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文檔簡介
1、.PAGE :.;PAGE 45血液常規(guī)測定一儀器法一儀器:深圳邁瑞B(yǎng)C-2600型三分群血液分析儀; 二抗凝劑: 運(yùn)用全血時(shí)常用EDTA-K2或EDTA-Na2。普通1.52.2mg可阻止1ml血液凝固。本實(shí)驗(yàn)室采用全血方式。三標(biāo)本采集及測定:1真空采集法:預(yù)備一次性采血針、消毒棉簽、75%乙醇、EDTA-K2抗凝管、壓脈帶。采血步驟:WHO引薦采血部位:患者取坐位,前臂程度伸直,暴露穿刺部位,選擇容易固定、明顯可見的肘部靜脈。,用75%乙醇棉簽自靜脈穿刺部位從內(nèi)向外、順時(shí)針方向消毒皮膚,待干。在采血部位上端6cm扎壓脈帶,使靜脈充盈暴露。穿刺時(shí),針頭與皮膚成30度角快速刺入皮膚,然后以5度
2、角向前穿破靜脈壁進(jìn)入靜脈腔。充分混勻抗凝管內(nèi)的血液。采血終了,用干棉簽壓住傷口,止血片刻。本卷須知:1假設(shè)患者正在進(jìn)展靜脈輸液、輸血,不宜在同側(cè)手臂采血。2在采血過程中,該當(dāng)防止導(dǎo)致溶血的要素。3嚴(yán)厲按照無菌技術(shù)操作,防止患者采血部位感染,保證一人一針一管一墊一消毒,杜絕交叉感染。4取血清標(biāo)本時(shí)防止震蕩,防止紅細(xì)胞破裂呵斥溶血。 測定:采血完成后待5-10分鐘即可上機(jī)測定。四血液分析儀測定原理1、白細(xì)胞分析:在進(jìn)展白細(xì)胞體積分析時(shí),儀器計(jì)算機(jī)部分可以將白細(xì)胞體積從35450fl分為256個(gè)通道,每個(gè)通道為1.64fl,細(xì)胞根據(jù)其大小被分別放在不同的通道中,從而得到白細(xì)胞體積分布的直方圖。經(jīng)過溶
3、血?jiǎng)┨幹煤蟮陌准?xì)胞可以根據(jù)體積大小初步確認(rèn)其相應(yīng)的細(xì)胞群:第一群35160fl是小細(xì)胞區(qū),主要是淋巴細(xì)胞。第二群90160fl是單個(gè)細(xì)胞區(qū),也被稱為中間細(xì)胞,包括單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、核向左移或白血病可有的各階段幼稚細(xì)胞及白血病細(xì)胞。第三群 160fl以上是大細(xì)胞區(qū),主要是中性粒細(xì)胞。儀器根據(jù)各亞群占總體的比例計(jì)算出各亞群的百分率,假設(shè)與該標(biāo)本的白細(xì)胞總數(shù)相乘,即得到各類細(xì)胞的絕對值。2、紅細(xì)胞分析:紅細(xì)胞數(shù)和紅細(xì)胞壓積:紅細(xì)胞經(jīng)過小孔時(shí),構(gòu)成相應(yīng)大小的脈沖,脈沖的多少即紅細(xì)胞的數(shù)目,脈沖的高度代表單個(gè)脈沖細(xì)胞的體積。脈沖高度疊加經(jīng)換算即可得紅細(xì)胞得壓積。稀釋的血液進(jìn)入紅細(xì)胞檢
4、測通道時(shí),其中含有白細(xì)胞,因此,紅細(xì)胞檢測的各項(xiàng)參數(shù)均含有白細(xì)胞要素,但正常血液有構(gòu)成分中白細(xì)胞比例很少,故其影響可忽略不計(jì)。在某些病理情況下,如白血病,白細(xì)胞數(shù)明顯添加而又伴嚴(yán)重貧血時(shí),即可使所得各項(xiàng)參數(shù)產(chǎn)生明顯差別。根據(jù)所測單個(gè)紅細(xì)胞體積及一樣體積細(xì)胞占總體得比例,可打印出紅細(xì)胞體積分布直方圖。3、血紅蛋白含量測定:被稀釋的血液參與溶血?jiǎng)┖?,紅細(xì)胞溶解,釋放血紅蛋白,后者與溶血?jiǎng)┙Y(jié)合構(gòu)成血紅蛋白衍生物,進(jìn)入血紅蛋白檢測系統(tǒng),在特定波長普通530550nm下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成比例,儀器便可顯示Hb濃度。4、各項(xiàng)紅細(xì)胞指數(shù)檢測:MCV、MCH、MCHC及RDW均是根據(jù)儀器檢測
5、的紅細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞壓積和血紅蛋白含量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),經(jīng)內(nèi)存電腦換算出來的。5、血小板分析:血小板計(jì)數(shù)直方圖范圍為220fl,不同儀器血小板直方圖的范圍不一,MPV就是此平整曲線所含的群體算術(shù)平均體積,所以,MPV也就是PLT大小分布直方圖的產(chǎn)物。五、各項(xiàng)參數(shù)代號、參考范圍及臨床意義稱號正常參考值臨床意義RBC男:4.0-5.5*1012/L女:3.5-5.0*1012/L添加:RBC增多癥、先天性心臟病、脫水、缺氧減少:各種緣由的貧血、白血病、大手術(shù)后、失血、缺血MCV80-100fl添加與降低應(yīng)與MCH、MCHC結(jié)合判別貧血類型RDW11.0-14.5%添加用于缺鐵性貧血與地中海貧血的鑒別MPV
6、6.0-11.5fl鑒別血小板減少病因和血小板分布直方圖一同有利于骨髓增生性疾病,與反響性血小板增多的鑒別;出血性疾病的診斷。PCT0.060.4%與血小板添加或減少性疾病有關(guān)PDW91312/L與血小板破壞增多的疾病有關(guān)WBC3.29.7*109/L添加:化膿性炎癥、高熱、組織損傷、術(shù)后、白血病減少:傷寒、再障、病毒性感染、放療化療后HCT35.0-50.0%減低:各類貧血及紅細(xì)胞數(shù)量減少時(shí)有不同程度降低MCH28.0-32.0pg與MCV一同作為貧血類型的診斷MCHC320360g/L同上 LY0.8-4.0 20-40*109/LGR添加:化膿性感染、術(shù)后、急性出血、尿毒癥、粒細(xì)胞性白血
7、病降低、傳染病、LY減少急性期、放射病、細(xì)胞免疫缺陷等GR減少:傷寒、流感、放療化療、再障、粒細(xì)胞缺乏癥、LY添加:結(jié)核、傳染性肝炎、慢性淋巴細(xì)胞白血病、傳單等GR2.0-7.550-70*109/L MID0.1-1.03-10*109/L六、血細(xì)胞體積分布直方圖的運(yùn)用:1、紅細(xì)胞體積分布直方圖:將MCV和RDW配合直方圖分析,可直接察看紅細(xì)胞體積的分布情況。只現(xiàn)一個(gè)峰:見于正常人、缺鐵性貧血峰左移、巨幼細(xì)胞性貧血峰右移??涩F(xiàn)兩個(gè)峰:缺鐵性貧血給予鐵劑治療有效時(shí),可出現(xiàn)一個(gè)小紅細(xì)胞峰和另一個(gè)正紅細(xì)胞或網(wǎng)織紅細(xì)胞峰。巨幼細(xì)胞性貧血給予葉酸、維生素B12治療有效時(shí)也可見兩個(gè)峰。2、白細(xì)胞體積分布
