2022年公豬精液采精與稀釋

1、公豬采精 公豬采精與稀釋操作規(guī)程1、采精與精液處理流程（1）采精過程流程1、 進入試驗室后清潔雙手（講究衛(wèi)生,掌握溫度）2、 預備稀釋液,并將稀釋液放入 35水浴鍋中升溫3、 打開顯微鏡上的加熱板掌握開關(guān),設(shè)定溫度到 384、 安裝集精杯（預熱到37）,預備其它采精用品,放入壁廚5、 將公豬趕入采精室,關(guān)上柵欄,清潔其體表 6、排出包皮液用 0.1 KMnO4溶液清洗其腹部及包皮, 再用清水洗凈, 抹干；7、 戴上雙層手套,誘導公豬爬跨假母豬 8、 鎖定并拉出陰莖 9、 待排出部分清亮液體后,開頭收集精液 10、將集精杯放入壁廚 11、將公豬趕回圈內(nèi)（2）精液處理操作流程1將一預溫后的燒杯或塑

2、料杯放在電子秤上,打開電子秤,當顯示為零時,將裝精液的食品袋從集精杯中取出放入杯中,顯示讀數(shù)為精液的重量；2將放精液的燒杯輕輕搖勻精液后,放入35的水浴鍋中與稀釋液等溫；3立刻用取樣器取精液 1025 微升左右,滴在載物臺上預熱的載玻片上,蓋上蓋玻片,估測活力；精子活力大于0.6 ,就可用于下一步的處理；4另取 1 毫升精液放入加有 10 毫升生理鹽水的精子密度杯中, 讀出讀數(shù)后,在查對表上查到精子密度值；5運算精液可分裝的份數(shù)和最終的精液體積或重量；6將大燒杯放在電子秤上,除皮,然后再將精液袋放入其中,并將精液袋上口翻在杯沿外, 將裝稀釋液的三角瓶從水浴鍋中取出,擦去底部水分, 將稀釋液加入

3、大燒杯中, 直到達到運算的最終重量, 輕輕搖動或用玻璃棒攪拌精液使其 混合；7、精液稀釋后,檢查精液活力,如無明顯下降,開頭分裝；8將精液按規(guī)定重量分裝于各個精液瓶（袋）中,排出空氣后封口,進行 精液標記, 置 22-25 的室溫 1 小時后 或用幾層毛巾包被好后 ,降溫到 20左右時直接放置 17冰箱中；9清洗各種容器并放于消毒柜中干燥消毒；1 公豬采精 2、稀釋液的配制過程2.1 配制過程以 1000 毫升 BTS稀釋液為例,可用任一方法：經(jīng)過清洗干燥消毒的三角瓶,將一袋BTS稀釋粉（ 50 克）全部加入瓶中,用量筒量取 雙蒸餾水 1000 毫升,加入三角瓶中；蓋上蓋子或用稀釋粉袋套在三

4、角瓶口上, 封緊搖動,使稀釋粉完全溶解； 或放在磁力攪拌器上, 攪拌加速溶解；取下蓋子,放入 35的水浴鍋中預溫；稀釋液用過后,三角瓶應(yīng)用蒸餾水沖洗,空干水分,然后將三角瓶、量筒 用牛皮紙封口,放入 80120的消毒柜或干燥箱中烘干；將兩個食品袋相套放入大燒杯中或塑料杯中,放在電子秤上,打開電子秤 開關(guān),當電子秤上讀數(shù)為零時,將連接蒸餾水容器的硅膠管放出少量水后,將管口對準杯口注水,并留意讀 數(shù)變化,當接近 1000 克時,應(yīng)放慢流速,改為滴注,直到 1000 克；之后,應(yīng)將 蒸餾水管的龍頭套好,防止污染；在大燒杯中加入一袋稀釋粉（50 克）；從盛磁珠的小燒杯中取鑷子并夾取磁珠, 在廢液缸上用

