于進(jìn)樣瓶，不同進(jìn)樣量各進(jìn)一針，記錄峰面積，求進(jìn)樣量與峰面積的相關(guān)系數(shù)。 c）測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)：相關(guān)系數(shù)r 以水流過(guò)流通池做一空白掃描，然后以手動(dòng)的方式將甲硝唑?qū)φ掌酚盟♂?0倍后注入流通池，掃描250nm-400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸收情況，得到甲硝唑溶液在紫外可見(jiàn)光區(qū)的吸收光譜曲線。記錄其在275nm、300nm、320nm、350nm附近波長(zhǎng)處的最大或最小吸收波長(zhǎng)，分別找出各點(diǎn)最大或最小波長(zhǎng)與標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)之差即為波長(zhǎng)示值誤差；重復(fù)測(cè)定三次，各點(diǎn)最小與最大之差即為波長(zhǎng)重復(fù)性誤差。檢測(cè)器波長(zhǎng)的示值誤差1和重復(fù)性誤差2 波長(zhǎng)275nm附近（max）300nm附近(min)320nm

13、附近(max)350nm附近(min)實(shí)測(cè)波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)272nm302nm320nm360nm測(cè)定次數(shù)3333示值誤差1重復(fù)性誤差2a) 測(cè)試條件： 色譜柱：C18色譜柱 檢測(cè)波長(zhǎng)：320nm 進(jìn)樣量：20 柱溫：37b)測(cè)試方法： 將儀器各部分連接好，開(kāi)機(jī)，記錄基線30-40分鐘，計(jì)算基線漂移和噪聲。 c）測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)：基線噪聲：10-4AU；基線漂移：10-4AU/hr。a)測(cè)試條件：流動(dòng)相：甲醇-水（20:80） 對(duì)照品：（5、10、25、50、100）g/ml咖啡因?qū)φ杖芤?色譜柱：C18色譜柱 檢測(cè)波長(zhǎng)：320nm 進(jìn)樣量：20 柱溫：37b)測(cè)試方法： 5個(gè)濃度對(duì)照品置于不同進(jìn)樣瓶中，

14、各進(jìn)一針，記錄峰面積，求個(gè)對(duì)照品濃度與峰面積的相關(guān)系數(shù) c）測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)：相關(guān)系數(shù)r a)測(cè)試條件： 流動(dòng)相：甲醇-水（20:80） 對(duì)照品：110-7g/ml甲硝唑?qū)φ杖芤?色譜柱：C18色譜柱 檢測(cè)波長(zhǎng)：320nm 進(jìn)樣量：20 柱溫：37 b)測(cè)試方法： 以流動(dòng)相沖洗系統(tǒng)至基線平穩(wěn)后，進(jìn)樣，記錄色譜圖，由色譜圖峰高及基線噪音，按下式計(jì)算最 小檢測(cè)濃度CC = 2N C H 式中：C最小檢測(cè)濃度，g/ml N基線噪音峰度，mAU C標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/ml H標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜峰高，mAU c）測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)：110-8g/ml咖啡因溶液。8.4.9 運(yùn)行確認(rèn)評(píng)價(jià)及結(jié)論9. 性能確認(rèn)(適用性試驗(yàn))9.1檢查

15、項(xiàng)目：甲硝唑氯化鈉注射液中甲硝唑含量的測(cè)定。9.2 檢查的目的和標(biāo)準(zhǔn)：檢查儀器在測(cè)試供試品的過(guò)程中，含量測(cè)定的相對(duì)偏差。檢查依據(jù)為中國(guó)藥典2010年版二部。9.3驗(yàn)證所需要的材料和儀器（同運(yùn)行確認(rèn)）。 a)測(cè)定條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水（20:80）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為320nm，溫度為37，理論板數(shù)按甲硝唑計(jì)算不得少于2000。b)對(duì)照品溶液的配制：精密稱定甲硝唑?qū)φ掌芳s25 mg，精密稱定，置于100ml容量瓶中，加流動(dòng)相（甲醇-水（20:80）溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液（0.25mg/ml）。c）供試品溶液的制備：精密量取本品5ml置100ml容量瓶中，加

