長(zhǎng)春中醫(yī)大《中藥化學(xué)》課件07黃酮類化合物-2理化性質(zhì)、顏色反應(yīng)及提取與分離等

1、第六章 黃酮類化合物Flavonoids理化性質(zhì) 性狀 熒光 溶解性 酸堿性 顯色反應(yīng)（Physical and chemistry properties）性狀 苷元多為（晶性固體） 苷為（無(wú)定形粉末） 顏色：與分子中是否存在交叉共軛體系 助色團(tuán)的類型、數(shù)目及取代位置有關(guān) 黃酮、黃酮醇及其苷類灰黃黃色 查耳酮黃橙黃色 二氫黃酮及醇、異黃酮不顯色或微黃色色原酮 2-苯基色原酮 （2-phenylchromone)結(jié)構(gòu)與顏色關(guān)系結(jié)構(gòu)與熒光關(guān)系 C3-OH在紫外光下有強(qiáng)烈熒光 （亮黃色或亮綠色） C3-OH成苷后熒光減弱與你能舉出實(shí)例證明嗎？結(jié)構(gòu)與溶解性關(guān)系黃酮苷元易溶MeOH、EtOH、EtOAC

2、等有機(jī)溶劑 易溶于稀堿液 難溶或不溶于H2O黃酮苷易溶于水、MeOH、EtOH(通常60%70%） 等溶劑 （苷元引入OH數(shù)量或糖的數(shù)量多，決定了在水 中溶解度大?。┮话闳芙庖?guī)律結(jié)構(gòu)與水溶性關(guān)系黃酮、黃酮醇、查耳酮均屬平面型分子 難溶于水二氫黃酮及醇屬非平面分子 在水中有一定溶解度 3-glc苷與7-glc苷水溶性結(jié)構(gòu)與酸性酸性 結(jié)構(gòu)基礎(chǔ) -分子中多Ar-OH，故顯酸性 （可溶于堿性水溶液、吡啶等溶劑中） 酸性規(guī)律由于Ar-OH數(shù)目、位置不同，酸性強(qiáng)弱也不同7,4-二-OH 7或4-OH 一般酚-OH 5-OH（溶NaHCO3）（溶Na2CO3）（溶不同濃度NaOH） （可用于提取、分離及鑒定

3、工作） -吡喃酮環(huán)上1-位氧原子，因有未共用電子對(duì)顯微弱的堿性可與強(qiáng)無(wú)機(jī)酸（H2SO4、HCl）等生成鹽堿性結(jié)構(gòu)與堿性思考題 二氫黃酮較黃酮水溶性 大，是由于黃酮為（ ）分子；二氫黃酮是( )分子5.黃酮的結(jié)構(gòu)分類依據(jù)是（ ）A.三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀 B. 三碳鏈氧化程度 C. 3位是否有羥基取代 D.3位是否有羧基取代 E. B環(huán)連接的位置5.黃酮的結(jié)構(gòu)分類依據(jù)是（ ）A.三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀 B. 三碳鏈氧化程度 C. 3位是否有羥基取代 D.3位是否有羧基取代 E. B環(huán)連接的位置 黃酮的結(jié)構(gòu)分類依據(jù)是（ ） A.三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀 B. 三碳鏈氧化程度 C. 3-位是否有羥基取代 D.3位

4、是否有羧基取代 E. B環(huán)連接的位置簡(jiǎn)述黃酮類化合物結(jié)構(gòu)與其顏色、旋光及溶解性的關(guān)系。 理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)（一）性狀（二）熒光（三）溶解性（四）酸堿性（五）顯色反應(yīng) 顯色反應(yīng) 還原反應(yīng) （1）鹽酸-鎂粉反應(yīng)（HCl-Mg） （2）四氫硼鈉反應(yīng)（NaBH4） 金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng) （1）鋁鹽 （4）鎂鹽 （2）鉛鹽 （5）氯化鍶 （3）鋯鹽 （6）三氯化鐵反應(yīng) 硼酸顯色反應(yīng) 堿性試劑顯色反應(yīng) 顯色反應(yīng)1 -還原反應(yīng)鹽酸鎂粉反應(yīng)（HCl-Mg） 還原反應(yīng)2 四氫硼鈉反應(yīng)（NaBH4） 顯色反應(yīng) 1.還原反應(yīng) （1）鹽酸-鎂粉反應(yīng)（HCl-Mg） （2）四氫硼鈉反應(yīng)（NaBH4） 2.金屬鹽類試劑

