分光光度法測定化妝品中的氨基酸

1、摘要采用分光光度法對化妝品中氨基酸含量的測定了研究探討。氨基酸的氨基與 茚三酮水合物反應(yīng)可生成藍(lán)紫色化合物，該化合物最大吸收峰在568nm波長處， 且此吸收峰值的大小與氨基酸釋放出的氨基成正比，因此可作為氨基酸定量分析 方法。該方法簡便、靈敏、快速重現(xiàn)性良好，可用于化妝品的產(chǎn)品檢驗(yàn)方法。13,14 關(guān)鍵詞：化妝品；總氨基酸；分光光度法；含量測定目錄 TOC o 1-5 h z HYPERLINK l bookmark10 o Current Document 1前言4 HYPERLINK l bookmark13 o Current Document 1.1氨基酸的分類41.2氨基酸的應(yīng)用 4

2、1.2.1在食品行業(yè)的應(yīng)用51.2.2在醫(yī)藥工業(yè)的應(yīng)用 5 HYPERLINK l bookmark16 o Current Document 1.2.3在飼料添加劑行業(yè)的應(yīng)用 51.2.4在化妝品行業(yè)的應(yīng)用 51.2.5在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用61.2.6在其他行業(yè)的應(yīng)用61.3氨基酸含量的測定方法 61.3.1化學(xué)法61.3.1.1甲醛滴定法 6 HYPERLINK l bookmark23 o Current Document 1.3.1.2 凱氏定氮法 61.3.2分光光度法 61.3.3.3紙色譜法和薄層色譜法 7 HYPERLINK l bookmark29 o Current Docume

3、nt 13.3.4氣相色譜法 7 HYPERLINK l bookmark32 o Current Document 1.3.3. 5液相色譜法 71.3.3.6毛細(xì)管電泳色譜法 8 HYPERLINK l bookmark35 o Current Document 1.3.3.7電化學(xué)法 8 HYPERLINK l bookmark38 o Current Document 2材料與方法82.1實(shí)驗(yàn)原理 92.2實(shí)驗(yàn)試劑及儀器 92.2.1主要試劑92.2.2 主要儀器 92.3溶液的配制92.4實(shí)驗(yàn)方法10 HYPERLINK l bookmark47 o Current Document

4、 2.4. 1測量波長的選擇10 HYPERLINK l bookmark50 o Current Document 2.4.2顯色時(shí)間的考察 10 HYPERLINK l bookmark53 o Current Document 2.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制102.4.4樣品氨基酸的提取 10 HYPERLINK l bookmark41 o Current Document 2.4.5樣品中氨基酸含量測定 10 HYPERLINK l bookmark44 o Current Document 3結(jié)果與討論 103.1測量波長的選擇103.2顯色時(shí)間的考察 113.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制11 HY

5、PERLINK l bookmark56 o Current Document 3.4樣品氨基酸含量的測定123.5注意事項(xiàng)13 HYPERLINK l bookmark59 o Current Document 總結(jié)13 HYPERLINK l bookmark62 o Current Document 致謝14 HYPERLINK l bookmark65 o Current Document 參考文獻(xiàn)15分光光度法測定化妝品中的氨基酸1前言化妝品是清潔、保護(hù)、美化人體面部、皮膚及毛發(fā)等的日用化學(xué)品，具有令 人愉快的香氣，能使人的容貌整潔美觀，并有益于身心健康?；瘖y品的種類繁多， 性能各異

6、，其分類方法很多。按應(yīng)用部位進(jìn)行分類，可分為：皮膚用化妝品、毛 發(fā)用化妝品、指甲用化妝品和唇膏。隨著人們生活水平的不斷提高，市場的日益 繁榮，化妝品在人們的日常生活中已得到廣泛的應(yīng)用?；瘖y品是由各種作用不同 的原料，經(jīng)過配制加工而成的復(fù)雜混合物，必須采用合理的配料和加工工藝，把 種原料有效地加以組合，形成一定的形態(tài)，才能充分發(fā)揮各種原料所具有的特性 和功能。制造化品所需要的原料品種繁多，根據(jù)其用途和性能，大體上可分為基 質(zhì)原料和配合原料（輔助原料）兩大類?；|(zhì)原料是組成化妝品的主體，也是在化 妝品中起主要作用的物質(zhì)；配合原料是使化妝品型、穩(wěn)定或賦予色、香及其他特 殊作用的原料，這些原料雖然用量

