常用儀器分析

1、質(zhì)譜法常用儀器分析（3）1質(zhì)譜及其應(yīng)用2R與何因素有關(guān)？何為質(zhì)譜？3偏轉(zhuǎn)程度與帶電離子質(zhì)量有關(guān)，質(zhì)量越大，偏轉(zhuǎn)越小，反之越大。4偏轉(zhuǎn)程度與帶電離子質(zhì)量有關(guān)，質(zhì)量越大，偏轉(zhuǎn)越小，反之越大。5與質(zhì)量和電荷有關(guān)600220060022006什么叫質(zhì)譜？ 樣品（Sample）M M1+ ，M2+（碎片離子或分子離子） 帶電離子在磁場(chǎng)中產(chǎn)生偏轉(zhuǎn)，（偏轉(zhuǎn)程度與帶電離子質(zhì)量有關(guān)）。從而使這些不同質(zhì)量的帶電離子分開，將這些不同質(zhì)量的離子用檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，得到質(zhì)譜圖。7SampleIntroductionIon SourceMass Analyzer+Mass Spectrometry: Mass Spectr

2、umm/z8Sample Introduction:Gas Phase (GC)Liquid Phase (LC)SolidIon Source:EI（電子轟擊源）CI（化學(xué)電離源）ESI （電噴霧離子化）FAB（快原子轟擊源)APCI(大氣壓離子源) SIMSMALDIAnalyzers:QuadrupolesSectorsIon TrapTOF9電子轟擊源（ EI ）熱電子（70eV）轟擊分子，使其電離豐富的碎片離子豐富的結(jié)構(gòu)信息“指紋”俵e- M m1m3m2作用（1）使被分析的物質(zhì)離化成正(或負(fù))離子CH4+eCH4 +2e （2）使離化的離子形成具有一定幾何形狀和一定能量的離子束10

3、 m/z 162m/z 124m/z 94 m/z 70質(zhì)荷比 / m/z m/z質(zhì)荷比11毒鼠強(qiáng)中毒者血液提取物的GS-MS圖譜A：全譜掃描方式總離子流圖；B：毒鼠強(qiáng)的質(zhì)量碎片圖；檢測(cè)分析條件：HP-1毛細(xì)管柱30m0.25mm，柱溫100（1min）20/ min280（15min），進(jìn)樣口溫度250，接口溫度280，離子源溫度230，EI電壓70ev 。 12優(yōu)點(diǎn)（1）電離效率高，離子流的強(qiáng)度能滿足測(cè)量要求（2）結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作方法（3）碎片離子多，可以提供“指紋”信息缺點(diǎn)（1）樣品必須汽化，不適用于難揮發(fā)熱不穩(wěn)定性化合物（2）某些樣品如醇類，不出現(xiàn)分子離子峰，難判別分子量 13化學(xué)電離源

4、(CI)原理把反應(yīng)氣引入電離室使之電離，然后與樣品分子進(jìn)行離子分子反應(yīng)而使樣品分子電離。有正、負(fù)兩種模式：PCI、NCI14優(yōu)點(diǎn)（1）MH+為準(zhǔn)分子離子，是偶電子離子,穩(wěn)定，MH +峰的強(qiáng)度高，便于識(shí)別分子量（2）可以用來(lái)研究離子-分子反應(yīng)缺點(diǎn)（1）樣品需汽化，因此不適應(yīng)于熱不穩(wěn)定及難揮發(fā)性化合物（2）碎片離子少，缺乏指紋信息（3）譜態(tài)隨反應(yīng)氣壓力，種類，溫度不同而不同151) LC流出液經(jīng)一毛細(xì)管,在N2的作用下霧化2）在所加的高電壓作用下，原始液滴含有的兩種極性的離子，其中一種占優(yōu)勢(shì)電噴霧離子化（ ESI ）163) 隨著溶劑蒸發(fā)（液滴表面）電場(chǎng)強(qiáng)度增強(qiáng)，離子移向（液滴）表面4) 當(dāng)達(dá)到臨

5、界電場(chǎng)時(shí)，離子發(fā)生庫(kù)侖爆炸，從液滴中噴發(fā)出來(lái)，噴發(fā)出來(lái)的離子（在電場(chǎng)作用下）引入到質(zhì)譜儀當(dāng)中電噴霧離子化（ ESI ）17特點(diǎn) 軟電離技術(shù)。通常只產(chǎn)生分子離子峰。因此可以測(cè)定熱不穩(wěn)定的極性化合物，并可直接測(cè)定混合物 多電荷離子的形成可以為分析大分子量化合物，如蛋白質(zhì)和寡核苷酸提供方便 通過(guò)調(diào)節(jié)離子源參數(shù)可以控制離子的斷裂，從而給出結(jié)構(gòu)信息（源內(nèi)CID） 電噴霧質(zhì)譜（Electrospray Ionization Mass Spectrometry, ESI-MS）18大氣壓化學(xué)電離（APCI）1) LC 餾份在霧化氣作用下進(jìn)入加熱器2) 流動(dòng)相蒸發(fā)3) 高壓放電，帶質(zhì)子的溶劑離子化 （反應(yīng)離子

6、）4) 樣品和反應(yīng)離子反應(yīng)產(chǎn)生質(zhì)子化分子19特點(diǎn) 軟的電離方式，只產(chǎn)生單電荷峰。適合于弱極性的小分子化合物 可快速的適合高低含量水溶液的流動(dòng)相。適合于做梯度洗脫 源內(nèi)CID可獲得結(jié)構(gòu)信息20Sample Introduction:Gas Phase (GC)Liquid Phase (LC)SolidIon Source:EI（電子轟擊源）CI（化學(xué)電離源）ESI （電噴霧離子化）FAB（快原子轟擊源)APCI(大氣壓離子源) SIMSMALDIAnalyzers:QuadrupolesSectorsIon TrapTOF21質(zhì)量分析器 將離子按質(zhì)荷比分開的部分，離子通過(guò)分析器后，按不同質(zhì)荷比

7、(M/Z)分開，相同的M/Z離子累積在一起，形成質(zhì)譜。22分類 常見(jiàn)質(zhì)量分析器:雙聚焦扇形磁場(chǎng)-電場(chǎng)串聯(lián)儀器(Sector)四極桿 (Q)離子阱（TRAP）飛行時(shí)間 (TOF)付利葉變換-離子回旋共振 (FT-ICR) 單純型，如QQQ，TOF-TOF串聯(lián)多級(jí)質(zhì)譜儀 (MS/MS) 混合型，如 Q+TOF，Q+LIT23 兩組對(duì)稱的電極加有直流電壓和射頻電壓。相對(duì)的兩個(gè)電極電壓相同，相鄰的兩個(gè)電極上電壓大小相等，極性相反。帶電粒子射入高頻電場(chǎng)中，在場(chǎng)半徑限定的空間內(nèi)振蕩。在一定的電壓和頻率下，只有一種質(zhì)荷比的離子可以通過(guò)四極桿達(dá)到檢測(cè)器，其余離子則因振幅不斷增大，撞在電極上而被“過(guò)濾”掉。四極分析器 （ Quadrupole，Q ）24 利用電壓或頻率掃描，可以檢測(cè)不同質(zhì)荷比的離子。 優(yōu)點(diǎn)是掃描速度快,比磁式質(zhì)譜價(jià)格便宜