5、的絡(luò)合反應(yīng) （1）鋁鹽 （4）鎂鹽 （2）鉛鹽 （5）氯化鍶 （3）鋯鹽 （6）三氯化鐵反應(yīng) 3.硼酸顯色反應(yīng) 4.堿性試劑顯色反應(yīng) ?？膳c金屬類試劑反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。 （1）鋁鹽 （2）鉛鹽 （3）鋯鹽 （4）鎂鹽 （5）氯化鍶 （6）三氯化鐵反應(yīng)黃酮類化合物分子結(jié)構(gòu)中多具有下列結(jié)構(gòu)： 金屬鹽類試劑的絡(luò)合（1）鋁鹽 可用于定性及定量分析 顯色反應(yīng) -金屬鹽類試劑的絡(luò)合（2）鉛鹽（3）鋯鹽 （ZrOCl2） 顯色反應(yīng) -金屬鹽類試劑的絡(luò)合（4）鎂鹽 顯色反應(yīng) -金屬鹽類試劑的絡(luò)合（5）氯化鍶（SrCl2） 顯色反應(yīng) -金屬鹽類試劑的絡(luò)合（6）三氯化鐵反應(yīng) 顯色反應(yīng) 還原反應(yīng) （1）鹽酸-鎂

6、粉反應(yīng)（HCl-Mg） （2）四氫硼鈉反應(yīng)（NaBH4） 金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng) （1）鋁鹽 （4）鎂鹽 （2）鉛鹽 （5）氯化鍶 （3）鋯鹽 （6）三氯化鐵反應(yīng) 硼酸顯色反應(yīng) 堿性試劑顯色反應(yīng) 顯色反應(yīng) -硼酸顯色反應(yīng) （五）顯色反應(yīng) 1.還原反應(yīng) （1）鹽酸-鎂粉反應(yīng)（HCl-Mg） （2）四氫硼鈉反應(yīng)（NaBH4） 2.金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng) （1）鋁鹽 （4）鎂鹽 （2）鉛鹽 （5）氯化鍶 （3）鋯鹽 （6）三氯化鐵反應(yīng) 3.硼酸顯色反應(yīng) 4.堿性試劑顯色反應(yīng) 顯色反應(yīng) -堿性試劑顯色反應(yīng)本 章 內(nèi) 容一、定義二、分類三、理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)四、提取與分離五、黃酮類化合物波譜解析六、生物

7、活性 黃酮類化合物的提取 根據(jù)化合物的性質(zhì)，采取哪些提取方法呢？ 化合物的極性？ 方法溶劑萃取 溶劑乙醇或甲醇；熱水；堿性水或堿性稀醇 化合物的酸性？ 方法堿提酸沉 黃酮類化合物的提取 系統(tǒng)溶劑萃取法 堿提酸沉法 熱水提取法 醇提取法 超臨界流體萃取法 系統(tǒng)溶劑萃取法 系統(tǒng)溶劑萃取法注意系統(tǒng)溶劑極性順序 提取-堿提取酸沉淀法注意：加入的酸、堿度應(yīng)盡可能低例如：蘆丁的提取熱水提取法由于黃酮苷易溶于水的性質(zhì)，故采用熱水提取水溶性雜質(zhì)多，純化困難甲醇或乙醇提取方法：可采用浸漬 /回流/滲濾，但不能用煎煮法醇濃度范圍：60%70%，低濃度適合提取苷類 85%95% 高濃度適合提取游離黃酮 黃酮類化合物

