腫瘤免疫以及其免疫檢測

1、關(guān)于腫瘤免疫及其免疫檢測第一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月思考題小結(jié)第一節(jié) 腫瘤抗原 一、根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類 二、根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機制分類第二節(jié) 機體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機制 一、抗腫瘤的細胞免疫機制 二、抗腫瘤的體液免疫機制第三節(jié) 腫瘤免疫學(xué)檢驗 一、腫瘤標(biāo)志物 二、腫瘤患者免疫功能狀態(tài)的檢測及臨床意義第二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 腫瘤免疫學(xué)( tumor immunology)是研究腫瘤抗原性質(zhì)、機體對腫瘤的免疫應(yīng)答、機體免疫功能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的相互關(guān)系以及腫瘤免疫學(xué)診斷和免疫學(xué)防治的科學(xué)。第三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 腫瘤抗原 腫瘤抗

2、原（tumor antigen）是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過度表達的抗原物質(zhì)。第四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月機體產(chǎn)生腫瘤抗原的可能機制為： 基因突變； 細胞癌變過程使原本不表達的某些基因被激活； 抗原合成過程的某些環(huán)節(jié)發(fā)生異常，如糖基化異常； 胚胎時期抗原或分化抗原的異常、異位表達； 某些基因產(chǎn)物尤其是信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的過度表達； 外源性基因（如病毒基因）的表達。第五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月1腫瘤特異性抗原（tumor specific antigen, TSA） 是腫瘤細胞所特有的新抗原，它只表達于腫瘤細胞，而不存在于正常組織細胞。2腫瘤相關(guān)性抗原 ( t

3、umor associated antigen, TAA) 是指非腫瘤細胞所特有的，正常組織或細胞也可表達的抗原物質(zhì)，但此類抗原在癌變細胞的表達水平遠遠超過正常細胞。一、根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類第六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月1理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原2病毒誘生的腫瘤抗原3自發(fā)性腫瘤抗原4正常細胞成分的異常表達 分化抗原： 過度表達的抗原： 胚胎抗原： 細胞突變產(chǎn)生的獨特型抗原：二、根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機制分類第七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月病毒誘生的腫瘤抗原第八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 第二節(jié) 機體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機制 機體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)十分復(fù)雜，涉及

4、特異性和非特異性抗腫瘤機制相互交錯，體液免疫與細胞免疫機制相互協(xié)調(diào)和補充，從而共同執(zhí)行免疫監(jiān)視功能。第九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 T細胞 1. CD4+T細胞 2. CD8+T細胞(在抗腫瘤效應(yīng)中起關(guān)鍵作用) 3. + T細胞 NK細胞 巨噬細胞一、抗腫瘤的細胞免疫機制第十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 1補體的溶細胞效應(yīng) 2抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒效應(yīng) 3抗體的免疫調(diào)理作用 4抗體封閉腫瘤細胞表面某些受體 5抗體干擾腫瘤細胞粘附作用 6其他機制 二、抗腫瘤的體液免疫機制第十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 腫瘤免疫學(xué)檢驗 腫瘤免疫學(xué)檢驗是指用免疫學(xué)

5、的方法檢測腫瘤抗原、抗體等腫瘤標(biāo)志物和腫瘤患者的免疫功能狀態(tài)，為腫瘤的診斷、觀察病情、評價療效及預(yù)后具有重要價值。 第十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 近年來隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展，免疫學(xué)，分子生物學(xué)，細胞生物學(xué)，生物化學(xué)的深入研究，發(fā)現(xiàn)了許多特異性較強，有一定臨床價值的腫瘤標(biāo)志物100多種，受到國內(nèi)外學(xué)者的高度重視。 一、腫瘤標(biāo)志物第十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 腫瘤標(biāo)志物（tumor marker，TM）是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細胞本身所產(chǎn)生的或者是由機體對腫瘤細胞反應(yīng)而產(chǎn)生的，反映腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基

