丹皮酚的提取

1、總提取物收率X二、丹皮酚的提取純化丹皮酚是中藥材丹皮的主要成分之一，含量約為2-3，屬揮發(fā)性成分，能隨水氣揮發(fā)，實(shí)驗(yàn)中采用揮發(fā)油提取裝置提取丹皮酚。稱取丹皮藥材約置圓底燒瓶中，加入水，搭好裝置，熱回流提取，將收集蒸餾液冷卻至室溫，冰浴析出結(jié)晶。剪取合適大小濾紙置于布氏漏斗中，先以水潤(rùn)濕，將含結(jié)晶溶液以玻璃棒攪拌后緩慢傾入布氏漏斗中，抽濾，以初濾液洗滌結(jié)晶，抽干后將結(jié)晶轉(zhuǎn)移至已知重量表面皿中，記錄結(jié)晶重量。本實(shí)驗(yàn)是以超臨界二氧化碳對(duì)牡丹皮內(nèi)部成份牡丹酚進(jìn)行萃取條件建立并以分析牡丹酚含量最后進(jìn)行有效成分測(cè)試。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)當(dāng)萃取一定比例的丹參、丹皮的飲片或粉末，以水或任意比例的醇水或酮水進(jìn)行低溫加熱提取

2、或滲漉或水蒸氣蒸餾，提取液經(jīng)濃縮后，過(guò)濾，行大孔吸附樹(shù)脂，以水洗去雜質(zhì)后，以任意比例的醇水洗脫至有效成分完全，減壓回收乙醇，干燥得到丹參或丹皮制備物粉末；或餾出液經(jīng)冷卻放置結(jié)晶，得丹皮酚粗品牡丹皮是毛莫科植物牡丹的干燥根皮。其主要有效成分包括丹皮酚、丹皮酚苷、丹皮酚原苷、丹皮酚新苷、芍藥苷等。中國(guó)藥典200年0版一部收載的含牡丹皮的成方制劑共32個(gè)，占所收載成方制劑的7.0，可%見(jiàn)牡丹皮屬于常用中藥。但在這個(gè)成方制劑中，僅有個(gè)經(jīng)過(guò)提取處理（占）,其余個(gè)均為藥材粉碎直接使用，這種現(xiàn)狀難以滿足現(xiàn)代用藥的要求，需要對(duì)牡丹皮藥材進(jìn)行提取，以“去粗取精”因主要有效成分丹皮酚具有升華性，其升華點(diǎn)低（C）,

3、易揮發(fā)，故在減少丹皮酚損失的同時(shí)盡可能多的提取他成分以保證綜合治療效果，是牡丹皮藥材提取應(yīng)考慮的問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)對(duì)牡丹皮的幾種提取方法進(jìn)行了比較，并對(duì)其生產(chǎn)實(shí)用性進(jìn)行探討，以期能為該藥材及含該藥材復(fù)方的提取工藝提供參考。1儀器與試藥超臨界流體萃取裝置（德陽(yáng)四創(chuàng)科技有限公司），島津型紫外光譜儀，型控溫電熱套（山東華魯儀器廠），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申順生物制品有限公司）。，牡丹皮藥材購(gòu)自成都市荷花池藥材市場(chǎng)（產(chǎn)地為江蘇鎮(zhèn)江），經(jīng)作者鑒定為毛莨科植物牡丹的干燥根皮。其他試劑均為分析純。方法與結(jié)果2.1牡丹皮藥材中丹皮酚的含量測(cè)定為計(jì)算提取工藝中丹皮酚的轉(zhuǎn)移率，需測(cè)定藥材中的丹皮酚含量。取牡丹皮粗粉3份，每份