8、直方圖:正常人白細(xì)胞體積分布直方圖,可見兩個(gè)明顯分別的峰,左峰為小細(xì)胞群淋巴細(xì)胞,右峰為大細(xì)胞群粒細(xì)胞,兩峰之間為中間細(xì)胞分布。急性白血病時(shí),由于異常的原始、幼稚細(xì)胞增多,可見中間細(xì)胞明顯增高,這時(shí)直方圖上見一個(gè)峰,峰值常在90160fl之間。這時(shí)必需推片染色鏡檢。3、血小板體積分布直方圖:正常人血小板體積主要分布在220fl之間,2130fl之間有少量血小板,普通儀器以30fl為最大的分析界標(biāo)。血小板體積增大時(shí),直方圖會出現(xiàn)明顯拖尾景象。有小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片干擾時(shí),直方圖尾部會抬高。七質(zhì)量保證:一人員1、操作人員上崗前的培訓(xùn):2、上崗前要接受良好的培訓(xùn)。要對儀器的原理、操作規(guī)程、運(yùn)用本卷須
9、知、異常報(bào)警的含義、引起實(shí)驗(yàn)誤差的要素及如何維護(hù)要有充分的了解,掌握用ICSH引薦的規(guī)范方法校正儀器的每一個(gè)測試參數(shù)的程序。3、留意在分析前、中、后每一步的質(zhì)量控制,留意病人生理或病理要素給實(shí)驗(yàn)呵斥的誤差或服用藥物的干擾作用。根據(jù)質(zhì)控圖的變化及時(shí)進(jìn)展儀器的調(diào)試。測試后要根據(jù)臨床診斷、直方圖變化、各項(xiàng)參數(shù)的關(guān)系,確認(rèn)無誤后方能發(fā)出報(bào)告。二儀器應(yīng)留意的問題1、機(jī)器應(yīng)防止直接與水接觸,防止過度的大氣壓力,防止過高的溫度及濕度。2、機(jī)器應(yīng)放置程度,在搬運(yùn)過程中應(yīng)防止搖動(dòng)和機(jī)械碰撞。3、當(dāng)出現(xiàn)警告信號時(shí),得到的數(shù)據(jù)是不正確的,特別是當(dāng)“!出現(xiàn)時(shí),不要運(yùn)用帶有警告信號的數(shù)據(jù)。4、定期校正儀器,以保證發(fā)出報(bào)
10、告的質(zhì)量。三操作人員在分析中應(yīng)留意的幾個(gè)問題:1、血液放置時(shí)間應(yīng)在510分鐘方可進(jìn)展檢驗(yàn),以免影響血小板抽取時(shí)盡量防止擠壓,破壞。2、測試時(shí)試劑的溫度對結(jié)果的影響:血液分析儀細(xì)胞計(jì)數(shù)最適溫度為1822OC,低于15 OC、高于30 OC,均對結(jié)果有影響。3、儀器運(yùn)用人員每天早晨應(yīng)做空白計(jì)數(shù),有條件時(shí)做室內(nèi)質(zhì)控,看儀器能否在正常形狀下,每天下班前,沖洗23次,每周或每1000個(gè)標(biāo)本改換過濾網(wǎng)。4、儀器的半堵孔景象:根據(jù)檢測器上微孔堵塞的程度,通常分為完全堵孔和不完全堵孔兩種。如發(fā)生完全堵孔,血細(xì)胞不能經(jīng)過微孔計(jì)數(shù),也不顯示結(jié)果,有的儀器還同時(shí)在屏幕上顯示“clog,所以完全堵孔較容易判別。不完全
11、堵孔主要經(jīng)過下述方法判別:察看計(jì)數(shù)時(shí)間;察看示波器波形;看計(jì)數(shù)指示燈閃爍,如該燈閃爍無規(guī)律常是不完全堵孔的表現(xiàn)。5、由于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴系統(tǒng)增殖性疾病、轉(zhuǎn)移瘤、本身免疫性疾病、感染及某些緣由不明疾病血中含有冷球蛋白;骨髓瘤、癌癥、白血病、妊娠、血栓疾病、糖尿病患者血中存有冷纖維蛋白,可使血液中非晶體物質(zhì)聚集,因此導(dǎo)致血細(xì)胞計(jì)數(shù)值增高。此時(shí),將稀釋標(biāo)本放37度水浴,10分鐘后立刻計(jì)數(shù)可消除此影響。6、血液中白細(xì)胞增高影響紅細(xì)胞計(jì)數(shù),或有核紅細(xì)胞出現(xiàn)影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)。7、低色素貧血或紅細(xì)胞內(nèi)含有大量HbS或HbCO,某些新生兒或某些肝病患者,紅細(xì)胞膜質(zhì)類異常,都具有抵抗溶血?jiǎng)┳饔?,?dǎo)
12、致紅細(xì)胞溶血不完全。8、M蛋白增多時(shí),在PH低的情況下M蛋白可與溶血?jiǎng)┌l(fā)生反響,使結(jié)果偏高。9、各種病因引起的血栓前形狀使血小板易于聚集。10、高血脂癥可使Hb假性升高,進(jìn)而導(dǎo)致MCH和MCHC的測定偏向。11、大量宏大血小板或小紅細(xì)胞的存在,影響血小板和紅細(xì)胞的檢查。血 型 鑒 定. ABO血型鑒定原理:根據(jù)紅細(xì)胞上有無A抗原或B抗原,將血型分為A型、B型、AB 型及O型四種,可利用紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn),經(jīng)過正反定型準(zhǔn)確鑒定A、B、O血型。所謂正定型,是用知抗-A和抗-B分型血清來測定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的A抗原/和B抗原;所謂反定型,是用知A細(xì)胞和B細(xì)胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗-A/和抗-B。二試劑
13、和資料:抗-AB型、抗-BA型及抗A+BO型分型血清。受檢者5%紅細(xì)胞鹽水懸液。三方法:玻片法常用:正定型:取干凈玻片一張或白凈板一塊,用蠟筆劃成圓圈,標(biāo)明抗A、抗B;分別滴加抗A、抗B分型血清1滴于標(biāo)明的圓圈內(nèi),再各加受檢者2%紅細(xì)胞懸液1滴或全血10ul,混合均勻,5min內(nèi)察看結(jié)果。結(jié)果察看:將玻片不斷悄然搖動(dòng),使血清與細(xì)胞充分混勻,延續(xù)15分鐘,以肉眼察看有無凝集溶血反響,如以玻片做實(shí)驗(yàn)時(shí),也可用低倍鏡察看結(jié)果。結(jié)果斷定:A、B、O血型正反定型結(jié)果分型血清+受檢者紅細(xì)胞受檢者血型受檢者血清+試劑紅細(xì)胞抗-A 抗-B 抗-A+B A細(xì)胞 B細(xì)胞 O細(xì)胞 + - + A - + - - +
14、 + B + - - - - - O + + - + + + AB - - -四本卷須知:分型血清質(zhì)量性能符合要求,用完后應(yīng)放冰箱保管,以免細(xì)菌污染。試劑紅細(xì)胞以3個(gè)安康者同型新穎紅細(xì)胞混合,用生理鹽水洗滌一次,以除去存在血清中的抗體,及可溶性抗原。試管、滴管和玻片必需清潔枯燥,防止溶血。操作方法應(yīng)按規(guī)定,普通應(yīng)先加血清,然后再加紅細(xì)胞懸液,以便容易核實(shí)能否滴加血清。按理IgM 抗-A和抗-B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反響溫度以40C為最強(qiáng),但為了防止冷凝集景象的干擾,普通仍在室溫200C 240C內(nèi)進(jìn)展實(shí)驗(yàn),370C可使反響減弱。察看時(shí)應(yīng)留意紅細(xì)胞呈特異性凝集,繼發(fā)性凝固以及緡錢狀陳列的區(qū)別。判別結(jié)果后
