腸道微生態(tài)臨床研究

1、關于腸道微生態(tài)的臨床研究第一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月一、微生態(tài)學（Microecology）概念 研究正常微生物群與其宿主相互關系的生命科學，一門新興的生命科學分支是“微觀生態(tài)學”，與宏觀生態(tài)學相對應與傳統(tǒng)的醫(yī)學微生物學不同醫(yī)學微生物學主要研究病原微生物對宿主的致病作用第二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月人體微生態(tài)學人體有胃腸道、口腔、泌尿生殖道、皮膚和呼吸道五大微生態(tài)系統(tǒng) 胃腸道微生態(tài)對人體最重要，研究最早、最多腸道是體內細菌定植的主要場所，腸道定植的細菌具有數(shù)量巨大、多樣化、復雜性和動態(tài)性的特點，構成了人體的腸道菌群（intestinal microflora）

2、腸道菌群從無到有，伴隨著人的一生而變化，直至生命結束第三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月二、腸道菌群的建立及其影響因素摘自光岡知足博士資料第四張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月影響腸道菌群建立及其組成的因素 Current Opinion in Biotechnology 2010, 21:149156第五張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月主要（優(yōu)勢）菌群（predominant microflora）： 數(shù)量在107-108/g以上，主要為原籍菌（autochthony）或常駐菌(resident flora) ，包括類桿菌屬、優(yōu)桿菌屬、雙歧桿菌屬、瘤胃球菌屬和梭菌

3、屬等專性厭氧菌，是對宿主發(fā)揮生理功能的菌群次要菌群（subdominant microflora）： 數(shù)量在107-108/g以下，主要為外籍菌（allochthony）或過路菌(transient flora),如大腸桿菌和鏈球菌等，流動性大，有潛在致病性乳桿菌：數(shù)量上歸次要菌群，但功能上歸優(yōu)勢菌群腸道菌群的分類第六張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 腸道中微生物(原籍菌)種類:99.9%是以雙歧桿菌和類桿菌為主的專性厭氧菌 0.1%是以腸桿菌科細菌為主的兼性厭氧菌1g1000g(78.67%)20g200g20g10g20g三、腸道菌群的分布和構成占專性厭氧菌98%，是最占優(yōu)勢的原

4、籍菌第七張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 胃腸道微生態(tài)系統(tǒng)胃PH2分泌酸（HCl)對大分子物質進行消化乳酸菌屬小腸PH4-7連續(xù)的消化吸收單糖、氨基酸、脂肪酸、水腸道球菌屬、乳酸糖屬大腸PH7儲存、運輸食物殘渣，吸收膽酸、維生素B12雙岐桿菌屬、乳酸菌屬消化球菌屬、腸道細菌等第八張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月人體腸道定居的幾種重要的菌群 專性厭氧菌屬革蘭染色兼性厭氧菌屬革蘭染色雙歧桿菌 BifidobacteriaG+乳桿菌屬 LactobacilliG+梭狀芽胞桿菌 ClostridiaG+腸球菌屬 EnterococciG+真細菌屬 Eubacteria G+鏈球菌屬

5、 StreptococciG+擬桿菌屬 BacteroidesG-葡萄球菌 StaphylococciG+梭桿菌屬(優(yōu)桿菌) FusobacteriaG-腸桿菌 EnterobacteriaG-第九張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月腸道菌群的分類第十張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月四、腸道菌群的生理功能 腸道菌群與宿主處于共生的狀態(tài),是進化的結果宿主為腸道菌群提供其生命活動的場所，并且對腸道菌群不引起強烈的免疫反應（免疫耐受狀態(tài)）腸道菌群對宿主發(fā)揮著必要的生理功能： 防御感染與增強腸道屏障功能 促進免疫系統(tǒng)發(fā)育成熟，并參與免疫應答調節(jié) 參與營養(yǎng)吸收及代謝 延緩衰老 抗腫瘤第十

