2022年專題三植物的組織培養(yǎng)技術-知識點總結

1、專題三 植物的組織培育技術 脫分化和再分化；菊花的組織培育 2 養(yǎng)分：常用的培育基是 MS固體培育基,其中含有的大量元素是 N、P、S、K、1. 細胞分化指在生物個體發(fā)育過程中,相同細胞的后代在外形、 結構和生理功能 Ca、Mg,微量元素是 Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I 、Co,它們供應了植物細胞所上顯現(xiàn)穩(wěn)固性差異的過程； 細胞分化使多細胞生物體中細胞結構和功能趨向特地 化,有利于提高各種生理功能的效率；2. 具有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細胞,都具有發(fā)育成完整個體的潛必需的無機鹽； 有機物有甘氨酸、 煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等；蔗糖供應碳源,維護細胞滲透壓； 甘氨酸、維生素等物

2、質主要是為了滿意離體植物細胞在正常代 謝途徑受到肯定影響后所產(chǎn)生的特別養(yǎng)分需求；微生物培育基以有機養(yǎng)分為主,能,叫做植物細胞的全能性； 但在生物體的生長發(fā)育過程中并未表現(xiàn)出來,這是MS培育基就需供應大量無機養(yǎng)分；由于在特定的時間和空間條件下,通過基因的挑選性表達, 形成了不同組織和器 3 激素：植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的官；3. 離體的植物組織或細胞, 在相宜條件下培育了一段時間以后, 會通過細胞分裂,關鍵性激素；使用次序試驗結果生長素細胞分裂素比值與結果形成愈傷組織, 這種由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱為植先生長素,后細胞分裂素有利于分裂但

3、不分化比值高時促根分化,抑芽形成物細胞的脫分化（去分化） ；愈傷組織連續(xù)進行培育,又可以重新分化成根或芽 等器官,這個過程叫做再分化；4. 愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)章,是一種高度液泡化的呈無定外形態(tài)的薄 壁細胞；先細胞分裂素,后生長素細胞既分裂也分化比值低時促芽分化,抑根形成同時使用分化頻率提高比值適中促進愈傷組織生長4環(huán)境條件：菊花的組織培育,一般將pH 掌握在左右,溫度掌握在1822,并且每日用日光燈照耀12h. 5. 植物組織培育技術廣泛應用在實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁衍、培育無病毒作物、 制6. 菊花組織培育的操作流程包括：配制MS固體培育基外植體的消毒接種作人工種子、培育作物新品種以及

4、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等方面；培育移栽栽培5. 影響植物組織培育的條件有材料、養(yǎng)分、激素及環(huán)境條件；7. 制備 MS固體培育基的步驟是：配置各種母液配制培育基滅菌；先將各種 1 材料：植物材料的挑選直接關系到試驗的成?。痪栈ńM織培育一般挑選未開 成分按配方比例配制成濃縮液（培育基母液）；然后在容器中加入瓊脂（加熱融花植物的莖上部新萌生的側枝作材料；一般來說, 簡單進行無性繁衍的植物簡單 化）,依次加入蔗糖、大量元素、微量元素、有機物和植物激素的母液,并用蒸進行組織培育； 選取生長旺盛嫩枝進行組培的緣由是嫩枝生理狀態(tài)好,簡單誘導 餾水定容到 1000 毫升,調劑 PH,分裝到錐形瓶中,用高壓蒸汽滅

5、菌法進行無菌處理；原生質,核位于細胞的中心（單核居中期）；隨著細胞不斷長大,細胞核由中心8. 外植體是指用于離體培育的植物器官或組織片段；取生長旺盛的嫩枝用流水 移向細胞一側（單核靠邊期） ,并分裂成 1 個生殖細胞核和 1 個花粉管細胞核,沖洗加少許洗衣粉刷洗在流水下沖洗 20min 左右無菌吸水紙吸干表面水 進而形成兩個細胞, 一個是生殖細胞, 一個是養(yǎng)分細胞； 生殖細胞將再分裂一次,分體積分數(shù)為 70%的酒精中搖動 23 次,連續(xù) 67s,無菌水中清洗用無菌 形成兩個精子（基因組成完全相同）；吸水紙吸干表面水分質量分數(shù)為 %的氯化汞溶液中 12min無菌水中至少清 4. 通過花藥培育產(chǎn)生

6、單倍體植株有兩種途徑,一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為洗 3 次,漂洗消毒液； 應留意對外植體進行表面消毒時,就要考慮藥劑的消毒效 植物,另一種是花粉在誘導培育基上先形成愈傷組織,再將其誘導分化成植株；果,又要考慮植物的耐受才能；這兩種途徑不同主要取決于培育基中激素的種類及其濃度配比；9. 接種過程中插入外植體時外形學上端朝上,每個錐形瓶接種78 個外植體,5. 胚狀體是植物體細胞組織培育過程中, 誘導產(chǎn)生的外形與受精卵發(fā)育成的胚類整個過程要求無菌操作；似的結構,有胚芽、胚根、胚軸等完整結構,就像一粒種子；10. 放在無菌箱中培育, 定期進行消毒, 保持相宜的溫度 （1822）和光照（12h）6

7、. 影響花藥培育的主要因素是材料的挑選與培育基的組成；應當選月季的初花11移栽前先打開培育瓶的封口膜,讓其在培育間生長幾日, 然后用流水清洗根 期（花粉早期的花藥比后期更簡單產(chǎn)生花粉植株；挑選單核靠邊期（花藥培育成部培育基, 將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍寶巖等環(huán)境中生活一段時間壯苗,最 功率最高）；挑選完全未開放的花蕾（有利于材料的消毒）；后進行露天栽培；7. 挑選花藥時,用醋酸洋紅法使細胞核中的染色體著色,通過鏡檢來挑選單核靠12. 外植體在培育過程中可能會被污染,緣由有外植體消毒不完全；培育基滅菌 邊期的花粉；如不易著色,需采納焙花青-鉻礬法將花粉細胞核染成藍黑色；不完全；接種中被雜菌污染

8、；錐形瓶密封性差等；8. 滅菌后的花蕾, 要在無菌條件下除去萼片和花瓣,并立刻將花藥接種到培育基月季的花藥培育 上；在剝離花藥時, 要盡量不損耗花藥 （否就接種后簡單從受傷部位長出愈傷組1. 被子植物的雄蕊包含花絲、 花藥兩部分； 花藥為囊狀結構, 內部含有很多花粉；織）,同時仍要完全去除花絲,由于與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體花粉是由花粉母細胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細胞；的形成；2. 被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)受小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段；9. 每瓶接種花藥 710 個, 溫度掌握在 25左右 , 幼小植株形成后賜予光照,培3. 在小孢子四分體時期, 4 個單倍體細胞連在一起,進入單核期時,四分體的4養(yǎng) 2030 天后, 花藥開裂長出愈傷組織或形成胚狀體；此時要將愈傷組織準時轉個單倍體細胞