15、應(yīng)仔細(xì)核對、記錄、防止筆誤。尿 液 常 規(guī) 測 定一、標(biāo)本搜集與保管:1、門診病人尿常規(guī)檢驗(yàn),可留取恣意時(shí)間的一次性尿于清潔、枯燥的一次性尿杯內(nèi),立刻送檢;2、臨床疑似腎臟病的患者,取清晨第一次尿?yàn)榧?;3、特殊檢驗(yàn)應(yīng)按實(shí)驗(yàn)要求留取標(biāo)本:尿糖檢驗(yàn),留空腹尿;細(xì)胞、管型計(jì)數(shù)留3h尿或24h尿;4、標(biāo)本的保管:收到標(biāo)本應(yīng)在30min內(nèi)檢查完,否那么應(yīng)妥善保管:如冷藏、加防腐劑等。二、尿液常規(guī)檢查方法:目前多采用干化學(xué)試帶法;儀器:迪瑞N-600型尿自動(dòng)分析儀判讀結(jié)果。檢測原理、臨床意義:一尿PH值檢查:原理:采用酸堿指示劑法,其膜塊區(qū)含有甲基紅及溴麝香草酚蘭,兩種酸堿指示劑適量配合可反映尿PH值4
16、.5-9.0的變化范圍。參考值:正常人普通膳食呈弱酸性:5.48.4平均6.0臨床意義:1、尿PH值測定可了解體內(nèi)酸堿平衡情況。強(qiáng)酸尿:代酸中毒、中風(fēng)、糖尿病、腎結(jié)石、型腎小管酸中毒、白血病、壞血病。2強(qiáng)堿尿:堿中毒、腎小管酸中毒、型、泌尿系變形桿菌感染。2、尿PH值檢測監(jiān)測腎結(jié)石和泌尿系病人的尿液酸堿變化情況,指點(diǎn)臨床用藥。如:某些患者經(jīng)過給藥使PH值大于6.5,就不會構(gòu)成尿酸和胱氨酸結(jié)石。而某些患者須堅(jiān)持PH值酸性,因堿性尿會促進(jìn)某些微生物的生長發(fā)育和磷酸鈣結(jié)石的構(gòu)成。因此有學(xué)者以為:尿PH值變化與尿結(jié)石的構(gòu)成親密相關(guān)。3、監(jiān)控尿PH值變化對其他膜塊區(qū)反響的干擾作用:如尿蛋白、比重受PH值
17、影響大。4、影響要素:尿標(biāo)本必需新穎,放置過久細(xì)菌分解尿液成分多數(shù)細(xì)菌產(chǎn)氨,使尿液呈堿性。2嚴(yán)厲按規(guī)定時(shí)間浸泡試帶,浸尿時(shí)間過長,尿PH值呈減低趨勢。3實(shí)驗(yàn)溫度:最適20度,PH值隨溫度升高而減低。二尿比重SG 尿比重是指尿液與純水的分量之比,主要測定尿內(nèi)固體物質(zhì)主要是尿素、氯化鈉濃度。隨著尿液分析儀的問世,干化學(xué)法測尿比重得到廣泛運(yùn)用,具有簡單快速、用尿量少不受人為要素影響等優(yōu)點(diǎn)。參考方法;折射儀法原理:其膜塊區(qū)主要含有多聚電解質(zhì)甲乙烯醛馬來酐、酸堿指示劑溴麝香草酚蘭、緩沖液。其原理是采用經(jīng)過處置的多聚電解質(zhì)的PKa改動(dòng)與尿液離子濃度相關(guān),試紙條中的多聚電解質(zhì)含有隨尿標(biāo)本中離子濃度而解離的酸
18、性基因,離子濃度越多,酸性基因H+解離越多,使膜塊區(qū)域中的PH改動(dòng),這種改動(dòng)可由膜塊中的酸堿指示劑溴麝香草酚蘭的顏色變化顯示出來。進(jìn)而換算成尿液的比重值。參考值:1.0151.025;晨尿通常1.020;新生兒1.0021.004臨床意義:1尿比重的高低主要取決于腎臟的濃縮功能,它與尿中所含溶質(zhì)的多少成正比,而與尿量成反比,并與尿液的顏色深淺根本相平行。尿比重升高:表示尿液濃縮,見于急性腎炎、蛋白尿、糖尿、高熱、大量出汗、腹水、心功能不全。2尿比重降低:表示濃縮功能下降,見于尿崩癥、慢性腎炎、精神性多飲多尿癥。3恒定在1.010左右,呈等張尿,表示腎本質(zhì)有嚴(yán)重的損害。用尿比重和尿量的動(dòng)態(tài)變化來
19、監(jiān)測腎結(jié)石病人的尿物理變化,用于指點(diǎn)病人飲食習(xí)慣,預(yù)防病人結(jié)石的再次構(gòu)成。4、影響要素:1新穎尿標(biāo)本,不能含有強(qiáng)堿、強(qiáng)酸等物質(zhì);強(qiáng)堿性尿PH7.0時(shí)應(yīng)在干化學(xué)根底上添加0.005作為補(bǔ)償;2試紙法只與離子濃度有關(guān)不受非離子化學(xué)物質(zhì)影響;3尿中蛋白升高時(shí),尿比重加強(qiáng)明顯;4不宜用于新生兒尿比重檢查,能夠由于新生兒尿比重在1.002-1.004之間的緣故。5過高過低的尿比重測試不夠敏感,因此只能用于挑選。三尿蛋白檢查: 各種指示劑都有一定的PH值變色范圍,在一定的PH值緩沖液中顏色比較恒定,當(dāng)溶液中有蛋白質(zhì)時(shí),由于蛋白質(zhì)離子對指示劑離子相反電荷的吸引而生成復(fù)合物,引起指示劑的進(jìn)一步電離,超越了緩沖
20、作用,指示劑發(fā)生顏色改動(dòng),溶液中蛋白質(zhì)濃度越大,變色程度也越大,這是指示劑的蛋白質(zhì)誤差。蛋白質(zhì)能與溴酚藍(lán)起顏色反響,蛋白質(zhì)含量的多少與顏色深淺成正比。指示劑蛋白誤差原理:其膜塊中主要含有酸堿指示劑溴酚藍(lán)PH域值3.2、枸櫞酸緩沖系統(tǒng)、外表活性劑。在PH3.2時(shí),溴酚藍(lán)產(chǎn)生陰離子,與帶陽離子的蛋白質(zhì)主要是白蛋白結(jié)合后發(fā)生顏色變化Nccls建議:磺基水楊酸法為干化學(xué)法檢測尿蛋白參比如法。參考值:陰性;30130mg/日;當(dāng)尿蛋白100mg/L或150mg/24h時(shí)尿蛋白定性陽性。臨床意義:1、生理性蛋白尿:指泌尿系并無器質(zhì)性病變,尿內(nèi)暫時(shí)出現(xiàn)蛋白而言,又稱功能性蛋白尿。由猛烈運(yùn)動(dòng)、長時(shí)間直立、高溫
21、、受寒等要素構(gòu)成腎血管痙攣或充血,構(gòu)成腎小球浸透性加強(qiáng)。2、病理性蛋白尿:指泌尿系因器質(zhì)性病變、尿內(nèi)繼續(xù)出現(xiàn)蛋白而言。見于:各類腎病、腎毒性物質(zhì)引起的腎損害、妊高癥、SLE的腎損害、免疫性蛋白尿。3、影響要素:1尿標(biāo)本必需新穎。蛻變尿液產(chǎn)生的PH值變化影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果假陽性。2試紙條溫度:40C取出即用,蛋白質(zhì)偏低。(3) 尿液存放時(shí)間過久而致細(xì)菌生長繁衍;試帶甩動(dòng)浸濕后甩動(dòng):因反響時(shí)間延伸,試帶色素相互浸透而致蛋白質(zhì)升高。(4) 起假陽性藥物:奎寧、嘧啶等藥物引起強(qiáng)堿尿PH值大于9.0時(shí)干化學(xué)法假陽性;磺基水楊酸法假陰性。(5) 引起假陰性藥物:青霉素族有明顯的干擾作用,干化學(xué)法假陰性,磺基水楊
22、酸法假陽性。(6) 標(biāo)本內(nèi)含其他分泌物如:生殖系統(tǒng)或較多細(xì)胞成分,或消毒殺菌劑可引起假陽性,這并非泌尿病變所致。(7) 不同測定方法對尿內(nèi)不同蛋白質(zhì)檢測的敏感性不同。雙縮脲定量可以對白蛋白、球蛋白顯示近似的敏感性。而干化學(xué)法對球蛋白較敏感,對球蛋白的敏感性僅是蛋白質(zhì)的1%-2%,因此對于腎病患者特別是在疾病開展過程中需求察看尿蛋白含量的病例、最好運(yùn)用磺基水楊酸法和雙縮脲法進(jìn)展定性和定量實(shí)驗(yàn)。(四) 尿糖測定原理:酶法:膜塊中主要成分含有GOD、POD酶和色原一類用碘化鉀作色原,另一類用鄰甲聯(lián)苯胺作色原葡萄糖氧化酶把葡萄糖氧化成葡萄糖醛酸和過氧化氫。過氧化氫再由過氧化物酶催化釋放O,使色原呈現(xiàn)不