5、洗瓶沖洗磁珠 2-3 次,待磁珠上水分滴凈后,放入燒杯中,然后將燒杯放在磁力攪拌器上,打開電 源開關(guān)和加熱開關(guān),調(diào)整磁珠轉(zhuǎn)速旋扭, 使磁珠以適當速度旋轉(zhuǎn) （水體形成渦流）,使稀釋粉全部溶解后,降低磁珠轉(zhuǎn)速,關(guān)閉加熱和電源開關(guān)；將杯子放入 35的水浴中預溫；注：不能控溫的加熱磁力攪拌器使用時間不行超過 熱電源；平常磁珠放在一個清洗干燥過的小燒杯中,10 分鐘,或及早關(guān)閉加 注入新奇蒸餾水半杯, 鑷子為不銹鋼材料, 也經(jīng)清洗干燥放入杯中, 蓋上潔凈的培育皿, 每 3 周應(yīng)換掉陳水,沖凈換上新的蒸餾水； 稀釋液加入精液中后, 應(yīng)用小燒杯中的鑷子將磁珠從大燒杯中夾出, 并在廢液缸上沖洗磁珠和鑷子前端

6、同鑷子放入小燒杯中,蓋上培育皿；3-4 遍,待磁珠上水分滴凈后, 連2 公豬采精這種方法由于稀釋液是在一次性食品袋中配制的,因此,不需要對配制稀釋 液的容器進行清洗和消毒,實現(xiàn)了稀釋液配制的免消毒；冬季稀釋粉溶解較慢,可將稀釋粉與水混合后,放入水浴鍋中預溫 10 分鐘,再搖勻,可加速稀釋粉溶解；使用加熱磁力攪拌器者不必在水浴鍋中預溫；注：除大規(guī)模人工授精站外,一般不主見自己配制稀釋粉,舉薦使用商業(yè)化 稀釋粉,這些產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)固牢靠； 另外,稀釋粉與蒸餾水按什么比例混合是非常 嚴格的,應(yīng)依據(jù)說明書上的配比進行稀釋粉的溶解,不行轉(zhuǎn)變配比；2.2 PH 值與滲透壓用 1N稀鹽酸或 1N氫氧化鈉調(diào)整 B

7、TS稀釋液的 PH值為 7.26.8-7.4 左右, 滲透壓為 330mOsm 2.3 稀釋液的儲存液態(tài)狀稀釋液冰箱4儲存,不超過24 小時,超過有效貯存期的變質(zhì)稀釋液應(yīng)廢棄；3、采精前的預備1. 集精杯的預備應(yīng)在試驗室中進行；用保溫杯作集精杯時,不能直接將精液采入杯中；將兩層食品袋裝入保溫杯內(nèi),并用潔凈的玻璃棒使其貼靠在保溫杯壁上,用過濾網(wǎng), 用橡皮筋固定, 并使過濾網(wǎng)中部下陷袋口翻向保溫杯外, 上蓋一層專 3 厘米,以防止公豬射精過快或精液過濾慢時,精液外溢；安裝好后,將其放恒溫箱在 37溫度下備用；假如是紙杯作集精杯,在杯口上固定上一次性過濾網(wǎng),并使網(wǎng)面下陷 23厘米,假如沒有恒溫箱,可

8、在安裝集精杯之前,用電吹風機將集精杯內(nèi)壁加熱到溫熱狀態(tài)（不行加熱到燙手）；采精前應(yīng)將集精杯、 消毒紙巾、一次性手套放入壁廚中, 以便利采精時取用；2精液品質(zhì)檢查用品預備最好先將顯微鏡調(diào)好備用,把顯微鏡加熱板放在顯微鏡載物臺上, 用標本夾固定好, 打開電熱板掌握器電源開關(guān),把設(shè)定溫度3 公豬采精調(diào)到 38再打到測溫狀態(tài),預備好兩張潔凈的載玻片和兩張潔將的蓋玻片放在加熱板上預溫；將電子秤、密度測定等用品預備好；3公豬的預備采精員將待采精的公豬趕至采精欄,關(guān)上采精區(qū)的柵欄門,并用毛刷刷拭假母豬的臺面和后軀下； 然后再清掃公豬兩側(cè)肋腹部及下腹部,必要時, 可將公豬的陰毛剪短（留 3 厘米）；4采精員的