7、不大，但極為重要偵7。目前，市場上許多食 品（保健品）中富含氨基酸類成分，其中以丙氨酸含量最高。丙氨酸是一種氨基酸， 化學(xué)式alanine，簡寫為ala，在氨基酸序列中可簡寫為A。對人體來說，丙氨酸為 必需氨基酸。但長期以來，質(zhì)檢系統(tǒng)缺乏對該類產(chǎn)品進(jìn)行系統(tǒng)性檢驗(yàn)研究。本試 驗(yàn)?zāi)７率袌錾虾兴庮愂称贰⒈＝∑返漠a(chǎn)品工藝，采用分光光度法測定該類制品 中的氨基酸含量18。本法所采用的強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂柱將樣品中的氨基酸鹽 置換為氨基酸。實(shí)驗(yàn)證明，采用分光光度法檢測含氨基酸類制品的檢驗(yàn)方法是可 行的。該法精密度高，抗干擾性強(qiáng)。此項(xiàng)技術(shù)在目食品監(jiān)管中具有十分普遍的意 義。由于方法簡單易行，幾乎可以在一般

8、實(shí)驗(yàn)室使用。1.1氨基酸的分類氨基酸（amino acids）廣義上是指既含有一個(gè)堿性氨基又含有一個(gè)酸性羧基 的有機(jī)化合物，正如它的名字所說的那樣。但一般的氨基酸，則是指構(gòu)成蛋白質(zhì) 的結(jié)構(gòu)單位。在生物界中，構(gòu)成天然蛋白質(zhì)的氨基酸具有其特定的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，即 其氨基直接連接在a-碳原子上，這種氨基酸被稱為a-氨基酸。a-氨基酸是肽和蛋 白質(zhì)的構(gòu)件分子，在自然界中共有20種。除a-氨基酸外，細(xì)胞還含有其他氨基酸。 氨基酸是構(gòu)成生命大廈的基本磚石之一。1.2氨基酸的應(yīng)用 13,14氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位，是動(dòng)物體合成蛋白質(zhì)的原料來源，屬食品、 飼料的營養(yǎng)成分，在醫(yī)學(xué)上具有防病治病的作用，也可作為營

9、養(yǎng)型化妝品的有效 成分及合成藥物、表面活性劑、其他工業(yè)產(chǎn)品的化工原料。因此，氨基酸分析是 工業(yè)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)及生命科學(xué)研究中最重要的技術(shù)之一。廣泛用于食品、醫(yī)藥、添 加劑及化妝品行業(yè)。隨著生物工程技術(shù)業(yè)的發(fā)展逐漸成為21世紀(jì)全球的主要產(chǎn)業(yè) 之一，氨基酸的需求量越來越大，品種變更越來越快，工藝改革越來越新。目前 全世界氨基酸每年的產(chǎn)量為100萬噸，而需求總量是800萬噸。我國自20世紀(jì)60 年代起，氨基酸的應(yīng)用在食品工業(yè)占61%，在飲料工業(yè)占30%，醫(yī)藥、日用化 工、農(nóng)業(yè)、冶金、環(huán)保、輕工、生物工程技術(shù)等方面占用的比例逐年增加。1.2.1在食品行業(yè)的應(yīng)用谷氨酸鈉是人類應(yīng)用的第一個(gè)氨基酸，也是世界上應(yīng)