23、同的顏色變化。參考值:正常人0.565.0mmol/24h,定性陰性。臨床意義:尿糖陽性:見于糖尿病、腎性糖尿病、甲亢、口服及注射大量葡萄糖及應(yīng)激反響時(shí)。影響要素:1、新穎尿標(biāo)本放置時(shí)間過長導(dǎo)致葡萄糖降低;2、試帶浸尿時(shí)間過長導(dǎo)致葡萄糖升高,3、試帶溫度:4度取出即用,導(dǎo)致葡萄糖偏低;4、試帶浸尿后甩動(dòng)導(dǎo)致葡萄糖升高;5、干化學(xué)與班氏法比較。五尿酮體檢測:原理:其膜塊中主要含有亞硝基鐵氰化鈉,可與尿中乙酰乙酸、丙酮產(chǎn)生紫色反響,其對乙酰乙酸的敏感性50-100mg/L,對丙酮僅為400-700mg/L,不與B-羥丁酸起反響。臨床意義:陽性:葡萄糖酮癥酸中毒、妊娠劇吐、長期饑餓、營養(yǎng)不良及猛烈運(yùn)
24、動(dòng)后。影響要素:1、新穎尿標(biāo)本及時(shí)送檢,防止出現(xiàn)假陰性或結(jié)果偏低。 1易揮發(fā):乙酰乙酸、丙酮都是揮發(fā)性物質(zhì); 2易分解:乙酰乙酸受熱易分解成丙酮; 3尿液被細(xì)菌污染,酮體消逝;2、試帶浸尿時(shí)間:隨時(shí)間延伸而下降;3、留意干化學(xué)法與酮體粉法的靈敏度差別:同一病理標(biāo)本兩種方法能夠出現(xiàn)截然不同的結(jié)果,分析時(shí)應(yīng)特別留意。4、留意不同病程,酮體成分的變化會給檢測結(jié)果帶來差別;不同病因引起的酮癥,酮體的成分可不同,即使同一病人不同病程也可有差別。在糖尿病酮癥酸中毒早期病例中:主要是-羥丁酸、乙酰乙酸很少或缺乏;此時(shí)丈量可導(dǎo)致對總酮體量估計(jì)缺乏。在糖尿病酮癥酸中毒病癥緩解之后:乙酰乙酸含量反而比初始急性期高
25、。 因此,應(yīng)根據(jù)病程開展,協(xié)助臨床醫(yī)生共同分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。六尿膽紅素、尿膽原檢測膽紅素原理:直接膽紅素在強(qiáng)酸介質(zhì)中與2,4-二氯苯胺重氮鹽起偶聯(lián)反響呈紫紅色偶氮化合物。尿膽原原理:與改良Ehrlich法一樣,尿膽原在酸性溶液中與對-二甲氨基甲醛作用生成櫻紅色。參考值:尿膽紅素:陰性 尿膽原:定性正常人為弱陽性反響,排出量0.54.0mg/d臨床意義: 1、尿膽紅素陽性:常見于阻塞性或肝細(xì)胞性黃疸,病毒性和中毒性肝炎。2、尿膽原-陽性:常見于溶血型疾患及肝本質(zhì)病變,如肝炎時(shí)。 -陰性:常見于完全阻塞性黃疸檢查。影響要素:1、新穎尿標(biāo)本放置時(shí)間長:膽紅素在陽光照射下成為膽綠素,膽紅素降低;尿膽原氧化
26、成尿膽素使尿膽原降低。2、試帶浸尿時(shí)間延伸時(shí)膽紅素升高。3、試帶浸濕后甩動(dòng)尿膽原升高。4、假陽性干擾:1膽紅素:某些藥物如牛黃、熊膽粉呵斥膽紅素假陽性。2尿膽原:尿內(nèi)源物質(zhì)如膽色素原、吲哚、膽紅素、吩噻嗪類藥物呵斥尿膽原假陽性。5、假陰性干擾:1膽紅素陰性:尿內(nèi)高濃度的VitC、亞硝酸鹽呵斥抑制偶氮反響,呵斥假陰性。氯丙嗪治療或尿內(nèi)含鹽酸苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物,呵斥假陰性。2抗菌素抑制腸道菌群導(dǎo)致尿膽原降低。6、正常人尿膽原排出量每天動(dòng)搖很大,夜間和上午量少,午后升高,在午后2-4h到達(dá)頂峰。同時(shí),尿膽原的去除率與尿PH相關(guān),PH5.0時(shí)去除率2ml/min; PH8.0時(shí)增至25ml/min。
27、故學(xué)者提倡:預(yù)先給患者提早服用碳酸氫鈉堿化尿液,搜集午后2-4h尿進(jìn)展測定,以提高檢出率。七尿亞硝酸鹽檢查原理:尿亞硝酸鹽檢查:膜塊中主要含有對氨基苯砷酸、1,2,3,4-四氫并喹啉-3酚物質(zhì)。大多數(shù)尿路感染是由大腸埃希菌引起的,正常人尿液中含有食物或蛋白質(zhì)正常代謝產(chǎn)物的硝酸鹽,當(dāng)尿液中有大腸埃希菌增殖時(shí),可將硝酸鹽復(fù)原為亞硝酸鹽,其可將膜塊中對氨基苯砷酸重氮化而成重氮鹽,后者與1,2,3,4-四氫并喹啉-3酚偶聯(lián),使膜塊產(chǎn)生紅色,借此診斷患者能否被大腸埃希菌感染。其檢出敏感度為0.03-0.06mg/dl。尿液中亞硝酸鹽檢出率:受以下三方面的影響: a. 感染細(xì)菌能否含有硝酸鹽復(fù)原酶; b
28、食物中能否含有適量的硝酸鹽; c 尿液標(biāo)天性否在膀胱停留間隔4h以上。符合上述三個(gè)條件,此實(shí)驗(yàn)的檢出率為80%,反之成陰性結(jié)果。因此本實(shí)驗(yàn)陰性并不能排除菌尿的能夠,陽性也不能完全一定泌尿系感染。參考值:普通為陰性。臨床意義:常用于大腸埃希菌引起的泌尿系感染??勺鳛槟蚵犯腥镜倪^篩實(shí)驗(yàn)。影響要素:1、標(biāo)本放置時(shí)間過長或污染亞硝酸鹽轉(zhuǎn)為陽性。2、尿液應(yīng)在膀胱停留間隔4h以上,使細(xì)菌有充分的作用時(shí)間,故以清晨第一次尿液為宜。間隔時(shí)間過短易呵斥假陰性。3、泌尿道止痛藥苯偶氮吡胺及空氣中的亞硝酸氣體呵斥假陽性。4、假陰性:運(yùn)用大量抗壞血酸時(shí);運(yùn)用抗生素細(xì)菌被抑制時(shí);運(yùn)用利尿劑時(shí)。八尿白細(xì)胞檢查原理:基于粒
29、細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有特異性酯酶,可作用于膜塊中的吲哚酚酯構(gòu)成吲哚酚釋放。并與重氮鹽反響構(gòu)成紫色縮合物,其顏色的深淺與細(xì)胞的多少呈比例關(guān)系。參考值:普通為陰性。臨床意義:1、泌尿系統(tǒng)及臨近器官有感染性病變。2、腎結(jié)核、腫瘤亦增多3、腎移植后有排斥反響者,尿中大量出現(xiàn)淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞。4、成年婦女生殖系統(tǒng)有炎癥時(shí),可見成團(tuán)的膿細(xì)胞并伴有大量扁平細(xì)胞。影響要素:1、新穎尿液標(biāo)本立刻測定,以免白細(xì)胞受破壞,導(dǎo)致干化學(xué)法與鏡檢法人為的實(shí)驗(yàn)誤差。2、此法只能測中性粒細(xì)胞,不與淋巴細(xì)胞反響,在腎移植術(shù)后排斥反響時(shí),尿中以淋巴細(xì)胞為主;或其他病因引起的淋巴細(xì)胞尿時(shí),會產(chǎn)生假陰性結(jié)果。3、假陽性:1尿液中污染甲醛;
