實驗二氣孔狀態(tài)觀察

1、關(guān)于實驗二氣孔狀態(tài)觀察第一張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月腎形（雙子葉植物）啞鈴形（單子葉植物）第二張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月氣孔密度：單位葉片面積上的氣孔數(shù) （顯微鏡視野面積內(nèi)觀測到的氣孔數(shù)）氣孔開度：保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)壁間跨距開度第三張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月不同植物氣孔的數(shù)目和大小第四張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月掌握測定氣孔密度和開度的方法；學(xué)會分析影響因素對氣孔運動的調(diào)節(jié)；學(xué)會利用顯微鏡物鏡測微尺（物尺）標(biāo)定目鏡測微尺（目尺）的方法。1. 實驗?zāi)康?第五張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2.1 印跡法以有機(jī)物質(zhì)的溶膠（火棉膠、牛皮

2、膠、醋酸纖維素膠、指甲油等）涂在植物的表面, 膠體風(fēng)干后凝成薄膜，這層膜上印有表皮組織各細(xì)胞的界跡邊痕，從而顯示出氣孔的開閉情況 。將印膜撕下，供觀察和測量。除用來觀察氣孔狀況外，還可用于觀測植物表皮上的細(xì)胞、茸毛、蜜腺、蜜盤、刺、鱗片等。優(yōu)點: 非破壞性取樣；方便快捷。缺陷: 界跡邊痕不明顯的樣品印跡模糊；凹陷氣孔難以取到印跡； 清晰薄膜制作有難度。2. 實驗原理 第六張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2.2 固定法優(yōu)點: 鏡下觀察較印跡法的醒目；植物材料可長期保存；凹陷氣孔仍可觀察。缺陷: 破壞性取樣；不適用于下表皮難于剝離的樣品觀察。 無水乙醇能使植物細(xì)胞迅速脫水、死亡，因而細(xì)胞

3、壁硬化、細(xì)胞形狀固定，氣孔也得以保持原形，有利于以后鏡檢研究 。第七張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2. 3 K+ 對氣孔開度的影響氣孔運動的機(jī)制（4種假說）:淀粉與糖轉(zhuǎn)化學(xué)說K+積累學(xué)說蘋果酸代謝學(xué)說玉米黃素假說第八張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 在光下，保衛(wèi)細(xì)胞中的葉綠體通過光合磷酸化生成ATP，ATP驅(qū)動質(zhì)膜上的K+-H+泵，使保衛(wèi)細(xì)胞能逆濃度梯度從周圍表皮細(xì)胞吸收K+，或從外界溶液中吸收K+ ，從而降低其滲透勢，促進(jìn)保衛(wèi)細(xì)胞吸水，氣孔開放。 K+在保衛(wèi)細(xì)胞的積累，可以促進(jìn)氣孔開放。 Na+可以代替K+，使氣孔開放，但效果如何？K+積累學(xué)說第九張，PPT共二十七頁，

4、創(chuàng)作于2022年6月蠶豆葉片，竹葉菜（Commelina benghalensis） 載玻片、蓋玻片、顯微鏡、測微尺、培養(yǎng)皿印跡法：火棉膠、棉花球、鑷子、刀片；固定法：無水酒精、鑷子0.5% KNO3、NaNO3溶液光源（生長箱或自然光）3. 材料、儀器設(shè)備與試劑第十張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月目鏡測微尺(目尺)：是一塊可放在目鏡內(nèi)隔板上的圓形小玻片，其中央有精確的等分刻度，有等分為50小格和100小格兩種。 用以測量經(jīng)顯微鏡放大后的物像大小?？潭却笮‰S放大倍數(shù)變化而改變。物鏡測微尺(物尺)：是中央部分刻有精確等分線的載玻片，一般是將1mm等分為100格，每格長10m。 實際長度

5、不受放大倍數(shù)影響。專用于校正目鏡測微尺 (目尺)每格的相對長度。第十一張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月目鏡測微尺 物鏡測微尺 第十二張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月4. 實驗步驟1）計算顯微鏡視野直徑和面積（ 40，物尺） 物尺放在視野直徑線計算直徑，視野面積S=(d/2)2。2）用物尺標(biāo)定目尺（ 40） 由于不同顯微鏡鏡筒長度不同，或不同的目鏡和物鏡組合放大倍數(shù)不同，目尺每小格所代表的實際長度也不一樣。 因此，用目尺測量物體大小時，必須先用物尺校正，以計算出在一定放大倍數(shù)目鏡和物鏡下目尺所代表的實際長度，然后才能用來測量物體大小。 第十三張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于202

