肝脂平膠囊中芍藥苷的提取工藝研究

1、肝脂平膠囊中芍藥苷的提取工藝研究【摘要】目的考察肝脂平膠囊中芍藥苷的最正確提取工藝。方法通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)，以芍藥苷的含量和干膏收率為指標(biāo)，考察加水量、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)對(duì)提取效果的影響。結(jié)果肝脂平膠囊中芍藥苷的最正確提取工藝為加水10倍，煎煮3次，1h/次。結(jié)論最正確工藝穩(wěn)定，提取率高?！娟P(guān)鍵詞】芍藥苷高效液相色譜提取工藝正交設(shè)計(jì)Abstrat:bjetiveTptiizethepreparatinpressfpeniflrininGanzhipingapsules.ethdsTheptiupreparatinpressasinvestigatedbyL934rthgnaldesigniththe

2、peniflrinandtheextratinratefdryintentasindexes.Thehieffatrsinflueningtheextratineffiienysahasthententfthetiesfaddedater，thetiefextratinandtiesfbilingereinvestigated.ResultsTheptiutehnialnditinastadd10tiesauntfater，extrating3tiesandbiling1heahtie.nlusinPeniflrinntentashigh.Theethdisreliable，aurateand

3、easytperate.Keyrds:Peniflrin；HPL；Extratinpress；rthgnaldesign肝脂平膠囊是由姜黃、赤芍等組成的復(fù)方制劑，具有疏肝理氣、活血化淤、軟堅(jiān)散結(jié)、健脾滲濕的成效。方中君藥姜黃主要含揮發(fā)油和姜黃素類(lèi)化合物，姜黃素類(lèi)不溶于水及乙醚，溶于乙醇及冰醋酸；臣藥赤芍主要有效成分為芍藥苷23H2811，具有較好的抗炎、活血化淤通脈1等成效，具有一定的代表性。海藻的主要有效成分海藻酸鈉及海藻多糖也為水溶性成分。所以，赤芍、海藻采取傳統(tǒng)的水提工藝。?中國(guó)藥典?2022年版部2對(duì)芍藥苷的含量規(guī)定不得少于1.8%，經(jīng)含量測(cè)定符合?中國(guó)藥典?標(biāo)準(zhǔn)。本研究通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)法

4、確定其最正確提取工藝。1器材Agilent1100高效液相色譜儀，G1311A泵，G1316紫外檢測(cè)器；色譜柱ZrbaxSB-184.6250，5；ettler十萬(wàn)分之一電子分析天平；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上海亞榮生化儀器廠(chǎng)；超聲波清洗器華南超聲設(shè)備廠(chǎng)；DZF-6020型真空枯燥箱上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備；芍藥苷對(duì)照品均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所；試劑均為分析純。赤芍等購(gòu)自武昌區(qū)藥材公司，姜黃購(gòu)自廣西，經(jīng)鑒定均為正品。2方法與結(jié)果2.1方法赤芍、海藻采取傳統(tǒng)的水提工藝，以芍藥苷為考察指標(biāo)，影響提取率較大的因素可能有：加水量、提取次數(shù)、提取時(shí)間、浸泡時(shí)間等。將浸泡時(shí)間和吸水量單獨(dú)考慮，把加水量、提取次

5、數(shù)、提取時(shí)間設(shè)置到正交程度表中，共有3個(gè)因素。各設(shè)3個(gè)程度，其因素程度設(shè)置見(jiàn)表1。表1赤芍、海藻水提因素程度略考慮各因素的交互作用，選用L934進(jìn)展正交實(shí)驗(yàn)。按處方比例，取赤芍飲片和海藻9份，每份50g，置1000l圓底燒瓶中用可調(diào)溫電熱套加熱回流提取，按表1中各實(shí)驗(yàn)號(hào)因素程度的要求進(jìn)展處理，以干膏量和總干膏中芍藥苷的含量為考察指標(biāo)，結(jié)果見(jiàn)表24。2.2色譜條件色譜柱為ZrbaxSB-184.6250，5；流動(dòng)相為甲醇-0.05l/L磷酸二氫鉀溶液4065；流速1l/in；檢測(cè)波長(zhǎng)230n；柱溫35；靈敏度0.08AUFS。2.3測(cè)試溶液的制備2.3.1對(duì)照品溶液的配制精細(xì)稱(chēng)取經(jīng)P25減壓枯燥