9、預備采精員應(yīng)穿上工作服,將公豬趕入采精室后,清掃豬體后, 應(yīng)盡快右手戴上雙層無毒的一次性手套,帶上紙巾、集精杯、小凳預備采精；4、采精技術(shù)一、采精的目標與要求1用最簡潔的方法采集到全部含較多精子的精液 公豬性反射和射精特點與牛羊不同,其龜頭對壓力、約束力較為敏銳,而對 溫度相對不敏銳, 因此公豬采納假陰道法采精成效往往不佳,而且豬射精時是分 段射精的, 一般不能收集最初射出的精液和清亮無精子的精液,因此,公豬適合 用拳握法進行采精；這種方法既簡潔,又便于分段收集精液；2采集到的精液最大限度地不受到任何污染 由于采精過程中,射精、收集精都是在開放的環(huán)境中,精液極易受到污染；采精用的手套、集精杯、

10、過濾網(wǎng)等與精液接觸的物品必需無菌和對精子無毒害,肯定要防止公豬體表及陰毛上的污物、塵進入精液中；包皮液、 尿生殖道中的尿液、 空氣中的灰3盡可能使精液不受到外界溫度的影響 公豬的精液對溫度非常敏銳,特別是低溫；因此,采精室的溫度能夠掌握,不應(yīng)低于 10,最好在 15-25之間, 這不僅有利于公豬的性行為正常,而且能 防止外界溫度對精液溫度的影響；二、采精過程1、 誘導公豬爬跨假母豬 誘導公豬爬跨；采精員可摩仿發(fā)情母豬的叫聲,并敲擊假母豬2、在采精之前先剪去公豬包皮上的被毛,防止干擾采精及細菌污染4 公豬采精 2、排出包皮液 用 0.1 KMnO4溶液清洗其腹部及包皮,再用清水洗凈,抹 干；公豬

11、爬跨上假母豬后, 采精員可坐公豬左后側(cè)的小凳上,用右手按摩公豬包 皮腔,盡可能將包皮腔中的包皮液（尿液）排凈,并用紙巾拭干；3、鎖定公豬陰莖并將其拉出公豬陰莖勃起后, 開頭有試圖插入母豬陰道的動作,但有些公豬伸出陰莖較慢, 需要按摩包皮以幫忙陰莖伸出；公豬陰莖伸 出后,采精員應(yīng)脫去外層手套,右手呈錐形的空拳,即拇指一側(cè)較松,小指一側(cè) 較緊,拳心向上,使龜頭（螺旋部分）進入空拳中,只讓公豬的龜頭伸出空拳 1 厘米左右,或不讓其伸出拳外,用中指、無名指和小指鎖定龜頭,留意不要抓握 陰莖體部（非螺放部分）,以防造成公豬不適而從假母豬上退下,然后順其向前 S” 狀彎曲盡可能地拉直,握緊陰莖龜頭防止其旋

12、轉(zhuǎn),公豬即 沖力,將陰莖的“可寂靜下來并開頭射精； 假如假母豬的結(jié)構(gòu)合理, 可將其陰莖向左前上拉, 并使 龜頭向下彎 （見圖） ,這樣有利于防止包皮腔中的殘存包皮液順著陰莖流至集精 杯；“擠出包皮積尿,按摩公豬的包皮部,待公豬爬上假臺豬后,用暖和清潔的手 有無 握緊伸出的龜頭,順公豬前沖時將陰莖的 S 狀彎曲拉直,握緊陰莖螺旋 手套皆可 部的第一和其次摺,在公豬前沖時答應(yīng)陰莖自然舒展,不必強拉；充分舒展后,陰 莖將停止推動,達到強直、“ 鎖定” 狀態(tài),開頭射精；射精過程中不要松手,否就 壓力減輕將導致射精中斷；”4、左手打開集精杯蓋,取下上面的紙巾；5、 精液收集公豬開頭射精后,不要立刻收集,