6、2年6月低倍鏡下找到物尺，并移至視野中部，高倍鏡下標(biāo)定目尺。 目尺每格10 20/ 29（m）目尺物尺每格10m目尺29格對物尺20格第十四張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月視野10格目尺r = ? 計算氣孔密度17格目尺對應(yīng)6 格物尺目尺每格610 / 17 （um）測氣孔大小目尺17格物尺6格第十五張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月計算氣孔開度？m第十六張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月將火棉膠均勻涂抹于葉片下表皮表面，風(fēng)干2 min，用鑷子揭開一層薄膜；將薄膜平鋪在稍有濕潤(哈氣)的載玻片上，壓上蓋玻片，鏡檢；低倍鏡下選視野，高倍鏡下觀察記數(shù)，觀察3個視野的氣孔數(shù)

7、目。3）印記法觀察氣孔密度第十七張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月4） 固定法觀察氣孔密度用鑷子撕剝?nèi)~片下表皮（用刀片切一小口以利于撕取或直接將鑷尖插入下表皮后側(cè)拉），迅速（愈快愈好）放入無水乙醇中固定23 min，把固定好的表皮平放在載玻片上，加幾滴無水乙醇，壓上蓋玻片，鏡檢，低倍鏡下選視野，高倍鏡下觀察記數(shù)，觀察3個視野的氣孔數(shù)目。 第十八張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月5） K+、Na +對氣孔開度的影響3個培養(yǎng)皿中分別放0.5%KNO3、0.5%NaNO3溶液和蒸餾水各15 ml；每個培養(yǎng)皿放23 張從相似葉位/相近大小的葉片上取下的下表皮；25下，光照處理60 mi

8、n； 依次制片和鏡下觀察氣孔開度，記錄與開度相應(yīng)的目尺格數(shù)。每個處理隨機(jī)觀察5個氣孔。第十九張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月實驗步驟1）計算顯微鏡視野直徑和面積（ 40，物尺）2）用物尺標(biāo)定目尺（ 40）3）印記法觀察氣孔密度：將火棉膠均勻涂抹于葉片下表皮表面，風(fēng)干2 min，用鑷子揭開一層薄膜；將薄膜平鋪在稍有濕潤(哈氣)的載玻片上，壓上蓋玻片，鏡檢，觀察3個視野的氣孔數(shù)目。4）固定法觀察氣孔密度：用鑷子撕剝?nèi)~片下表皮，迅速放入無水乙醇中固定23 min，把固定好的表皮平放在載玻片上，加幾滴無水乙醇，壓上蓋玻片，鏡檢，觀察3個視野的氣孔數(shù)目。5）K+、Na+對氣孔開度的影響：3個培

9、養(yǎng)皿中分別放0.5% KNO3、0.5% NaNO3溶液和水各15 ml；每個培養(yǎng)皿分別放23張從相似葉位/相近大小的葉片上取下的下表皮；25下，光照處理60 min；依次制片和鏡下觀察氣孔開度，記錄與開度相應(yīng)的目尺格數(shù)。每個處理隨機(jī)觀察5個氣孔。第二十張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月1）比較印跡法和固定法測定的氣孔密度，如果兩者結(jié)果有差異，試加以分析。5. 結(jié)果與分析表1 不同方法觀察的氣孔密度方 法 固定法 印跡法 a1 a2 a3 b1 b2 b3氣孔數(shù)目平均數(shù)視野直徑及面積氣孔密度(個/mm2)第二十一張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 氣孔開度（目尺格數(shù)） 氣孔開度

10、(m) 平均開度(m) a1 a2 KNO3 a3 a4 a5 b1 b2NaNO3 b3 b4 b5 c1 c2H2O c3 c4 c5目尺標(biāo)定記錄 ： 表2 不同溶液處理后的氣孔開度2） 以H2O為對照，分析比較K+、Na+對氣孔開度的影響。第二十二張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月6. 注意事項 首先確定顯微鏡好用； 膠棉液涂均勻、超薄一層； 葉表皮取下后要迅速投入乙醇（2秒）； 物鏡測微尺安全使用，切勿壓破，載物臺由近及遠(yuǎn)，緩慢調(diào)節(jié)； 先低倍鏡下找到視野后，高倍鏡下觀察氣孔數(shù)目、大小或標(biāo)定目尺； 物尺放在視野直徑線計算直徑； 物尺和目尺0刻度對齊再標(biāo)定，之后即可還物尺； 固定法、印跡法各觀察3個視野； 膠膜朝上觀察。第二十三張，PPT共二十七頁，創(chuàng)作于2022年6月1）印跡法