10、用范圍最廣、產(chǎn)銷量最 的種氨基酸。后來人們已陸續(xù)發(fā)現(xiàn)甘氨酸、丙氨酸、脯酸、天冬氨酸也具有調(diào)味 作用，并將之應(yīng)用于食品行業(yè)。1.2.2在醫(yī)藥工業(yè)的應(yīng)用氨基酸是合成人體蛋白質(zhì)、激素、酶及抗體的原料，在人體內(nèi)參與正常的代 謝和生理活動(dòng)。用氨基酸及其衍生物可治療各種疾病，可作為營養(yǎng)劑、代謝改良 劑，具有抗?jié)?、防輻射、抗菌、治癌、催眠、?zhèn)痛及為特殊病人配制特殊膳食 的功效。如氨基酸的混合液可供病人注射用，氨基酸的混合粉可作宇航員、飛行 員的補(bǔ)品。1.2.3在飼料添加劑行業(yè)的應(yīng)用在飼料添加劑行業(yè)用的氨基酸主要有蛋氨酸和賴氨酸。其功效主要是：促進(jìn) 動(dòng)物生長發(fā)育；改善肉質(zhì)，提高畜禽生產(chǎn)能力，增加產(chǎn)量；提高飼

11、料利用率，節(jié) 省蛋白質(zhì)飼料；降低成本。如蛋氨酸主要用于雞飼料，亦可用于豬、牛的混合飼 料。又如，賴氨酸具有增強(qiáng)畜禽食欲、提高抗病能力、促進(jìn)外傷治愈的作用。 1.2.4在化妝品行業(yè)的應(yīng)用氨基酸及其衍生物易被皮膚吸收，使老化和硬化的表皮恢復(fù)彈性，延緩皮膚 衰老，具有保水、抗菌、緩沖、表面活性劑保護(hù)作用，以及某些有利機(jī)體的生理 作用。如氨基酸和高級(jí)脂肪酸制成的表面活性劑、抗菌劑，已成為最高效的添加 劑而被廣泛應(yīng)用；氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸的碳酸鹽、聚天門冬氨酸等 制成的護(hù)發(fā)劑、染發(fā)劑，發(fā)展成為時(shí)興商品供應(yīng)市場由于氨基酸具有促進(jìn)美膚功 能，目前化妝品界應(yīng)用為保濕劑的氨基酸，有小分子量氨基酸(Am

12、inoacid)以 及大分子量的氨基酸聚合體(Polypetide)。屬于氨基酸類的保濕劑有蛋白類， 例如植物蛋白、大豆蛋白、動(dòng)物蛋白、水解蛋白等。這一類保濕劑的來源成本較 高，所以被視為較珍貴的保濕劑。1.2.5在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用一些氨基酸在體外并無殺菌功能，但它們能干擾植物與病原菌之間的生化關(guān) 系，使植物的代謝及抗病能力發(fā)生變化，從而達(dá)到殺菌的目的。例如苯丙氨酸和 丙氨酸可用于治療蘋果瘡痂病。又如，美國一家公司用甘氨酸制成了除草劑，這 類農(nóng)藥易被微生物分解，不易造成環(huán)境污染。1.2.6在其他行業(yè)的應(yīng)用在生物工程方面，半胱氨酸等正被開發(fā)成新的保護(hù)劑；亮氨酸、胱氨酸等正 作為發(fā)酵工業(yè)中多種氨基酸生

13、產(chǎn)菌的添加劑而被應(yīng)用。在輕工業(yè)方面，聚谷氨酸 和聚丙氨酸用于具有良好保溫性和透氣性的人造皮革和高級(jí)人造纖維的生產(chǎn)。在 重金屬提取和電鍍工業(yè)方面，天門冬氨酸、組氨酸、絲氨酸有重要的應(yīng)用；谷氨 酸等可用于電鍍工業(yè)的電解溶液，半胱氨酸可用于銅礦探測，氨基酸烷基酯可用 于海流油回收等。1.3氨基酸含量的測定方法71.3.1化學(xué)法1.3.1.1甲醛滴定法原理：是在中性或弱堿性水溶液中，9氨基酸與甲醛反應(yīng)生成亞甲基亞氨 基衍生物,亞基亞氨基衍生物用堿滴定，從而得到樣品中總氨基酸的含量1。特點(diǎn)： 此法簡單易行、快速方便，但準(zhǔn)確度差，終點(diǎn)較難掌握。1.3.1.2凱氏定氮法原理：通過測定樣品中總氮的含量，然后根