30、2含有高濃度的膽紅素;3某些物質(zhì):呋喃坦啶。4尿液再膀胱儲存時(shí)間過長或標(biāo)本放置時(shí)間延伸,導(dǎo)致白細(xì)胞破壞,酯酶釋放到尿中,呵斥干化學(xué)法陽性、鏡檢陰性的所謂“假陽性景象。4、假陰性:1尿蛋白大于5g/L。2尿中含大劑量頭孢氨卞或慶大霉素等負(fù)干擾。九尿血紅蛋白潛血尿紅細(xì)胞檢查原理:干化學(xué)法膜塊中主要含有氧化氫菌香素或過氧化氫烯枯及色素鄰甲聯(lián)苯胺兩種物質(zhì)。其原理是尿中紅細(xì)胞內(nèi)的Hb或其被破壞釋放的Hb均含有亞鐵血紅素,它具有過氧化物酶活性,在過氧化氫菌香素或過氧化氫烯枯存在條件下,催化鄰甲聯(lián)苯胺脫氫而呈色。參考值:普通為陰性。臨床意義:Hb、肌紅蛋白敏感度0.3-0.6/L,對完好紅細(xì)胞敏感度5-10
31、 個(gè)/ul。影響要素:1、新穎尿標(biāo)本,放置時(shí)間越長,潛血減低。2、試帶浸尿時(shí)間延伸,潛血升高。3、試帶浸濕后甩動(dòng):潛血升高。 假陽性:1、某些氧化性藥物:漂白粉及磺胺類、非那酊、喹啉、砷中毒。2、尿含有易熱酶、肌紅蛋白或菌尿細(xì)菌產(chǎn)生過氧化物酶。3、腎病患者的紅細(xì)胞在腎臟或泌尿道破壞、或尿比重過低、尿PH偏高,均易呵斥紅細(xì)胞破壞,血紅蛋白釋出,出現(xiàn)所謂紅細(xì)胞干化學(xué)檢查的“假陽性景象。假陰性:大量VitC競爭性的奪取試帶中過氧化物的氧,導(dǎo)致假陰性。 尿HCG檢查膠體金法原理:免疫膠體金法是將羊抗人HCG抗血清多抗、羊抗鼠IgG分別固定在特制的纖維素試帶上并呈兩條線上下陳列,羊抗鼠IgG線在試帶上方
32、為陰性對照,羊抗人HCG多抗在下方為測定。試帶條中含均勻分布的膠體金標(biāo)志的鼠抗人-HCG單克隆抗體和無關(guān)的金標(biāo)志鼠IgG。檢測時(shí)將試帶浸入被檢尿液中液面低于固定的兩條抗體線后迅速取出,尿液沿試帶上行,尿中的-HCG在上行過程中與膠體金標(biāo)志單克隆抗體結(jié)合,待行至羊抗人HCG抗體線時(shí),構(gòu)成金標(biāo)志的-HCG單抗-尿HCG-羊抗人HCG復(fù)合物而在試帶上顯紫紅色區(qū)帶,為HCG陽性反響,試帶上無關(guān)的金標(biāo)志鼠IgG隨尿繼續(xù)上行至羊抗鼠IgG處時(shí)與之構(gòu)成紫紅色的金標(biāo)志抗原抗體復(fù)合物是為陰性對照。判別結(jié)果時(shí),含HCG的尿液試帶上可顯示上、下兩條紫紅色線條,而陰性標(biāo)本那么只顯示出上邊一條紫紅色線。操作:搜集尿液:
33、取任何時(shí)間尿標(biāo)本留于干凈、枯燥的尿杯中及時(shí)送檢,取晨尿標(biāo)本更佳;取出試紙將標(biāo)有MAX線的一端向下浸入尿液,液面不得超越MAX線,待顯示尿液向上爬行時(shí)將試紙條取出平放,5min內(nèi)讀取結(jié)果。參考范圍:正常非妊娠女性:陰性;正常妊娠女性:陽性臨床意義:早期妊娠診斷:普通孕后710天尿HCG即可陽性,3540天為2500IU/L以上,6070天出現(xiàn)頂峰,可達(dá)8萬32萬IU/L。常用的HCG檢驗(yàn)法均能呈陽性反響,早早孕檢測在受精卵著床后57天既能測出HCG。先兆流產(chǎn):HCG含量如逐漸上升能夠保住胎兒,不斷下降應(yīng)盡及早處置,以免呵斥過期流產(chǎn)。人工流產(chǎn)后無胎盤組織殘留者,即轉(zhuǎn)為陰性反響;如仍有活動(dòng)的胎盤組織
34、殘留者仍為陽性,應(yīng)思索為不完全流產(chǎn)。宮外孕的診斷,60%宮外孕患者HCG呈陽性反響。50%宮外孕在陰道開場流血3周后,反響轉(zhuǎn)為陰性。滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤:惡性葡萄胎、絨毛膜癌80%左右可引起陽性反響以及男性睪丸畸胎瘤等腫瘤時(shí),尿中HCG升高。尿液HCG檢測是早期診斷妊娠及相關(guān)疾病最簡便而重要的方法。妊娠實(shí)驗(yàn)陽性,首先應(yīng)想到正常妊娠,除了少數(shù)出現(xiàn)假陽性反響外,大約95%100% 孕婦均可被檢出來。如有可疑,可配合血清HCG檢測,兩者有很好的相關(guān)性。 7其它:更年期、排卵期、雙側(cè)卵巢切除術(shù)均可致黃體生成素LH升高;內(nèi)分泌疾病如腦垂體疾病、甲亢,婦科疾病如卵巢囊腫、子宮癌等HCG也可增高。近年發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤
35、如畸胎瘤、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、肺癌等,血HCG也可升高五、本卷須知:宜用清晨第一次新穎尿液,必要時(shí)離心取上清液測定。標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送檢,否那么應(yīng)貯于28度,不超越48h。浸入尿液時(shí)液面不得超越MAX線;5min后讀取結(jié)果無效。假設(shè)無控制線出現(xiàn)或控制線與測定線均不呈現(xiàn)紫紅色,表示試劑失效。 5留意假陽性要素的影響。糞 便 檢 查一、標(biāo)本采集方法及本卷須知: 標(biāo)本采集的方法,因檢驗(yàn)?zāi)康牟煌胁顒e。1、普通檢驗(yàn)應(yīng)留取新穎糞便約5g左右指頭大小或稀便2ml,以防止糞質(zhì)迅速枯燥。假設(shè)孵化血吸蟲毛蚴,應(yīng)留取全部新穎糞便,不得少于30 g。2、糞便標(biāo)本應(yīng)選擇膿血黏液等病理成分,假設(shè)無病理成分,那么可多
36、部分取材。糞便標(biāo)本應(yīng)搜集于清潔、枯燥、內(nèi)層涂臘的有蓋硬紙盒內(nèi)送檢,便于檢驗(yàn)后熄滅消毒。細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的糞便標(biāo)本應(yīng)搜集于滅菌封口的容器內(nèi),勿混入消毒劑及化學(xué)藥品。3、糞便標(biāo)本中不得混入尿液、消毒劑及污水,因此不應(yīng)采取尿壺或便盆中的糞便。糞便標(biāo)本應(yīng)在采取后1小時(shí)內(nèi)進(jìn)展檢查,否那么可因PH及消化酶等的影響,導(dǎo)致其有構(gòu)成分分解破壞。4、檢驗(yàn)阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立刻檢查,冬季尚需求采取保溫25度措施。5、做化學(xué)法潛血實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)于實(shí)驗(yàn)前3天禁食肉類及動(dòng)物血食物,同時(shí)禁服鐵劑及Vc 。6、糞便檢驗(yàn)的標(biāo)本通常采取自然排出的糞便,但在無糞便排出而又必需檢查時(shí),可經(jīng)肛門指診或采便管拭取標(biāo)本;而灌腸后的糞便常因過度稀
37、釋及混有油滴而影響檢驗(yàn)結(jié)果。二、檢驗(yàn)后的處置:1、如盛器為紙類物質(zhì),檢驗(yàn)終了后運(yùn)用火燒毀。2、所用載玻片需用1%8.4液浸泡后洗刷并烤干。三、普通性狀檢查:包括顏色、性狀、寄生蟲、結(jié)石等。1、顏色:可根據(jù)察看所見報(bào)告,如:黃色、褐色、土色、灰白、綠色、紅 色、柏油樣等。正常糞便因糞膽素而顯棕黃色,但可因食物、藥物或病理緣由影響而改動(dòng)糞便顏色:灰白色見于鋇餐后、服矽酸鋁、阻塞性黃疸、膽汁減少或缺乏;綠色見于食用含葉綠素的蔬菜后及含膽綠素時(shí);紅色見于下消化道出血、食用西紅柿、西瓜等;柏油樣便見于上消化道出血等或服用鐵劑、活性炭等藥物或食用動(dòng)物血及肝臟;醬色常見于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等;