8、分離 根據(jù)化合物的性質(zhì)，采取哪些分離方法呢？ 化合物的極性大小？ 方法溶劑、吸附、分配色譜 化合物的酸性強(qiáng)弱？ 方法pH梯度萃取 化合物的分子大??？ 方法葡聚糖凝膠 分子中具有特殊結(jié)構(gòu)？ （如：鄰二酚羥基） 方法金屬鹽絡(luò)合 黃酮類化合物的分離 1.柱色譜法 （硅膠、氧化鋁、大孔吸附樹(shù)脂、 聚酰胺、葡聚糖凝膠） 2.pH梯度萃取法 柱色譜法-硅膠柱色譜（1）硅膠柱色譜 出柱先后順序： 若母核結(jié)構(gòu)相同，而-OH取代數(shù)目不同， 則-OH 數(shù)量多的后出柱 易形成分子內(nèi)氫鍵的-OH，其極性變小先出柱 如：鄰二-OH 間二-OH （Rf值） 一般出柱順序：苷元 單糖苷 雙糖苷 多糖苷 柱色譜法-氧化鋁柱色

9、譜 氧化鋁柱色譜 通常情況下，要求在分子的結(jié)構(gòu)中 無(wú)酸性基團(tuán)，或Ar-OH被甲基化情況下采用 柱色譜法-聚酰胺柱色譜聚酰胺（Polyamide）是由酰胺聚合而成的一類高分子物質(zhì)。商品名綿綸、尼龍。 原理：氫鍵吸附學(xué)說(shuō) 聚酰胺分子內(nèi)有很多酰胺鍵，可與酚類、酸類、醌類、硝基化合物等形成氫鍵，因而對(duì)這些物質(zhì)產(chǎn)生了吸附作用。 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜聚酰胺吸附物質(zhì)的原理如下圖： （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 吸附強(qiáng)弱取決于 化合物與聚酰胺形成氫鍵的能力。 聚酰胺對(duì)化合物的吸附力在水中有下列規(guī)律： 形成氫鍵的基團(tuán)越多，則吸附力越強(qiáng)； （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱

10、色譜 易形成分子內(nèi)氫鍵，則吸附力減弱； （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 芳香核、共軛雙鍵多者吸附力大； （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 以上介紹了聚酰胺對(duì)化合物吸附力的影響因素。 即： 形成氫鍵的基團(tuán)越多，則吸附力越強(qiáng)； （Ar-OH、-COOH、醌基、硝基等） 易形成分子內(nèi)氫鍵，則吸附力減弱； （鄰二-OH、3-OH 4-酮基、5-OH 4-酮基等） 芳香核、共軛雙鍵多者吸附力大； （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 聚酰胺柱色譜在分離黃酮類化合物時(shí) 有下述規(guī)律： （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 不同類型黃酮化合物的出柱先后順序： 異黃酮 二氫黃酮

11、醇 黃酮 黃酮醇 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 苷元相同，出柱先后順序（雙重色譜）： 叁糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元 查爾酮往往比相應(yīng)的黃酮類化合物難于洗脫 。 （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 在聚酰胺柱上，常用的洗脫溶劑如下： 水 甲醇 丙酮 氫氧化鈉/H2O 甲酰胺 二甲基甲酰胺 尿素/H2O （洗脫能力：弱 強(qiáng)） （二）分離 1.柱色譜法（4）聚酰胺柱色譜 聚酰胺色譜的應(yīng)用： 黃酮類、酚類、生物堿類、萜類、甾體、糖類等 （二）分離 1.柱色譜法（5）葡聚糖凝膠柱色譜葡聚糖凝膠（Sephadex gel） 用于黃酮類化合物的分離，主要有兩種型號(hào)： Sephadex-

12、G型Sephadex LH-20型（羥丙基葡聚糖凝膠） （二）分離 1.柱色譜法（5）葡聚糖凝膠柱色譜 作用機(jī)理： 分離游離黃酮時(shí)吸附作用 （取決于游離Ar-OH的數(shù)目， Ar-OH少則先出柱） 分離黃酮苷是分子篩起主導(dǎo)作用 （分子量大的先出柱） （二）分離 1.柱色譜法（5）葡聚糖凝膠柱色譜 常用洗脫溶劑： 堿性水溶液（0.1mol/L NH4OH） （含鹽水溶液0.5mol/L NaCl等） 醇及含水醇 其它溶劑 含水丙酮、甲醇-氯仿等。 黃酮類化合物的分離方法總結(jié) 1.柱色譜法 （硅膠、氧化鋁、聚酰胺、葡聚糖凝膠） 大孔吸附樹(shù)脂 2.pH梯度萃取法 3. HPLC法 4.超臨界流體色譜法