16、流動(dòng)相（甲醇-水（20:80）稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液（0.25mg/ml）。 d）測(cè)定：精密量取對(duì)照品和供試品各20l注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。 甲硝唑（C6H9N3O3）+=+=+=%= A樣C標(biāo) A標(biāo)C樣式中： A樣 為供試品的峰面積； A標(biāo) 為對(duì)照品的峰面積； C樣 為供試品的濃度； C標(biāo) 為對(duì)照品的濃度。 e）測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)：含甲硝唑應(yīng)為標(biāo)示量的93.0%107.0%。 10. 擬訂再驗(yàn)證項(xiàng)目及周期設(shè)備動(dòng)力、質(zhì)量部根據(jù)設(shè)備儀器情況，確定再驗(yàn)證周期項(xiàng)目及周期（附件6），報(bào)驗(yàn)證委員會(huì)審核。11.驗(yàn)證評(píng)價(jià)及結(jié)論（附件5）附件：1驗(yàn)證方案申請(qǐng)及批準(zhǔn)書（附件

17、1）2關(guān)鍵性儀表及消耗性備品情況（附件2）3儀器組成信息及性能、質(zhì)量及適用性評(píng)價(jià)表（附件3）4儀器安裝條件檢查記錄（附件4）5驗(yàn)證評(píng)價(jià)及結(jié)論（附件5）6再驗(yàn)證項(xiàng)目及周期（附件6）7驗(yàn)證證書（附件7）附件1. 儀器驗(yàn)證方案申請(qǐng)及批準(zhǔn)書驗(yàn)證方案名稱島津SPD-20A高效液相色譜儀驗(yàn)證方案擬驗(yàn)證時(shí)間驗(yàn)證方案號(hào)放置地點(diǎn)精密儀器室驗(yàn)證負(fù)責(zé)人驗(yàn)證參加人員驗(yàn)證內(nèi)容（參數(shù)）驗(yàn)證依據(jù)驗(yàn)證方案（輔助資源） 起草人 部門 年 月 日驗(yàn)證委員會(huì)審 批 驗(yàn)證委員會(huì)： 年 月 日附件2.關(guān)鍵性設(shè)備及消耗性備品情況儀器名稱高效液相色譜儀型 號(hào)島津SPD-20A制造廠商儀器編號(hào)生產(chǎn)日期企業(yè)編號(hào)使用部門中心化驗(yàn)室放置地點(diǎn)高效液

18、相室關(guān)鍵性設(shè)備設(shè)備名稱生產(chǎn)廠家或型號(hào)校正證書編號(hào)保存處校正周期消耗性備品品 名生產(chǎn)廠家和型號(hào)單 位數(shù) 量保存處確認(rèn)使用部門 年 月 日質(zhì)量管理部 年 月 日質(zhì)量管理部 年 月 日附件3. 儀器組成信息及性能、質(zhì)量及適用性評(píng)價(jià)表儀器名稱高效液相色譜儀型 號(hào)島津SPD-20A 制造廠商儀器編號(hào)生產(chǎn)日期企業(yè)編號(hào)使用部門質(zhì)檢中心放置地點(diǎn)精密儀器室主機(jī)輔件性能質(zhì)量要求評(píng)價(jià)結(jié)果確認(rèn)使用部門 年 月 日質(zhì)量管理部 年 月 日驗(yàn)證委員會(huì) 年 月 日附件4.儀器安裝條件檢查記錄儀器名稱高效液相色譜儀型 號(hào) 島津SPD-20A制造廠商儀器編號(hào)生產(chǎn)日期企業(yè)編號(hào)使用部門放置地點(diǎn)高效液相室設(shè)備條件要求實(shí)際條件溫度1535濕度35%75%電壓220V22V其它條件工作臺(tái)不受陽(yáng)光直射。室內(nèi)應(yīng)無(wú)腐蝕性氣體或其它影響測(cè)定的氣體干擾。周圍應(yīng)無(wú)影響測(cè)定的強(qiáng)電場(chǎng)、磁場(chǎng)周圍應(yīng)無(wú)強(qiáng)烈震動(dòng)。排風(fēng)裝置良好確認(rèn)使用部門 年 月 日質(zhì)量管理部 年 月 日驗(yàn)證委員會(huì) 年 月 日附件5.驗(yàn) 證 記 錄（參考）驗(yàn)證對(duì)象 島津SPD-20A高效液相色譜儀驗(yàn)證時(shí)間驗(yàn)證方法驗(yàn)證編號(hào)溫度相對(duì)濕度驗(yàn)證方法描述：驗(yàn)證記錄：序號(hào) 檢測(cè)參數(shù) 參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)值 檢測(cè)結(jié)果 （或前次檢測(cè)結(jié)果）檢測(cè)： 年 月 日 年 月 日數(shù)據(jù)分析處理： 分析人： 年 月 日驗(yàn)證評(píng)價(jià)及結(jié)論 負(fù)責(zé)人： 年 月 日備注：附件6.再驗(yàn)證項(xiàng)目及周期設(shè)備編號(hào)設(shè)備名稱高效液相色譜儀型號(hào)