圣愈湯及其拆方對血虛小鼠紅細胞生成素影響的實驗研究

1、圣愈湯及其拆方對血虛小鼠紅細胞生成素影響的實驗研究【摘要】討論圣愈湯補血的作用機理與配伍機制。方法采用60射線照射誘發(fā)的放射損傷性血虛小鼠模型，觀察比擬圣愈湯及其拆方對造血功能損傷的修復(fù)作用以及調(diào)控EP對造血功能的影響。結(jié)果圣愈湯及各拆方組能明顯進步血虛小鼠血中EP程度，熟地黃、白芍藥在通過促進血虛小鼠EP分泌，調(diào)控造血的環(huán)節(jié)上有與全方相似的作用，表達了益精補血藥在補血劑中促進紅系細胞生成的主導(dǎo)作用。當歸、川芎能增強熟地、白芍進步血虛小鼠EP程度。人參、黃芪似有抑制熟地、白芍組合以及熟地、白芍與川芎、當歸組合升高血中EP程度的作用。結(jié)論圣愈湯調(diào)控血虛小鼠血液中EP程度，是其有效改善血虛小鼠貧血

2、狀況，促進造血功能修復(fù)的重要環(huán)節(jié)，其補氣益精生血組合，表達了既互相協(xié)同又相制為用的整體效應(yīng)特點?！娟P(guān)鍵詞】圣愈湯；組方配伍；造血調(diào)控；紅細胞生成素ExperientalStudynEffetfShengyuDetinandItsDepsitinnRatsRedellEPShandngUniversityfT,Jinan(250014)Abstrat:bjetiveTexplrethefuntinalehanisandpatibilityfShengyuDetinntifyingbld.ethdTake60yrayradiatintindueblddefiienyiedelfradiativei

3、njury,bserveandparetheeffetfthedetinanditsdepsitinnreveryfhepiesisinjuryandregulatingEPlevel,ebdyingtheainfuntinfdrugsfrEinfringesseneandntifyingbldEPlevelfieinblddefiienyistheeffetivelinkfiprvinganeiaandprtingreveryfhepiesis;itsbinatinfntifyingQi,esseneandprduingbldebdiesthehleeffiayfutualrdinatina

4、ndntrl.Keyrds:ShengyuDetin;pundandpatibility;hepiesisregulatin;EP圣愈湯是中醫(yī)補益氣血的經(jīng)典名方，源于元朱丹溪?脈因證治?，臨床常用于血虛證的治療。為討論該方補血的配伍機制和作用機理，采用60射線照射誘發(fā)的放射損傷性血虛小鼠模型，觀察比擬圣愈湯及其拆方對造血功能損傷的修復(fù)作用以及對紅細胞生成素調(diào)控造血功能的影響，為臨床應(yīng)用乃至說明補血類方劑的配伍機制提供實驗根據(jù)。1實驗材料與方法1.1實驗材料1.1.1實驗動物安康Balb/小鼠SPF級210只，雌雄各半，體重(18.01.0)g，購自山東大學醫(yī)學實驗動物中心動物質(zhì)量合格證：魯動質(zhì)

5、字D20021239號1.1.2實驗藥品及試劑熟地黃、白芍藥、人參、黃芪、當歸、川芎一次同批購自濟南建聯(lián)中藥總店，并經(jīng)山東中醫(yī)藥大學中藥鑒定教研室鑒定。促紅細胞生成素EP放免試劑盒，購自海軍放射免疫中心。1.1.3主要儀器1.2實驗方法1.2.1實驗分組將實驗動物隨機分為7組，每組30只，雌雄各半。分別為正常組、拆方1為益精補血組(熟地20g、白芍15g)、拆方2為補氣生血組(人參15g、黃芪12g)、拆方3為益精補氣生血組(熟地20g、白芍15g、人參15g、黃芪12g)、拆方4為補血和血組(熟地20g、白芍15g、當歸12g、川芎9g)、圣愈湯即全方組(熟地20g、白芍15g、當歸12g、

6、川芎9g、人參15g、黃芪12g)和模型組。其中拆方4即四物湯，既是拆方的一個組合，又作為本研究的陽性對照藥。1.2.2動物模型制備1.2.3藥物制備各實驗組藥物加蒸餾水浸泡30in，煎煮2次，分別煮沸60in和45in，合并2次藥液，4層紗布過濾，水浴蒸發(fā)濃縮，配制成100%藥液即濃度調(diào)至每l藥液含生藥1g，置4冰箱保存?zhèn)溆?。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.1.2.4給藥方法模型制作后，連續(xù)灌胃21d，每天1次，每次0.125l10g拆方1組、拆方2組、拆方3組、拆方4組及全方組分別按5.3gkg、4.1g/kg、9.3g/kg、8.4g/kg、12.5g/kg給藥，劑量相當于成人臨床有效劑量的9倍。