14、據(jù)蛋白質(zhì)和氨基酸中的氮含量， 得知含氮的氨基酸、蛋白質(zhì)的總量。常見的方法有常量法、微量法、自動(dòng)定氮法、 半微量法及改良凱氏法等多種。特點(diǎn)：該方法準(zhǔn)確度高，但操作步驟復(fù)雜、試 劑耗量多、測定周期長。1.3.2分光光度法原理：分光光度法是基于物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立起來的分析方法。大 部分氨基酸在紫外區(qū)無吸收，只有小部分在紫外區(qū)有吸收，而且吸收光譜嚴(yán)重重 疊，所以，對大部分氨基酸不經(jīng)分離而用紫外分光光度法同時(shí)測定，需要采用一 定的數(shù)學(xué)方法3。目前常用的數(shù)學(xué)分光光度法有偏最小二乘法分光光度法、多元 線性回歸分析分光光度法等方法。1.3.3色譜法1.3.3.3紙色譜法和薄層色譜法紙色譜法原理：以紙為

15、載體，紙所吸附的水為固定相，展開劑為流動(dòng)相，由 于樣品成分在兩相溶劑中的分配系數(shù)不同而實(shí)現(xiàn)分離，按操作方法分為垂直型和 水平型兩類囹。運(yùn)用紙色譜法采用不同的層析液和檢測用顯色劑，可以對三十多 種氨基酸及其衍生物行分析。紙色譜點(diǎn)是操作簡單、分離效能較高、所需儀器設(shè) 備廉價(jià)，因而應(yīng)用廣泛。紙色譜一電泳相結(jié)合可以對氨基酸進(jìn)行進(jìn)一步的分離薄 層色譜法原理：根據(jù)各種氨基酸在吸附劑表面的吸附能力不進(jìn)行分離或提純的一 種方法，常用的薄層板有硅膠、聚酰胺纖維素，采用相應(yīng)的展開對氨進(jìn)行分離， 然后分別采用紫外光熒光或可光進(jìn)行檢測。特點(diǎn)：具有展開快、分離效能高、 靈度高、耐腐蝕等特點(diǎn)，比紙色譜的應(yīng)用更廣泛。13.

16、3.4氣相色譜法原理：將氨基酸衍生化成為易于氣化的物質(zhì)，將其衍生物在一定溫度下轉(zhuǎn)化 為氣體，利用試樣中各組分在氣相和固定液液相間的分配系數(shù)不同進(jìn)行檢測分析 6。應(yīng)用較廣的反應(yīng)有兩種，即生成三氟乙酰(N-TFA)氨基酸正丁酯和生成七氟 丁?；?N-HFA)氨基酸丁基酯。氣相色譜具有高效能、選擇性好、靈敏度高、操 作簡單的特點(diǎn)，還便于與質(zhì)譜聯(lián)用，確定氨基酸的結(jié)構(gòu)，從而有可能發(fā)現(xiàn)新的氨 基酸或測定非蛋白氨基酸。近年來，已在生化、醫(yī)藥、食品等方面得到了廣泛的 應(yīng)用。缺點(diǎn)：氣譜法必須衍生，而衍生中又要恪守嚴(yán)格的條件，不能用一根色譜 柱實(shí)現(xiàn)全氨基酸測定，樣品要經(jīng)過脫鹽處理，操作繁瑣且易帶來污染。1.3.3

17、. 5液相色譜法原理：由于樣品溶液中的各組分在流動(dòng)相和固定相中具有不同的分配系數(shù)， 在兩相中做相對運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附一解吸的分配過程進(jìn)行分離檢測。 由于大多數(shù)氨基酸無紫外吸收和熒光發(fā)射特征，為提高分析檢測靈敏度和分離選 擇特性，通常將氨基酸進(jìn)行衍生化。目前，氨基酸的液相色譜分析方法主要有柱 后衍生法和柱前衍生法7,8。1.3.3.6毛細(xì)管電泳色譜法原理：以高壓電場為驅(qū)動(dòng)力，以毛細(xì)管為分離通道，依據(jù)樣品中各組成之間 淌度和分配行上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的技術(shù)。芳香族氨基酸可采用紫外檢測直接測 定，其他氨基酸在可見光和近紫外區(qū)域都沒有光吸收，也不發(fā)射熒光，因此往往 通過柱前或柱后衍生的方法進(jìn)行紫