13、（SFC） （二）分離 2.pH梯度萃取法 適用于酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元的分離。該流程表示是什么方法？請(qǐng)進(jìn)行名詞解釋HPLC法吸附劑：C18 和 C8柱洗脫劑：常用洗脫劑為含一定比例的甲酸或乙酸 的甲醇-水或乙腈-水溶劑系統(tǒng)。反相色譜 黃酮類化合物的提取分離方法總結(jié)（一）提取 1.溶劑萃取法 2.堿提酸沉法 3.熱水提取法 4.醇提取法 5.SFE（二）分離 1.柱色譜法 2.pH梯度萃取法 3.HPLC 4.SFC本 章 內(nèi) 容一、定義二、分類三、理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)四、提取與分離五、黃酮類化合物波譜解析六、生物活性 五、黃酮類化合物波譜解析 在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用 主要有： （一）紫

14、外光譜（UV） （二）核磁共振1H-NMR （三）核磁共振13C-NMR （四）質(zhì)譜（MS） 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 多數(shù)黃酮類化合物在紫外（UV）譜中主要由兩個(gè)吸收帶組成。 苯甲?；到y(tǒng) 桂皮酰基系統(tǒng) ( benzoyl) (cinnamoyl) Band II Band I 220280 nm 300400 nm 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的交叉共軛體系苯甲?；到y(tǒng) 桂皮?；到y(tǒng) ( benzoyl) (cinnamoyl) Band II Band I 220280 nm 300400 nm 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫

15、外光譜（UV）黃酮類化合物在MeOH溶液中的紫外（UV）光譜特征 黃酮及黃酮醇類 查爾酮及橙酮類 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 黃酮及黃酮醇類 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 黃酮類在MeOH中B環(huán)氧代對(duì)Band I的影響 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 黃酮類在MeOH中A環(huán)氧代對(duì)Band II的影響 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 利用在MeOH中的UV區(qū)別黃酮和黃酮醇類Band I 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV）黃酮類化合物在MeOH溶液中的紫外（UV）光譜特征 黃酮及黃酮醇

16、類 查爾酮及橙酮類 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 查耳酮及橙酮類 波譜特征： 帶 I 強(qiáng)主峰 帶 II 弱次強(qiáng)峰2,3,4-三羥基查耳酮3,4-二羥基橙酮 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 查耳酮類 Band II220 270 nm Band I 340 390 nm 有時(shí)分裂為 Ia（340390） Ib（300320） 環(huán)上引入氧取代基（同黃酮及黃酮醇類） 使帶 I 紅移（ 2-OH影響最大） 2-OH甲基化或苷化使帶I紫移1520nm 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 橙酮類 常出現(xiàn)34個(gè)吸收峰 主峰（Ban

17、d I） 370 430 nm天然來(lái)源的橙酮 388 413 nm五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV）黃酮類化合物在MeOH溶液中的紫外（UV）光譜特征 黃酮及黃酮醇類 查爾酮及橙酮類 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇7-羥基異黃酮4,7-二羥基二氫黃酮 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇共同特點(diǎn)： 帶 I 弱B環(huán)不能與吡喃酮環(huán)上羰基共軛 帶 II 強(qiáng)主峰根據(jù)主峰位置區(qū)別： 異黃酮245270 nm 二氫黃酮、二氫黃酮醇270295 nm五、黃酮類化合物波譜解析（一）

18、紫外光譜（UV）黃酮類化合物在MeOH溶液中的紫外（UV）光譜特征 黃酮及黃酮醇類 查爾酮及橙酮類 異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇類 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） 加入診斷試劑后引起的位移及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的意義 下面以黃酮及黃酮醇為例進(jìn)行說(shuō)明 NaOMe NaOAc NaOAc/H3BO3 AlCl3、AlCl3/HCl五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOMe NaOMe是個(gè)強(qiáng)堿，在一定程度上可使黃酮及黃酮醇上所有的Ar-OH解離。 因此，將使Band I及II向紅位移。1. Band I + 4060 nm 強(qiáng)度不降有4-OH + 5060 nm 強(qiáng)度下降無(wú)