7、正常組和模型組那么給予等體積的生理鹽水。1.3檢測指標1.3.1外周血液成分分別于給藥后第1d及連續(xù)給藥第7、13、18d末次給藥24h后，隨機取各組小鼠8只，斷尾靜脈取血，用玻璃毛細吸管取血20l，用血球計數(shù)儀自動檢測RB、B、HGB、PLT。1.3.2血清紅細胞生成素程度血清來源于實驗1.3.1中的各組小鼠，0.5%烏拉坦腹腔注射麻醉(50gkg)，翻開腹腔，別離下腔靜脈，抽取靜脈血2l，4條件下3000rp離心10in，別離血清，注入聚苯乙烯試管中，采用非平衡法，在放射免疫計數(shù)儀上測定沉淀p值，用儀器裝備的軟件6.4DS處理分析后打印出有關(guān)參數(shù)、標準曲線及樣品濃度。1.4統(tǒng)計學處理采用S

8、PSS10.0統(tǒng)計軟件進展統(tǒng)計學處理。2結(jié)果2.1圣愈湯及其拆方對外周血液成分的影響見表14。表1圣愈湯及其拆方對外周血B的影響略與正常組比擬，*P0.05，*P0.01；與模型組比擬，P0.05，P0.01；與全方組比擬，P0.01表2圣愈湯及其拆方對外周血RB的影響略與正常組比擬，*P0.05，*P0.01；與模型組比擬，P0.05，P0.01；與全方組比擬，P0.05，P0.01；與拆方1組比擬，P0.05，P0.01；與拆方4組比擬，P0.05，P0.01表3圣愈湯及其拆方對外周血HGB的影響略與正常組比擬，*P0.05，*P0.01；與模型組比擬，P0.05，P0.01；與全方組比擬

9、，P0.05，P0.01；與拆方1組比擬，P0.05，P0.01；與拆方4組比擬，P0.05，P0.01表4圣愈湯及其拆方對外周血PLT的影響略與正常組比擬，*P0.05，*P0.01；與模型組比擬，P0.05，P0.01；與全方組比擬，P0.05，P0.01；與拆方1組比擬，P0.05，P0.01；與拆方4組比擬，P0.05，P0.01如表14所示，圣愈湯有明顯升高血虛小鼠外周血中B、RB、HGB、PLTR作用P0.05或0.01，其升高RB和HGB的作用不如四物湯，但從總體療效綜合分析，圣愈湯的作用較為全面。益精補血藥在方中起主導(dǎo)作用，配伍補氣健脾藥、調(diào)血和血藥對增加B、PLT可起協(xié)同增效

10、作用，對增加RB和HGB那么與當歸、川芎配伍效果更佳。2.2圣愈湯及其拆方對血清紅細胞生成素程度的影響如表5表5圣愈湯及其拆方對小鼠血清EP程度的影響略與正常組比擬，*P0.05，*P0.01；各組與模型組比擬，P0.05，P0.01；拆方2組與各給藥組比擬，P0.05，P0.01；拆方4組與各給藥組比擬，*P0.05，*，P0.01所示，圣愈湯及各拆方組能明顯進步血虛小鼠血中EP程度(P0.05或0.01)，提示該方藥能有效改善由60照射所誘發(fā)的貧血。熟地黃、白芍藥在促進血虛小鼠EP分泌來調(diào)控造血的環(huán)節(jié)上有與全方相似的作用。拆方4明顯優(yōu)于拆方1P0.05，說明當歸、川芎能增強熟地、白芍促進血

11、虛小鼠EP分泌的作用。而含有人參、黃芪的拆方3組及全方組，均有減抑無人參、黃芪的拆方1組及拆方4組作用的趨勢，提示人參、黃芪似有抑制熟地、白芍組合以及熟地、白芍與川芎、當歸組合升高血中EP程度的作用。3討論本研究結(jié)果顯示，圣愈湯全方及其各拆方組均有進步血虛小鼠全血B、RB、HGB和PLT數(shù)量的作用。補氣健脾的人參、黃芪對提升血虛小鼠血液中的白細胞數(shù)量具有重要作用，初步佐證了中醫(yī)“補氣生血的科學內(nèi)涵；人參、黃芪與益精補血藥及補血調(diào)血藥相配，可以互相協(xié)同，增強療效。提示補血劑中的益精補血藥對升高紅細胞發(fā)揮主導(dǎo)作用，補氣健脾藥及調(diào)血和血藥可增強益精補血藥的“補血作用。促進機體分泌促紅細胞生成素或增強其活性，進而通過EP的生物學效能，刺激紅系細胞的產(chǎn)生、成熟與釋放，補充破壞和死亡的紅細胞，維持血細胞的相對穩(wěn)定，可能是圣愈湯提升血液中紅細胞的作用機理之一。【參考文獻】1劉永學，高月，陶來寶，等.造血細胞凋亡在射線誘發(fā)小鼠血虛證中的作用J.深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2000,1014：16.2高月.血虛證本質(zhì)及四物湯反