4、約0.2精9密9稱定，照中國(guó)藥典200年0版一部牡丹皮藥材含量測(cè)定項(xiàng)下操作。平行測(cè)定次，結(jié)果丹皮酚含量為（），符合藥典規(guī)定（三）。2.2牡丹皮的幾種提取工藝比較醇提法據(jù)文獻(xiàn)工藝條件略作改進(jìn)：牡丹皮藥材乙醇回流，提取次，每次，提取液合并，濾過(guò)測(cè)定體積。精密吸取濾液藥典法測(cè)定丹皮酚量，并計(jì)算丹皮酚總量。取上述濾液于已知重量的蒸發(fā)皿中，水浴揮干并恒重，計(jì)算浸膏總量。同法操作次,提取物總量、總提取物收率、丹皮酚的提取率及轉(zhuǎn)移率見(jiàn)表1提取物總量=浸膏總量丹皮酚總量總提取物收率X藥材用量丹皮酚提取量丹皮酚的提取率=X藥材用量丹皮酚提取量丹皮酚的轉(zhuǎn)移率=X丹皮酚含量（2.80%）表1各提取方法的提取情況比較

5、總提取物丹皮酚提丹皮酚轉(zhuǎn)含酚苷類提取方法上率/%取率/%移率/%情況醇提法12.662.4587.5蒸餾-煎煮法13.512.2680.5超臨界萃取法7.280.3111.1煎煮法7.561.1541.1+酚苷類成分鑒別：另取相當(dāng)于藥材的濾液，水浴揮干（除去丹皮酚，因丹皮酚遇乙醇溶液也顯紫色），殘?jiān)訜o(wú)水乙醇溶解，滴加乙醇溶液滴，振搖，溶液變?yōu)樽霞t色，說(shuō)明提取液中含有酚苷類成分（鞣質(zhì)遇顯藍(lán)色或綠色，不干擾鑒別）蒸餾煎煮法取牡丹皮藥材約加倍量的水直接蒸餾，收集藥材倍量的餾出液，加攪拌溶解，冷藏過(guò)夜，濾過(guò)收集丹皮酚晶體，低溫干燥后稱重。蒸餾后的藥液濾過(guò)備用，藥渣再加倍量的水回流提取，濾過(guò)，合并濾液

6、并測(cè)定體積。取濾液于已知量的蒸發(fā)皿中，水浴揮干并恒重，計(jì)算浸膏總量和提取物總量。同法操作次，總提取物收率、丹皮酚的提取率及轉(zhuǎn)移率見(jiàn)表1酚苷類成分鑒別：取相當(dāng)于藥材的濾液，正丁醇萃取次，每次。合并萃取液，取水浴揮干，同酚苷類鑒別操作，結(jié)果見(jiàn)表1超臨界流體萃取法牡丹皮藥材用超臨界流體萃取裝置萃取，條件如下:萃取溫度C、萃取壓力，解析溫度C,解析壓力，萃取時(shí)間，流量-提取物為淡紅棕色液體，重總收率為2冷藏后自動(dòng)分層，上層為淡黃色液體，下層為淡紅棕色固體，與文獻(xiàn)報(bào)道基本相符。提取物加適量乙醇，使其溶解成均一溶液，轉(zhuǎn)人量瓶中，乙醇稀釋至刻度。精密吸取該溶液，藥典法測(cè)定丹皮酚量，計(jì)算丹皮酚總量，丹皮酚的提

7、取率及轉(zhuǎn)移率見(jiàn)表1酚苷類成分鑒別：取定容后的溶液水浴揮干，同酚苷類鑒別的最后操作，結(jié)果見(jiàn)表1煎煮法據(jù)文獻(xiàn)條件略作改進(jìn)：牡丹皮藥材加入到倍量的沸水中，煎煮濾過(guò)，藥渣同法再煎煮次，濾過(guò)，合并濾液并測(cè)定體積。取濾液，藥典法測(cè)定其丹皮酚量，計(jì)算丹皮酚總量。提取物總量的測(cè)定同蒸餾一煎煮法的提取物總量測(cè)定。同法操作3次，總提取物收率、丹皮酚的提取率及轉(zhuǎn)移率見(jiàn)表1酚苷類成分鑒別：同蒸餾一煎煮法的酚苷類鑒別。結(jié)果見(jiàn)表1。3結(jié)論與討論3.1藥材的提取工藝評(píng)價(jià)是一件復(fù)雜的工作，需要多方面綜合考慮。以牡丹皮為例，對(duì)很多疾病而言，藥材中的丹皮酚是主要有效成分，但其他成分所起的作用如何還不很清楚；對(duì)另總提取物收率X外的