19、4-OH 有 3-OH 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOMe 2. 立即測(cè)試光譜 = 5分鐘后測(cè)試光譜 （即：Band I 和 Band II 吸收譜不隨時(shí)間延長(zhǎng)而衰退） 說(shuō)明無(wú) 3,4-二-OH結(jié)構(gòu)（free） （即無(wú)對(duì)堿敏感的取代圖式）3. 立即測(cè)試光譜 5分鐘后測(cè)試光譜 說(shuō)明可能存在 3,4-二-OH結(jié)構(gòu)（free）注：對(duì)堿敏感的取代圖式 3,4- 3,3,4- 5,6,7- 5,7,8- 3,4,5- 等 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOMe NaOAc NaOAc/H3BO3 AlCl3、AlCl3/HCl五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外

20、光譜（UV） NaOAc NaOAc的堿性 NaOMe，故只能使黃酮及黃酮醇上酸性較強(qiáng)的酚-OH解離，如7-，3-及4-OH。 NaOAc（未熔融） Band I在長(zhǎng)波一側(cè)有肩峰示有4-OH 但無(wú) 3-及/或7-OH Band II + 5 20 nm 示有 7-OH 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOAcNaOAc（熔融） Band I + 40 65 nm有 4-OH （強(qiáng)度不降） 譜圖隨時(shí)間處長(zhǎng)而衰退有堿敏感系統(tǒng) 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOMe NaOAc NaOAc/H3BO3 AlCl3、AlCl3/HCl五、黃酮類化合物波譜解析（一）

21、紫外光譜（UV） NaOAc/H3BO3 （H3BO3可與鄰二酚-OH螯合） Band I + 12 30 nmB環(huán)有鄰二酚-OH Band II + 5 10 nmA環(huán)有鄰二酚-OH （不包括5,6-位） 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOMe NaOAc NaOAc/H3BO3 AlCl3、AlCl3/HCl五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） AlCl3、AlCl3/HCl AlCl3可與下列結(jié)構(gòu)系統(tǒng)螯合，并引起相應(yīng)的吸收帶向紅位移。 其中，鄰二酚-OH形成的絡(luò)合物不穩(wěn)定，加少量酸水即可分解。反應(yīng)過(guò)程如下：五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） Al

22、Cl3、AlCl3/HCl 黃酮類化合物與AlCl3形成的絡(luò)合物五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） AlCl3、AlCl3/HCl AlCl3/HCl = AlCl3譜圖 結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚-OHAlCl3/HCl AlCl3譜圖 可能有鄰二酚-OH Band I 紫移 30 40 nm B環(huán)有鄰二酚-OH 紫移 50 65 nm A、B環(huán)均有鄰二酚-OH五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） AlCl3、AlCl3/HCl AlCl3/HCl = MeOH譜圖 無(wú) 3-及/或 5-OHAlCl3/HCl MeOH譜圖 可能有3-及/或5-OH Band I 紅移 35 55

23、nm 只有 5-OH 紅移 60 nm 只有 3-OH 紅移 50 60 nm 可能同時(shí)有3-及5-OH 紅移 17 20 nm 除5-OH外尚有6-含氧取代 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） NaOMe NaOAc NaOAc/H3BO3 AlCl3、AlCl3/HCl 五、黃酮類化合物波譜解析（一）紫外光譜（UV） MeOH了解結(jié)構(gòu)類型、-OH取代數(shù)目等； MeOH / NaOMe了解是否有Ar-OH； MeOH / NaOAc了解酸性強(qiáng)的Ar-OH， 即7、4-OH； NaOAc/H3BO3 了解鄰二Ar-OH； AlCl3、AlCl3/HCl 鄰二Ar-OH或C3、C5