18、外可見吸收或熒光檢測1。，11。衍生方式液相色 譜一樣，有柱前、柱后之分。商品儀器通常用柱前衍生，但對一些不夠穩(wěn)定的衍 生試劑如OPA，應(yīng)采用柱后衍生方式。氨基酸的對映體分離有兩種方法：直接法 和間接法。直接法是由兩個(gè)對映體與手性選擇劑形成不對稱的絡(luò)合物分子或其他 結(jié)構(gòu)，產(chǎn)生不同的物理化學(xué)性質(zhì)從而達(dá)到分離的目的。間接法是先將對映體與手 性選擇劑反應(yīng)生成非對映體化合物，使之產(chǎn)生物理和化學(xué)性質(zhì)的差異，再通過電 泳系統(tǒng)進(jìn)行分離毛細(xì)管電泳具有進(jìn)樣少、絕對靈敏度高、分辨率高、溶劑消耗量 少等優(yōu)點(diǎn)，得到了迅速的發(fā)展。但是CE仍要繼續(xù)提高分辨率、速度和檢測器的 選擇性。同時(shí)，增加自動(dòng)進(jìn)樣裝置和使之微機(jī)化、商

19、品化。1.3.3.7電化學(xué)法原理：是建立在物質(zhì)在溶液中的電化學(xué)性質(zhì)基礎(chǔ)上的一類儀器分析方法，采 用適用于不同氨基酸的選擇電極，對各種氨基酸進(jìn)行測定12，氨基酸的電化學(xué)分 析可分為直接電化學(xué)分析和間接電化學(xué)分析。對于胱氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等 電活性的氨基酸一般采用直接電分法。多數(shù)氨基酸于金屬電極上是非電活性的， 無法直接測定，一般是采用衍生化反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化成電活性的物質(zhì)進(jìn)行間接測定。 氨基酸的電化學(xué)分析特點(diǎn)：此法以其簡單、靈敏、無放射、無污染與各種現(xiàn)代化 的分離方法相結(jié)合可以大大簡化操作過程，節(jié)約分析時(shí)間。氨基酸的電分析法也 存在不足，如具有直接電化學(xué)活性的氨基酸不多、可逆性較差、背景干擾較大、

20、 非電化學(xué)活性的氨基酸仍需進(jìn)行衍生化反應(yīng)等，因此，實(shí)際應(yīng)用時(shí)選擇合適的體 系及反應(yīng)方法。綜上所述，實(shí)驗(yàn)測定氨基酸的方法有很多，通過比較，聯(lián)系實(shí)際，我們選擇 了分光光度法進(jìn)行測定。2材料與方法2.1實(shí)驗(yàn)原理本實(shí)驗(yàn)主要利用蛋白質(zhì)物質(zhì)經(jīng)水解成氨基酸，而氨基酸在一定的pH條件下， 與茚三酮反應(yīng)生成藍(lán)紫色化合物，對其進(jìn)行比色定量測定，從而計(jì)算出相應(yīng)的氨 基酸含量。該化合物最大吸收峰在568nm波長處，且此吸收峰值的大小與氨基酸 釋放出的氨基成正比，因此可作為氨基酸定量分析方法。52.2實(shí)驗(yàn)試劑及儀器2.2.1主要試劑顏寇爽膚水廣州品智化妝品有限公司詩來雅爽膚水奧雪國際有限公司硝酸GR廣州化學(xué)試劑廠活性炭

21、CP廣州增城連勝活性炭廠磷酸二氫鉀AR廣州化學(xué)試劑廠磷酸氫二鈉AR廣州化學(xué)試劑廠丙氨酸AR惠興生化試劑有限公司茚三酮AR上海伯奧生物科技有限公司雙氧水AR廣州化學(xué)試劑廠2.2.2主要儀器T6新銳分光光度計(jì)，北京普析通用儀器公司；50、100ml容量瓶；1、2、5、 10ml移液管；SYC-15超級(jí)恒溫水浴，上海豫康科教儀器有限公司；25ml比色 管；AL204-IC分析天平，梅特勒-托利多儀器有限公司；EL20K標(biāo)準(zhǔn)型pH計(jì)， 梅特勒-托利多儀器有限公司；燒杯，量筒等。2.3溶液的配制2.3.1磷酸二氫鉀溶液：稱取磷酸二氫鉀0.4535g，溶于水中后定容至50ml。2.3.2磷酸氫二鈉溶液：稱

