35果蠅雜交實驗

1、實驗3-5 果蠅雜交實驗 實驗目的 實驗原理 實驗材料與藥品 實驗方法 注意事項 實驗作業(yè)1實驗目的掌握果蠅雜交實驗技術；驗證并加深理解三大遺傳規(guī)律和伴性遺傳規(guī)律；掌握繪制遺傳學圖的原理和方法，學會實驗數(shù)據(jù)的處理方法，進一步加深對遺傳學圖、重組值、雙交換值、并發(fā)率和干涉等概念的理解。2實驗原理分離規(guī)律自由組合規(guī)律連鎖與互換規(guī)律伴性遺傳規(guī)律3分離規(guī)律P： 長翅 + 殘翅 vgvg F1： 長翅+vg F2： + +vg vgvg 長翅 : 殘翅 3 : 1 45自由組合規(guī)律P： 長翅黑檀體 殘翅灰身 + + ee vgvg+ F1： 長翅 灰身 +vg+e F2： 長翅灰身 殘翅灰身 長翅黑檀體

2、 殘翅黑檀體 + vgvg+ +ee vgvgee 9 3 3 1 67伴性遺傳8三點測交 三隱性（雌） 野生型（雄） wsnm + wsnm Y F1 野生型 +/wsnm 三隱性wsnm/Y F2 wsnm wsn+ +snm +sn+ + +m w+ w+m親本型 單交換 單交換 雙交換9干涉和并發(fā)率干涉：一個單交換發(fā)生后，其臨近發(fā)生單交換的機會將減少。一般用并發(fā)率表示干涉的大?。?觀察到的雙交換百分率并發(fā)率= 兩個單交換百分率的乘積10 實驗材料與藥品野生型和各種突變型果蠅乙醚11突變性狀的鑒別 影響部位 突變名稱 基因符號 性狀特征 染色體號數(shù)翅形 殘翅 vg 翅退化 小翅 m 翅小

3、 (X) 勺狀翅 nub2 翅小似勺 眼 白眼 w 復眼白色 (X) 棒眼 B 復眼棒狀 體色 黑檀體 e 體色黑亮 黃體 y 體色淺橙黃色 剛毛 焦剛毛 sn3 剛毛卷曲 12配置雜交組合一對性狀：長翅殘翅、長翅勺翅兩對性狀：灰身殘翅黑檀體長翅、灰身勺翅黑檀體長翅伴性遺傳：紅眼白眼三點測交：三隱性 野生型13實驗方法配制果蠅培養(yǎng)基按組合收集雌雄種蠅2-3對（雌蠅一定要是處女蠅）貼上標簽，標明親本基因型、收集日期和實驗者姓名，放入25 溫箱中培養(yǎng)。雜交-天后當蛹變黑時放飛種蠅，并在隨后的-天、-天、-天觀察1，記錄1的性狀，統(tǒng)計數(shù)目，并從中選出5-6對雌雄蠅做兄妹交。-天后蛹變黑時放飛成蠅，并

4、在隨后的幾天觀察2，記錄2的性狀和數(shù)目。14生活史：完全變態(tài)：最適溫度：20-25生活史周期： 12-15 day (20-25) 10 day (26) 57 day (10)羽化后： 8-12h 交配 兩天后產卵成蟲存活：15 day (25)15注意事項處女蠅最好在放飛成蠅后8h之內收集，數(shù)量不夠時單獨培養(yǎng)，足夠5只后才可接入雄蠅果蠅不可麻醉過度種蠅剛放入培養(yǎng)瓶時，應先將瓶橫放，等種蠅蘇醒后再豎起瓶子雜交2只記錄10天，否則會出現(xiàn)F3個體1統(tǒng)計要超過50只，2要達到200只左右，做三點測交的要出現(xiàn)雙交換為止預防污染16實驗作業(yè)統(tǒng)計F1 、F2代果蠅各種表型的數(shù)目，并進行2檢驗。三點測交試驗需要繪出三個基因的遺傳學圖，并計算并發(fā)率和干涉。 17實驗分組1-8號：分離規(guī)律（4人做正交、4人做反交）9-16號：自由組合規(guī)律（4人做正交、4人做反交）17-24號：伴性遺傳（4人做正交、4人做反交）25-40號：三點測交（4人/小組）18果蠅培養(yǎng)基的配制（）原料：玉米粉85g、紅糖65g、瓊脂8.5g、干酵母10g、正丙酸5mL步驟：水加熱溶解瓊脂溶解紅糖加攪拌好的玉米面定容至1升煮沸5分鐘冷卻到50左右（防止溫度過高殺死酵母） 加入溶解好的酵母粉加入正丙酸攪勻裝瓶19剛毛的作用果蠅的味覺識