24、-OH一般測(cè)定程序：五、黃酮類化合物波譜解析 在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用 主要有： （一）紫外光譜（UV） （二）核磁共振1H-NMR （三）核磁共振13C-NMR （四）質(zhì)譜（MS） 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR溶劑 氘代氯仿、氘代二甲基亞砜（DMSO-d6） 氘代吡啶等。 也可作成三甲基硅醚衍生物，溶于四氯化碳中進(jìn)行測(cè)定。1H-NMR在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1. A環(huán)質(zhì)子 2. B環(huán)質(zhì)子 3. C環(huán)質(zhì)子 4. 糖端基碳上的質(zhì)子 5. 乙酰氧基上的質(zhì)子 6. 甲氧基上的質(zhì)子從以下幾個(gè)方面介紹： 五、黃酮類化合物波譜解析

25、（二） 1H-NMR1. A環(huán)質(zhì)子 (1) 5,7-二羥基黃酮類黃酮、黃酮醇、異黃酮 二氫黃酮、二氫黃酮醇 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR1. A環(huán)質(zhì)子 (1) 5,7-二羥基黃酮類 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMRH-5 ppm 8.0 d, J= 9.0 Hz （C4羰基負(fù)屏蔽效應(yīng)，使其在較低場(chǎng)； 與H-6鄰偶二重峰）H-6 ppm 6.77.1 dd, JH-5=9.0 Hz JH-8=2.5 Hz （與H-5鄰偶；與H-8間偶）H-8 ppm 同H-6 d, J=2.5 Hz1. A環(huán)質(zhì)子 (2) 7-羥基黃酮類 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR1

26、. A環(huán)質(zhì)子 (2) 7-羥基黃酮類 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1. A環(huán)質(zhì)子 2. B環(huán)質(zhì)子 3. C環(huán)質(zhì)子 4. 糖端基碳上的質(zhì)子 5. 乙酰氧基上的質(zhì)子 6. 甲氧基上的質(zhì)子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR2. B環(huán)質(zhì)子 (1) 4-氧取代黃酮類化合物 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR2. B環(huán)質(zhì)子 (2) 3,4-二氧取代黃酮及黃酮醇類化合物 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 依據(jù)H-2及H-6的化學(xué)位移，可以區(qū)別黃酮及黃酮醇的3,4-位上是 3-OH, 4-OMe 3-OMe, 4-OH。2. B環(huán)質(zhì)子 (2) 3,4-二氧取

27、代黃酮及黃酮醇類化合物 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR2. B環(huán)質(zhì)子 (2) 3,4-二氧取代黃酮及黃酮醇類化合物 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR2. B環(huán)質(zhì)子 (3) 3,4-二氧取代異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMRB環(huán)有3,4,5-三-OH時(shí)H-2及H-6 （2H，S，6.50 7.50）3-OH或5-OH甲基化或苷化 H-2及H-6 （2H，d，J 2.0 Hz）2. B環(huán)質(zhì)子 (4) 3,4,5-三氧取代黃酮類化合物 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1. A環(huán)質(zhì)子 2. B環(huán)質(zhì)子 3. C環(huán)質(zhì)子 4.

28、糖端基碳上的質(zhì)子 5. 乙酰氧基上的質(zhì)子 6. 甲氧基上的質(zhì)子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR孤立芳?xì)涞膯畏逍盘?hào)易與之相混注意3. C環(huán)質(zhì)子 (1) 黃酮類 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR3. C環(huán)質(zhì)子 (2) 異黃酮類 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR3. C環(huán)質(zhì)子 (3) 二氫黃酮及二氫黃酮醇 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR3. C環(huán)質(zhì)子 (4) 查耳酮及橙酮類 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1. A環(huán)質(zhì)子 2. B環(huán)質(zhì)子 3. C環(huán)質(zhì)子 4. 糖端基碳上的質(zhì)子 5. 乙酰氧基上的質(zhì)子 6. 甲氧基上的質(zhì)子 五、黃酮類化

29、合物波譜解析（二） 1H-NMR黃酮苷類化合物上糖的質(zhì)子信號(hào)（端基質(zhì)子） 黃酮醇-3-O-葡萄糖苷 5.70 6.00 黃酮醇-3-O-鼠李糖苷 5.00 5.10 黃酮類 -7-O-葡萄糖苷 4.80 5.20 黃酮類-4-O-葡萄糖苷 黃酮類 -5-O-葡萄糖苷 黃酮類-6 及 8-C-糖苷4. 糖端基碳上的質(zhì)子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1. A環(huán)質(zhì)子 2. B環(huán)質(zhì)子 3. C環(huán)質(zhì)子 4. 糖端基碳上的質(zhì)子 5. 乙酰氧基上的質(zhì)子 6. 甲氧基上的質(zhì)子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 有時(shí)將黃酮類化合物制備成乙?；锖筮M(jìn)行結(jié)構(gòu)測(cè)定脂肪族： 乙酰氧基上的質(zhì)