22、取磷酸氫二鈉1.2938g，溶于水中后定容至50ml。取5.0m l磷酸二氫鉀溶液于10 0mL容量瓶中，用磷酸氫二鈉溶液稀釋至刻度， 搖勻。2.3.3氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(200ug/ml)：準(zhǔn)確稱取丙氨酸(含量不小于98%)0. 2000g，用 水溶解并定容至100mL,搖勻后再吸取l0ml于l00ml容量瓶中加水稀釋至刻度。2.3.4 2%茚三酮溶液：稱取茚三酮1.0g，溶于一定量熱水中，待冷卻后定容至50ml。 該溶液每隔(2-3)天需重新配制。2.4實(shí)驗(yàn)方法2.4.1測量波長的選擇取丙氨酸對照品溶液l ml于3個(gè)25ml比色管瓶中，加茚三酮溶液1 ml和磷酸鹽 緩沖液1 ml，搖勻，水浴加

23、熱30min，取出，冷卻，用蒸餾水定容至25ml。用可 見分光光度計(jì)進(jìn)行全波長測定。囹2.4.2顯色時(shí)間的考察取2ml丙氨酸對照液于25m l比色管中，按“2.4.1”項(xiàng)顯色方法進(jìn)行顯色后，以 每5min間隔測一次吸光度A，繪制吸光值與時(shí)間的關(guān)系曲線。2.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制準(zhǔn)確移取氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0，0.6, 0.8, 1.0，1.2, 1.4mL（相當(dāng)于氨基酸0,120， 160,200,240,280ug）分別里于25mL比色管中，加水補(bǔ)充至4mL，然后各加人2%茚 三酮溶液和磷酸鹽緩沖溶液各1mL，搖勻。置沸水浴中加熱，取出冷卻至室溫， 加水至刻度，搖勻。靜置15min，測吸光值，繪

24、制標(biāo)準(zhǔn)曲線。42.4.4樣品氨基酸的提取2.4.4.1稱取樣品1.0g置于燒杯中，加入10mL蒸餾水和lg左右的活性炭，加熱煮 沸，10min后過濾，用68mL熱水洗滌后過濾，收集濾液于25m l比色管中，定容 至刻度，搖勻備用2】。2.4.4.2稱取約1.0g樣品于25mL比色管中，加硝酸5.0ml，雙氧水1.0mL，放置30min 后，于沸水浴中加熱24h。加氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為7左右，冷卻至室溫用蒸餾水 定容至刻度。2.4.5樣品中氨基酸含量測定準(zhǔn)確吸取澄清的樣品溶液4mL，重復(fù)3次，按照2.4.3中測定步驟，在相同條 件下測得吸光度值。3結(jié)果與討論3.1測量波長的選擇可見分光光度計(jì)全波

25、長掃描如圖3-1，得最大吸收波長為568nm。氨基酸的最大吸收波長波長/nm圖3-1最大吸收波長曲線圖3.2顯色時(shí)間的考察吸光值與時(shí)間的關(guān)系曲線如圖3-2,得最佳顯色時(shí)間為30min。5 5 4 4 I. O - OO6 3 LO 2 53 1-21-1 o o o*光吸1 B o -o o -o圖3-2顯色時(shí)間曲線圖3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制用分光光度計(jì)在568nm波長下以0號(hào)作參比，用lcm比色皿測定試液的吸光 度，繪制吸光度對氨基酸含*（ug/mL）的標(biāo)準(zhǔn)曲線（如圖3-3），回歸方程為，Y = 0.0014X-0.1021, r = 0.9988。表明丙氨酸在120300ug / mL范圍內(nèi)成