6、因產(chǎn)物等?；颊哐夯蝮w液中腫瘤標(biāo)志物的檢測，對腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、療效觀察、病情監(jiān)測以及預(yù)后的評價具有一定的價值。（一）腫瘤標(biāo)志物的慨述1. 腫瘤標(biāo)志物的定義第十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月特異性好與腫瘤類型 (大小/分期) 有關(guān)靈敏度高，能腫瘤能早期發(fā)現(xiàn)。具有器官特異性監(jiān)測腫瘤治療效果監(jiān)測腫瘤的復(fù)發(fā) 理想的腫瘤標(biāo)志物預(yù)測腫瘤的預(yù)后第十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月體液腫瘤標(biāo)志物的分類和命名尚未完全統(tǒng)一，一般分為： 胚胎抗原類：如AFP，CEA等， 糖鏈抗原類：如CA125，CA15-3，CA19-9等。 激素類：如患甲狀腺髓樣癌時降鈣素升高，患絨毛膜 細胞癌時

7、hCG明顯升高。 酶和同工酶類：GT，PAP等。 蛋白質(zhì)類：2微球蛋白，鐵蛋白，本周蛋白等 癌基因產(chǎn)物類如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。2. 腫瘤標(biāo)志物的分類第十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 腫瘤的大小和腫瘤細胞的數(shù)目 腫瘤細胞合成和分泌腫瘤標(biāo)志物的速度 腫瘤組織的血液供應(yīng)好壞 腫瘤細胞是否有壞死和壞死的程度 腫瘤細胞的分化程度和腫瘤的分期 腫瘤細胞是否表達和合成腫瘤標(biāo)志物 腫瘤標(biāo)志物在體內(nèi)的降解和排泄速度3. 影響血液和體液中腫瘤標(biāo)志物濃度的因素第十七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 4. 腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用 高危人群的篩查 腫瘤的輔助診斷 腫

8、瘤治療效果的評價 腫瘤復(fù)發(fā)的監(jiān)測和預(yù)后判斷第十八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月1. 胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物（二）常見腫瘤標(biāo)志物 甲胎蛋白（-fetoprotein，AFP） AFP是胎兒發(fā)育早期合成的一種糖蛋白(1球蛋白)，分子量70kD，胎兒出生后不久即逐漸消失。參考值：血清AFP 300g/L，但有部分患者AFP始終不升高； 病毒性肝炎與肝硬化患者，血清中AFP可有不同程度的增高，但一般在300g/L以下； 生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高； 妊娠三個月后，血清AFP含量開始升高，分娩后三周恢復(fù)正常。若孕婦血清中AFP異常升高，應(yīng)考慮有胎兒神經(jīng)管缺損畸形的可能性。第

9、二十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 癌胚抗原（carcino-embryonic antigen，CEA） 結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性 惡性腫瘤也有不同程度的陽性率；在惡性腫瘤的隨訪， 病情監(jiān)測，療效評價等方面有重要價值。 腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺 部疾病也可有不同程度的升高； 吸煙者中約有33%的人CEA5g/L。1965年CEA發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中，分子量約為200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌組織以及胎兒的胃腸管組織中，故名癌胚抗原，是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物。參考值：血清CEA

10、 5.0g/L第二十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 2. 糖鏈抗原類腫瘤標(biāo)志物第二十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）糖鏈抗原15-3 ( CA 15-3) 乳腺癌，但在乳腺癌的早期陽性率較低約為30%，轉(zhuǎn)移性 乳腺癌陽性率可達80%； 其他惡性腫瘤，如肺癌，結(jié)腸癌，胰腺癌，卵巢癌，子宮 頸癌，原發(fā)性肝癌等，也有不同程度的陽性率； 肝臟，胃腸道，肺，乳腺，卵巢等非惡性腫瘤疾病，陽性 率一般低于10%。CA15-3是一種乳腺癌相關(guān)抗原，屬糖蛋白，分子量超過400kD，可用一對單克隆抗體（MAb115D8和MAbDF3）進行