30、子信號(hào) 1.65 2.10 根據(jù)質(zhì)子數(shù)目判斷苷中結(jié)合糖的數(shù)目芳香族： 乙酰氧基上的質(zhì)子信號(hào) 2.30 2.50 根據(jù)質(zhì)子數(shù)目判斷 苷元上Ar-OH數(shù)目5. 乙酰氧基上的質(zhì)子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 1. A環(huán)質(zhì)子 2. B環(huán)質(zhì)子 3. C環(huán)質(zhì)子 4. 糖端基碳上的質(zhì)子 5. 乙酰氧基上的質(zhì)子 6. 甲氧基上的質(zhì)子 五、黃酮類化合物波譜解析（二） 1H-NMR 甲氧基質(zhì)子信號(hào)一般在：ppm 3.50 4.10 可通過(guò)NOE核磁共振技術(shù)及二維技術(shù)確定基位置6. 甲氧基上的質(zhì)子 五、黃酮類化合物波譜解析 在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用 主要有： （一）紫外光譜（UV） （二）核

31、磁共振1H-NMR （三）核磁共振13C-NMR （四）質(zhì)譜（MS） 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR1. 骨架類型的判斷2. 取代圖式的確定方法3. 氧糖苷中的連接位置4. 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及 糖的連接順序13C-NMR在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR 1. 骨架類型的判斷 根據(jù)中央三個(gè)碳信號(hào)的位置、裂分等，推斷其骨架類型。 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR1. 骨架類型的判斷2. 取代圖式的確定方法3. 氧糖苷中的連接位置4. 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及 糖的連接順序13C-NMR在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用

32、五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR黃酮（flavone） 2. 取代圖式的確定方法 根據(jù)芳香碳的信號(hào)特征來(lái)確定取代圖式。 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR即： 2. 取代圖式的確定方法 A環(huán)上引入取代基影響A環(huán)位移效應(yīng)。 B環(huán)上引入取代基位移效應(yīng)影響到B環(huán)。 C-5引入-OH影響A環(huán)、C4、C2、C3 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR 2. 取代圖式的確定方法 如： B環(huán)上引入取代基時(shí)的位移效應(yīng)影響 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR 2. 取代圖式的確定方法 5,7-二羥基黃酮中C-6、C-8信號(hào)特征： 通常5,7-二-OH化合物的C-6、

33、C-8 90.0 100.0 在二氫黃酮中 C6 - C8 = 0.9 ppm 黃酮及黃酮醇中 C6 - C8 = 4.8 ppm如何判斷C-6、C-8有無(wú)烷基或芳香基取代？ 判斷C-6、C-8有無(wú)烷基或芳香基取代，可通過(guò)觀察化學(xué)位移值是否發(fā)生位移而確定。 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR1. 骨架類型的判斷2. 取代圖式的確定方法3. 氧糖苷中的連接位置4. 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及 糖的連接順序13C-NMR在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR 3. 氧糖苷中的連接位置 （1）糖的苷化位移及端基碳的信號(hào) 酚性苷中，糖上端基碳的苷化位移約為: + 4.0 + 6.0 （2）苷元的苷化位移 通常，苷元糖苷化后直接相連碳原子向高場(chǎng)位移，其鄰位及對(duì)位碳原子則向低場(chǎng)位移，且對(duì)位碳原子的位移幅度大。 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR 3. 氧糖苷中的連接位置 如：黃酮類化合物的苷化位移情況 五、黃酮類化合物波譜解析（三） 13C-NMR1. 骨架類型的判斷2. 取代圖式的確定方法3. 氧糖苷中的連接位置4. 雙糖苷及低聚糖苷中苷鍵及 糖的連接順序13C-NMR在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用