26、良好的線性19。0.0014x - 0.1201R2 = 0.9988圖3-3氨基酸標(biāo)準(zhǔn)曲線3.4樣品氨基酸含量的測定樣品氨基酸含量吸光值見表3-1，3-2。表3-1顏寇爽膚水中的氨基酸含量顏寇爽膚水2.4.4.1提取方法2.4.4.2提取方法123123吸光值0.0650.0680.0620.0370.0360.034含量（ug/ml）528.86537.43520.29448.86446.00440.26平均含量（ug/ml）528.86445.04百分含量0.0530.043表3-2詩萊雅爽膚水中的氨基酸含量詩萊雅爽膚水2.4.4.1提取方法2.4.4.2提取方法123123吸光值0.0

27、840.0870.0850.0740.0780.076含量（ug/ml）583. 14591.71586. 00554.57566.00560.29平均含量（ug/ml）586.95560.29百分含量0.0580.055從表格可以得出，用不同的處理方法處理樣品，氨基酸的含量會(huì)有所不同， 用2.4.4.1提取氨基酸的含量相對的多。不同的化妝品中氨基酸的含量也有所不 同，茚三酮比色法測定化妝品中游離氨基酸的含量，只是定量測定樣品中所含的 游離氨基酸，并不能說明所含此化妝品的質(zhì)量好壞，若需要判定是否保濕，還需 要進(jìn)行大一致范圍，化妝品中具有保濕作用的還有其方面。對皮膚來說，氨基酸 具有緩和外界物質(zhì)

28、傷害的基本功效，適當(dāng)?shù)陌被幔瑢κ軗p角質(zhì)有協(xié)助修復(fù)的效 果，所以廣泛被化妝品界所使用。3.5注意事項(xiàng)3.5.1茚三酮每隔23天需重新配置，盡量在使用時(shí)當(dāng)天配制，茚三酮與氨基酸顯 色反應(yīng)需在PH78之間，在實(shí)驗(yàn)中需檢測磷酸鹽緩沖溶液PH值。53.5.2消化劑種類及其用量對消化結(jié)果的有影響，在化妝品前處理需考慮消化時(shí) 間及溫度對消化的影響。3.5.3注意雙氧水與化妝品強(qiáng)氧化性，會(huì)發(fā)生爆炸的危險(xiǎn)性?？偨Y(jié)隨著國家不斷加大對化妝品生產(chǎn)企業(yè)的監(jiān)控力度認(rèn)證推行，含氨基酸類食品 生產(chǎn)廠家，必須加強(qiáng)對產(chǎn)品質(zhì)量的檢測，尤其在對生產(chǎn)過程的質(zhì)量監(jiān)控尤為重要， 因此對檢測方法更需要簡便、靈敏、快速、重現(xiàn)性良好、抗干擾性

29、強(qiáng)。14我們研 究探討了采用分光光度法對富含氨基酸類成分的制品中氨基酸的含量測定方法。實(shí)驗(yàn)證明，采用分光光度法檢測含氨基酸類制品的檢驗(yàn)方法是可行的。該法 精密度高，抗擾性強(qiáng)。此項(xiàng)技術(shù)在目前食品、化妝品監(jiān)管中具有十分普遍的意義。 由于方法簡單易行，幾乎可以在一般的實(shí)驗(yàn)室使用。致謝本論文是在侯勇老師的精心指導(dǎo)下完成的。做論文的這個(gè)月時(shí)間是我大學(xué)生 活最充實(shí)和最快樂的一段時(shí)間，做實(shí)驗(yàn)一步步的摸索，從失敗中找到原因并改進(jìn)， 讓我充分感受到科學(xué)研究的魅力。論文結(jié)束之際，要衷心感謝侯勇老師在學(xué)業(yè)上 的指導(dǎo)和生活上的關(guān)懷。感謝本實(shí)驗(yàn)侯勇老師、何素軍、徐秋萍、吳影珊同學(xué)以及陳佩珊同學(xué)對本實(shí) 驗(yàn)的幫助和指導(dǎo)。感謝中山職業(yè)技術(shù)各位領(lǐng)導(dǎo)和老師。最后，感謝我的家人、朋友一直以來在我的背后默默支持與鼓勵(lì)，使得我能 更加順利地完成學(xué)業(yè)。盧金霞2010年12月1日參考文獻(xiàn)王朝暉，蔡繼文。我國