8、疾病而言，芍藥苷又成了主要有效成分，所以僅以某一種或幾種成分對(duì)所有的提取工藝進(jìn)行評(píng)價(jià)未免有失偏頗，而應(yīng)根據(jù)不同治療目的進(jìn)行有針對(duì)性的提取，同時(shí)又盡可能多地保留各成分，以確保其療效。3.2醇提法提取工藝簡(jiǎn)單，有效成分提取多，似應(yīng)為牡丹皮提取的最佳方法，但問(wèn)題在于醇提液的后處理困難，因丹皮酚的揮發(fā)性強(qiáng)，實(shí)際生產(chǎn)中難于僅除去乙醇而不損失較多的丹皮酚。為測(cè)定回收乙醇損失的丹皮酚，進(jìn)行了試驗(yàn)。取上述醇提液，置圓底燒瓶中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓回收乙醇，溫度5,濃縮至相對(duì)密度為C）。取濃縮物，藥典法測(cè)定其丹皮酚量，結(jié)果表明丹皮酚損失率為.故醇提法不適用于牡丹皮的提取。3.3蒸餾-煎煮法是指先蒸餾提取揮發(fā)性成分，

9、藥渣再加水提取的方法，適用于含揮發(fā)性成分藥材的提取。丹皮酚隨水餾出后，在冷藏狀態(tài)下大量析出，濾過(guò)干燥即可用于成型，保存方便且轉(zhuǎn)移率較高；水提液經(jīng)醇沉除雜后，也較易成型。蒸餾煎煮法丹皮酚及總提取物收率均較高，兼顧了多種成分的提取，工藝簡(jiǎn)便，是牡丹皮提取的一種切實(shí)可行的方法。實(shí)驗(yàn)室最佳工藝蒸餾丹皮酚的時(shí)間為，中試時(shí)為了充分提取丹皮酚，將時(shí)間延長(zhǎng)為。為考察提取物的熱穩(wěn)定性，對(duì)蒸餾得到的丹皮酚用藥典法及峰面積歸一化法測(cè)定其純度，結(jié)果均大于；水提液部分以芍藥苷為指標(biāo)進(jìn)行了鑒別，在提取物中可檢出芍藥苷。說(shuō)明在提取時(shí)間內(nèi)，丹皮酚及苷類成分的穩(wěn)定性不受影響。在蒸餾煎煮法餾出液中加入藥材量的，可以促使丹皮酚更多地從餾出液中析出。文獻(xiàn)報(bào)道是采用重蒸餾法，即餾出液收集晶體后，濾液加入藥材量的再蒸餾。重復(fù)該方法，丹皮酚總提取率為2.2，0略的低于改進(jìn)后的方法，且在餾出液中直接加入N，操作更簡(jiǎn)單，因此采用改進(jìn)后的方法。超臨界流體萃取法提取的丹皮酚量少，遠(yuǎn)低于文獻(xiàn)報(bào)道值，但該方法能萃取出大量脂溶性成分，加上萃取溫度低、提取分離可一次完成，具有其鮮明的特點(diǎn)。因是非極性物質(zhì)而酚苷類成分極性較大，故未能將該類萃取出來(lái)，這也是導(dǎo)致總提取物收率較低的一個(gè)原因。為提高丹皮酚及酚苷類成分的收率，并保持本方法的提取特點(diǎn)，可考慮進(jìn)一步優(yōu)化提取條件并加入夾帶