6、一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月腸道微生態(tài)系統(tǒng)的重要性EMBO Report 2006;7:688-93 腸道微生態(tài)是對健康狀態(tài)的積極評價，根本 性影響?zhàn)つっ庖呦到y(tǒng)的結構和功能 微生態(tài)改變能成為各種小腸功能失調的致病 原因（包括IBD），控制微生態(tài)能成為有效治 療措施第十二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月微生態(tài)具有聚集代謝能力等同于器官中重要器官, 受細菌對黏膜體內平衡和免疫反應擴散的條件性影響更好地理解這個隱藏的器官將揭示人類健康和感染、炎癥及新生物形成的奧秘腸道微生態(tài)系統(tǒng)的重要性第十三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（五）人體微生物組計劃 隨著人類基因組計劃

7、(HGP)完成以后， 2007年正式啟動人體微生物組計劃 (Human Microbiome Project,HMP) 人體微生物組或宏基因組(metagenome)是人體的第二個基因組，其編碼的基因是人體自身基因數(shù)目的50-100倍 人類基因組與微生物組共同作用，影響人體的免疫、營養(yǎng)和代謝過程第十四張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月人體微生物組計劃人類是一個超級生物體(superorganism),由細菌和人體細胞共同組成，這對許多人類疾病的臨床診斷和治療有深遠的意義 （Metagenomic analysis of the human distal gut microbiome.

8、Science. 2006;312(5778):1355-9.）微生物組被2010年自然雜志預測為未來十年科學的走向之一HMP：腸道菌群研究進入了基因時代第十五張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月六、微生態(tài)制劑概念益生菌（Probiotics): 指給予一定數(shù)量的、能夠對宿主健康產(chǎn)生有益作用的活的微生物。常用菌種有雙歧桿菌、乳桿菌、糞鏈球菌、酪酸梭菌、芽孢桿菌和布拉酵母菌。益生原(元)（Prebiotics): 能夠選擇性地刺激宿主腸道內一種或幾種有益菌的活性或生長繁殖，又不能被宿主消化和吸收的物質。目前主要指非消化性低聚糖（NDO），包括菊糖、低聚果糖（FOS）、低聚半乳糖（GOS）、

9、大豆低聚糖、乳果糖等。合生原(元)（Synbiotics): 益生菌與益生元的復合制劑。 目前在臨床使用的微生態(tài)藥物主要為益生菌。第十六張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月微生態(tài)制劑應滿足以下標準 來源于人體的常居微生物 具有耐酸和耐膽汁 能黏附在人的消化道黏膜細胞上 能在人消化道定殖能影響新陳代謝(如膽固醇吸收、乳糖酶活性、維生素產(chǎn)生)能調節(jié)免疫應答能在生產(chǎn)加工和保存過程中成活并具有一定數(shù)量的細菌能產(chǎn)生抗微生物的物質無副作用和安全無害的食品或藥品 第十七張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 七、益生菌在機體內的作用機制 1）拮抗腸道病原菌 與致病菌競爭粘附于IEC，阻止其入侵、定

10、植和生長，促進腸蠕動，易于排出其酸性代謝產(chǎn)物能使腸道pH及氧化還原電勢（Eh）下降，抑制不耐酸的腸道致病菌生長與腸道潛在致病菌競爭有限的細菌生長必需的營養(yǎng)成分，抑制潛在病原菌的生長繁殖代謝產(chǎn)生一些抑制或殺傷病原菌的成分，如雙歧桿菌產(chǎn)生的Bifilong和Bifidin，有一定的抗菌作用第十八張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月能維護由腸粘膜和粘液層構成的機械性屏障 保護腸粘膜緊密連接蛋白的作用，免受侵襲性大腸桿菌的影響，降低腸道通透性保護上皮生長因子受體，使其發(fā)揮受損腸粘膜的修復作用 2）維護腸粘膜屏障完整性第十九張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月刺激腸粘膜相關淋巴組織分泌SIg