13、待公豬射出部分精亮的液體后,再開頭收集含精多的部分,假如手中的膠狀物較多, 可隔著紙巾將膠狀物擦除；6、 在精液收集過程中,應(yīng)盡可能依據(jù)公豬的射精特點,只收集含精豐富的部分,不要收集清亮的液體和膠狀物；莖將快速縮回；留意在采精過程中不要碰陰莖體,否就陰7、 采精過程中,假如仍有包皮中的尿液順陰莖流出,可先將龜頭抬高,然后在射精間隙或只射出清亮液體時,入集精杯中；放下集精杯, 左手拿紙巾將其吸附, 防止流8、 當公豬開頭環(huán)顧四周時,說明公豬射精即將終止；可略松開龜頭,以觀 察公豬反應(yīng),假如陰莖又開頭轉(zhuǎn)動,說明射精沒有終止,應(yīng)立刻鎖定龜頭；假如 陰莖軟縮,說明射精終止,可終止采精；8采精后,當心地

14、將集精杯上的過濾網(wǎng)去掉,防止其掉入集精杯中,將集精杯中食品袋束口, 將袋口上部放在集精杯沿上,蓋上集精杯蓋, 然后應(yīng)看著公豬爬下假母豬；將精液放入采精室與試驗室之間的壁廚內(nèi),然后將公豬趕回圈內(nèi)；5、精液的稀釋1精液稀釋的目的5 公豬采精新采集的動物精液精子濃度高,而且溫度較高,精子的代謝強度大,很快就 產(chǎn)生大量的代謝產(chǎn)物, 并使其自身的生命耗盡； 即使很短的時間內(nèi), 都可能因精 子的代謝產(chǎn)物對精子產(chǎn)生毒害, 而使精子儲存時間縮短； 而用合理的稀釋液稀釋 精液,就可給精子供應(yīng)養(yǎng)分,中和代謝產(chǎn)物,并且答應(yīng)精液降溫,從而大大延長 精子的存活時間,并能保持精子的受精才能；所以,對人工授精來說,豬精液盡

15、快進行稀釋非常重要, 這也是為什么要將試驗室建在采精室的隔壁的緣由；另外,原精液的精子濃度大, 而一次輸精的總精子數(shù)僅幾十個億,只相當于幾毫升到十 幾毫升的原精, 而母豬受精時需要的總精液量又不能低于 100 毫升,這也是必需 稀釋的另一個緣由；因此,精液稀釋的目的是：（1）增加精液容量,以確保每頭母豬輸精的總精液量；（2）有利于精子的體外存活和受精才能的保持；豬精液的稀釋液配方有許多種,如在常溫下可儲存 Kiev 、Modena等,儲存 57 天的長效儲存稀釋液有 液；最常用的稀釋液為 BTS稀釋液；2每份精液的總精子數(shù)35 天的配方有 BTS,ZorPVA；也有冷凍精液稀釋目前仍沒有一個每頭份精液的最低精子數(shù)標準和體積標準,但一般認為一次輸入 15 億以上個精子, 對受胎率和產(chǎn)仔數(shù)是牢靠的； 但也沒有必要超過 60 億個精子；在實際生產(chǎn)中,建議剛剛開展人工授精的豬場,每份精液應(yīng)有 5060 億個精子； 假如人工授精人員技術(shù)已經(jīng)嫻熟,可將每份精液總精子數(shù)降到 40