11、雙抗體夾心法來識別。與CA15-3同類的多態(tài)性上皮粘蛋白抗原還有MCA，CA27-29，CA549等。參考值：血清CA15-328kU/L第二十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 （2）糖鏈抗原125 ( CA 125)CA125是很重要的卵巢癌相關(guān)抗原，1981年Bast發(fā)現(xiàn)。CA125是一種大分子多聚糖蛋白。參考值 ：血清CA 125 35kU/L 卵巢癌，陽性率約為61.4%。手術(shù)和化療有效者CA 125水平很快 下降，若有復(fù)發(fā)，CA 125升高可先于臨床癥狀出現(xiàn)之前。 其他惡性腫瘤，如乳腺癌40%，胰腺癌50%，胃癌47%，肺癌41.4%， 結(jié)腸直腸癌34.2%，其他婦科腫瘤4

12、3%。 非惡性腫瘤，如子宮內(nèi)膜異位癥，盆腔炎，卵巢囊腫，胰腺炎，肝炎， 肝硬化等疾病也有不同程度升高。 妊娠早期，CA 125有升高。第二十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）糖鏈抗原19-9 (CA19-9)CA19-9是一種與胰腺癌，膽囊癌，結(jié)腸癌和胃癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，又稱胃腸癌相關(guān)抗原。參考值：血清CA199 37 kU/L 胰腺癌，膽囊癌，膽管壺腹癌時，血清CA 19-9水平明顯升高， 陽性率約為74.9%，尤其是胰腺癌晚期病人，血清CA 19-9濃度 可達40萬kU/L，是重要的輔助診斷指標(biāo)； 胃癌，陽性率約為50%，結(jié)腸癌，陽性率約為60%； 急性胰腺炎，膽囊炎，膽汁

13、淤積性膽管炎，肝硬化，肝炎等 疾病，CA 19-9也有不同程度的升高，注意與惡性腫瘤的鑒別。第二十七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 3. 酶類腫瘤標(biāo)志物第二十八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 前列腺特異性抗原 (PSA) 參考值：血清 t-PSA 4.0 g/L， f-PSA 25PSA是一種由前列腺上皮細胞分泌的蛋白酶。在血清中PSA以兩種生化形式存在： 一部分(5%40%)是以低分子量(33kD)的 游離PSA（f-PSA）形式存在； 大部分(60%90%)是以PSA和1抗糜蛋白酶、 2-巨球蛋白等結(jié)合的形式存在， 稱復(fù)合PSA(c-PSA)。 總PSA（t-PSA）,

14、包括血清中f-PSA和c-PSA。第二十九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 【注意事項】在采集病人的血標(biāo)本前進行直腸指診、前列腺按摩，導(dǎo)尿等，將會導(dǎo)致血清PSA升高，應(yīng)注意避免。血清PSA升高 前列腺癌患者升高，但大約25%患者，其PSA水平正常；而大約有50%的良性前列腺疾病患者PSA水平增高。為增加PSA對前列腺癌 檢測的敏感性和特異性，可使用PSA年齡特異性參考范圍，PSA密度、PSA速率、f-PSA/t-PSA比值等； 前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系統(tǒng)的疾病，也可見血清PSA水平升高，故當(dāng)PSA在4.0g/L10.0g/L的灰區(qū)時，須進行f-PSA和 f-PSA/t-PSA比