11、A，激活單核巨噬細胞系統(tǒng)等調節(jié)機體的免疫功能 對于自身免疫性因素參與的炎癥性腸病，如潰瘍性結腸炎，應用益生菌制劑能大大降低復發(fā)率 3）調節(jié)免疫第二十張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月以氨為氮源，在腸道內合成氨基酸和尿素，減少腸道內氨的吸收，降低血氨濃度參與了多種維生素的合成吸收和利用 有利于維生素D，鈣和鐵離子的吸收 降低血清膽固醇和甘油二酯 增加血SOD的含量和活性4）合成營養(yǎng)成分，拮抗毒素吸收第二十一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月根據(jù)微生態(tài)變化選擇根據(jù)病理生理變化選擇 如維生素缺乏用干酵母、枯草桿菌制劑根據(jù)聯(lián)合用藥選擇 抗菌藥物死菌或提取物1）微生態(tài)制劑的選擇原則八、微

12、生態(tài)制劑的應用第二十二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月根據(jù)制劑特點選擇 單一菌種 制劑純、量大、易保存、作用相對狹 多菌種 作用譜廣、比例設計、生產(chǎn)保存難 合生元 國內尚無理想制劑，開發(fā)前景廣第二十三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月對人、動物無致病性能被抗生素滅活不會對人、動物所用抗生素產(chǎn)生抵抗不產(chǎn)生抗生素不會從腸腔易位無基因轉移2)微生態(tài)制劑安全性要求第二十四張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月應用于下列病因所致輕中型急慢性腹瀉： 抗菌藥物相關性腹瀉、旅游者腹瀉 部分感染性腹瀉等八、微生態(tài)制劑的臨床應用第二十五張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 Sunil

13、等統(tǒng)計截至 2006.2 嚴格采用隨機雙盲對照研究 有關益生菌治療急性腹瀉的文章34篇發(fā)現(xiàn)： 抗生素相關腹瀉的有效率 52 旅行者腹瀉的有效率 8% 其他原因腹瀉的有效率 34 預防腹瀉發(fā)生 兒童 57 成人 26Lancet Infect Dis 2006,6:374382第二十六張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月微生態(tài)制劑的臨床應用IBS：一種以腹痛或腹部不適伴排便習慣改變?yōu)樘卣鞯墓δ苄阅c病。該病缺乏可解釋癥狀的形態(tài)學改變和生化異常分類： 腹瀉型 便秘型 腹瀉便秘交替型第二十七張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月Peter J, et al.American Journal

14、of Gastroenterology.2006;101:15811590腹痛/不適腹脹各種不適組合分數(shù)陽性應答率微生態(tài)與IBS第二十八張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月胃腸脹氣腹脹腹痛Hoveyda N et al BMC Gastroenterology 2009, 9:15第二十九張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月一組服用含乳酸菌（Lactobacillus salivarius UCC4331，11010 ）的麥乳精飲料；一組服用雙歧桿菌（Bifidobacterium infantis 35624， 11010 ）的麥乳精飲料；一組為安慰劑對照。臨床研究乳酸菌、雙歧桿

15、菌對IBS癥狀的作用及其與細胞因子的關系研究方法：77例IBS患者隨機分成三組服用8周，每日記錄IBS患者的主要癥狀，評估生活質量、糞便微生物、外周單核細胞釋放的細胞因子白介素-10和白介素-12。第三十張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月試驗結果雙歧桿菌可以有效降低IBS患者癥狀積分，但乳酸菌和安慰劑則不明顯第三十一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月試驗結果雙歧桿菌可以有效改善IBS患者腹痛、腹脹癥狀積分，乳酸菌在第2周時改善腹痛癥狀積分第三十二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月雙歧桿菌可以有效降低IBS患者排便困難癥狀積分雙歧桿菌可以改變IL-10/IL-12的比值試