6、器中枯燥36h的芍藥苷對(duì)照品12.66g于25l容量瓶?jī)?nèi)，加甲醇20l后超聲處理20in使溶解，放至室溫，加甲醇定容至刻度。2.3.2藥材溶液的制備稱(chēng)取赤芍粗粉0.5g，精細(xì)稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精細(xì)參加甲醇25l，稱(chēng)定重量。浸泡4h，超聲處理20in，放至室溫，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，濾過(guò)，即得。2.3.3供試品溶液的制備取赤芍和海藻提取的干膏適量，精細(xì)稱(chēng)定，置25l容量瓶?jī)?nèi)，精細(xì)參加甲醇20l后超聲20in使溶解，放至室溫，加甲醇定容至刻度。進(jìn)樣前均用0.45微孔濾膜過(guò)濾。2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備用微量進(jìn)樣器分別取已配好的對(duì)照品溶液3，4，5，6，7，8l注入高效液相色譜儀，測(cè)

7、定峰面積，根據(jù)進(jìn)樣量和測(cè)得的峰面積計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)附HPL圖13。經(jīng)計(jì)算得回歸方程：Y=1990.2X698.1r=0.99999，n=6。這一結(jié)果顯示芍藥苷的進(jìn)樣量與峰面積在1.5194.051g范圍內(nèi)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。2.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)汲取供試品溶液，用20l定量環(huán)間隔一定時(shí)間2h進(jìn)樣，連續(xù)測(cè)定5次。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，芍藥苷在8h內(nèi)根本穩(wěn)定，記錄各峰面積，RSD=2.04%。2.6精細(xì)度實(shí)驗(yàn)用20l定量環(huán)進(jìn)芍藥苷對(duì)照品溶液，按上述色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積并計(jì)算其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏向，RSD=0.97%，結(jié)果說(shuō)明精細(xì)度較好。2.7回收率實(shí)驗(yàn)采用加樣回收法，取適量樣品，參加芍藥苷適量，按上述色譜條件

8、測(cè)定，計(jì)算回收率。平均回收率為99.15%，RSD=2.53%。結(jié)果說(shuō)明，本方法具有良好的回收率。2.8結(jié)果統(tǒng)計(jì)與分析結(jié)果統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表24。從方差分析表和正交試驗(yàn)結(jié)果可以看到，三因素中，對(duì)干膏量的影響大小依次為BA，且321；B3B2B1；A3A2A1，其中僅因素對(duì)干膏量有顯著影響F=72.1055。三因素對(duì)干膏中芍藥苷總量的影響大小依次為BA，且321；B2B3B1；A3A2A1，其中僅因素對(duì)芍藥苷總量有顯著影響F=104.67。應(yīng)選定A、因素的程度為A3、3，對(duì)于B因素，在給定的程度條件下，雖無(wú)顯著影響，但從節(jié)省能源、有效成分盡量提取充分的角度考慮，擬選定B因素的程度為B2。因此，從實(shí)際出發(fā)，

9、綜合考慮，選擇的最正確提取工藝為A3B23。即10倍水，煎煮3次，1h/次。表2赤芍、海藻水提正交實(shí)驗(yàn)安排及結(jié)果略表3干膏量的方差分析略表4芍藥苷含量的方差分析略2.9驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)按最正確工藝驗(yàn)證4批，所得藥液同前法處理，測(cè)定，取4批的平均值，得干膏量12.7901g，芍藥苷總量為0.6930g，有效成分的轉(zhuǎn)移率為80.10%。其干膏收率、干浸膏中芍藥苷的含量根本穩(wěn)定，說(shuō)明工藝較穩(wěn)定。3討論3.1赤芍、海藻藥材的吸水量實(shí)驗(yàn)按處方比例，稱(chēng)取赤芍和海藻混合生藥10g加水浸泡過(guò)夜，倒出水液，藥渣放于濾紙上至濾紙不出現(xiàn)明顯水跡時(shí)稱(chēng)重，得22.4g，即10g赤芍和海藻生藥吸水12.4g，吸水率為124%。3.2赤芍、海藻生藥浸泡時(shí)間實(shí)驗(yàn)取10g生藥浸泡30in后，赤芍藥材飲片外周已潤(rùn)但中心未透，繼續(xù)觀察1h左右潤(rùn)透。3.3加水量、煎煮次數(shù)的驗(yàn)證因?yàn)檎唤Y(jié)果加水量、煎煮次數(shù)均為最大值，為了考察正交設(shè)計(jì)的嚴(yán)密性，將藥渣再行提取1次，第4次的轉(zhuǎn)移率為1.4