15、值的測定。第三十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 NSE是烯醇化酶的一種同功酶，烯醇化酶同功酶根據(jù)，三個亞基的不同，可分為、和五種二聚體同功酶。 亞基組成的同功酶屬神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細胞特有，故命名為神經(jīng)元特異性烯醇化酶， NSE是一種酸性蛋白酶，參與糖酵解。腫癌組織糖酵解作用加強，細胞增殖周期加快，細胞內(nèi)的NSE釋放進入血液增多，導(dǎo)致此酶在血清內(nèi)含量增高。 參考值：血清NSE15g/L 神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）第三十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月【注意事項】NSE也存在于正常紅細胞中，標(biāo)本溶血會影響測定結(jié)果，因此采血時

16、要特別注意避免溶血。血清NSE升高見于 小細胞肺癌（SCLC）。可用于鑒別診斷，監(jiān)測小細胞肺癌放療、化療后的治療效果。 神經(jīng)母細胞瘤，患者NSE水平異常增高， 而Wilms瘤則升高不明顯，因此測定NSE的水平可用于上述疾病的診斷和鑒別診斷。 神經(jīng)內(nèi)分泌細胞腫瘤，如嗜鉻細胞瘤，胰島細胞瘤，甲狀腺髓樣癌，黑色素瘤，視網(wǎng)膜母細胞瘤等血清NSE也可增高。第三十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 AFU是一種溶酶體酸性水解酶，以往主要用于遺傳性AFU缺乏引起的巖藻糖貯積病的診斷。Deugnier等（1984）首先發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌患者血清中AFU活性升高。參考值 ：血清 420 mol/L -L-巖

17、藻糖苷酶測定（AFU） 原發(fā)性肝癌，患者血清中AFU活性明顯升高，AFP陰性的肝癌患者中AFU也可見升高，因此，兩者聯(lián)合檢測有較好的互補作用。 其他惡性腫瘤，如肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮癌等也可有部分病例升高。 慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高，隨病情好轉(zhuǎn)AFU下降，動態(tài)監(jiān)測有助于與肝癌的鑒別。 妊娠期間，AFU升高，分娩后迅速下降。第三十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 4. 激素類腫瘤標(biāo)志物第三十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 hCG是胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白類激素，是監(jiān)測早孕的重要指標(biāo)。在異常情況下，惡性腫瘤也可產(chǎn)生hCG。參考值上限為: 5 IU/L

18、 人絨毛膜促性腺激素 (hCG) 滋養(yǎng)層腫瘤和生殖細胞腫瘤hCG升高，如絨毛膜細胞癌、 葡萄胎、精原細胞睪丸癌等 其他腫瘤如乳腺癌、胃腸道癌、肺癌等也可見升高。 良性疾病如卵巢囊腫、子宮內(nèi)膜異位癥、肝硬化等hCG 也可見增高。第三十六張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月CT是由甲狀腺濾泡旁細胞即C細胞分泌的多肽激素，主要生理作用是降低血鈣。參考值100 ng/L 降鈣素（calcitonin, CT） 甲狀腺髓樣癌血清降鈣素升高，其他腫瘤如肺癌、 乳腺癌、胰腺癌等也見增高。 腎功能衰竭患者降鈣素常升高?！咀⒁馐马棥坑捎诮碘}素在血液中的半壽期短約為 10min，樣本收集后應(yīng)及時處理，冷凍保存

19、。第三十七張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 5. 蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物第三十八張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月2M是一種低分子蛋白，人體除成熟紅細胞和胎盤滋養(yǎng)層細胞以外，所有的有核細胞都有2M。因為2M分子量小，易于由腎小球濾過，但幾乎全部由近曲小管重吸收，因此正常人血和尿中2M含量很低。參考值：血清 2.4mg/L；尿 320g/L 2-微球蛋白( 2M ) 2M升高見于: 惡性腫瘤，慢性淋巴細胞白血病等。 腎臟疾?。杭甭阅I盂腎炎，腎小管藥物性損害等 腎移植排斥反應(yīng)時。 免疫性疾病：系統(tǒng)性紅斑性狼瘡，艾滋病等?！咀⒁馐马棥磕驑?biāo)本采集后，為避免2M分解，應(yīng)加適當(dāng)?shù)?NaOH緩沖