16、驗結果第三十三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月IBD益生菌輔助治療IBD的主要機制： 1、與腸粘膜上皮細胞緊密結合形成生物屏障，通過其代謝產(chǎn)物阻止致病菌的定植和入侵，保護宿主免受致病菌的侵害。 2、可促進腸上皮細胞分泌粘蛋白，既提供益生菌合適的生長環(huán)境，又能抑制致病菌的定植。 3、抑制巨噬細胞釋放TNF的同時，可能還通過誘導免疫耐受而起到治療炎癥性腸病的作用。微生態(tài)制劑的臨床應用第三十四張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月Sheil B,et al.J. Nutr. 137: 819S824S, 2007.減輕炎癥降低復發(fā)保護腸道屏障第三十五張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022

17、年6月Sheil B,et al.J. Nutr. 137: 819S824S, 2007.維持緩解降低復發(fā)調節(jié)免疫改善腸道通透性第三十六張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月BALFOUR- SARTOR R,et al. GASTROENTEROLOGY 2004;126:16201633第三十七張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月肝硬化 研究對象：24例肝硬化患者，child-pugh B或C級 實驗分組：培菲康，3粒，tid，療程3周 觀察指標：治療前后測下列指標糞便中的7種常見厭氧菌及需氧菌定量分析外周血內毒素水平外周血IL-6水平 正常對照：健康成人18例益生菌的臨床應用

18、第三十八張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月治療前后腸道菌群的變化細菌正常組培菲康組治療前治療后雙歧桿菌10.94+1.32 7.64+4.5210.40+1.98*乳酸桿菌8.95+ 1.199.51 +1.299.32+0.90真桿菌9.30+ 1.397.79+4.519.54+1.53擬桿菌9.27+1.254.08+4.858.01+1.95*產(chǎn)氣莢膜菌8.01+0.739.74+1.158.12+1.32*腸球菌6.06+1.027.13+2.067.53+2.06大腸桿菌7.21+0.718.03+1.837.22+1.37*: P0.05上海市消化疾病研究所第三十九張，P

19、PT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月治療前后內毒素、IL-6的變化指標正常組培菲康組治療前治療后內毒素5.96 + 0.6110.32 + 2.09#7.79 + 3.51*IL-613.96 + 6.8326.58 + 16.57#20.92 + 15.98*#: P0.05 *: P0.05上海市消化疾病研究所第四十張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月治療后其他情況改善腹瀉、便秘、腹脹：明顯減輕或消失，大便成形總有效率：89%血漿白蛋白升高(P0.05)：治療前：27.60 4.33治療后：32.68 5.97上海市消化疾病研究所第四十一張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 搜

20、索PubMed, Scopus, Web of Science, and Cochrane 分析關于腹部手術圍手術期使用微生態(tài)制劑RCTs結果 9個RCTs 研究涉及733患者，術后肺炎，膽管炎，任何感染以及術后住院時間和抗生素治療時間在接受微生態(tài)制劑治療組明顯降低；但術后傷口感染率，尿路感染率，腹內膿腫和死亡率無顯著差異 結論微生態(tài)制劑能降低腹部手術后的手術后感染率 益生菌的臨床應用手術后感染第四十二張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月根除Hp 作用機制： 1、益生菌通過活化幽門螺桿菌感染中細胞因子信號抑制物(SOCS)的表達和信號轉導來發(fā)揮抗炎作用。 2、通過STAT-1/STAT-

21、3的活化和JAK2的失活來發(fā)揮作用的SOCS抗炎信號可能是益生菌關鍵的抗炎機制，使其成為幽門螺桿菌感染的非微生物策略。 3、占位機制：乳酸桿菌定植于胃粘膜，通過占位效應與HP競爭結合位點，抑制HP粘附。 4、營養(yǎng)競爭與HP競爭營養(yǎng)物質，不利于HP繁殖微生態(tài)制劑的臨床應用第四十三張，PPT共四十九頁，創(chuàng)作于2022年6月培菲康四聯(lián)療法提高Hp根除率臨床初步研究240例每中心60例分4組三聯(lián)療法7天（d1-d7）培菲康14天（d1-d14） 三聯(lián)療法7天（d14-d21）三聯(lián)療法7天（d1-d7） 培菲康14天（d8-d21）培菲康14天（d1-d14） 三聯(lián)療法（d14-d21）培菲康14天（d22-d35）A