38、米泔水樣見于霍亂;淡黃色見于乳兒便或服用大黃或山道年后,在病理情況下,那么因膽紅素未氧化所致。2、性狀:正常時(shí)為成形軟便。1粘液便:小腸有炎癥,見于各種腸炎、痢疾。2溏便:便呈粥狀且內(nèi)容粗糙,見于消化不良、慢性胃炎、胃竇潴留。(3)胨狀便:腸易激質(zhì)綜合癥。(4)血性及膿血便:見于腸道下段有病變:痢疾、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸或直腸癌。阿米巴痢疾:以血為主,血中帶膿,呈暗紅色稀果醬樣;菌?。阂哉骋杭澳摓橹?,膿中帶血。(5)鮮血便:直腸息肉、結(jié)腸癌、痔瘡、肛裂等。6柏油樣便:腸道上段病變:上消化道出血。7稀糊汁狀便:腸蠕動(dòng)亢進(jìn)或分泌增多所致。常見于急性胃腸炎。8米泔水樣便:霍亂及副霍亂。9白陶土樣便:阻
39、塞性黃疸。10干結(jié)便:習(xí)慣性便秘。11細(xì)條狀便:提示直腸狹窄、直腸癌。12乳凝塊:嬰兒糞便中見有黃白色乳凝塊,也可見蛋花樣便,提示脂肪或蛋白消化不完全消化不良、嬰幼兒腹瀉。3、寄生蟲:蛔蟲、蟯蟲、絳蟲節(jié)片等較大蟲體,肉眼即可分辨;鉤蟲蟲體常需將糞便沖洗過篩后方可看到。服驅(qū)蟲劑后排便時(shí)應(yīng)檢查有無蟲體;驅(qū)帶絳蟲后應(yīng)仔細(xì)尋覓頭節(jié)。4、結(jié)石:糞便中可見到膽石、胰石、糞石。運(yùn)用排石藥或碎石術(shù)后多見膽石。四顯微鏡檢查:主要檢出:細(xì)胞、寄生蟲卵、真菌、細(xì)菌、原蟲等。1. 涂片鏡檢:普通采用生理鹽水涂片法。干凈玻片上加等滲鹽水12滴,選擇糞便的不正常部位,或挑取不同部位的糞便,做直接涂片檢查。最好取載玻片,制
40、成涂片后,應(yīng)覆于蓋片,涂片的厚度以能透過印刷物字跡為準(zhǔn)。先用低倍鏡察看全片有無蟲卵、原蟲、包囊、寄生蟲幼蟲、血細(xì)胞,再用高倍鏡詳細(xì)檢查病理成分的形狀構(gòu)造。應(yīng)留意將植物纖維及其細(xì)胞與寄生蟲、人體細(xì)胞相鑒別,并應(yīng)該留意有無肌纖維、結(jié)締組織、彈力纖維、淀粉顆粒、脂肪小滴球等。假設(shè)大量出現(xiàn)那么提示消化不良,或胰腺外分泌功能不全。細(xì)胞中應(yīng)留意紅細(xì)胞、白細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、腸黏膜上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等。夏科雷登結(jié)晶:為無色或淺黃色兩端尖而透明具有折光性的菱形晶體,大小不一,常見于腸道潰瘍,尤以阿米巴感染糞便中最易檢出,過敏性腹瀉及鉤蟲病患者糞便亦??梢姷?。細(xì)菌:占糞便凈重的1/3,正常菌群主要是大
41、腸桿菌和腸球菌占80%,而過路菌不超越10%,芽孢菌和酵母菌為常住菌,但總量不超越10%,正常菌群消逝或比例失調(diào)可因大量運(yùn)用抗生素所致。2鏡檢規(guī)那么及報(bào)告方式:先用低倍鏡10*10,視野寬度1.8mm檢視全片。寄生蟲卵分別計(jì)數(shù)10個(gè)低倍鏡視野中的蟲卵數(shù),求均值報(bào)告/低倍鏡視野。原蟲檢查的標(biāo)本必需在低倍鏡檢查的根底上,再換高倍鏡檢查,詳細(xì)察看原蟲的構(gòu)造特征,確定后再報(bào)告。細(xì)胞以高倍鏡10*4,視野寬度0.45mm檢查10個(gè)視野,求均值報(bào)告:/高倍視野。表1 :糞便涂片鏡檢時(shí)細(xì)胞成分的報(bào)告方式細(xì)胞數(shù)/10個(gè)高倍視野HPF 報(bào)告方式細(xì)胞數(shù)/HPF10個(gè)高倍視野中:只見到一個(gè) 偶見 有時(shí)不見,最多見到
42、23/每HPF 03最少5個(gè),多那么10個(gè)/每HPF 510 均在10個(gè)以上/每HPF 多數(shù)均勻分布滿視野,難以計(jì)數(shù) 滿視野五化學(xué)檢查糞便潛血實(shí)驗(yàn)上消化道有少量出血時(shí),紅細(xì)胞被消化而分解破壞,由于顯微鏡下不能發(fā)現(xiàn),故稱潛血。糞便潛血實(shí)驗(yàn)常用的一類化學(xué)方法是利用血液中的主要成分血紅蛋白中的亞鐵血紅素,具有類似過氧化物酶的作用催化過氧化氫,分解釋放新生態(tài)氧,氧化色原物質(zhì)而呈色,呈色的深淺反映HB的多少,亦即出血量的大小。一金標(biāo)法:特異性強(qiáng)、靈敏度度高、檢測限寬。 1原理:采用單克隆和多克隆抗體,特異性地針對糞便樣品中的人Hb,在不到5分鐘的時(shí)間里,可以檢測出最低量為0.2ug/ml的Hb,高濃度的
43、Hb可在1分鐘內(nèi)檢出。2試劑:便潛血一步法試紙條型或板型,室溫保管。3操作方法:采便:用采便棒采集糞便標(biāo)本的多個(gè)部位后放回采便容器內(nèi),將蓋擰緊,搖動(dòng)采便器使構(gòu)成均勻混懸狀便樣;折斷采便器尖端待用;條型試紙:將適量混懸液滴到小試管內(nèi),將試紙條箭頭端插入小試管內(nèi),液面不得超越MAX線;5分鐘內(nèi)判讀結(jié)果。4結(jié)果判讀:陽性:控制線與反響線同時(shí)出現(xiàn)色帶,闡明樣品中有隱性出血;陰性:只需控制線出現(xiàn)色帶,反響線未出現(xiàn)色帶,闡明樣品中無隱性出血;無效:控制線無色帶出現(xiàn),闡明實(shí)驗(yàn)無效,應(yīng)重新測試。5、本卷須知:1肉眼血便時(shí),最好在顯微鏡下識別RBC,因本試紙抗體僅特異性針對人HB,當(dāng)大量出血時(shí),RBC來不及被破
44、壞,便隱血能夠出現(xiàn)陰性結(jié)果。2出現(xiàn)柏油便時(shí),HB濃度超出檢測范圍會出現(xiàn)假陰性結(jié)果,處理方法是;充分稀釋便樣然后測試。 3出現(xiàn)柏油便時(shí),如充分稀釋后仍為陰性,能夠是由于HB在消化道內(nèi)存留時(shí)間太長,其免疫原性被破壞二失去與抗體結(jié)合的才干,而呈陰性反響。此時(shí)可在排除飲食等其他要素后用化學(xué)法加以確認(rèn)。4分析結(jié)果時(shí)留意:家族性腸道息肉或直腸癌部分能夠不出血或延續(xù)出血,少量血在糞便中分布不均,都可呵斥假陰性結(jié) 果。5正常人便隱血陽性,能夠是由于某些藥物如阿司匹林刺激胃腸道呵斥隱血。6普通需連查三次以獲得準(zhǔn)確結(jié)果。7本實(shí)驗(yàn)只能作為挑選或輔助診斷用,不能替代其他檢查。 6、臨床意義:糞便潛血實(shí)驗(yàn)對慢性消化道出