20、液調(diào)PH至7.0左右，然后置4保存，2天內(nèi)測定。第三十九張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月鐵蛋白是判斷體內(nèi)是否缺鐵的敏感指標(biāo)。 Fer升高還與腫瘤有關(guān)，癌細胞具有較強合成鐵蛋白的能力，因此也是一種腫瘤標(biāo)志物。 血清參考值：男性 15200 g/L 女性 12150 g/L 鐵蛋白（ ferritin , Fer) 各種惡性腫瘤和白血病可見血清鐵蛋白升高。 各種炎癥感染、急性心肌梗死、反復(fù)輸血等，見鐵蛋白升高。 鐵蛋白 12 g/L 時即可診斷為缺鐵。是診斷隱性缺鐵性貧血的可靠指標(biāo)。第四十張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月腫瘤標(biāo)志物 參考值 相關(guān)腫瘤CA 50 24 kU/L 胰腺癌

21、、結(jié)腸癌、胃癌等 CA 72-4 6 kU /L 胃癌、粘液性卵巢癌等 CA 242 20 kU /L 胰腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等 前列腺酸性磷酸酶（PAP） 2.0g /L 前列腺癌鱗狀上皮細胞癌抗原（SCC） 1.5g /L 宮頸癌、肺和頭頸部鱗癌等 組織多肽抗原（TPA） 80U/L 膀胱癌、前列腺癌、消化道 惡性腫瘤 細胞角蛋白19片段 3.3g /L 非小細胞肺癌（NSCLC）（CYFRA21-1）唾液酸 1.8 mmol/L 肺癌、胃癌、黑色素瘤等 6. 其它常用腫瘤標(biāo)志物 第四十一張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）腫瘤標(biāo)志物檢測的注意事項1. 標(biāo)本采集: 各種物理檢查對T

22、M檢測的影響藥物對TM檢測的影響標(biāo)本保存對TM檢測的影響溶血標(biāo)本對TM檢測的影響 酶類和激素類腫瘤標(biāo)志物的特點第四十二張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月2. 檢測方法和試劑： 方法學(xué)的差異 試劑盒的差異 測定標(biāo)準(zhǔn)化的問題 因此，在工作中要盡量使用同一種方法，同一種儀器和同一廠家的試劑盒進行測定。第四十三張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 3. TM檢測的干擾因素 攜帶污染 (carry-over)“鉤狀效應(yīng)”（hook effect） 嗜異性抗體：可導(dǎo)致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤 標(biāo)志物濃度增高的假象。嗜異性抗體可出現(xiàn)在曾被 鼠或?qū)櫸镆н^的人，以及使用過動物免疫劑（如單 克隆抗體）

23、治療過的人。第四十四張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月 一種腫瘤可分泌多種腫瘤標(biāo)志物，而不同的腫瘤或同種腫瘤的不同組織類型可有相同的腫瘤標(biāo)志物。因此，單獨檢測一 種腫瘤標(biāo)志物，可能會因為測定方法的敏感性不夠而出現(xiàn)假陰性，聯(lián)合檢測多種腫瘤標(biāo)志物有利于提高檢出的陽性率。為此，選擇一些特異性較高，可以互補的腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測定，對提高腫瘤的檢出率是有價值的。常用腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合使用。（四）腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合應(yīng)用第四十五張，PPT共五十頁，創(chuàng)作于2022年6月常用腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測的臨床應(yīng)用 腫瘤 首選標(biāo)志物 補充標(biāo)志物肺癌 NSE、CYFRA21-1 CEA、TPA、SCC、ACTH、降鈣素肝癌 AFP AFU、GT、CEA、ALP乳腺癌 CA15-3、CA549 CEA、hCG、降鈣素、鐵蛋白 胃癌 CA72-4 CEA、CA19-9、CA50前列腺癌