米曲霉通用型染料法熒光定量PCR試劑盒說明書

1、米曲霉通用型染料法熒光定量PCR試劑盒說明書1、試劑盒簡介貨為了適應米曲霉通用型染料法熒光定量PCR試劑盒快速檢測和疫病研究的需要，本公司參照 OIE國際標準中規(guī)定的引物序列，經多次實驗及系統(tǒng)優(yōu)化，開發(fā)生產了本試劑盒。應用本試劑盒進行檢測具有快速、靈敏、特異、準確、安全操作簡單、應用廣泛和高通量檢測等特點及優(yōu)點。2、試劑盒組成:試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑，具體組成參見表 1：s表 1：試劑盒組成（50test/盒）試劑盒組成及試劑配制：酶聯(lián)板（Assay plate）：一塊（96孔）。2.標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。3.樣品稀釋液（Sample Diluent）：

2、120ml/瓶4.生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：110ml/瓶。5.辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液（HRP-avidin Diluent）：110ml/瓶。6.生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1120l/瓶（1：100）7.辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1120l/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：110ml/瓶。9.濃洗滌液（Wash Buffer）：120ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。10.終止液（Stop Solution）：110ml/瓶（2N H2SO4）。樣本處理及要

3、求：1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20或-80保存，但應避免反復凍融。2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20或-80保存，但應避免反復凍融。3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑

4、制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。將勻漿液于5000g離心510分鐘，取上清檢測。4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20或-80保存，但應避免反復凍融。操作流程:1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4。2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50L；3.樣本孔中加入待測樣本50L；空白孔不加。4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100L，用封板膜封住反應孔，37水浴鍋或恒溫箱溫

5、育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350L），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。6.每孔加入底物A、B各50L，37避光孵育15min。7.每孔加入終止液50L，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。樣本：血清血漿組織勻漿等液體樣本標記物：血清血漿組織勻漿等應用：僅用科研實驗檢測定量，定性檢檢測方法：夾心法技術要求：全程按說明書步驟檢測，操作規(guī)范，專業(yè)，儀器設備齊全。規(guī)格：48t/96t性狀：液體運輸方式：快遞發(fā)貨有效期：6個月品特點：靈敏性高，-性，吸附均勻，吸附性好，回收利用率高，是一款可以讓您放心選購的產品。

6、使用范圍：此產品供科研實驗使用，不得用于-。用途：用于測定人血清、血漿、組織及相關液體樣本中的含量或活性。注意事項:1 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。2.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。3.請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數（n5）。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。8.本試劑不同批號組分不得混用。9.不