45、血的診斷及消化道惡性腫瘤的篩 選均有重要價(jià)值,屬非損傷性檢查。1消化道出血時(shí),如潰瘍病、惡性腫瘤、腸結(jié)核、傷寒、鉤蟲病等均可呈陽性反響。2消化道惡性腫瘤時(shí),糞便潛血可繼續(xù)陽性;潰瘍病時(shí)顯延續(xù)陽性。3流行性出血熱患者便隱血實(shí)驗(yàn)也有84%的陽性率,可作為該病的重要佐證。 靜脈采血法 采血部位:通常采用肘部靜脈,當(dāng)肘部靜脈不明顯時(shí),可采用手背部、手腕部等部位靜脈;幼兒可采用頸外靜脈采血。 采血器材:一次性注射器或真空定量采血管、止血帶、墊枕、75%乙醇、30g/L碘液、無菌棉簽。 采血步驟:1采血前按檢驗(yàn)工程要求,預(yù)備好相應(yīng)的采血器材,如注射器、抗凝管或不同種類的真空管。2患者取臥位或坐位,手臂伸直
46、平放在床邊或臺面墊枕上,暴露穿刺部位。3找好采血靜脈后,先用30g/L碘棉簽從內(nèi)向外部順時(shí)針方向消毒穿刺處皮膚,稍等片刻再用75%乙醇棉簽以同樣方式消毒并擦去碘跡,在采血部位上方扎上止血帶,囑患者握緊拳頭,使靜脈顯露。如靜脈不太明顯時(shí),可囑患者反復(fù)伸握拳數(shù)次,促使靜脈怒漲。肥胖型患者,上述伸握拳數(shù)次后還不明顯者,這時(shí)必需憑操作者的閱歷,以左手食指在采血部位觸摸,發(fā)現(xiàn)靜脈走向后,試采穿刺往往勝利。4操作者以左手拇指固定靜脈穿刺部位的下端,右手持注射器或其它穿刺器具,使針頭斜面與針筒刻度向上,先以約與皮膚30度角的位置迅速刺破皮膚,然后適當(dāng)降低角度穿破靜脈壁進(jìn)入靜脈腔中,見回血后,將針頭順勢進(jìn)入少
47、許,以免采血時(shí)針頭滑出,但不可用力穿刺,以免穿破靜脈呵斥血腫。5用右手食指將針頭固定,左手漸漸抽動(dòng)注射器內(nèi)芯,至所需血量后解開止血帶,囑患者松拳,用無菌干棉簽壓住傷口,拔出針頭。6取下針頭,將血液沿管壁漸漸注入容器中,防止產(chǎn)生泡沫。7采血終了,應(yīng)再次核對病人姓名和號碼,并立刻清洗器材,如屬一次性注射器或真空采血管安裝,應(yīng)將用過的器材放在固定的回收箱內(nèi),決不能隨意丟棄,污染環(huán)境。 本卷須知:1采血前應(yīng)向病人耐心解釋以消除不用要的疑慮和恐懼心思。如遇個(gè)別病人進(jìn)針時(shí)或采血后發(fā)生眩暈,應(yīng)立刻拔出針頭,讓其平臥休憩片刻即可恢復(fù)。2應(yīng)防止血標(biāo)本溶血。呵斥溶血的緣由有注射器和容器不枯燥、不干凈、止血帶固扎時(shí)
48、間太長,淤血過久;穿刺不順損傷組織過多;抽血速度太快;3血液注入容器時(shí)未取下針頭或用力按出產(chǎn)生大量氣泡;抗凝血用力震蕩; 4離心機(jī)速度過快等。5為了防止淤血或濃縮,止血帶壓迫時(shí)間不可過長,最好不超越半分鐘。6抽血時(shí),只能向外抽,不能向靜脈內(nèi)推,以免空氣進(jìn)入構(gòu)成氣栓,呵斥嚴(yán)重后果。 葡萄糖GLUGOD-PAP法一原理:葡萄糖氧化酶GOD能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生一分子過氧化氫。在過氧化物酶POD和色原性氧受體的存在下,過氧化氫分解,釋放初生態(tài)氧、氧化色素原,生成紅色化合物Trinder反響。其反響式如下: 葡萄糖+O2+2H2O GOD 葡萄糖酸+2 H2O2 2H2O2 +4-氨基安替
49、比林+酚 POD 醌亞胺+4 H2O二標(biāo)本搜集:標(biāo)本應(yīng)為血清或血漿,正常量的抗凝劑檸檬酸鹽、EDTA、肝素、草酸鹽等不影響測定。盡快分別血清。在全血中每小時(shí)葡萄糖大約降低7%,血清中葡萄糖儲存在280C可穩(wěn)定24小時(shí)。三試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品試劑:液體試劑,原裝試劑280C避光保管,如出現(xiàn)混濁或沉淀,那么失效。2校準(zhǔn)品:試劑盒配套校準(zhǔn)品:濃度5.55mol/L100mg/dl,可分裝、標(biāo)志、密閉冷藏保管,分次運(yùn)用。3質(zhì)控品:質(zhì)控血清3ml*10規(guī)格小心開啟瓶塞請勿喪失,用奧氏吸管準(zhǔn)確汲取3ml蒸餾水溶解粉劑,顛倒混勻,防止產(chǎn)生氣泡和喪失,靜置30min。待完全溶解后,悄然倒置510次即可運(yùn)用???/p>
50、以分裝、標(biāo)志、冷凍保管備用。四儀器設(shè)備: 1. 杰出310型半自動(dòng)生化儀; 2根本設(shè)備:離心機(jī)等。 五操作: 標(biāo) 準(zhǔn) 質(zhì)控 測 定 空 白 規(guī)范液 10ul 質(zhì)控液 10ul 血清樣品 10ul 試劑運(yùn)用液 1.5ml 1.5ml 1.5ml 1.5ml 充分混勻,370C保溫15min后,冷卻空白調(diào)零,505nm比色讀取吸光度。 六計(jì)算: 血糖濃度=A標(biāo)本/A規(guī)范*規(guī)范濃度5.5mmoL/L 單位換算:mg/L= mmoL/L18 七操作性能: 試劑空白吸光度0.1反復(fù)性:變異系數(shù)CV%2%線性范圍:可達(dá)22.24 mmoL/L;八參考值: 成 人:3.896.1 mmoL/L 九醫(yī)學(xué)決議程
51、度:1 2.8mmoL/L。禁食后12小時(shí)血糖測定值低于此值,那么為低血糖癥,可出現(xiàn)焦慮、出汗、顫抖和虛弱等病癥;假設(shè)反響發(fā)生較慢,且以易怒、嗜睡、頭痛為主要病癥、那么應(yīng)該做其他實(shí)驗(yàn),以查找緣由。 2 7.0mmoL/L??崭寡堑竭_(dá)或超越此值,可思索糖尿病的診斷,但應(yīng)加做糖 耐量實(shí)驗(yàn)。 3 10.0mmoL/L。飯后1h血糖測得此值或高于此值,那么可高度疑心為糖尿病。十臨床意義: 1血糖增高: 1.1 生理性增高:見于餐后1-2小時(shí)、攝入高糖食品、猛烈運(yùn)動(dòng)或心情緊張等 交感神經(jīng)興奮和應(yīng)熱情況包括全麻引起的全身應(yīng)激反響。2病理性增高:1.2.1胰島功能低下,胰島分泌缺乏的糖尿??; 1.2.2升
52、血糖激素分泌增多:如嗜鉻細(xì)胞瘤、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)庫欣綜合癥腦垂體功能亢進(jìn)肢端肥大癥、甲亢等。 1.2.3中樞性疾?。猴B內(nèi)壓增高、顱內(nèi)出血、重癥腦炎、顱腦外傷等。 1.2.4其它:高熱、嘔吐、腹瀉所致脫水、肺炎等急性傳染病、腎臟炎癥。2. 血糖降低:2.1 生理性降低:見于饑餓和猛烈運(yùn)動(dòng);妊娠期、哺乳期;2.2 病理性降低:2.2.1空腹血糖降低:(1) 內(nèi)分泌疾病所致胰島素絕對或相對過剩:胰島細(xì)胞瘤、甲狀腺功能不全、腎上腺功能不全、腦垂體惡性病質(zhì);(2) 嚴(yán)重肝細(xì)胞受損所致肝糖原儲存耗竭:急性進(jìn)展性肝臟疾?。?(3) 其它:營養(yǎng)物質(zhì)缺乏、急性酒精中毒抑制糖原異生、先天性糖原代謝酶缺乏;2.2
53、.2 餐后或反響性血糖降低:(1) 功能性飲食性低血糖;(2) 胃切除術(shù)后飲食性反響性低血糖;(3) 2型糖尿病或OGTT受損出現(xiàn)晚期低血糖;2.2.3 藥物引起的血糖降低:胰島素注射過量、優(yōu)降糖運(yùn)用不當(dāng);十一質(zhì)量保證:1標(biāo)本普通運(yùn)用無溶血的血清或血漿。全血血糖濃度比血清或血漿低8%-15%,參考值為3.3-5.6mmol/L。所以,干化學(xué)測定多用于治療監(jiān)測,而不能用于診斷。2樣品采集后盡快離心分別血清或血漿。全血樣品在室溫條件下放置每小時(shí)可下降5%7%約0.56mmol/L,如立刻分別血清或血漿,那么可穩(wěn)定24h。3血糖測定受飲食、取血部位影響??崭寡潜匦栌谇宄砍槿】崭?2h后的靜脈血;由
54、于靜脈GLU毛細(xì)血管GLU動(dòng)脈GLU(動(dòng)脈血較靜脈血高0.56mmol/L, 毛細(xì)血管血較靜脈高0.22mmol/L),臨床分析時(shí)應(yīng)留意。4血糖測定也受測定方法影響。GOD-POD法谷胱甘肽、VitC可干擾測定。VitC濃度0.1g/L時(shí)可使血糖結(jié)果偏低1.3%7.6%;1.0 g/L時(shí)可使反響不顯色。5樣品嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸也產(chǎn)生干擾。溶血可使結(jié)果添加。6結(jié)果如超越線性范圍,請用生理鹽水將標(biāo)本按1:1稀釋,測定結(jié)果乘2。7仔細(xì)做好室內(nèi)質(zhì)控,適時(shí)保養(yǎng)儀器,適時(shí)校準(zhǔn)儀器,保證儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)。 十二危急值報(bào)告目的: 血糖2.8mmol/L或25mmol/L須立刻向臨床報(bào)告結(jié)果,以利于病人的搶救,并
55、做好記錄。 血清甘油三酯測定原理:采用中華醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)學(xué)會引薦的方法GPOPAP酶法用高效的微生物脂蛋白脂肪酶LPL使血清中TG水解成甘油與脂肪酸,將生成的甘油用甘油激酶GK及腺苷三磷酸ATP磷酸化,以磷酸甘油氧化酶GPO氧化3-磷酸甘油G-3-P,然后以PAP試劑顯色測定所生成的過氧化氫,反響式如下: TG + 3 H2O LPL 甘油 + 3RCOOH 甘油 + ATP GK /mg2+ G-3-P + ADP G-3-P + O2 GPO 磷酸二羥丙酮 + H2O2 H2O2 + 4-AAP + 4-氯酚 POD 苯醌亞胺非那腙+ 2H2O+HCL 二標(biāo)本的采集方法及對病人預(yù)備的要求:1受
56、試者預(yù)備:取血前兩周堅(jiān)持平常飲食習(xí)慣;近期無急性病、外傷、手術(shù)等異常情況;取血前數(shù)天至數(shù)周停頓影響血脂的藥物如血脂調(diào)理藥物、避孕藥、某些降壓藥、激素等,否那么記錄用藥情況;取血前禁食12小時(shí)、不飲酒、不做猛烈運(yùn)動(dòng);除臥床患者外,取血前至少靜坐5分鐘。2取血方法:取前臂靜脈血,止血帶的運(yùn)用不超越1分鐘,防止溶血。3取血次數(shù):應(yīng)以1周以上2月以內(nèi)的時(shí)間間隔對同一受試者取血2-3次。4血清的處置和貯藏: 血液樣品采取在室溫靜置30-40min令其自行凝固,3小時(shí)內(nèi)分別血清。樣品如不能當(dāng)日完成測定,在40C保管不超越3天,-200C以下可保管數(shù)周,-700C保管數(shù)年。血清不能反復(fù)凍融,否那么LDH-L
57、值最不穩(wěn)定。三試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品:試劑:中生試劑,原裝試劑2-8保管至試劑標(biāo)簽所示失效日期。 任務(wù)液:取10mlR1緩沖液參與一瓶R2中,溶解后即為任務(wù)液。280C保管可穩(wěn)定2周,15250C保管穩(wěn)定2天。2校準(zhǔn)品:試劑盒配套校準(zhǔn)品:濃度2.26mol/L200mg/dl,可分裝、標(biāo)志、密閉冷藏保管,分次運(yùn)用。3質(zhì)控品:中生21項(xiàng)質(zhì)控血清3ml*10規(guī)格小心開啟瓶塞請勿喪失,用奧氏吸管準(zhǔn)確汲取3ml蒸餾水溶解粉劑,顛倒混勻,防止產(chǎn)生氣泡和喪失,靜置30min。待完全溶解后,悄然倒置510次即可運(yùn)用??梢苑盅b、標(biāo)志、冷凍保管備用。四儀器設(shè)備: 1. 杰出310型半自動(dòng)生化儀; 2根本設(shè)備:離心
58、機(jī)。 五操作: 標(biāo) 準(zhǔn) 質(zhì)控 測 定 空 白規(guī)范液 10ul 質(zhì)控液 10ul 血清樣品 10ul 試劑運(yùn)用液 1.0ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml 充分混勻,370C保溫10min后,試劑空白調(diào)零,500nm比色讀取吸光度。六計(jì)算: 甘油三酯濃度=A標(biāo)本/A規(guī)范*規(guī)范濃度mmoL/L單位換算:mg/L= mmoL/L87.7七操作性能: 試劑空白吸光度0.1可報(bào)告范圍線性范圍: 11.29 mmol/L精細(xì)度 :變異系數(shù)CV%4%;批間CV6%八正常參考值:TG: 0.56-1.71mmoL/L 建議控制程度:男:0.45-1.81 mmoL/L,女:0.4-1.53 mmoL/L
59、九臨床意義:多數(shù)學(xué)者以為高甘油三酯血癥為心血管疾病的危險(xiǎn)要素。血清甘油三酯程度受性別、年齡和飲食的影響。1. TG增高:可見家族性高甘油三酯血癥、飲食大量甘油三酯和繼發(fā)於某些疾病如:糖尿病、甲狀腺功能減退、腎病綜合征和胰腺炎等。2. TG降低:見于甲狀腺功能亢進(jìn)、腎上腺皮質(zhì)功能降低、肝功能嚴(yán)重妨礙等。十質(zhì)量保證:嚴(yán)厲病人預(yù)備及標(biāo)本采集。盡快分別標(biāo)本測定,防止溶血,溶血可使結(jié)果偏高。高濃度膽紅素和VitC可使測定結(jié)果偏低。4結(jié)果如超越線性范圍,請用生理鹽水將標(biāo)本按1:1稀釋,測定結(jié)果乘2。5仔細(xì)做好室內(nèi)質(zhì)控。每次測定都應(yīng)落在允許范圍內(nèi),真實(shí)地反映儀器和試劑的性能。適時(shí)保養(yǎng)儀器,適時(shí)校準(zhǔn)儀器,保證
60、儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)。血 膽 固 醇 測 定一原理:血清中的膽固醇酯CE被膽固醇酯水解酶CEH水解成游離膽固醇Fc,后者被膽固醇氧化酶CHOD氧化成4- 膽甾烯酮并產(chǎn)生過氧化氫,再經(jīng)過氧化物酶POD催化4-氨基安替比林與酚三者合稱PAP,生成紅色醌亞胺色素Trinder反響。醌亞胺的最大吸收在500nm左右,吸光度與標(biāo)本中TC含量成正比。反響式如下:膽固醇酯 + H2O CEH 膽固醇 + 游離脂肪酸膽固醇 + O2 CH)D 4- 膽甾烯酮 + H2O2 2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 酚 POD 醌亞胺 + 4H2O。 H2O2 + 4-AAP + 4-氯酚 POD 苯醌亞胺非那腙+ 2H2
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